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缺氧诱导因子在膝关节骨性关节炎发病机制中作用研究 被引量：10
1
作者 廖太阳 王培民 +7 位作者 茆军 丁亮 梅伟 张力 李晓辰 吴鹏 徐波 张皞晟 《临床误诊误治》 2020年第8期107-112,共6页
膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)属于痹症范畴,包括“痛痹”、“膝痹”和“骨痹”等,主要病理特征为滑膜炎症、软骨破坏、软骨下骨病变,造成长期慢性疼痛,最终可导致膝关节活动受限甚至残疾不得不行关节置换,给工作和生活造... 膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)属于痹症范畴,包括“痛痹”、“膝痹”和“骨痹”等,主要病理特征为滑膜炎症、软骨破坏、软骨下骨病变,造成长期慢性疼痛,最终可导致膝关节活动受限甚至残疾不得不行关节置换,给工作和生活造成严重影响[1]。目前,KOA的发病机制尚未明确,一项针对KOA的非手术指南中指出,其发病可能与生物力学改变,基质金属蛋白酶(MPP)激活活化,炎症因子分泌,软骨、软骨下骨和滑膜病变等相关,提出五级治疗和干预方案[2]。 展开更多
关键词 骨关节炎 膝 缺氧 缺氧诱导因子 综述
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从中医髓理论探析膝骨关节炎疼痛机制研究进展 被引量：5
2
作者 张力 丁亮 +4 位作者 梅伟 肖延成 张皞晟 廖太阳 王培民 《山东中医杂志》 2022年第4期448-452,共5页
“肾主骨生髓”的治疗原则在膝骨关节炎(KOA)中的应用得到了历代医家的认可。现代医学依托“下丘脑-垂体-靶腺-骨髓”轴揭示了“激素-软骨下骨”对KOA疼痛的调节作用,一方面阐释了“肾主骨生髓”的科学依据,也启迪了脑作为KOA疼痛研究... “肾主骨生髓”的治疗原则在膝骨关节炎(KOA)中的应用得到了历代医家的认可。现代医学依托“下丘脑-垂体-靶腺-骨髓”轴揭示了“激素-软骨下骨”对KOA疼痛的调节作用,一方面阐释了“肾主骨生髓”的科学依据,也启迪了脑作为KOA疼痛研究对象的可能性。从髓理论入手,综述了“肾主骨生髓”“脑为髓海”在KOA疼痛领域的现代医学阐释,同时论证了控制KOA疼痛的重要意义及脑计划的推进对KOA疼痛研究带来的机遇与挑战,旨在为中医药治疗KOA疼痛提供新的思路。参考文献36篇。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 疼痛 痛觉敏化 肾主骨 脑为髓海
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三色散干预滑膜巨噬细胞焦亡影响背根神经节TRPA1治疗KOA疼痛的离体研究 被引量：4
3
作者 杨楠 廖太阳 +4 位作者 张力 张皞晟 李晓辰 王培民 张农山 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期33-38,共6页
目的探讨滑膜巨噬细胞焦亡对背根神经节神经元细胞(DRG)膜上瞬时受体电位TRPA1的影响及三色散的干预作用。方法提取ICR小鼠滑膜巨噬细胞,用1μg/mL的脂多糖(LPS)以模拟KOA的炎症微环境;采用CCK-8法检测三色散水提物冻干粉对滑膜巨噬细... 目的探讨滑膜巨噬细胞焦亡对背根神经节神经元细胞(DRG)膜上瞬时受体电位TRPA1的影响及三色散的干预作用。方法提取ICR小鼠滑膜巨噬细胞,用1μg/mL的脂多糖(LPS)以模拟KOA的炎症微环境;采用CCK-8法检测三色散水提物冻干粉对滑膜巨噬细胞的增殖活性,确定对细胞无毒性的干预浓度;滑膜巨噬细胞分组为正常组、LPS组、三色散组,Western blot法检测滑膜巨噬细胞焦亡相关NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达;qRT-PCR检测滑膜巨噬细胞NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18基因表达;ELISA检测炎症细胞因子(IL-1β和IL-18)水平;提取ICR小鼠DRG细胞,将上述三组细胞上清加入DRG细胞中,另增设一组加入LPS及TRPA1抑制剂,DRG分组为正常上清干预组(A组)、LPS上清干预组(B组)、三色散上清干预组(C组),LPS+TRPA1抑制剂组(D组);βⅢ-tubulin及GFAP免疫荧光鉴定提取的DRG神经元细胞;Western blot法及qRT-PCR检测TRPA1蛋白及基因表达;ELISA检测疼痛因子(CGRP和SP)水平;实时荧光钙成像观察各组DRG神经元细胞钙离子内流情况。结果确定100μg/mL三色散水提冻干粉对滑膜巨噬细胞无明显细胞毒性;LPS组NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达显著高于正常组,低于三色散组(P<0.05);LPS组NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18基因表达显著高于正常组,低于三色散组(P<0.05);LPS组细胞上清中IL-1β和IL-18表达量显著高于正常组,低于三色散组(P<0.05);βⅢ-tubulin及GFAP免疫荧光显示提取的DRG神经元细胞胞体呈圆形或椭圆形,可见神经元之间的轴突呈大量增加,形成稀疏网络状结构;三色散水提冻干粉干预后可抑制B组瞬时受体电位TRPA1蛋白及基因表达水平的上升(P<0.05),降低B组细胞上清中CGRP和SP表达量;实时荧光钙成像分别观察20、40和60 s的荧光强度发现:B组荧光强度较A组增加(P<0.05),C组及D组荧光强度较B组降低(P<0.05)。结论滑膜巨噬细胞焦亡激活DRG膜上TRPA1离子通道 展开更多
关键词 焦亡 瞬时受体电位TRPA1 三色散 背根神经节 疼痛
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一种小鼠背根神经节原代神经元细胞分离与培养的优化方法
4
作者 张皞晟 王培民 《临床神经外科杂志》 2023年第2期189-194,共6页
目的 探索一种可以大量快速培养活力好且卫星胶质细胞污染少的原代神经元细胞的方法。方法 混合酶溶液消化体式显微镜下提取的背根神经节(DRG),随后接种于纤维连接蛋白提前包被的培养皿中,8 h后更换含5-氟尿嘧啶的维持培养基,抑制非神... 目的 探索一种可以大量快速培养活力好且卫星胶质细胞污染少的原代神经元细胞的方法。方法 混合酶溶液消化体式显微镜下提取的背根神经节(DRG),随后接种于纤维连接蛋白提前包被的培养皿中,8 h后更换含5-氟尿嘧啶的维持培养基,抑制非神经元细胞增殖。结果 分离培养的感觉神经元细胞在培养过程中可维持15 d左右,部分细胞可维持更长时间。原代细胞于第3天即可观察到交错的轴突网络,接种细胞密度大,卫星胶质细胞污染情况少,细胞在7 d之内可投入使用,操作者经短时间训练后即可快速掌握方法。结论 新方法在传统方法的基础上进行了改良,可获取较多数量细胞活性好、纯度高的原代神经元细胞,相较传统方法具有可操作性高,重复率高的优势。 展开更多
关键词 背根神经节 神经元细胞 细胞培养 TRPA1
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基于NLRP3炎症小体活化探讨“三色散”挥发油减轻膝骨关节炎滑膜炎症的机制 被引量：3
5
作者 廖太阳 张力 +3 位作者 张皞晟 李晓辰 吴鹏 王培民 《中国药房》 CAS 北大核心 2021年第19期2335-2341,共7页
目的:基于NOD样受体家族3(NLRP3)炎症小体的活化探讨"三色散"挥发油减轻膝骨关节炎(KOA)滑膜炎症的机制。方法:采取水蒸气蒸馏法提取"三色散"挥发油,采用气质联用(GC-MS)技术分析其组成。提取雄性SD大鼠膝关节成纤... 目的:基于NOD样受体家族3(NLRP3)炎症小体的活化探讨"三色散"挥发油减轻膝骨关节炎(KOA)滑膜炎症的机制。方法:采取水蒸气蒸馏法提取"三色散"挥发油,采用气质联用(GC-MS)技术分析其组成。提取雄性SD大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞(FLS),采用CCK-8法检测10、25、50、100、250、500、1000μg/mL"三色散"挥发油对FLS存活率的影响;以脂多糖诱导12 h建立KOA炎症细胞模型,检测10、250μg/m L"三色散"挥发油对炎症模型细胞中NLRP3、胱天蛋白酶1(caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的蛋白及其mRNA相对表达量的影响,检测炎症模型细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18水平。结果:提取得到黄色澄清且有独特芳香气味的"三色散"挥发油0.51~0.61 g,提取率为0.33%~0.41%(n=9)。从该挥发油中共分离得到化学成分41种,鉴定了其中的30种,其峰面积之和占总峰面积的90.0736%;相对含量较高的成分依次为芳姜黄酮(17.5739%)、δ-杜松烯(15.4345%)、姜黄酮(11.5095%)等。当"三色散"挥发油质量浓度为10~250μg/mL时,其对FLS存活率均无显著影响(P>0.05)。与空白组比较,模型组细胞中NLRP3、caspase-1、ASC的蛋白及其mRNA相对表达量以及细胞上清液中IL-1β、IL-18水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,"三色散"挥发油10、250μg/m L组细胞及上清液中上述指标的相对表达量或水平均显著降低(P<0.05)。结论:"三色散"挥发油可能通过抑制FLS中NLRP3炎症小体的活化而减少下游炎症级联反应,从而发挥其改善KOA滑膜炎症的作用。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 滑膜炎症 NOD样受体家族3炎症小体 三色散 挥发油 成纤维样滑膜细胞
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