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基于智能手机内置传感器的人体运动状态识别 被引量:11
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作者 殷晓玲 陈晓江 +3 位作者 夏启寿 何娟 张鹏 陈峰 《通信学报》 EI CSCD 北大核心 2019年第3期157-169,共13页
针对目前智能手机识别人体运动状态种类少、准确率低的问题,提出一种利用加速度传感器和重力传感器分层识别人体运动状态的方案。首先,利用加速度和重力加速度的关系计算出与手机方向无关的惯性坐标系下的线性加速度;其次,根据人体运动... 针对目前智能手机识别人体运动状态种类少、准确率低的问题,提出一种利用加速度传感器和重力传感器分层识别人体运动状态的方案。首先,利用加速度和重力加速度的关系计算出与手机方向无关的惯性坐标系下的线性加速度;其次,根据人体运动频率的变化范围和线性加速度矢量来确定脚步的波峰和波谷位置;最后,提取线性加速度在时域上的特征向量,使用层次支持向量机方法分层识别人体运动状态。实验结果表明,该方法能有效识别人体6种日常运动状态,准确率达到93.37%。 展开更多
关键词 运动状态识别 层次支持向量机 智能手机传感器 时域特征
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甜龙侧枝扦插袋苗培育技术探究
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作者 武淑玲 张鹏 +1 位作者 李明斌 段国朝 《中国林业产业》 2024年第6期36-37,共2页
甜龙竹是一种竹属大型丛生竹类植物,秆高20~25米,在我国境内主要分布于云南省。甜龙竹是一种阳性植物,多生长在高温、湿润、向阳的区域,生长适宜温度为22~32℃,有着耐旱、耐热的特点。我国常见的甜龙竹有版纳甜龙竹、勃氏甜龙竹,其中,... 甜龙竹是一种竹属大型丛生竹类植物,秆高20~25米,在我国境内主要分布于云南省。甜龙竹是一种阳性植物,多生长在高温、湿润、向阳的区域,生长适宜温度为22~32℃,有着耐旱、耐热的特点。我国常见的甜龙竹有版纳甜龙竹、勃氏甜龙竹,其中,版纳甜龙竹高达通直,是一种集食用、材用、观赏为一体的优良竹种;而勃氏甜龙竹则是一种良好的笋用竹,其秆也能被用于制作筷子或当做建筑耗材,但篾用价值较低。甜龙竹一般采用埋杆育苗、直接埋节定植、压杆育苗、侧枝扦插等方式。 展开更多
关键词 勃氏甜龙竹 适宜温度 笋用竹 版纳甜龙竹 通直 侧枝扦插 优良竹种 大型丛生竹
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国有企业内部经济责任审计存在的困境与防范对策
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作者 张鹏 《中文科技期刊数据库(全文版)经济管理》 2024年第5期0204-0207,共4页
新形势下,国有企业发展内部经济责任审计具有重要作用,但目前发展还很欠缺。例如,经济责任审计机制还不够健全,需要及时进行修订和完善;审计成果在应用方面还不够深入,并且与其他部门的衔接不够紧密;经济责任审计的创新能力及发展驱动... 新形势下,国有企业发展内部经济责任审计具有重要作用,但目前发展还很欠缺。例如,经济责任审计机制还不够健全,需要及时进行修订和完善;审计成果在应用方面还不够深入,并且与其他部门的衔接不够紧密;经济责任审计的创新能力及发展驱动力仍然不足,无法适应新的发展与改革。对此,本文针对上述困境,提出优化国有企业监管考核程序,进一步完善内部经济责任审计机制。包括建立更加科学合理的考核指标和流程,完善内部经济责任审计的工作形式及评估标准,加强审计报告的分析和整理,加强国有企业内部审计人员创新意识和能力,积极探索新的多样化工作机制。通过这些措施,从而有效推动国有企业内部经济责任审计的发展及创新。 展开更多
关键词 国有企业 内部经济责任审计 困境
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乙型脑炎减毒活疫苗诱导小鼠的细胞免疫应答 被引量:3
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作者 叶琳 张鹏 +1 位作者 郑庆纹 姚亚夫 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第11期1099-1101,共3页
目的探讨乙型脑炎(简称乙脑)减毒活疫苗在小鼠中诱导细胞免疫应答的能力,评价疫苗的免疫原性。方法以乙脑减毒活疫苗免疫BALB/c小鼠,制备小鼠脾淋巴细胞,在体外以重组蛋白NS3-1和NS3-2进行刺激,采用酶联斑点法(ELISPOT)检测分泌细胞因... 目的探讨乙型脑炎(简称乙脑)减毒活疫苗在小鼠中诱导细胞免疫应答的能力,评价疫苗的免疫原性。方法以乙脑减毒活疫苗免疫BALB/c小鼠,制备小鼠脾淋巴细胞,在体外以重组蛋白NS3-1和NS3-2进行刺激,采用酶联斑点法(ELISPOT)检测分泌细胞因子的效应T细胞的频数。结果乙脑减毒活疫苗免疫小鼠的脾淋巴细胞在体外经重组蛋白NS3-1和NS3-2刺激后,可诱导高频数的分泌IFNγ的CD4+和CD8+T淋巴细胞及低频数的分泌IL-4的淋巴细胞;而乙脑灭活疫苗仅诱导低频数的分泌IFNγ和IL-4的T淋巴细胞。结论乙脑减毒活疫苗可在小鼠中有效地诱导NS3-1和NS3-2抗原特异性T淋巴细胞应答,且应答水平显著高于乙脑灭活疫苗。 展开更多
关键词 乙型脑炎 减毒活疫苗 NS3-1蛋白 NS3-2蛋白 细胞免疫应答
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论国有林场森林火灾隐患及防控策略 被引量:3
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作者 张鹏 《农村实用技术》 2020年第12期128-129,共2页
森林是重要的自然资源和国家财产,火灾是造成森林资源损失的主要原因,国有林场肩负森林资源培育和管理的首要责任,必须要提高森林火灾风险防控意识。本文首先分析了森林火灾的特点,其次分析了导致国有林场发生森林火灾的相关隐患因素,... 森林是重要的自然资源和国家财产,火灾是造成森林资源损失的主要原因,国有林场肩负森林资源培育和管理的首要责任,必须要提高森林火灾风险防控意识。本文首先分析了森林火灾的特点,其次分析了导致国有林场发生森林火灾的相关隐患因素,最后提出了相应的防控措施,期望能降低国有林场森林火灾风险和损失,有效保护国有财产与生态环境。 展开更多
关键词 国有林场 森林火灾 隐患及防控
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连续状态马氏链遍历性的初等证明 被引量:2
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作者 张鹏 杨卫国 《应用概率统计》 CSCD 北大核心 2018年第3期312-318,共7页
本文介绍了连续状态马氏链Dobrushin系数、指数强遍历性、强遍历性以及弱遍历性,在此基础上给出指数强遍历、强遍历和弱遍历之间相互等价的一个初等证明.
关键词 连续状态马氏链 指数强遍历 强通历 弱遍历
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Iscom佐剂增强含前S表位重组乙肝表面抗原的免疫原性 被引量:2
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作者 谭昌耀 叶琳 +3 位作者 蒋丽明 张鹏 胡波 Bror Morein 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期643-646,共4页
目的探讨Iscom佐剂对含前S表位重组乙肝表面抗原(SS1S2)免疫原性的影响。方法用纯化的SSIS2抗原与A1(OH),和Iscom佐剂分别配制疫苗,在0d和14d时采用肌肉和皮下注射方式免疫BALB/c小鼠,免后14d各取-半小鼠采血,测定乙肝病毒s、... 目的探讨Iscom佐剂对含前S表位重组乙肝表面抗原(SS1S2)免疫原性的影响。方法用纯化的SSIS2抗原与A1(OH),和Iscom佐剂分别配制疫苗,在0d和14d时采用肌肉和皮下注射方式免疫BALB/c小鼠,免后14d各取-半小鼠采血,测定乙肝病毒s、前s1和前s2抗体滴度以及总的IgG1和IgG2a抗体滴度,并计算IgG2a和IgG1抗体比例。同时分离脾淋巴细胞,进行IFN-1酶联斑点(ELISPOT)测定。结果单针免疫时,两组疫苗血清样品乙肝病毒S、前S1和前S2抗体阳转率、抗体滴度及IFN-1分泌细胞数相当,但Iscom佐剂疫苗组IgG2a抗体比例较高;加强免疫后,两组疫苗抗体滴度均呈上升趋势,Iscom疫苗组抗体滴度上升幅度大于AI(OH),疫苗组,两者S、前S1和前s2抗体滴度差异均有统计学意义。加强免疫后Iscom疫苗组IgG2a抗体比例保持平衡,而A1(OH),疫苗组IgG2a抗体比例进-步降低。在细胞免疫方面,Iscom疫苗组在加强免疫后产生的特异性IFN-γ分泌细胞数显著超过AI(OH),疫苗组。结论本研究初步显示,Iscom佐剂对含前S表位重组乙肝表面抗原具有比Al(OH),佐剂更强地免疫增强作用。 展开更多
关键词 ISCOM 前S 表位 乙肝表面抗原 免疫原性
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乙型肝炎病毒核心抗原在大肠杆菌中的构建及表达 被引量:2
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作者 张鹏 叶琳 《检验医学与临床》 CAS 2010年第17期1802-1803,共2页
目的用基因工程的方法获得乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)编码区的基因片段,构建重组质粒并在大肠杆菌中表达抗原蛋白。方法用PCR法扩增HBcAg基因片段,构建含有HBcAg基因的克隆质粒及表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)plys中以IPTG诱导重组蛋... 目的用基因工程的方法获得乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)编码区的基因片段,构建重组质粒并在大肠杆菌中表达抗原蛋白。方法用PCR法扩增HBcAg基因片段,构建含有HBcAg基因的克隆质粒及表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)plys中以IPTG诱导重组蛋白的表达,并用Western blot对重组蛋白进行检测。结果重组HBcAg在大肠杆菌中得到表达,Western blot检测显示在预期位置出现特异性条带。结论成功构建HBcAg原核表达系统并获得重组HBcAg,为该重组蛋白的相关功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 HBCAG 大肠杆菌 克隆 表达
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应用中空纤维柱和凝胶色谱纯化鸡胚流感病毒 被引量:2
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作者 杨欣 刘杰 +5 位作者 刘瑛 吴永林 范凤鸣 刘辉 张鹏 李玉华 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期395-398,共4页
目的研究鸡胚尿囊腔培养流感病毒的纯化方法。方法采用中空纤维柱超滤、病毒裂解和两次Seph-arose 4FF凝胶色谱纯化流感病毒。结果通过中空纤维柱超滤可去除76.53%~93.66%卵清蛋白,再通过两次Sepharose 4FF凝胶色谱纯化,流感病毒样品... 目的研究鸡胚尿囊腔培养流感病毒的纯化方法。方法采用中空纤维柱超滤、病毒裂解和两次Seph-arose 4FF凝胶色谱纯化流感病毒。结果通过中空纤维柱超滤可去除76.53%~93.66%卵清蛋白,再通过两次Sepharose 4FF凝胶色谱纯化,流感病毒样品总蛋白含量与血凝素含量比值小于4.5,卵清蛋白含量小于500 ng/mL,SDS-PAGE电泳和Western免疫印迹的电泳条带和血凝素特异性条带与英国国家生物制品检定所(NIBSC)的标准品一致。结论该工艺纯化的流感病毒的纯度符合《中国药典》2010版的要求。 展开更多
关键词 流感病毒 纯化 中空纤维柱 凝胶色谱 血凝素
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乙型肝炎病毒核心抗原在疫苗研究中的应用 被引量:1
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作者 张鹏 叶琳 《国际生物制品学杂志》 CAS 2015年第3期136-140,共5页
乙型肝炎病毒核心抗原(hepatitis B virus core antigen,HBcAg)是乙型肝炎病毒的核衣壳蛋白,具有高度的免疫原性,能自我装配形成病毒样颗粒,并可接受外源基因的插入。HBcAg作为载体和佐剂已用于数十种病原微生物抗原表位的表达和... 乙型肝炎病毒核心抗原(hepatitis B virus core antigen,HBcAg)是乙型肝炎病毒的核衣壳蛋白,具有高度的免疫原性,能自我装配形成病毒样颗粒,并可接受外源基因的插入。HBcAg作为载体和佐剂已用于数十种病原微生物抗原表位的表达和新型疫苗的研发。此文就HBcAg的结构特点、免疫原性及其在疫苗研究中的应用进展作一综述。 展开更多
关键词 肝炎核心抗原 乙型 病毒样颗粒 免疫原性 疫苗
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含前S表位重组HBsAg联合重组HBcAg的免疫原性研究 被引量:1
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作者 张鹏 丁显平 +1 位作者 叶琳 谭昌耀 《国际生物制品学杂志》 CAS 2014年第2期53-57,共5页
目的 研究含前S表位重组HBsAg(SS1 S2)与重组HBcAg(C)联合免疫BALB/c小鼠的体液和细胞免疫应答.方法 用纯化的SS1S2与C分别配制含或不含Al(OH)3佐剂(Al)的疫苗.采用简单随机法将雌性BALB/c小鼠分为5组:阴性对照(NC)、SS1S2、... 目的 研究含前S表位重组HBsAg(SS1 S2)与重组HBcAg(C)联合免疫BALB/c小鼠的体液和细胞免疫应答.方法 用纯化的SS1S2与C分别配制含或不含Al(OH)3佐剂(Al)的疫苗.采用简单随机法将雌性BALB/c小鼠分为5组:阴性对照(NC)、SS1S2、SS1S2+C、SS1S2+ Al、SS1S2+C+Al,各组分别于0和21 d进行腹腔免疫,对照组注射磷酸盐缓冲液.初免及加强后1周各取一半小鼠采血,采用ELISA法测定抗-HBs、抗-前S1、抗-前S2和抗-HBc滴度;常规制备脾淋巴细胞,用酶联免疫斑点法测定分泌IFN-γ的T细胞频数.采用t检验对各组结果进行比较.结果 联合HBcAg的疫苗组均产生了较高水平的抗-HBs、抗-前S1、抗-前S2和抗-HBc.初免后1周,SS1S2+C组的抗-HBs阳转比例(1/5)高于SS1S2组(0/5)、SS1S2 +Al+C组(4/5)高于SS1S2 +Al组(3/5);SS1S2+C组的抗-前S1阳转比例(3/5)高于SS1S2组(0/5);HBcAg对抗-前S2的产生无影响.加强免疫后,各疫苗组的抗体滴度均升高,联合HBcAg的疫苗组各抗体滴度明显高于SS1S2疫苗组.各组疫苗免疫后均可诱导细胞免疫应答,初免后SS1S2+C和SS1S2+ Al+C组分泌IFN-γ的T细胞频数显著超过SS1S2和S1S2+Al组(t值分别为2.926、2.974,P值均<0.05);加强免疫后,各组均有加强效应,SS1S2+C组的T细胞频数明显超过SS1S2组(t=4.604,P=0.010).结论 SS1S2联合HBcAg可在BALB/c小鼠中诱导较强的免疫应答,HBcAg可增强SS1S2诱导的体液及细胞免疫应答. 展开更多
关键词 肝炎表面抗原 乙型 肝炎核心抗原 乙型 免疫原性 免疫 体液 免疫 细胞
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重组CHO细胞乙肝表面抗原诱导小鼠细胞免疫应答的研究
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作者 叶琳 张鹏 黄林 《微生物学免疫学进展》 2007年第4期6-9,共4页
为了研究重组CHO细胞乙肝表面抗原(CHO-rHBsAg)在小鼠中诱导T细胞免疫应答的能力,全面评价疫苗的免疫原性,以CHO-rHBsAg免疫BALB/c小鼠,常规制备小鼠脾脏淋巴细胞并在体外以抗原或特异多肽刺激;采用ELISA法测定抗原特异性T淋巴细胞分泌... 为了研究重组CHO细胞乙肝表面抗原(CHO-rHBsAg)在小鼠中诱导T细胞免疫应答的能力,全面评价疫苗的免疫原性,以CHO-rHBsAg免疫BALB/c小鼠,常规制备小鼠脾脏淋巴细胞并在体外以抗原或特异多肽刺激;采用ELISA法测定抗原特异性T淋巴细胞分泌的细胞因子,乳酸脱氢酶法(LDH)测定抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性,酶联斑点法(ELISPOT)测定CTL频数(CTLp),应用流式细胞仪分析T淋巴细胞亚群。结果显示,rHBsAg可在小鼠中诱导Th1及Th2类细胞因子;加铝佐剂的rHBsAg较未加佐剂的抗原可诱导较高水平的IFN-γ、CTL克隆及较高百分比的CD8+T淋巴细胞亚群。重组CHO细胞来源的HBsAg可在BALB/c小鼠中诱导一定程度的细胞免疫应答。 展开更多
关键词 重组乙肝表面抗原 细胞免疫 细胞毒T淋巴细胞
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含PreS1、PreS2和S抗原的重组乙型肝炎疫苗辅以不同佐剂在HBV转基因小鼠中的免疫原性 被引量:1
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作者 叶琳 胡波 +3 位作者 张鹏 蒋丽明 施慧敏 谭昌耀 《国际生物制品学杂志》 CAS 2017年第3期109-115,共7页
目的 研究以免疫刺激复合物(immune stimulating complex,ISCOM)或Al(OH)3为佐剂的含PreS1、PreS2和S抗原的重组乙型肝炎疫苗在HBV转基因小鼠中诱导的免疫应答。方法 将纯化的含PreS1、PreS2和S抗原的重组HBsAg(SS1S2)分别辅以... 目的 研究以免疫刺激复合物(immune stimulating complex,ISCOM)或Al(OH)3为佐剂的含PreS1、PreS2和S抗原的重组乙型肝炎疫苗在HBV转基因小鼠中诱导的免疫应答。方法 将纯化的含PreS1、PreS2和S抗原的重组HBsAg(SS1S2)分别辅以ISCOM或Al(OH)3佐剂制成疫苗。HBV转基因小鼠每月肌内注射1针疫苗,共注射7针。免疫前及每针后1个月称量小鼠体重,观察小鼠生长情况。免疫前及每针后1个月采血,用ELISA检测HBV S、PreS1、PreS2抗原及其相应抗体。7针后1个月分离小鼠脾淋巴细胞,用酶联免疫斑点试验分别测定分泌IL-4、IL-5、IFN-γ的效应T细胞频数。结果 小鼠生长状况良好,每针后体重均有增长。首针后1个月,10只ISCOM+SS1S2免疫鼠分别有3和1只抗S和PreS1抗体阳转,无一小鼠抗PreS2抗体阳转;10只Al(OH)3+SS1S2免疫鼠的抗体均为阴性。7针后1个月,10只ISCOM+SS1S2免疫鼠的抗S和PreS1抗体均阳转,8只抗PreS2 抗体阳转;10只Al(OH)3+SS1S2免疫鼠分别有9、7和1只抗S、PreS1和PreS2 抗体阳转;ISCOM+SS1S2组和Al(OH)3+SS1S2组的抗S抗体几何平均滴度分别为1:15 647和1:1 039,差异有统计学意义(t=5.18,P=0.000)。7针后1个月,ISCOM+SS1S2组和Al(OH)3+SS1S2组分泌IL-4的斑点细胞数分别为219和78斑点形成细胞(spot-forming cell,SFC)/106细胞(t=10.50,P=0.000),分泌IL-5的斑点细胞数分别为286和34 SFC/106细胞(t=19.53,P=0.000 ),差异有统计学意义。结论 含PreS1、PreS2和S抗原的重组乙型肝炎疫苗辅以ISCOM或Al(OH)3佐剂在HBV转基因小鼠中均具有免疫原性,且ISCOM+SS1S2的免疫原性强于Al(OH)3+SS1S2。 展开更多
关键词 肝炎表面抗原 乙型 小鼠 转基因 免疫刺激复合物 免疫原性
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对连续状态马氏链Dobrushin不等式的一个证明 被引量:1
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作者 张鹏 杨卫国 《高等数学研究》 2017年第4期94-95,共2页
本文先利用Dobrushin系数的定义和Fubini定理证明一个不等式,相应地给出连续状态马氏链Dobrushin不等式的一个证明.
关键词 连续状态马氏链 Dobrushin系数 Dobrushin不等式
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含前S1、前S2和S抗原的重组乙型肝炎疫苗在小鼠中的免疫原性 被引量:1
15
作者 胡波 叶琳 +3 位作者 蒋丽明 张鹏 施慧敏 谭昌耀 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期561-565,570,共6页
目的探讨包含前S1、前S2和S抗原的新型重组乙型肝炎疫苗(简称SS1S2疫苗)在小鼠中诱导体液和细胞免疫应答的能力以及在无应答小鼠中的免疫原性。方法以不同剂量(2.0、0.5、0.125、0.03μg)的SS1S2疫苗或商品化单S乙型肝炎疫苗(简称S疫苗... 目的探讨包含前S1、前S2和S抗原的新型重组乙型肝炎疫苗(简称SS1S2疫苗)在小鼠中诱导体液和细胞免疫应答的能力以及在无应答小鼠中的免疫原性。方法以不同剂量(2.0、0.5、0.125、0.03μg)的SS1S2疫苗或商品化单S乙型肝炎疫苗(简称S疫苗)免疫BALB/c小鼠,于免后1、2、4周时采血,采用ELISA法检测两组疫苗单只小鼠血清的S、前S1和前S2抗体。以SS1S2疫苗或单S疫苗于0和3周时免疫BALB/c小鼠,每只5μg,于每次免疫后1周处死一半小鼠,制备脾脏淋巴细胞,采用ELISPOT法检测分泌IFNγ的细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)频数。以单S疫苗于0、2、4周时免疫NIH小鼠,于末次免疫后4周采血,测定S抗体,筛选无应答小鼠。将无应答小鼠分为两组,分别用SS1S2疫苗或单S疫苗加强免疫1次,于免后1个月采血,测定S抗体。结果免后1、2周,2.0、0.5、0.125μg的SS1S2疫苗组S抗体阳转率均高于同剂量的单S疫苗组,且能诱导前S1、前S2抗体产生,而单S疫苗组无前S1、前S2抗体产生;免后4周,两组疫苗的抗体阳转率在总体上继续增加,2.0、0.5、0.125μg的SS1S2疫苗组S抗体几何平均滴度(GMT)均高于同剂量的单S疫苗组,且有一定滴度的前S1、前S2抗体,而单S疫苗组无前S1、前S2抗体产生。初免后1、4周,SS1S2疫苗组小鼠IFNγ分泌细胞频数均明显高于单S疫苗组(P<0.05或<0.01)。以0.5μg SS1S2疫苗或单S疫苗对经3剂单S疫苗免疫无应答NIH小鼠进行1次加强免疫后,SS1S2疫苗组小鼠抗体阳转率和GMT均明显高于单S疫苗组(P均<0.01)。结论与商品化单S乙肝疫苗相比,SS1S2疫苗在小鼠中诱导的抗体产生时间较早,抗体阳转率和抗体滴度较高,还能诱导前S1、前S2抗体产生;SS1S2疫苗比单S疫苗诱导了更高水平的特异性CTL应答;在无应答小鼠中能诱导更大比例和更高滴度的保护性抗体产生,表现出更好的免疫原性。 展开更多
关键词 乙型肝炎疫苗 前S1抗原 前S2抗原 S抗原 免疫原性
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乙型脑炎病毒SA14-14-2株NS3基因的克隆及原核表达 被引量:1
16
作者 叶琳 张鹏 +1 位作者 郑庆纹 姚亚夫 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第8期758-761,共4页
目的克隆并表达乙型脑炎病毒SA14-14-2株NS3编码区的基因片段,为重组蛋白进一步的功能研究奠定基础。方法提取乙脑病毒SA14-14-2株总RNA,用RT-PCR法扩增NS3-1、NS3-2基因片段,克隆入原核表达载体pET15bTAT中,构建重组原核表达质粒,转化... 目的克隆并表达乙型脑炎病毒SA14-14-2株NS3编码区的基因片段,为重组蛋白进一步的功能研究奠定基础。方法提取乙脑病毒SA14-14-2株总RNA,用RT-PCR法扩增NS3-1、NS3-2基因片段,克隆入原核表达载体pET15bTAT中,构建重组原核表达质粒,转化大肠杆菌Rosetta2,IPTG诱导表达。表达产物经Ni2+亲和层析柱纯化后,进行Western blot鉴定。结果重组原核表达质粒pET15bTAT-NS3-1和pET15bTAT-NS3-2经酶切证明构建正确。表达的重组蛋白相对分子质量约为27000和20000,主要以包涵体的形式表达。重组蛋白纯化后纯度可达80%以上,并可被小鼠抗乙型脑炎病毒SA14-14-2株血清识别。结论已成功克隆了乙型脑炎病毒SA14-14-2株NS3-1和NS3-2基因,并在大肠杆菌Rosetta2中获得表达。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 SA14-14—2株 NS3基因 克隆 原核表达
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两种不同配方含前S表位乙型肝炎疫苗的免疫原性及抗原活性比较
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作者 胡波 谭昌耀 +2 位作者 施慧敏 张鹏 蒋丽明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第7期873-877,共5页
目的对共表达的含前S1(PreS1)和前S2(PreS2)表位的乙肝表面抗原(SS1S2)及分别表达的含PreS1表位乙肝表面抗原(SS1)和含PreS2表位乙肝表面抗原(SS2)混合物的免疫原性及抗原活性进行比较,为疫苗配方的选择提供依据。方法将SS1S2抗原、SS1... 目的对共表达的含前S1(PreS1)和前S2(PreS2)表位的乙肝表面抗原(SS1S2)及分别表达的含PreS1表位乙肝表面抗原(SS1)和含PreS2表位乙肝表面抗原(SS2)混合物的免疫原性及抗原活性进行比较,为疫苗配方的选择提供依据。方法将SS1S2抗原、SS1抗原与SS2抗原的混合物(1∶1混合,以下简称SS1+SS2)分别用氢氧化铝佐剂吸附,制成SS1S2疫苗和SS1+SS2疫苗,总抗原含量均为20μg/ml,分别经BALB/c小鼠腹腔单次注射两种疫苗1.0、0.25和0.06μg,免疫后1、2、4周采血,分离血清,ELISA法检测小鼠血清中HBV S、PreS1和PreS2抗体水平。分别以纯化的SS1抗原或SS2抗原为参考品,采用ELISA法检测6批SS1S2抗原所对应的SS1或SS2抗原含量。结果免后1、2、4周,3个剂量的SS1S2疫苗S抗体阳转率均高于同剂量的SS1+SS2疫苗,0.25μg剂量的SS1S2疫苗PreS1抗体阳转率高于同剂量的SS1+SS2疫苗;免后1、2周,3个剂量的SS1S2疫苗PreS2抗体阳转率与SS1+SS2疫苗相近;免后4周,1.0和0.25μg剂量的SS1S2疫苗PreS2抗体阳转率高于SS1+SS2疫苗。免后4周,3个剂量的SS1S2疫苗的S和PreS1几何抗体平均滴度(GMT)均高于同剂量的SS1+SS2疫苗;1.0和0.25μg剂量的SS1S2疫苗的PreS2抗体GMT高于同剂量的SS1+SS2疫苗。6批SS1S2抗原中,每10μg SS1S2抗原所包含的PreS1抗原活性相当于(12.1±0.84)μg的SS1,每10μg SS1S2抗原所包含的PreS2抗原活性相当于(7.0±0.52)μg的SS2;SS1S2抗原中SS1和SS2抗原活性之和远超过100%。结论共表达的SS1S2抗原比单独表达的SS1抗原、SS2抗原具有更强的免疫原性;共表达的SS1S2抗原中PreS1和PreS2抗原活性也得到增强。 展开更多
关键词 前S表位 乙肝疫苗 免疫原性 抗原活性
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地鼠多瘤病毒PCR检测方法的建立
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作者 叶琳 张鹏 +3 位作者 曾献武 郑庆纹 张雪梅 姚亚夫 《国际生物制品学杂志》 CAS 2012年第3期113-117,共5页
目的建立地鼠多瘤病毒(hamster polyomavirus,HaPyV)PCR检测方法,并应用于乙型脑炎减毒活疫苗生产过程中地鼠肾细胞的感染检测。方法设计针对HaPyV衣壳蛋白VP1基因片段的特异引物,以含HaPyV VP1片段的质粒PMDl9T—HaPyV688为模板进... 目的建立地鼠多瘤病毒(hamster polyomavirus,HaPyV)PCR检测方法,并应用于乙型脑炎减毒活疫苗生产过程中地鼠肾细胞的感染检测。方法设计针对HaPyV衣壳蛋白VP1基因片段的特异引物,以含HaPyV VP1片段的质粒PMDl9T—HaPyV688为模板进行PCR扩增并测序确认扩增产物。以多种病毒DNA为模板进行PCR扩增,并对扩增产物进行斑点杂交鉴定以验证PCR方法的特异性。将定量的质粒PMD19T-HaPyV68810倍系列稀释后进行PCR敏感性检测。以小鼠多瘤病毒(murinepolyomavirus,MuPyV)检验PCR法对质粒DNA和病毒DNA检测的一致性。应用建立的方法对生产用地鼠肾细胞悬液进行HaPyVDNA检测。结果仅含有质粒PMDl9T—HaPyV688和MuPyVDNA的样品能够扩增出600bp的片段,经斑点杂交及测序证明其分别为HaPyV和MuPyV的VPl特异基因片段。PCR所能检出的PMD19T—HaPyV688和MuPyV的最少DNA拷贝数分别为5300和590。7个亚批生产用地鼠肾细胞悬液的HaPyV检测结果均为阴性。结论建立的PCR方法具有较高的敏感性和特异性,可用于生产用地鼠肾细胞HaPyV感染的检测。 展开更多
关键词 多瘤病毒属 聚合酶链反应 敏感性与特异性
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硫氰钴铵比色法检测流感裂解疫苗中Triton N-101残留量
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作者 杨欣 张鹏 《预防医学情报杂志》 CAS 2012年第9期758-760,共3页
目的用硫氰钴铵比色法检测流感裂解疫苗中Triton N-101残留量。方法用硫氰钴铵显色,620nm测定吸光度,检测Triton N-101的线性、空白回收率、加标回收率和精密度。结果 Triton N-101含量在0~400μg/ml时,线性良好,R2大于0.99;空白回收率... 目的用硫氰钴铵比色法检测流感裂解疫苗中Triton N-101残留量。方法用硫氰钴铵显色,620nm测定吸光度,检测Triton N-101的线性、空白回收率、加标回收率和精密度。结果 Triton N-101含量在0~400μg/ml时,线性良好,R2大于0.99;空白回收率在87.4%~95.4%之间,加标回收率在94.7%~99.8%之间;精密度(CV%)≤6%。结论该方法能满足流感裂解疫苗中Triton N-101残留量检测。 展开更多
关键词 TRITON N-101 硫氰钴铵 比色法 流感裂解疫苗
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C端截短的乙型肝炎病毒核心抗原的原核表达及免疫原性
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作者 张鹏 叶琳 《国际生物制品学杂志》 CAS 2015年第1期1-5,共5页
目的 原核表达C端截短的乙型肝炎病毒核心抗原(hepatitis B virus core antigen,HBcAg)[HBcAg(aa 1-149)],并研究其在小鼠中的免疫原性.方法 用聚合酶链反应扩增C端截去34个氨基酸的HBcAg基因片段,构建含HBcAg(aa 1-149)基因的克... 目的 原核表达C端截短的乙型肝炎病毒核心抗原(hepatitis B virus core antigen,HBcAg)[HBcAg(aa 1-149)],并研究其在小鼠中的免疫原性.方法 用聚合酶链反应扩增C端截去34个氨基酸的HBcAg基因片段,构建含HBcAg(aa 1-149)基因的克隆质粒及表达质粒,在大肠杆菌Rossatta2中以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导重组蛋白的表达.表达产物经Ni2+亲和层析柱纯化后进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹法鉴定.将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,用ELISA法检测血清抗-HBc水平.结果 重组原核表达质粒pET15bHBcAg(aa 1-149)经双酶切和SDS-PAGE鉴定证明构建正确.重组HBcAg(aa 1-149)在大肠杆菌中获得高效表达,表达形式主要为可溶性蛋白.蛋白质印迹法显示在预期位置(相对分子质量约17 000位置)出现特异性条带.纯化后的重组蛋白纯度较高(>90%),并可在小鼠中诱生较高水平的抗-HBc.结论 重组HBcAg(aa 1-149)在原核系统中获得成功表达,并可在小鼠中诱导抗体应答. 展开更多
关键词 肝炎核心抗原 乙型 原核细胞 基因表达 蛋白纯化 免疫原性
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