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广东省575株肺炎链球菌的毒力因子psaA、ply基因检测分析 被引量：3
1
作者 熊平 李柏生 +6 位作者 江锦志 彭托华 杨彤 刘美真 柯碧霞 刘闪闪 柯昌文 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第8期693-698,共6页
目的采用PCR检测肺炎链球菌(S.pn)毒力基因psaA和ply,研究分析两个毒力基因的特异性,为S.pn临床诊断提供依据。方法对广东省12家医疗机构诊断为S.pn感染患者的654份标本,经过细菌培养和乳胶凝集试验筛选出575株,以psaA、ply基因核心区... 目的采用PCR检测肺炎链球菌(S.pn)毒力基因psaA和ply,研究分析两个毒力基因的特异性,为S.pn临床诊断提供依据。方法对广东省12家医疗机构诊断为S.pn感染患者的654份标本,经过细菌培养和乳胶凝集试验筛选出575株,以psaA、ply基因核心区域序列设计合成扩增引物,以抽提的S.pn分离株DNA为模板,采用常规聚合酶链反应(PCR)扩增目标基因psaA、ply片段,长度分别为838bp和209bp,调查分析不同来源标本的分离株psaA和ply基因检出率;采用乳胶凝集试验与多重PCR分型,比较两种结果中S.pn菌株psaA和ply检出率差异,以及广东S.pn主要血清型与非主要血清型菌株的psaA和ply检出率情况。结果经乳胶凝集试验鉴定为S.pn的560株菌株中,psaA和ply基因检出率分别为78.21%和83.57%,ply基因检出率高于psaA基因,psaA基因阳性的S.pn菌株,其ply基因均阳性;来源于血液和脑脊液标本的S.pn分离株的psaA和ply基因检出率分别为93.18%和95.45%,脓液标本分离的S.pn菌株psaA和ply基因检出率为100%。在荚膜肿胀反应和多重PCR检测为S.pn可分型血清型菌株中,前者psaA和ply基因阳性率分别为93.90%和98.57%,后者为96.34%和98.31%;而在多重PCR检定为不可分型血清型菌株中,psaA和ply基因检出率分别为47.06%和57.84%,显著低于荚膜肿胀试验的68.59%和74.64%,但ply基因检出率也均比psaA高;可分型血清型中主要血清型菌株的psaA和ply基因检出率高于非主要血清型。结论广东地区S.pn临床分离株中ply基因检出率比psaA高,保守性高,但其他链球菌亦能扩增出ply基因从而出现假阳性,因此,对于S.pn菌株的鉴定,采用PCR同时扩增psaA和ply基因,并结合临床常规实验,鉴定更为可靠。此外,血液和脑脊液psaA和ply基因阳性率高可能与psaA和ply是S.pn入侵血和脑的关键因子有关。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 psaA基因 ply基因 PCR
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