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分子标记技术的进展及其应用 被引量：14
1
作者 吴谡琦 张进兴 +1 位作者 洪旭光 孙修勤 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第4期99-103,共5页
综述了分子标记产生与发展的过程 ,综合比较、分析了目前常用的RAPD、DAF、SSCP、AFLP、VNTR、RFLP、同工酶等分子标记技术的原理、特点和适用范围 ,简要介绍了分子标记技术的研究与开发现状以及未来的发展趋势。
关键词 分子标记 RAPD DAF SSCP AFLP VNTR RELP 同工酶
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热休克蛋白研究进展 被引量：35
2
作者 曲凌云 孙修勤 +2 位作者 相建海 洪旭光 张进兴 《海洋科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期385-391,共7页
热休克蛋白是生物体在不利环境因素刺激下应激合成的一族进化上高度保守的蛋白质。综述了热休克蛋白在热休克因子和热休克元件调节下的基因表达调控,并讨论了热休克蛋白的生物学功能和它们在海洋生物养殖方面潜在的应用意义。
关键词 热休克蛋白 胁迫 调控 热耐力 免疫
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栉孔扇贝种群的遗传变异分析 被引量：21
3
作者 李太武 孙修勤 +1 位作者 刘艳 张进兴 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第4期25-27,共3页
采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究了中国栉孔扇贝和日本栉孔扇贝两个天然种群的六种同工酶。结果表明 ,两个种群具有基本相同的基因位点控制同工酶的表达 ,二者都具有居群内的个体差异。中国和日本的两个种群的多态位点比例 (P .99... 采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究了中国栉孔扇贝和日本栉孔扇贝两个天然种群的六种同工酶。结果表明 ,两个种群具有基本相同的基因位点控制同工酶的表达 ,二者都具有居群内的个体差异。中国和日本的两个种群的多态位点比例 (P .99)分别为 41 .1 8%和 45.45% ,平均杂合度观测值 (Ho)分别为 0 .1 2 95和 0 .1 531 ,平均杂合度预期值 (He)分别为 0 .1 695和 0 .2 331 ,各位点平均等位基因数 (Ne)分别为 1 .52 94和 1 .6363。日本栉孔扇贝自然种群的遗传变异明显高于中国栉孔扇贝自然种群。 展开更多
关键词 栉孔扇贝 同工酶 基因位点 人工养殖 种群 遗传变异分析
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养殖牙鲆淋巴囊肿病流行状况与组织病理学研究 被引量：19
4
作者 曲凌云 张进兴 孙修勤 《黄渤海海洋》 CSCD 1999年第2期43-47,共5页
１９９７～１９９８年，山东省烟台市和威海市４个养殖场的养殖牙鲆发生了一种危害很大的疾病。该病症状为患病牙鲆的眼睛、口腔内外、鳍及上下体表等部位有明显囊肿物。病症轻的牙鲆援食正常且有自愈现象，病症重的牙鲆基本不摄食、部... １９９７～１９９８年，山东省烟台市和威海市４个养殖场的养殖牙鲆发生了一种危害很大的疾病。该病症状为患病牙鲆的眼睛、口腔内外、鳍及上下体表等部位有明显囊肿物。病症轻的牙鲆援食正常且有自愈现象，病症重的牙鲆基本不摄食、部分出现死亡。自愈牙鲆体质弱，在运输过程中死亡率超过了８０×１０－２，可以说失去了商品价值。据调查，发病养殖场的鱼苗系购自同一育苗场，而该育苗场则使用了韩国亲鱼进行鱼苗生产。病理组织切片表明，在囊肿细胞的胞质内有嗜碱性、具网状结构、形状不规则的包涵体。由于本病的症状和病理组织特征与国内外有关真鲷和石斑鱼等的报道基本一致，所以，本研究初步认为该病为淋巴囊肿病。 展开更多
关键词 淋巴囊肿病 流行状况 组织病理学 牙鲆
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牙鲆淋巴囊肿病毒的病原性与免疫原性 被引量：18
5
作者 孙修勤 曲凌云 张进兴 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第9期19-21,共3页
用病牙鲆体表肿瘤纯化的病毒 ,对健康牙鲆进行人工感染实验。感染 6 0天后 ,供试牙鲆再现了自然发病鱼的症状。该结果证明 ,从病鱼囊肿物中纯化的病毒 ,确系引发淋巴囊肿病的病原。免疫学实验显示 ,淋巴囊肿病毒使被感染鱼产生了抗体Ig... 用病牙鲆体表肿瘤纯化的病毒 ,对健康牙鲆进行人工感染实验。感染 6 0天后 ,供试牙鲆再现了自然发病鱼的症状。该结果证明 ,从病鱼囊肿物中纯化的病毒 ,确系引发淋巴囊肿病的病原。免疫学实验显示 ,淋巴囊肿病毒使被感染鱼产生了抗体IgM。在实验期间内 ,IgM随着时间的延长而增加。 展开更多
关键词 淋巴囊肿病毒 感染 病原性 免疫原性 牙鲆
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牙鲆淋巴囊肿病的PCR诊断方法研究 被引量：15
6
作者 刘允坤 孙修勤 +1 位作者 黄捷 张进兴 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第11期87-89,共3页
以中国养殖牙鲆 (Paralichthysolivaceus)淋巴囊肿病毒 (Lymphocystisdiseasevirus,LCDVcn)主要衣壳蛋白 (majorcapsidprotein ,MCP)基因的中间保守序列为目标基因 ,设计了一对特异性引物。该引物可扩增出 172bp的病毒DNA片段 ,其最小DN... 以中国养殖牙鲆 (Paralichthysolivaceus)淋巴囊肿病毒 (Lymphocystisdiseasevirus,LCDVcn)主要衣壳蛋白 (majorcapsidprotein ,MCP)基因的中间保守序列为目标基因 ,设计了一对特异性引物。该引物可扩增出 172bp的病毒DNA片段 ,其最小DNA检出量为 0 0 183ng。用PCR法从人工感染淋巴囊肿病毒 3天的牙鲆血、鳃、肝、脾、肠、胃及自然发病牙鲆的肿瘤中 ,分别检测到了LCDV的存在。本实验结果证明 ,PCR法对于早期检测LCDV是十分有效的。 展开更多
关键词 牙PING 诊断方法 淋巴囊肿病毒 PCR 鱼病诊断 人工感染 衣壳蛋白
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海洋抗菌肽研究进展 被引量：19
7
作者 洪旭光 孙修勤 +2 位作者 张进兴 吴谡琦 曲凌云 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第2期105-110,共6页
抗菌肽是基因编码的肽类抗菌分子，广泛分布于整个生物界，是脊椎动物、无脊椎动物和植物先天免疫的关键因子。本文综述了目前已发现的海洋动物抗菌肽的种类、结构、功能及分子生物学等研究状况，探讨了其在免疫防御中的作用及其应用前景。
关键词 海洋抗菌肽 海洋生物 免疫防御 基因编码 鲎
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牙鲆淋巴囊肿病的诊断技术研究 被引量：13
8
作者 孙修勤 黄捷 +3 位作者 刘允坤 曲凌云 洪旭光 张进兴 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第1期89-94,共6页
使用本实验室设计的PCR引物 ,在标记反应体系下 ,通过PCR反应合成了碱基数为 172bp的牙鲆 (Paralichthysolivaceus)囊肿病 (Lymphocystisdisease ,LCD)的地高辛标记探针。在其琼脂糖凝胶电泳图 172bp处有明显的亮带 ,由软件分析得出 ,... 使用本实验室设计的PCR引物 ,在标记反应体系下 ,通过PCR反应合成了碱基数为 172bp的牙鲆 (Paralichthysolivaceus)囊肿病 (Lymphocystisdisease ,LCD)的地高辛标记探针。在其琼脂糖凝胶电泳图 172bp处有明显的亮带 ,由软件分析得出 ,合成探针的浓度为 5 0 0ng/ μl,此结果证明 ,该产物确是所需的探针 ,且具有很好的合成效率。通过实验证明本文采用的核酸探针 杂交诊断方法可以有效地定性和定位LCDV。实验结果还提示 ,LCDV是通过血液在牙鲆体内传播的、并可能同时存在垂直和水平两种传播方式。 展开更多
关键词 淋巴囊肿病 诊断技术 牙鲆 LCD 探针-杂交
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温度刺激下栉孔扇贝不同组织热休克蛋白HSP70的表达研究 被引量：17
9
作者 曲凌云 相建海 +2 位作者 孙修勤 洪旭光 张进兴 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期96-100,共5页
采用免疫印迹(Western blot)和流式细胞术(flow cytometry,FCM)方法,研究了热激栉孔扇贝不同组织内热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)的表达变化.免疫印迹结果显示,HSP70的诱导表达有组织特异性,即热休克可以使扇贝鳃组织中HSP7... 采用免疫印迹(Western blot)和流式细胞术(flow cytometry,FCM)方法,研究了热激栉孔扇贝不同组织内热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)的表达变化.免疫印迹结果显示,HSP70的诱导表达有组织特异性,即热休克可以使扇贝鳃组织中HSP70的表达明显升高,但在肌柱、外套膜和性腺组织中,未检测到HSP70 的表达.流式细胞术结果表明:在不同的季节,相同的热刺激对扇贝血淋巴中HSP70的诱导表达存在差异.高温刺激后,栉孔扇贝血淋巴细胞中HSP70的表达量逐渐升高,在诱导7h时达到最高. 展开更多
关键词 栉孔扇贝 热休克蛋白 HSP70 免疫印迹 流式细胞术 组织特异性 血淋巴细胞 温度刺激
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环球空气微生物考察 被引量：18
10
作者 陈皓文 孙修勤 张进兴 《中国环境科学》 EI CAS CSSCI CSCD 北大核心 1994年第2期112-118,共7页
在１９８６年１０月３１日～１９８７年５月１７日间，中国＂极地＂船作环球暨南极的航行中对空气微生物进行了考察。测点分布在其行经的３０９２１海里的空气中，样品计４３２份。作了对微生物的含量分析及分类研究。结合有关参数，比... 在１９８６年１０月３１日～１９８７年５月１７日间，中国＂极地＂船作环球暨南极的航行中对空气微生物进行了考察。测点分布在其行经的３０９２１海里的空气中，样品计４３２份。作了对微生物的含量分析及分类研究。结合有关参数，比较各类型环境间微生物含量的差别，指出本环球航行所经各区空气微生物的状况。结果表明，西半球、大西洋、温带、台湾海峡、南美洲、中国、坎帕纳（阿根廷）、黄海等区域的空气微生物含量一般分别比同类环境的高。南大洋空气较洁净，所考察的环球空气至少有１５属细菌和５属酵母，葡萄球菌、微球菌较多，长城站空气中有芽孢杆菌。的结果说明长城站的空气微生物含量高于其他两测区的，内海（此处指麦克斯威尔湾）空气的微生物含量高于开阔性海域的（指南设得兰群岛海域），与其他区域比，陈皓文等，国际五城市空气微生物概况（待发表）。陈皓文等，中国南极长城站微生物考察（待发表）。南设得兰群岛区域的微生物（待发表）。表７世界５个海峡空气微生物含量表８南美一些近海河流、水道空气微生物含量表９中国海空气微生物含量（ＣＦＬ／ｍ３）南极半岛空气仍较洁净，但长城站的空气有待改善。当船只进入中国海域时，均测定了空气微生物。结果列于表９，表中说明黄海的空? 展开更多
关键词 空气微生物 微生物含量 微生物属群
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牙鲆淋巴囊肿病毒在牙鲆鳃细胞系FG-9307中的增殖 被引量：9
11
作者 孙修勤 洪旭光 +3 位作者 张进兴 张士璀 汪敏 童尚亮 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第12期94-96,共3页
向已建立的牙鲆 (Paralichthysolivaceus)鳃细胞系[1] (FG 930 7)中接种淋巴囊肿病 (Lymphocystisdiseasevirus ,LCDV)、探讨其是否可支持LCDV的增殖。光学显微镜观察发现 :接种 3天后 ,呈纤维状的鳃细胞隆起、立体感加强 ;之后细胞逐... 向已建立的牙鲆 (Paralichthysolivaceus)鳃细胞系[1] (FG 930 7)中接种淋巴囊肿病 (Lymphocystisdiseasevirus ,LCDV)、探讨其是否可支持LCDV的增殖。光学显微镜观察发现 :接种 3天后 ,呈纤维状的鳃细胞隆起、立体感加强 ;之后细胞逐渐变圆 ,一周左右绝大部分鳃细胞变圆、呈现了细胞病变 (cytopathiceffect ,CPE)现象。将CPE细胞制作超薄切片 ,电镜观察发现细胞内有大量具囊膜、直径 133～ 186nm的LCDV。CPE细胞的核变形、线粒体增加且空洞化 ,出现了与淋巴囊肿细胞相同的特征。本实验证明 :FG 930 7是可支持LCDV增殖的鱼类细胞系。 展开更多
关键词 牙鲆 鳃细胞系 LCDV 增殖 淋巴囊肿病 病毒感染
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海参纲动物的吐脏再生 被引量：9
12
作者 孙修勤 郑法新 张进兴 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期719-724,共6页
随着现代生命科学的迅猛发展,海参表现出的极强生命现象———再生,引起了生物学家的广泛兴趣、并被作为器官再生的模型来研究。当前,在我国迅速发展的刺参养殖业中,吐脏现象给养殖者造成了很大困惑。为了搞清刺参吐脏的原因、过程及影... 随着现代生命科学的迅猛发展,海参表现出的极强生命现象———再生,引起了生物学家的广泛兴趣、并被作为器官再生的模型来研究。当前,在我国迅速发展的刺参养殖业中,吐脏现象给养殖者造成了很大困惑。为了搞清刺参吐脏的原因、过程及影响因子,结合对中国北方养殖刺参的吐脏再生过程研究结果、参考国内外有关文献,综述了海参再生器官的细胞起源、迁移与增殖机理,以为刺参养殖提供理论参考。 展开更多
关键词 海参 刺参 吐脏 再生
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牙鲆抗淋巴囊肿病毒免疫球蛋白的纯化 被引量：4
13
作者 曲凌云 孙修勤 +1 位作者 战文斌 张进兴 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第9期14-18,共5页
采用饱和硫酸铵沉淀、DEAE 52纤维素离子交换柱层析和Sepharose 6B凝胶过滤的方法 ,首次得到了纯化的牙鲆抗淋巴囊肿病毒IgM。该IgM的重链与轻链分子量分别为 74KD和 2 2KD。
关键词 牙鲆 淋巴囊肿病毒 疫苗
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刺参吐脏再生的组织学研究 被引量：9
14
作者 郑法新 孙修勤 张进兴 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期134-139,共6页
以中国山东地区的养殖刺参（Apostichopus jalxmicus）为研究材料，将体长10～15cm的刺参，通过注射KCI（0．35mol／L）诱导吐脏。采用组织学方法对刺参吐脏和再生过程进行观察，结果表明，刺参吐脏后便开始再生，吐脏后的第2天可观察... 以中国山东地区的养殖刺参（Apostichopus jalxmicus）为研究材料，将体长10～15cm的刺参，通过注射KCI（0．35mol／L）诱导吐脏。采用组织学方法对刺参吐脏和再生过程进行观察，结果表明，刺参吐脏后便开始再生，吐脏后的第2天可观察到呼吸树主干及分支结构。腹部肠系膜在吐脏后逐渐增厚，第5天可观察到肠上皮与肌肉组织，再生出具有功能的新肠管的时间大约为2周。本研究旨为刺参再生的进一步研究以及刺参的养殖生产提供基础理论依据。 展开更多
关键词 刺参 吐脏 再生 组织学
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海洋发光细菌的发光及其应用 被引量：8
15
作者 张进兴 逄爱梅 +1 位作者 孙修勤 孙培光 《发光学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期167-172,共6页
海洋发光细菌是一类在正常的生理条件下能够发射可见光的异养细菌,其发光特性与细菌体内的物质结构、海洋环境要素、水中污染物等多种因素有关。通过对海洋发光细菌发光特性及其应用可能性的论述,如利用发光细菌的发光强度与水中毒物的... 海洋发光细菌是一类在正常的生理条件下能够发射可见光的异养细菌,其发光特性与细菌体内的物质结构、海洋环境要素、水中污染物等多种因素有关。通过对海洋发光细菌发光特性及其应用可能性的论述,如利用发光细菌的发光强度与水中毒物的浓度、毒性的关系检测污染物;利用潜艇航行时激发的生物发光勾画出潜艇涡动的光尾流可跟踪探测潜艇;海洋发光细菌的发光特性还可用以改进水下光通讯与探测、海洋水色遥感、海洋发光细菌分类、发光免疫和抗菌素浓度测定等方面。阐明海洋发光细菌发光特性的重要研究意义并为进一步开展应用研究提供借鉴。 展开更多
关键词 海洋发光细菌 发光特性 应用研究
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皱纹盘鲍肝和肾cDNA文库的构建及免疫相关基因的初步分析 被引量：11
16
作者 郑明刚 孙修勤 张进兴 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期319-324,共6页
用鳗弧菌（Vibrio anguillarum）人工感染皱纹盘鲍（Haliotis discus Hannai）,取等量肝和肾组织混匀,Unizol提取总RNA。用Oligotex mRNA Kits分离mRNA和带有Oligo dT（18）的引物合成双链cDNA,将双链cDNA与PBluescript Ⅱ SK（＋）载... 用鳗弧菌（Vibrio anguillarum）人工感染皱纹盘鲍（Haliotis discus Hannai）,取等量肝和肾组织混匀,Unizol提取总RNA。用Oligotex mRNA Kits分离mRNA和带有Oligo dT（18）的引物合成双链cDNA,将双链cDNA与PBluescript Ⅱ SK（＋）载体连接后电转化E.coli DH10B,得到cDNA文库。经测定库容为5.24×105cfu/mL,插入片段大小为0.8～2.5kb,构建的文库质量较高。对文库进行测序和生物信息学初步处理,得到了高质量的EST（expressed sequence tags）1282条。用BlastX和BlastN进行序列同源性对比,发现有393个（45%）基因聚类在蛋白质和核酸水平上找到了同源序列。对具有同源序列的基因进行了分析,发现了31种与免疫相关的基因,如防御素、凝集素、基质金属蛋白酶、铁蛋白和热激蛋白等。这些基因均已在Genbank中注册。 展开更多
关键词 皱纹盘鲍 CDNA文库 EST 免疫相关基因
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对虾幼体真菌病和纤毛虫病的防治研究 被引量：11
17
作者 孙修勤 王云鹏 张进兴 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期257-260,T001,共5页
一、材料与方法 本文主要讨论由链壶菌(Lagenidium sp.)引起的对虾幼体真菌病和聚缩虫(Zooth-amnium sp.)引起的纤毛虫病的病原、病理、症状及其防治方法. 试验场地为河北省唐海县一农场育苗室、八农场育苗室及八里滩养殖场育苗室。
关键词 对虾 真菌病 纤毛虫病 幼体 防治
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中国对虾卵细胞中病毒的初步研究 被引量：6
18
作者 张进兴 孙修勤 《黄渤海海洋》 CSCD 1997年第1期48-51,共4页
对中国对虾卵巢和受精卵细胞进行了电子显微镜超微结构观察，发现卵巢内有球状病毒粒子，大小为80nm左右。受精卵细胞内有传染性皮下和造血组织坏死病毒（IHHNV）感染，其严重影响对虾受精卵的发育，从获得的结果来看，中国对虾病毒（IH... 对中国对虾卵巢和受精卵细胞进行了电子显微镜超微结构观察，发现卵巢内有球状病毒粒子，大小为80nm左右。受精卵细胞内有传染性皮下和造血组织坏死病毒（IHHNV）感染，其严重影响对虾受精卵的发育，从获得的结果来看，中国对虾病毒（IHHNV）垂直传播的可能性极大。 展开更多
关键词 中国对虾 卵巢 受精卵细胞 病毒粒子
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加味喉科六味汤对上气道咳嗽综合征大鼠血清IL-6、IL-8、TNF-α的影响 被引量：11
19
作者 唐贤豪 张徐非 +1 位作者 张进兴 陈海淼 《中国中医药科技》 CAS 2019年第5期666-669,共4页
目的:探讨加味喉科六味汤对上气道咳嗽综合征模型大鼠血清IL-6(白细胞介素-6)、IL-8(白细胞介素-8)和TNF-α(肿瘤坏死因子-α)的影响。方法:采用改良膨胀海绵鼻腔填塞联合香烟雾化的方法,制备大鼠上气道咳嗽综合征模型,50只SD大鼠分为... 目的:探讨加味喉科六味汤对上气道咳嗽综合征模型大鼠血清IL-6(白细胞介素-6)、IL-8(白细胞介素-8)和TNF-α(肿瘤坏死因子-α)的影响。方法:采用改良膨胀海绵鼻腔填塞联合香烟雾化的方法,制备大鼠上气道咳嗽综合征模型,50只SD大鼠分为正常对照组、模型组、加味喉科六味汤高、中、低剂量组,每组均为10只。各组大鼠给予相应处理15 d后,记录各组大鼠鼻部症状总评分,ELISA法检测各组大鼠血清IL-6、IL-8和TNF-α含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠鼻部症状评分明显增高(P <0. 01),血清IL-6、IL-8和TNF-α含量明显升高(P <0. 01);中药各剂量组大鼠鼻部症状评分明显低于模型组,血清IL-6、IL-8和TNF-α含量明显降低,高剂量组效果最显著(P <0. 01)。结论:加味喉科六味汤可有效控制上气道咳嗽综合征大鼠的症状,降低血清炎性因子水平。 展开更多
关键词 加味喉科六味汤 上气道咳嗽综合征 白细胞介素-6 白细胞介素-8 肿瘤坏死因子-Α 大鼠
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五种理化因子对眼斑拟石首鱼苗种的影响 被引量：6
20
作者 王波 张进兴 刘洪杰 《齐鲁渔业》 1999年第2期16-18,共3页
报道了眼斑拟石首鱼苗种对盐度、有效氯、高锰酸钾、硫酸铜耐受力的实验，测定了它的呼吸耗氧量和窒息点：缺氧浮头时的溶氧值为1．86mg／L，窒息点范围为0．79～0．38mg／L。实验表明：有效氯毒性极强，高锰酸钾次之，CuSO4·5H2O... 报道了眼斑拟石首鱼苗种对盐度、有效氯、高锰酸钾、硫酸铜耐受力的实验，测定了它的呼吸耗氧量和窒息点：缺氧浮头时的溶氧值为1．86mg／L，窒息点范围为0．79～0．38mg／L。实验表明：有效氯毒性极强，高锰酸钾次之，CuSO4·5H2O较弱。采用1×10(－6)以下的CuSO4·5H2O处理眼斑拟石首鱼鱼苗是安全的。 展开更多
关键词 眼斑拟石首鱼 窒息点 盐度 有效氯 中毒 苗种
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