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负载Wharton’s Jelly源间充质干细胞来源外泌体的水凝胶可促进小鼠创面修复
被引量:
2
1
作者
徐
崔
博
诚
徐
正保
+1 位作者
余承洋
蒋祖福
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期766-776,共11页
目的:探究负载Wharton’s Jelly衍生的间充质干细胞(WJMSC)来源的外泌体(WEX)的水凝胶对创面修复的作用。方法:从WJMSC中提取WEX,通过透射电子显微镜和纳米粒度分析仪分析WEX的形态和大小,通过蛋白质印迹法检测外泌体表面标志物(CD9、C...
目的:探究负载Wharton’s Jelly衍生的间充质干细胞(WJMSC)来源的外泌体(WEX)的水凝胶对创面修复的作用。方法:从WJMSC中提取WEX,通过透射电子显微镜和纳米粒度分析仪分析WEX的形态和大小,通过蛋白质印迹法检测外泌体表面标志物(CD9、CD81和Calnexin)鉴定WEX。通过结合WEX与海藻酸钠水凝胶来制备WEX水凝胶,扫描电子显微镜观察WEX水凝胶的形态,流式细胞仪检测WEX水凝胶的流变行为,BCA法评估WEX水凝胶的体外释药性能。海藻酸纳水凝胶、WEX和WEX水凝胶作用巨噬细胞系RAW264.7后,流式细胞术检测CD86和CD206的表达。建立小鼠全层皮肤创伤模型,将小鼠随机分为空白对照组、WEX对照组和WEX水凝胶组,按照分组分别将磷酸盐缓冲液、WEX和WEX水凝胶覆盖到创面。造模第3天,取小鼠皮肤组织,采用平板计数法评价WEX水凝胶的抗菌功效。造模后第15天处死小鼠,计算残余创面百分比,苏木精-伊红染色及Masson染色后观察皮肤创面组织学变化,免疫组织化学法检测皮肤创面组织中CD86、CD206、CD31和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:成功从WJMSC中提取出WEX。制备的WEX水凝胶呈现规整的三维网络结构,具有良好的流变学和药物控释性能。WEX水凝胶可以促进体外RAW264.7细胞从M1表型极化为M2表型。空白对照组、WEX对照组和WEX水凝胶组残余创面百分比分别为(27.5±3.4)%、(15.3±1.2)%和(7.6±1.1)%,WEX水凝胶明显增强WEX对小鼠皮肤创面的修复作用(P<0.05),且抗菌性能优于WEX(P<0.05)。WEX水凝胶组的真皮厚度、新生毛囊数和胶原蛋白沉积率均明显高于其余两组(均P<0.05)。WEX水凝胶可抑制皮肤创面组织中CD86的阳性表达,并促进CD206、CD31和VEGF的阳性表达(均P<0.05)。结论:WEX水凝胶能够通过调节巨噬细胞极化明显促进小鼠皮肤创面修复。
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关键词
创面修复
间充质干细胞
外泌体
海藻酸盐水凝胶
巨噬细胞
小鼠
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题名
负载Wharton’s Jelly源间充质干细胞来源外泌体的水凝胶可促进小鼠创面修复
被引量:
2
1
作者
徐
崔
博
诚
徐
正保
余承洋
蒋祖福
机构
台州市中心医院台州学院附属医院肛肠科
出处
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期766-776,共11页
基金
浙江省医学会临床科研基金(2019ZYC-A182)。
文摘
目的:探究负载Wharton’s Jelly衍生的间充质干细胞(WJMSC)来源的外泌体(WEX)的水凝胶对创面修复的作用。方法:从WJMSC中提取WEX,通过透射电子显微镜和纳米粒度分析仪分析WEX的形态和大小,通过蛋白质印迹法检测外泌体表面标志物(CD9、CD81和Calnexin)鉴定WEX。通过结合WEX与海藻酸钠水凝胶来制备WEX水凝胶,扫描电子显微镜观察WEX水凝胶的形态,流式细胞仪检测WEX水凝胶的流变行为,BCA法评估WEX水凝胶的体外释药性能。海藻酸纳水凝胶、WEX和WEX水凝胶作用巨噬细胞系RAW264.7后,流式细胞术检测CD86和CD206的表达。建立小鼠全层皮肤创伤模型,将小鼠随机分为空白对照组、WEX对照组和WEX水凝胶组,按照分组分别将磷酸盐缓冲液、WEX和WEX水凝胶覆盖到创面。造模第3天,取小鼠皮肤组织,采用平板计数法评价WEX水凝胶的抗菌功效。造模后第15天处死小鼠,计算残余创面百分比,苏木精-伊红染色及Masson染色后观察皮肤创面组织学变化,免疫组织化学法检测皮肤创面组织中CD86、CD206、CD31和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:成功从WJMSC中提取出WEX。制备的WEX水凝胶呈现规整的三维网络结构,具有良好的流变学和药物控释性能。WEX水凝胶可以促进体外RAW264.7细胞从M1表型极化为M2表型。空白对照组、WEX对照组和WEX水凝胶组残余创面百分比分别为(27.5±3.4)%、(15.3±1.2)%和(7.6±1.1)%,WEX水凝胶明显增强WEX对小鼠皮肤创面的修复作用(P<0.05),且抗菌性能优于WEX(P<0.05)。WEX水凝胶组的真皮厚度、新生毛囊数和胶原蛋白沉积率均明显高于其余两组(均P<0.05)。WEX水凝胶可抑制皮肤创面组织中CD86的阳性表达,并促进CD206、CD31和VEGF的阳性表达(均P<0.05)。结论:WEX水凝胶能够通过调节巨噬细胞极化明显促进小鼠皮肤创面修复。
关键词
创面修复
间充质干细胞
外泌体
海藻酸盐水凝胶
巨噬细胞
小鼠
Keywords
Wound healing
Mesenchymal stem cell
Exosome
Alginate hydrogel
Macrophages
Mice
分类号
R282.5 [医药卫生—中药学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
负载Wharton’s Jelly源间充质干细胞来源外泌体的水凝胶可促进小鼠创面修复
徐
崔
博
诚
徐
正保
余承洋
蒋祖福
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023
2
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