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内含子源性microRNA对内皮型一氧化氮合酶表达及血管内皮细胞增殖的作用 被引量:13
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作者 严丽梅 吴建勇 +2 位作者 于潇华 徐竞 欧和生 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第7期747-753,共7页
前期工作表明,内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)第4内含子中的27碱基(nucleotide,nt)重复序列是27-nt microRNA的来源,并对eNOS具有重要的调节作用.为进一步探讨该内含子源性27-nt microRNA参与调节eNOS表... 前期工作表明,内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)第4内含子中的27碱基(nucleotide,nt)重复序列是27-nt microRNA的来源,并对eNOS具有重要的调节作用.为进一步探讨该内含子源性27-nt microRNA参与调节eNOS表达的分子机制及其在内皮细胞增殖中的可能作用,通过构建27-ntmicroRNA高表达质粒,用脂质体将该质粒转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),Westernblot和RT-PCR检测该细胞系中eNOS蛋白和mRNA表达情况以及胞核转录因子的表达改变,并观察HUVEC增殖的变化情况.结果发现:27-ntmicroRNA高表达能降低eNOSmRNA的水平和蛋白质表达;同时对转录因子Sp1、Ap1的蛋白质表达也产生了不同程度的抑制作用;转染后细胞的生长速度比未转染的细胞明显减慢,尤其转染了27-nt microRNA的双倍长度突变体(pEGP-mut-54nt-mi)质粒的HUVEC,其生长倍增时间比正常对照组明显延长达49.4%.结果表明,27-nt microRNA明显抑制eNOS蛋白及其mRNA表达,同时HUVEC增殖受到明显抑制,转录因子Sp1和Ap1在27-ntmicroRNA对eNOS的表达调节中起重要作用.实验提示,内含子源性microRNA与转录因子共同参与对内皮细胞增殖及其相关性基因的表达调节,可能是众多真核细胞中某些疾病相关性基因表达自我调节的重要机制之一. 展开更多
关键词 MICRORNA 内皮型一氧化氮合酶 内皮细胞 转录因子
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MiR-24对3T3-L1脂肪细胞分化及脂肪型脂肪酸结合蛋白表达的调节作用 被引量:8
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作者 严丽梅 梁秋艳 +5 位作者 许金华 吴建勇 王荣姣 于潇华 徐竞 欧和生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期483-487,共5页
目的探讨microRNAs对脂肪细胞分化过程的调节作用分子机制及其对脂肪特异性基因——脂肪型脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP4)表达的影响。方法用microRNAs微阵列分析法筛选和鉴定3T3-L1脂肪细胞分化相关性microRNAs,构... 目的探讨microRNAs对脂肪细胞分化过程的调节作用分子机制及其对脂肪特异性基因——脂肪型脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP4)表达的影响。方法用microRNAs微阵列分析法筛选和鉴定3T3-L1脂肪细胞分化相关性microRNAs,构建脂肪细胞分化相关性micro-RNAs的高表达质粒,通过脂质体介导转染3T3-L1前体脂肪细胞,观察脂肪相关性microRNAs对脂肪细胞分化过程的影响,Westernblot和RT-PCR分别检测FABP4蛋白及其mR-NA在脂肪细胞分化过程中的表达变化。结果3T3-L1脂肪细胞分化过程中microRNA表达谱发生明显改变,其中35个microRNAs下调,miR-24最明显;17个microRNAs上调,miR-21最明显;用不同脂肪相关性microRNAs转染3T3-L1前体脂肪细胞并高表达后,发现miR-24明显抑制脂肪细胞的分化与成熟,而miR-21则无影响;miR-24明显抑制FABP4蛋白表达,但对其mRNA无影响,miR-21对FABP4的蛋白和mRNA表达都没有影响。结论3T3-L1脂肪细胞分化过程中存在脂肪细胞分化相关性microRNAs;miR-24脂肪细胞分化过程及其脂肪特异蛋白FABP4表达有重要的调节作用。 展开更多
关键词 MICRORNA 3T3-L1前体脂肪细胞 脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4) 糖尿病 基因表达 脂肪细胞分化
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高效液相色谱-荧光法测定丙泊酚的血浆浓度 被引量:6
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作者 陈宁 赵恒利 徐竞 《中国医药导报》 CAS 2008年第25期13-16,共4页
目的:建立灵敏可靠的高效液相色谱-荧光法进行丙泊酚血浆浓度的测定,考察丙泊酚静脉给药后母婴血浆浓度差异。方法:静脉注射丙泊酚注射液5min后,立即取母血、脐动脉血和脐静脉血,3500rpm离心10min,分离血浆。血浆样本用甲醇沉淀蛋白、... 目的:建立灵敏可靠的高效液相色谱-荧光法进行丙泊酚血浆浓度的测定,考察丙泊酚静脉给药后母婴血浆浓度差异。方法:静脉注射丙泊酚注射液5min后,立即取母血、脐动脉血和脐静脉血,3500rpm离心10min,分离血浆。血浆样本用甲醇沉淀蛋白、高速离心后,取上清液采用高效液相色谱法进行分析,以甲醇-水(80:20,V/V)为流动相,流速1.0ml/min,荧光检测激发波长276nm,发射波长310nm。采用SPSS13.0软件对结果进行统计学分析。结果:丙泊酚血浆浓度在0.1~5.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9975);低、中、高三个浓度日内变异RSD为4.49%~10.61%。脐静脉血、脐动脉血和母血中丙泊酚血浆浓度分别为(0.83±0.25)、(0.78±0.24)和(2.28±0.70)μg/ml。经统计学分析母血和脐血中丙泊酚血浆浓度差异显著(P<0.01),而脐动脉血和脐静脉血中丙泊酚血浆浓度的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本测定方法准确简便,灵敏可靠,适用于丙泊酚血浆浓度的分析测定。丙泊酚静脉滴注5min后,新生儿的血浆浓度明显低于母体血浆浓度。 展开更多
关键词 高效液相色谱 丙泊酚 血浆浓度
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P38MAPK/NOX4通路介导CGRP对氧化损伤HUVEC保护作用 被引量:2
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作者 徐竞 于潇华 +2 位作者 汪煜华 秦旭平 张亮 《中南医学科学杂志》 CAS 2011年第6期712-712,715,共2页
氧化应激过程调控细胞增殖和凋亡。研究发现,某些血管活性肽的保护血管作用与抑制氧化应激有关。降钙素基因相关肽(CGRP)是一种由辣椒素敏感的感觉神经末梢释放的神经递质,在体内有广泛的分布和表达,有多种生理功能,如舒张血管和... 氧化应激过程调控细胞增殖和凋亡。研究发现,某些血管活性肽的保护血管作用与抑制氧化应激有关。降钙素基因相关肽(CGRP)是一种由辣椒素敏感的感觉神经末梢释放的神经递质,在体内有广泛的分布和表达,有多种生理功能,如舒张血管和收缩心肌、抑制血管平滑肌细胞增殖、保护内皮细胞、调节神经系统和消化系统等。最新研究表明, 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 内皮细胞 NADPH氧化酶 信号通路
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MicroRNAs在心血管疾病中作用的研究进展 被引量:1
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作者 徐竞 欧和生 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2009年第5期451-455,共5页
MicroRNAs(miRNAs)是一类长度为21~28nt单链非编码小分子RNA,通过与靶基因3'-UTR完全或不完全互补配对结合导致靶基因降解或翻译抑制调节几千种基因。近年研究表明miRNAs已成为许多重要生物过程的主要调节因子,包括生长发育、细... MicroRNAs(miRNAs)是一类长度为21~28nt单链非编码小分子RNA,通过与靶基因3'-UTR完全或不完全互补配对结合导致靶基因降解或翻译抑制调节几千种基因。近年研究表明miRNAs已成为许多重要生物过程的主要调节因子,包括生长发育、细胞增殖、分化和凋亡等。研究对应miRNAs参与疾病发生的机制可能为人类某些疾病的治疗开辟一条新的途经。本综述总结miRNAs在调控心血管疾病发生的作用方面的研究成果。 展开更多
关键词 MIRNAS 心血管疾病 作用
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microRNAs对脂肪细胞分化相关因子的作用及预测
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作者 郑宏 徐竞 +2 位作者 于潇华 周锋平 欧和生 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第5期972-974,981,共4页
microRNAs是一类调节靶基因的转录后翻译的小型非编码单链RNA,研究已发现microRNAs在癌症、心血管疾病及糖尿病中显示极为重要的生物学功能。糖尿病目前已成为威胁人类健康的最主要疾病,尤其是II型糖尿病的发病机制成为研究热点。脂肪... microRNAs是一类调节靶基因的转录后翻译的小型非编码单链RNA,研究已发现microRNAs在癌症、心血管疾病及糖尿病中显示极为重要的生物学功能。糖尿病目前已成为威胁人类健康的最主要疾病,尤其是II型糖尿病的发病机制成为研究热点。脂肪细胞分化异常是导致II型糖尿病以及胰岛素抵抗的主要因素。进一步阐明microRNAs对脂肪细胞分化过程的作用机制,可能为糖尿病治疗找到新的靶点。本综述将从microRNAs与脂肪细胞分化基因、核激素受体以及相关信号通路相互作用三方面阐述和预测microRNAs对脂肪细胞分化的潜在作用。 展开更多
关键词 mieroRNAs 脂肪细胞分化 潜在作用
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丙丁酚对oxLDL诱导血管内皮细胞增殖抑制的保护作用
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作者 曾亮海 王刚 +2 位作者 尹珊辉 于潇华 徐竞 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第15期2918-2920,2934,共4页
目的:探讨丙丁酚(普罗布考)对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用,以及对NF-κB和IκB-α表达的调节作用。方法:MTT法分别检测oxLDL不同浓度(1g/ml、10g/ml、100g/ml)处理HUVEC不同时间(12h、24h、4... 目的:探讨丙丁酚(普罗布考)对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用,以及对NF-κB和IκB-α表达的调节作用。方法:MTT法分别检测oxLDL不同浓度(1g/ml、10g/ml、100g/ml)处理HUVEC不同时间(12h、24h、48h)细胞增殖情况;5g/mL丙丁酚预处理HUVEC24小时,MTT检测细胞增殖情况;Western blot检测oxLDL处理细胞及丙丁酚预处理后NF-κB和IκB-α蛋白表达水平。结果:oxLDL处理HUVEC细胞24小时后,对细胞增殖具有抑制作用,Western blot结果显示NF-κB表达显著上调,IκB-α蛋白表达下调。而用5ug/mL丙丁酚预处理可以明显缓解细胞增殖抑制,NF-κB和IκB-α蛋白的表达也恢复至正常水平。结论:丙丁酚可显著缓解oxLDL诱导的HUVEC细胞增殖抑制,并且NF-κB和IκB-α表达的改变可能参与此过程。 展开更多
关键词 丙丁酚 NF-ΚB 细胞增殖
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中药芪苈强心胶囊循证医学研究登陆《美国心脏病学会杂志》 破循证堡垒 立心衰中药治疗国际典范 被引量:1
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作者 许奉彦 徐竞 +1 位作者 许菁 牛艳红 《中国社区医师》 2013年第27期14-15,共2页
7月14日,“中国中西医结合学会血管脉络病专业委员会成立暨首届中西医血管病学大会”在京召开、会议上,最引人关注的无疑就是由高润霖院士、张伯礼院士、黄峻教授等作为主要研究者完成的芪苈强心胶囊治疗慢性心衰循证医学研究,近日... 7月14日,“中国中西医结合学会血管脉络病专业委员会成立暨首届中西医血管病学大会”在京召开、会议上,最引人关注的无疑就是由高润霖院士、张伯礼院士、黄峻教授等作为主要研究者完成的芪苈强心胶囊治疗慢性心衰循证医学研究,近日发表于《美国心脏病学会杂志》,同时该杂志编辑部发表评论:“中医药让衰竭的心脏更加强劲,该研究开启了心衰治疗协同作用的希望之门”。 展开更多
关键词 美国心脏病学会 芪苈强心胶囊 中药治疗 慢性心衰 医学研究 杂志 循证 中国中西医结合学会
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CGRP通过抑制p38MAPK/Nox4通路对氧化应激损伤HUVEC的保护作用
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作者 徐竞 于潇华 +5 位作者 刘彦梅 郭锋 罗平 唐江琼 陈临溪 秦旭平 《中国药理通讯》 2011年第2期59-59,共1页
目的:观察降钙素基因相关肽(CGRP)和/或过氧化氢(H2O2)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响,以及对P38MAPK磷酸化和NADPH氧化酶(NOX4)的调节作用。以探讨CGRP对HzOz诱导HUVEC增殖和损伤的保护作用及分子机制。方法:
关键词 氧化应激损伤 HUVEC 保护作用 CGRP P38MAPK 人脐静脉内皮细胞 降钙素基因相关肽 NADPH氧化酶
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