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IL-37对炎症相关性疾病的抑制作用 被引量：8
1
作者 李梦媛 杨星九 +1 位作者 徐大模 高苒 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第12期75-80,共6页
IL-37属IL-1家族细胞因子,最初发现时被命名为IL-1F7,具有5种不同的亚型(IL37a^e)。研究已证实,IL-37能够抑制多种免疫细胞中促炎性细胞因子的产生,进而调节固有免疫应答;此外,IL-37对外源性刺激诱导的结肠炎、关节炎、胰腺炎等炎症性... IL-37属IL-1家族细胞因子,最初发现时被命名为IL-1F7,具有5种不同的亚型(IL37a^e)。研究已证实,IL-37能够抑制多种免疫细胞中促炎性细胞因子的产生,进而调节固有免疫应答;此外,IL-37对外源性刺激诱导的结肠炎、关节炎、胰腺炎等炎症性疾病具有一定的保护作用。总之,IL-37能够在多种炎症相关性疾病中发挥抑制作用,是一种新型的炎症抑制因子。 展开更多
关键词 IL-37 炎症抑制因子 炎性疾病
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Smad3对非小细胞肺癌A549细胞和宫颈癌HeLa细胞迁移的影响 被引量：5
2
作者 韦荣飞 李梦媛 +3 位作者 杨星九 朱瑞敏 徐大模 高苒 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期11-15,21,共6页
目的过表达、敲低或抑制Smad3的活性,探讨Smad3对非小细胞肺癌A549细胞和宫颈癌He La细胞迁移的影响。方法设计扩增Smad3基因全长编码序列c DNA的引物,通过分子克隆技术构建p CMV-MycSmad3过表达载体,同时设计并合成靶向Smad3的siRNA序... 目的过表达、敲低或抑制Smad3的活性,探讨Smad3对非小细胞肺癌A549细胞和宫颈癌He La细胞迁移的影响。方法设计扩增Smad3基因全长编码序列c DNA的引物,通过分子克隆技术构建p CMV-MycSmad3过表达载体,同时设计并合成靶向Smad3的siRNA序列,在A549和He La细胞中过表达或敲低Smad3,或者利用Smad3的抑制剂SIS3 2μM处理细胞,采用细胞划痕的方法研究Smad3对A549和He La细胞迁移的影响。结果利用分子克隆技术成功构建p CMV-Myc-Smad3过表达载体。过表达Smad3促进A549和He La细胞的迁移。敲低Smad3抑制A549和He La细胞的迁移。SIS3抑制Smad3的活性导致A549和He La细胞的迁移速率变慢。结论Smad3促进A549和He La细胞的迁移。 展开更多
关键词 SMAD3 过表达载体 RNA干扰 SIS3 细胞迁移
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肥大细胞和类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞共培养对白细胞介素-6分泌的影响 被引量：3
3
作者 穆荣 徐大模 栗占国 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第17期1202-1205,共4页
目的观察肥大细胞和关节成纤维样滑膜细胞（FLS）共培养对FLS分泌白细胞介素（IL）石的影响及其作用机制。方法应用免疫组化染色法观察肥大细胞在关节滑膜中的分布。分离培养RA患者的FLS，加入肥大细胞系LAD-2共培养或用Transwell小室... 目的观察肥大细胞和关节成纤维样滑膜细胞（FLS）共培养对FLS分泌白细胞介素（IL）石的影响及其作用机制。方法应用免疫组化染色法观察肥大细胞在关节滑膜中的分布。分离培养RA患者的FLS，加入肥大细胞系LAD-2共培养或用Transwell小室隔离共培养，观察上清中FLS分泌的细胞因子IL-6的变化。结果LAD-2几乎不产生IL-6，FLS组IL石的浓度为（3019±57）μg／L，而FLS与等量LAD-2细胞共培养的IL-6浓度为（7150±114）μg/L（P〈0．01）。且其增加程度与LAD-2细胞数量呈正相关。以4％甲醛固定和Transwell小室隔离两种方法分别阻断可溶性介质分泌和细胞间相互黏附，前一组中IL石增加可被阻断，但在后一组中不受影响。结论肥大细胞与FLS通过可溶性介质相互作用可增加FLS的IL石分泌，在RA发病中可能有重要意义。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿性 肥大细胞 成纤维细胞
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鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium感染C57BL/6小鼠肠道模型的建立及表型分析 被引量：1
4
作者 韦荣飞 李梦媛 +1 位作者 徐大模 高苒 《中国比较医学杂志》 北大核心 2017年第6期33-36,45,共5页
目的建立鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium感染C57BL/6小鼠肠道模型。方法先用5%NaHCO_3溶液灌胃,中和部分胃酸,提高鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium的感染能力,随后进行鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium灌胃攻毒。观察小鼠的临床症状,对小鼠的生... 目的建立鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium感染C57BL/6小鼠肠道模型。方法先用5%NaHCO_3溶液灌胃,中和部分胃酸,提高鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium的感染能力,随后进行鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium灌胃攻毒。观察小鼠的临床症状,对小鼠的生存情况及体重进行统计学分析,并通过组织病理切片分析小鼠肠道组织病理变化等。结果鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium攻毒后C57BL/6小鼠出现体重下降、萎靡不振、寒颤及死亡等表型,解剖学水平显示小鼠肠道充血膨胀。病理分析结果显示小鼠小肠绒毛间质水肿、肠粘膜层坏死及炎性细胞浸润等。结论成功建立鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium感染C57BL/6小鼠肠道模型,该模型在研究相关免疫分子或细胞因子在S.Typhimurium引发肠炎过程中的生物学功能及治疗等方面具有重要的科学意义。 展开更多
关键词 肠道感染 S.Typhimurium C57BL/6 组织病理
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人IL-37b转基因对小鼠哮喘模型作用的研究 被引量：1
5
作者 秦啸峰 李艳 +10 位作者 李陈铎 韦荣飞 李慎涛 袁慧慧 王晶晶 陈彦 刘杰 吕喆 孙英 徐大模 王炜 《微生物学免疫学进展》 2020年第5期6-15,共10页
目的通过研究人抑制性细胞因子白细胞介素37b(interleukin 37b,IL-37b)转基因(transgenic,TG)小鼠(Il37b TG)对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的哮喘气道高反应性、气道炎症和气道重塑等指标的变化,以及IL-37b在体外对小鼠和人肺结构细胞... 目的通过研究人抑制性细胞因子白细胞介素37b(interleukin 37b,IL-37b)转基因(transgenic,TG)小鼠(Il37b TG)对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的哮喘气道高反应性、气道炎症和气道重塑等指标的变化,以及IL-37b在体外对小鼠和人肺结构细胞的作用,评估IL-37b在治疗哮喘方面的潜在意义。方法采用野生型和Il37b TG的雌性C57BL/6小鼠,建立周期为24 d的OVA诱导的哮喘小鼠模型,检测其肺力学参数、炎性细胞分类和Th2细胞因子表达以及肺组织病理学改变。体外采用原核细胞表达系统,获得大量纯化的重组人IL-37b。继而分别预处理小鼠肺成纤维细胞系(MLg)和人肺泡上皮细胞系(A549细胞),随后加以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激,收集培养上清,采用双抗体夹心ELISA检测炎性细胞因子IL-6含量。结果与野生型OVA模型组相比,Il37b TG OVA组的气道高反应性降低,差异有统计学意义(P=0.0001,P<0.05);支气管肺泡灌洗液和肺组织中嗜酸性粒细胞数量降低,差异有统计学意义(分别为P=0.0001和P<0.0001,P<0.05);肺组织炎症细胞浸润明显减少,气道炎症、杯状细胞增生和黏液分泌均明显减轻,苏木精-伊红染色和过碘酸-希夫染色评分也有所降低,差异有统计学意义(分别为P=0.0001和P=0.0002,P<0.05),马松染色显示急性期胶原沉积的改变不明显;肺组织匀浆中Th2型细胞因子IL-5和IL-13的含量均有所降低。同时研究采用原核细胞表达系统得到的IL-37b预处理鼠肺成纤维细胞MLg和人肺上皮细胞A549,可以降低LPS所诱导IL-6的产生。结论IL-37b可能通过对相关靶细胞的负向调控进而发挥对哮喘气道的高反应性及气道炎症的抑制作用,为IL-37b作为一种新的治疗方法在临床治疗哮喘的潜在应用提供了一定的实验依据。 展开更多
关键词 白细胞介素37b 哮喘 气道炎症 气道重塑
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DNA分子杂交技术在基因工程人白细胞介素-2质量检测中的应用 被引量：1
6
作者 孙凤至 隋宝真 +1 位作者 徐大模 刘东升 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1992年第4期177-179,共3页
将携带有人白细胞介素-2基因的工程菌(PBV^(220)/ZL-2),发酵培养后经一系列提纯可获得基因工程人白细胞介素-2(rIL-2)的纯品。采用分子杂交技术,用^(32)P标记PBV_(220)大肠杆菌全DNA为探针,检测rlL-2纯品,没有检测出残余DNA,完全符合WH... 将携带有人白细胞介素-2基因的工程菌(PBV^(220)/ZL-2),发酵培养后经一系列提纯可获得基因工程人白细胞介素-2(rIL-2)的纯品。采用分子杂交技术,用^(32)P标记PBV_(220)大肠杆菌全DNA为探针,检测rlL-2纯品,没有检测出残余DNA,完全符合WHO和“中国人用重组DNA制品质量控制要点”所规定的残余DNA含量在100Pg/剂以下的要求。 展开更多
关键词 基因工程白细胞介素-2 分子杂交 DNA探针
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人IL-37b在大肠埃希菌中的表达、纯化及活性鉴定
7
作者 李梦媛 韦荣飞 +2 位作者 徐大模 杨星九 高苒 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期20-24,共5页
目的表达重组IL-37b蛋白并去除内毒素,鉴定其活性。方法构建原核表达载体p ET28/IL-37b,转化大肠杆菌感受态细胞;经IPTG诱导表达的重组蛋白由Ni2+-NTA凝胶进行变性条件下的亲和层析纯化;用SDS-PAGE分析、考马斯亮蓝染色鉴定重组蛋白是... 目的表达重组IL-37b蛋白并去除内毒素,鉴定其活性。方法构建原核表达载体p ET28/IL-37b,转化大肠杆菌感受态细胞;经IPTG诱导表达的重组蛋白由Ni2+-NTA凝胶进行变性条件下的亲和层析纯化;用SDS-PAGE分析、考马斯亮蓝染色鉴定重组蛋白是否为目的蛋白;去除蛋白中原核表达所产生的内毒素;将蛋白作用于受LPS刺激的RAW 264.7细胞,收集培养上清,通过ELISA方法检测IL-6的表达水平,鉴定蛋白的生物学活性。结果表达了纯度较好的重组IL-37b蛋白,降低了其中原核表达所产生的内毒素,经鉴定其具备良好的生物学活性。结论成功表达了具备良好生物学活性的IL-37b蛋白。 展开更多
关键词 IL-37b 表达 纯化 生物学活性
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