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SD大鼠睾丸支持细胞的分离、培养、纯化及鉴定 被引量：6
1
作者 姚玲 李春艳 +4 位作者 李晓剑 黎宗强 谢丽萍 张留光 靖蓓蓓 《广西农业科学》 CAS CSCD 2010年第3期259-262,共4页
为进一步简化、优化SD大鼠睾丸支持细胞的体外培养条件及鉴定方法,采用三酶两步消化法和差异贴壁法分离、培养、纯化SD大鼠支持细胞,并用HE染色、油红染色、Feulgen染色及透射电镜扫描其超微结构予以鉴定。结果表明:平均0.10g睾丸组织... 为进一步简化、优化SD大鼠睾丸支持细胞的体外培养条件及鉴定方法,采用三酶两步消化法和差异贴壁法分离、培养、纯化SD大鼠支持细胞,并用HE染色、油红染色、Feulgen染色及透射电镜扫描其超微结构予以鉴定。结果表明:平均0.10g睾丸组织可获得2.5×106个支持细胞,细胞存活率90%以上,体外培养5h后开始贴壁,96h后细胞生长速率下降,其对数生长期为3～7d,整个体外生长周期约为10～15d。对获得的纯化细胞进行鉴定,发现其形态结构及超微结构与支持细胞的形态特征一致。可见,采用三酶两步消化法和差异贴壁法,可达到分离、培养、纯化SD大鼠支持细胞的目的。 展开更多
关键词 睾丸 支持细胞 体外培养 鉴定 SD大鼠
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精子形成期基因转录表达的研究进展 被引量：3
2
作者 张俊芳 朱化彬 +5 位作者 张留光 郝海生 赵学明 秦彤 路永强 王栋 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期587-594,共8页
减数分裂后,圆形精子细胞经过一系列变态过程最终发育为成熟精子。期间,精子细胞质逐渐丢失,其染色质组蛋白逐渐经过渡蛋白替换为鱼精蛋白,染色质被致密包装并高度浓缩。很多学者认为,精子转录活性被关闭,不存在RNA。但近些年却在精子... 减数分裂后,圆形精子细胞经过一系列变态过程最终发育为成熟精子。期间,精子细胞质逐渐丢失,其染色质组蛋白逐渐经过渡蛋白替换为鱼精蛋白,染色质被致密包装并高度浓缩。很多学者认为,精子转录活性被关闭,不存在RNA。但近些年却在精子中检测到了种类繁多的转录本,包括精子染色质重新包装所需蛋白的转录本及一些小分子RNA等。由于精子核内组蛋白没有完全被鱼精蛋白替换,且染色质上包含一些核酸活性敏感位点,推测精子存在一定的转录活性,并通过激素和表观遗传修饰等调控转录。精子中的这些RNA一部分是精子形成过程中残留下来的,另一部分是精子细胞适时表达的。深入研究精子形成中的基因转录表达,可增进对精子形成与成熟遗传本质的理解,为高效利用雄性配子进行生殖控制提供理论依据。文章综述了近年来精子形成期基因转录表达的研究进展,并提出了未来的研究方向。 展开更多
关键词 变态过程 精子形成 鱼精蛋白 转录本 转录调控
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褪黑素缓解白消安损伤小鼠睾丸的机理研究
3
作者 吴开慧 张留光 +5 位作者 汪超 许师源 刘松奇 原开敏 王栋 庞云渭 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2486-2497,共12页
旨在揭示褪黑素(melatonin, MT)缓解白消安损伤睾丸的机理,提高白消安制备精原干细胞移植受体的效率,并探究其对白消安毒害雄性生精机能的治疗作用。本研究以6~7周ICR雄鼠为模型动物,分为对照组,白消安处理组和白消安+褪黑素处理组,每组... 旨在揭示褪黑素(melatonin, MT)缓解白消安损伤睾丸的机理,提高白消安制备精原干细胞移植受体的效率,并探究其对白消安毒害雄性生精机能的治疗作用。本研究以6~7周ICR雄鼠为模型动物,分为对照组,白消安处理组和白消安+褪黑素处理组,每组8个重复,于注射后第7天取样。通过ELISA检测睾丸组织的炎性细胞因子水平,并对睾丸和附睾进行HE染色。此外,免疫组化或免疫荧光检测血睾屏障(blood-testis barrier, BTB)相关蛋白的表达情况,以分析MT对BTB影响。结果表明,小鼠经白消安注射后,联合MT处理,观察到MT显著缓解了睾丸重和睾体率下降的趋势,并减缓了精子数量下降的速度;睾丸组织HE染色和炎性细胞因子检测发现,MT显著减缓了核转录因子κB(nuclear transportation factorκB,NF-κB)、p-NF-κB、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-ɑ(tumor necrosis factor-ɑ,TNF-α)及髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)水平的上升趋势,从而减少了组织中炎性细胞浸润;免疫组化或免疫荧光检测发现,MT缓解了白消安处理导致的BTB组成蛋白(Occludin、connexin-43、N-cadherin)和细胞骨架蛋白(F-actin和Vimentin)含量的下降。综上,MT通过下调睾丸组织中炎性细胞因子水平,缓解白消安诱发的小鼠睾丸炎症反应;并通过减缓BTB相关蛋白含量的下降,缓解白消安对BTB和支持细胞的损伤,进而缓解小鼠生精机能的损伤。 展开更多
关键词 褪黑素 白消安 睾丸炎 血睾屏障 细胞骨架
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ART3调控小鼠精子发生的作用与机制研究
4
作者 许师源 张留光 +4 位作者 刘松奇 吴开慧 汪超 王栋 庞云渭 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2995-3010,共16页
为探究ADP核糖基转移酶3(ADP-ribosyl transferase 3,ART3)在精子发生及变形中的作用及机制,本研究随机选取21只6~8周龄健康ICR雄鼠分为对照组、ART3抑制剂3-甲氧基苯甲酰胺(3-methoxybenzamide,3-MBA)处理组,每组各3个重复。处理组睾... 为探究ADP核糖基转移酶3(ADP-ribosyl transferase 3,ART3)在精子发生及变形中的作用及机制,本研究随机选取21只6~8周龄健康ICR雄鼠分为对照组、ART3抑制剂3-甲氧基苯甲酰胺(3-methoxybenzamide,3-MBA)处理组,每组各3个重复。处理组睾丸注射3-MBA后12 h、24 h、48 h、5 d、7 d、14 d采集睾丸和附睾组织。跟踪分析其中的精子发生过程发现,抑制ART3导致睾丸萎缩、附睾尾精子密度降低、畸形率升高。组织学观察发现,曲细精管生精细胞逐渐减少,且排列松散,部分生精细胞脱落至管腔;附睾头和附睾尾出现非精子细胞成分,经顶体蛋白免疫荧光鉴定非精子细胞成分为圆形精细胞。进一步免疫荧光检测发现,抑制剂处理降低了精细胞和支持细胞间的细胞粘附蛋白Nectin-3水平,曲细精管出现生精细胞凋亡现象,AKT信号通路相关蛋白水平下降。据此推测,ART3通过调控精细胞与支持细胞间连接,影响AKT通路的抗凋亡作用,促进精细胞变形。 展开更多
关键词 ADP核糖基转移酶3 精细胞 支持细胞 信号通路
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食蟹猴支持细胞的分离、纯化以及不同血清浓度对其增殖的影响研究
5
作者 李晓剑 张留光 +3 位作者 姚玲 黎宗强 谢丽萍 李春艳 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第23期14137-14138,14155,共3页
[目的]纯化培养食蟹猴支持细胞,并测定不同血清浓度对细胞增殖的影响。[方法]分离并纯化食蟹猴支持细胞后,分别以5%、10%、15%、20%4种不同血清浓度的培养基对食蟹猴支持细胞进行培养。利用MTT比色法判断支持细胞的增殖情况,从而确定最... [目的]纯化培养食蟹猴支持细胞,并测定不同血清浓度对细胞增殖的影响。[方法]分离并纯化食蟹猴支持细胞后,分别以5%、10%、15%、20%4种不同血清浓度的培养基对食蟹猴支持细胞进行培养。利用MTT比色法判断支持细胞的增殖情况,从而确定最佳的血清培养浓度。[结果]5%血清浓度的培养基对细胞增殖能力的影响与10%血清浓度的培养基差异不显著,15%与20%的血清浓度的培养基对细胞增殖能力的影响差异不显著,5%、10%与15%、20%的血清浓度的培养基对细胞增殖能力的影响差异极显著。[结论]15%的血清浓度是支持细胞增殖的最佳比例。 展开更多
关键词 食蟹猴 支持细胞 MTT比色法 血清浓度 增殖
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褪黑素在体外受精-胚胎移植中对胚胎的影响 被引量：1
6
作者 马博 张留光 张秀兰 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第34期4820-4822,共3页
目的研究在胚胎培养基中添加褪黑素对接受辅助生殖技术治疗的高龄患者胚胎的影响。方法将符合研究条件的患者卵子分为4组,分别置于褪黑素浓度为0nmol/L(A组)、0.1nmol/L(B组)、1.0nmol/L(C组)、10.0nmol/L(D组)的受精液、卵裂培养液和... 目的研究在胚胎培养基中添加褪黑素对接受辅助生殖技术治疗的高龄患者胚胎的影响。方法将符合研究条件的患者卵子分为4组,分别置于褪黑素浓度为0nmol/L(A组)、0.1nmol/L(B组)、1.0nmol/L(C组)、10.0nmol/L(D组)的受精液、卵裂培养液和囊胚培养液中,观察各组正常受精率、可利用胚胎率、优质胚胎率、囊胚形成率。结果 D组的正常受精率高于其他组,与A组结果比较差异有统计学意义(P<0.05),C组的可利用胚胎率、优质胚胎率、囊胚形成率显著高于A组(P<0.05)。结论较高浓度的褪黑素有利于卵子的受精,特定浓度的褪黑素有利于胚胎的发育。 展开更多
关键词 b褪黑激素 辅助生殖技术 生殖技术 辅助
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囊胚玻璃化冷冻预平衡时间对辅助生殖妊娠结局的影响
7
作者 张留光 李宁 +1 位作者 李玉虎 蔡雪想 《中国现代医生》 2023年第19期4-8,14,共6页
目的探讨囊胚激光皱缩后缩短玻璃化冷冻预平衡时间对临床妊娠及新生儿结局的影响。方法回顾性分析2018年1月至2021年12月于海口玛丽医院进行囊胚复苏移植患者的临床资料,从中筛选501例患者518个移植周期。根据实验室囊胚玻璃化冷冻技术... 目的探讨囊胚激光皱缩后缩短玻璃化冷冻预平衡时间对临床妊娠及新生儿结局的影响。方法回顾性分析2018年1月至2021年12月于海口玛丽医院进行囊胚复苏移植患者的临床资料,从中筛选501例患者518个移植周期。根据实验室囊胚玻璃化冷冻技术标准操作程序修订前后的预平衡时间将其分为A组(9~10min)和B组(7~8min),比较两组间的妊娠结局和新生儿结局。结果两组患者的年龄、移植胚胎数、卵泡刺激素、体质量指数、不孕年限、原发不孕比例、移植日内膜厚度和内膜方案比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组的囊胚存活率、着床率、临床妊娠率、活产率、早期流产率、多胎妊娠率、母体并发症比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组的新生儿性别比、孕周、早产儿比例、出生体质量、低出生体重儿、巨大儿、剖宫产、出生缺陷比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论囊胚激光皱缩后,缩短玻璃化冷冻预平衡时间不影响囊胚复苏移植的妊娠结局。 展开更多
关键词 玻璃化冷冻 囊胚 时间 妊娠结局
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提前复苏D3胚胎对不同年龄段患者临床结局的影响
8
作者 李玉虎 于萍 +2 位作者 李宁 蔡雪想 张留光 《生殖医学杂志》 CAS 2020年第3期358-362,共5页
目的分析提前复苏D3胚胎对不同年龄段患者临床结局的影响。方法回顾性分析2015年5月至2018年3月在海口玛丽医院生殖医学中心进行冻融胚胎移植(FET)的581个周期的临床资料,按照不同的胚胎复苏时间分为两组:当日复苏的为A组,提前18 h复苏... 目的分析提前复苏D3胚胎对不同年龄段患者临床结局的影响。方法回顾性分析2015年5月至2018年3月在海口玛丽医院生殖医学中心进行冻融胚胎移植(FET)的581个周期的临床资料,按照不同的胚胎复苏时间分为两组:当日复苏的为A组,提前18 h复苏的为B组;又按照女方年龄不同分为3个年龄段组:≤35岁、36~40岁和>40岁,比较不同年龄各组中A、B两组的胚胎着床率、临床妊娠率、多胎率及流产率。结果与A组比较,B组的整体胚胎着床率(33.9%vs.22.3%)、临床妊娠率(54.0%vs.42.1%)和多胎率(32.4 vs.18.4%)显著升高(P<0.05)。各不同年龄组中,≤35岁组中B组的胚胎着床率(47.3%vs.31.1%)、临床妊娠率(68.3%vs.53.0%)和多胎率(43.6%vs.20.8%)显著高于A组(P<0.05);36~40岁组中,B组的胚胎着床率(30.3%vs.19.1%)和临床妊娠率(53.2%vs.36.5%)显著高于A组(P<0.05),但两组的多胎率(20.7%vs.22.6%)比较无显著性差异(P>0.05);>40岁组中,A组和B组的胚胎着床率(12.1%vs.12.4%)、临床妊娠率(29.2%vs.25.6%)和多胎率(0.0%vs.5.0%)比较均无显著性差异(P>0.05)。各不同年龄组中A、B组间的流产率比较均无显著性差异(P>0.05)。结论提前18 h复苏D3胚胎不增加FET周期的流产率,且可显著提高≤40岁患者的临床妊娠率和胚胎着床率,但对>40岁的患者则无明显影响;同时提前复苏能显著提高≤35岁患者的多胎率,提示临床工作中应减少这部分患者FET周期的移植胚胎数,以降低多胎妊娠的发生。 展开更多
关键词 提前复苏 卵裂期胚胎 年龄 临床结局
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