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塞内卡病毒A VP1蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备与初步应用 被引量：3
1
作者 彭宛清 钱炳旭 +5 位作者 廖凯 董雨豪 薛峰 尼博 薛青红 戴建君 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期867-874,共8页
塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)感染猪可引起口鼻、蹄和冠状动脉带等部位出现水疱,严重危害猪的健康。VP1蛋白是SVA重要的结构蛋白,含有病毒主要的抗原表位并可诱导猪产生中和抗体。本研究采用原核表达系统,将VP1基因分别克隆入表达载... 塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)感染猪可引起口鼻、蹄和冠状动脉带等部位出现水疱,严重危害猪的健康。VP1蛋白是SVA重要的结构蛋白,含有病毒主要的抗原表位并可诱导猪产生中和抗体。本研究采用原核表达系统,将VP1基因分别克隆入表达载体pET32a和pGEX6P1中构建重组质粒,通过优化诱导表达条件,利用亲和层析介质纯化,成功制备了重组蛋白VP1-His和VP1-GST。以纯化的VP1-His蛋白免疫BALB/c小鼠,以纯化的VP1-GST蛋白建立间接ELISA,成功筛选获得3株稳定分泌抗VP1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株3A2、5D12和6G10,经Western-blot及间接ELISA鉴定,3株单克隆抗体具有良好的特异性,其腹水效价分别为1∶51200、1∶25600、1∶12800。应用效价最高的3A2抗体初步建立了检测猪血清中抗SVA抗体的竞争ELISA。临床样品检测结果表明,建立的竞争ELISA具有高敏感性,高特异性和高准确性。VP1蛋白单克隆抗体的制备为SVA致病机制的研究提供了材料支撑;竞争ELISA的建立对于SVA感染的防控具有重要意义。 展开更多
关键词 塞内卡病毒A(SVA) VP1蛋白 单克隆抗体 竞争ELISA
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抗非洲猪瘟病毒药物筛选Cell-ELISA法的建立及应用
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作者 钱炳旭 胡永新 +13 位作者 郑东霞 李金明 苗雨润 戈胜强 巩明霞 韩秀琚 曾德新 汤芳 廖凯 彭宛清 吴晓东 戴建君 王志亮 薛峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1348-1354,共7页
为了建立一种抗非洲猪瘟病毒(ASFV)药物高通量筛选(HTS)方法,采用ASFV感染细胞作为包被抗原,以p30单克隆抗体作为检测抗体,通过优化抗体稀释度、孵育时间等试验条件,成功建立了Cell-ELISA方法,并使用该方法对Selleck天然产物库中的1036... 为了建立一种抗非洲猪瘟病毒(ASFV)药物高通量筛选(HTS)方法,采用ASFV感染细胞作为包被抗原,以p30单克隆抗体作为检测抗体,通过优化抗体稀释度、孵育时间等试验条件,成功建立了Cell-ELISA方法,并使用该方法对Selleck天然产物库中的1036个化合物进行了筛选。结果显示,该Cell-ELISA法筛选得到5个具有抗ASFV活性的化合物;当5个化合物浓度为10μmol/L时,PAM细胞存活率均大于80%;进一步分析ASFV p72的转录和翻译水平,结果显示,ASFV在经化合物处理的PAM上被显著抑制,确保了Cell-ELISA筛选结果的准确性。上述结果表明,该Cell-ELISA法可作为一种HTS方法,用于筛选抗ASFV药物,并促进ASFV抗病毒药物的开发,对ASF疫情防控具有重要意义。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 Cell-ELISA 抗病毒药物 高通量筛选 小分子化合物
原文传递
动物产地检疫合格证明迈向无纸化 被引量：1
3
作者 林家全 陈冲 彭宛清 《湖南农业》 2023年第12期45-45,共1页
2023年10月13日,江永县开出湖南省调往广东省的首张无纸化动物产地检疫合格证明(动物A)(见图1),这是湖南省在中南区(福建、江西、湖南、广东、广西、海南)内开展无纸化出具动物A证试点以来取得的重大突破,标志着湖南省动物检疫信息化工... 2023年10月13日,江永县开出湖南省调往广东省的首张无纸化动物产地检疫合格证明(动物A)(见图1),这是湖南省在中南区(福建、江西、湖南、广东、广西、海南)内开展无纸化出具动物A证试点以来取得的重大突破,标志着湖南省动物检疫信息化工作进人新阶段。 展开更多
关键词 动物产地检疫 动物检疫 合格证明 中南区 无纸化 江永县 信息化 湖南省
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