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题名新型重组Ulp1的制备工艺研究
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作者
徐海悦
吴勇
李乐乐
黄宗庆
化浩举
冯军
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机构
中国医药工业研究总院
上海多米瑞生物技术有限公司
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出处
《中国医药工业杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期1432-1438,共7页
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文摘
类泛素特异性蛋白酶1(Ulp1)是从融合蛋白中移除小分子泛素相关修饰物蛋白(SUMO)标签工艺中的重要工具蛋白酶,在重组多肽和蛋白生产制备中具有广泛应用。Ulp1蛋白易聚集的特性给下游分离纯化工艺带来了诸多挑战。为克服这些问题,本研究设计并重组表达制备了一种S13-Ulp1融合蛋白,以提高Ulp1酶的溶解度,减少聚集,同时降低蛋白等电点,便于采用阴离子交换色谱纯化。通过对发酵、澄清等步骤的工艺参数进行优化,建立了一条发酵表达产量高、纯化工艺简便的S13-Ulp1融合蛋白制备工艺。优化后发酵产量达到了2.34g/L,下游分离纯化总收率为64%,制得的S13-Ulp1蛋白的SDS-PAGE纯度为95%。经酶切试验验证,S13-Ulp1融合蛋白具有与Ulp1相同的特异性,可高效地移除SUMO标签,获得目的多肽。
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关键词
小分子泛素相关修饰物蛋白(SUMO)蛋白酶:类泛素特异性蛋白酶1(Ulp1)
重组
表达
纯化
离子交换色谱
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Keywords
small ubiquitin-related modifier protein(SUMO) protease
ubiquitin-like protein-specific protease 1(Ulp1)
recombination
expression
purification
ion-exchange chromatography
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分类号
Q783
[生物学—分子生物学]
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题名浅谈升级数学原味,创造课堂灵感
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作者
徐海悦
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机构
吉林省乾安县实验中学
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出处
《中国校外教育（上旬）》
2015年第11期59-59,共1页
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文摘
通过揭示数学的原来味道往往是生活的真实味道,数学使生活更方便与快乐,眼光更宽更远。结合当前数学课堂教学乏味现状,通过理论与实践的研究提出升级数学生活原味,创造课堂快乐灵感,进而适应新的教育环境以及培养社会需要的人才,并对相应增加数学课堂教学的有效性提出对策与措施。
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关键词
数学原味
思维灵感
快乐学习
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分类号
G633.6
[文化科学—教育学]
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