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湖北省荆州市2010-2012年实验室确诊流感住院率估计 被引量:9
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作者 郑建东 陈辉 +13 位作者 陈茂义 怀扬 姜慧 邢学森 彭质斌 向妮娟 张玉 刘琳琳 黄继贵 冯录召 官旭华 John Klena 占发先 余宏杰 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期222-227,共6页
目的 估算2010-2012年湖北省荆州市流感所致严重急性呼吸道感染(SARI)病例的住院率。方法 2010-2012年在湖北省荆州市4家医院的住院病例中开展SARI监测,在患者知情同意后纳入收集人口学、临床表现、治疗情况及转归等信息,并采集呼... 目的 估算2010-2012年湖北省荆州市流感所致严重急性呼吸道感染(SARI)病例的住院率。方法 2010-2012年在湖北省荆州市4家医院的住院病例中开展SARI监测,在患者知情同意后纳入收集人口学、临床表现、治疗情况及转归等信息,并采集呼吸道标本进行流感病毒PCR核酸检测。结果 2010年4月至2012年9月共纳入19 679例SARI病例,为荆州市城区常住居民,其中18 412例(93.6%)采集了鼻咽拭子开展PCR检测,阳性率为13.3%。实验室确诊流感导致的SARI住院率在2010-2012年连续3年的流感季分别为102/10万、132/10万和244/10万。不同的型别/亚型的流感病毒所致的住院率在2010-2011流感季 A(H3N2)为48/10万,A(H1N1)pdm2009为30/10万,B型为24/10万;2011-2012流感季A(H3N2)为42/10万,B型为90/10万;2012年4-9月A(H3N2)为 90/10万,B型为1/10万。A型和B型流感病毒所致住院均主要发生在〈5岁年龄组,以0.5~岁组最高。结论 湖北省荆州市流感造成一定住院负担,不同型别/亚型流感在不同流感季会导致不同的住院率,应将〈5岁儿童作为流感疫苗接种的重点推荐人群。 展开更多
关键词 严重急性呼吸道感染 流感 住院率
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26例不典型Rett综合征MECP2基因的突变分析 被引量:6
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作者 李美蓉 潘虹 +3 位作者 包新华 张玉 姜胜玲 吴希如 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期285-288,共4页
目的了解不典型Rett综合征患儿MECP2基因的突变频率、突变类型、是否存在突变热点,寻找基因型和表型的相互关系。方法取26例不典型Rett综合征患儿外周静脉抗凝血,采用Miller′s蛋白酶K氯化钠盐析法提取基因组DNA,采用PCR方法扩增MECP2... 目的了解不典型Rett综合征患儿MECP2基因的突变频率、突变类型、是否存在突变热点,寻找基因型和表型的相互关系。方法取26例不典型Rett综合征患儿外周静脉抗凝血,采用Miller′s蛋白酶K氯化钠盐析法提取基因组DNA,采用PCR方法扩增MECP2基因的外显子及结合区,1%的琼脂糖凝胶电泳鉴定目的PCR产物,然后进行DNA直接测序。DNA测序结果与人基因组序列(GeneBankAF030876)比较。结果26例不典型Rett综合征患儿中有12例存在突变。突变类型包括错义突变,由于单个碱基缺失导致的移码突变和剪切位点的突变,其中错义突变为最常见类型。c·397C>T为3例,c·473C>T、c·916C>T、c·806delG各为2例,c·397A>G、c·1005G>A、c·IVS2-2A>T各为1例。结论不典型Rett综合征患儿存在MECP2基因突变,R133C、T158M和R306C为其热点突变。基因突变类型和表型之间有一定的相关性。 展开更多
关键词 RETT综合征 染色体蛋白质类 非组蛋白 DNA结合蛋白质类 阻遏蛋白质类
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大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体的构建与鉴定 被引量:4
3
作者 金婧 包新华 +2 位作者 潘虹 张玉 吴希如 《山西医科大学学报》 CAS 2007年第5期393-397,共5页
目的构建并鉴定大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体,以便应用RNAi技术进一步研究MeCP2功能。方法设计针对大鼠MeCP2mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成双链后,与酶切后的pLentiLox3.7载体片段进行连接、... 目的构建并鉴定大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体,以便应用RNAi技术进一步研究MeCP2功能。方法设计针对大鼠MeCP2mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成双链后,与酶切后的pLentiLox3.7载体片段进行连接、转化。用菌落PCR法、酶切及DNA测序鉴定重组克隆。结果重组克隆经菌落PCR及酶切证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确。结论两个大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体的成功构建为应用RNAi研究大鼠MeCP2功能打下了基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 MECP2 小发夹状RNA 慢病毒载体 大鼠
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Rett综合征与MECP2基因 被引量:4
4
作者 张玉 潘虹 +1 位作者 包新华 吴希如 《国外医学(儿科学分册)》 2004年第3期157-159,共3页
Rett综合征是一种严重影响儿童精神运动发育的神经遗传病 ,诊断主要依靠国际上根据临床表现制定的标准 ,包括典型和非典型Rett综合征两类。该病的遗传方式尚无定论。致病基因是位于染色体Xq2 8的MECP2基因 ,编码甲基化结合蛋白 2。推测... Rett综合征是一种严重影响儿童精神运动发育的神经遗传病 ,诊断主要依靠国际上根据临床表现制定的标准 ,包括典型和非典型Rett综合征两类。该病的遗传方式尚无定论。致病基因是位于染色体Xq2 8的MECP2基因 ,编码甲基化结合蛋白 2。推测致病机制为MECP2基因突变导致蛋白结构和功能异常 ,使胚胎发育时期应当转录静止的基因继续转录 ,而这种“转录噪音”对神经系统的生长和发育具有致病作用。典型Rett综合征患儿MECP2基因主要有 8种热点突变。MECP2基因作用的下游靶基因尚不清楚。 展开更多
关键词 Ren综合征 结合蛋白质类 基因 突变
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无辅助病毒HSV-1载体介导LacZ基因在培养皮层神经元中的表达 被引量:1
5
作者 王汉森 潘虹 +3 位作者 张玉 包新华 张国荣 吴希如 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期172-174,共3页
目的:探讨无辅助单纯疱疹病毒(herpessimplexvirustype 1,HSV 1)载体的包装及其介导LacZ基因在体外培养神经元表达的作用, 解决该载体系统在包装及体外培养神经元应用中的有关问题。方法:将一组含HSV 1基因组的粘粒以限制性内切酶PacⅠ... 目的:探讨无辅助单纯疱疹病毒(herpessimplexvirustype 1,HSV 1)载体的包装及其介导LacZ基因在体外培养神经元表达的作用, 解决该载体系统在包装及体外培养神经元应用中的有关问题。方法:将一组含HSV 1基因组的粘粒以限制性内切酶PacⅠ酶切、纯化后,与含LacZ和酪氨酸羟化酶 (tyrosinehydroxylase,TH)及神经微丝(neurofilament,NF)嵌合启动子的HSV 1质粒DNA在脂质体作用下,共转染 2 2细胞;在 34℃条件下培养 72h,收获病毒颗粒。将含病毒颗粒的上清液,加入BHK细胞培养液中,继续培养 24h后,加X gal染液作用 4h,观察表达LacZ基因的蓝染细胞。取培养第 3天的胚胎大鼠大脑皮层神经元,加入含病毒颗粒的培养液,过夜后更换新鲜培养液,分组继续培养 1, 7和 14d,进行X gal染色,光镜下观察。结果:包装形成的病毒颗粒感染BHK细胞, 24h后可见表达LacZ基因的蓝染细胞;感染培养第 3天的皮层神经元,继续培养 1, 7和 14d后均可见蓝染神经元。结论:无辅助病毒包装系统能够使含TH NF嵌合启动子的HSV 1载体形成有效的病毒颗粒,并且在体外培养神经元中持续稳定地表达外源基因,为在神经系统进行基因转移和基因功能研究提供了有效的工具。 展开更多
关键词 LACZ基因 HSV-1 辅助病毒 载体介导 培养神经元 大脑皮层神经元 病毒颗粒 X-gal 单纯疱疹病毒 限制性内切酶 酪氨酸羟化酶 继续培养 基因功能研究 质粒DNA 细胞培养液 BHK细胞 载体系统 神经微丝 胚胎大鼠 镜下观察 包装系统
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大鼠MeCP2基因HSV-1型反义表达载体的构建与鉴定(英文) 被引量:2
6
作者 王汉森 潘虹 +3 位作者 张玉 包新华 张国荣 吴希如 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2004年第15期32-35,38,共5页
目的以真核表达载体单纯疱疹病毒I型(Herpes simplex virus type 1, HSV-1)质粒型载体(pHSV)作为表达载体,构建大鼠MeCP2基因反义表达载体。方法用PCR方法扩增出大鼠MeCP2 cDNA部分片段,将其反向插入表达载体pHSV,并以PCR、酶切电泳以及... 目的以真核表达载体单纯疱疹病毒I型(Herpes simplex virus type 1, HSV-1)质粒型载体(pHSV)作为表达载体,构建大鼠MeCP2基因反义表达载体。方法用PCR方法扩增出大鼠MeCP2 cDNA部分片段,将其反向插入表达载体pHSV,并以PCR、酶切电泳以及DNA测序等方法对重组质粒进行鉴定。结果经过PCR、酶切电泳以及DNA测序,鉴定出连接方向和插入序列正确的反义表达载体。结论成功构建了大鼠MeCP2基因HSV-1型反义表达载体,为进一步研究该基因的功能打下了基础。 展开更多
关键词 甲基化CpG结合蛋白2 RETT综合征 反义RNA 单纯疱疹病毒载体 大鼠
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Rett综合征患儿甲基化CpG结合蛋白2基因和细胞周期依赖性激酶样5蛋白基因的突变 被引量:1
7
作者 李美蓉 潘虹 +4 位作者 包新华 朱兴旺 曹广娜 张玉 吴希如 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期224-229,共6页
目的了解Rett综合征(RTT)患儿甲基化CpG结合蛋白2基因(MECP2)和细胞周期依赖性激酶样5蛋白基因(CDKL5)突变及热点突变,建立适合临床诊断的检测方法和策略。方法对1987至2007年北京大学第一医院儿科神经专业组诊断的177例散发RTT... 目的了解Rett综合征(RTT)患儿甲基化CpG结合蛋白2基因(MECP2)和细胞周期依赖性激酶样5蛋白基因(CDKL5)突变及热点突变,建立适合临床诊断的检测方法和策略。方法对1987至2007年北京大学第一医院儿科神经专业组诊断的177例散发RTT患儿抽取外周抗凝血提取DNA,用PCR—DNA测序方法对MECP2的全部外显子进行突变筛查,如未发现突变,用多重连接依赖的探针扩增(MLPA)法进行基因剂量分析。对MECP2未发现突变的患儿用变性高效液相色谱法(DHPLC)进行CDKL5突变筛查。结果在177例患儿中发现145例MECP2突变,1例CDKL5突变,总的突变率82%。MECP2突变中错义突变频率最高(39%);其后依次为无义(28%)、移码(17%)和大片段缺失突变(14%)。所有突变中8种最常见突变依次为P.T158M(13%)、pR168X(12%)、c.806delG(7%)、p.R255X(6%)、p.R270X和p.R133C各(5%)、p.R306C(4%)、p.R106W(3%)。11%的患儿存在一个或多个外显子的缺失。结论中国R1T患儿MECP2突变谱和国外报道相似,有热点突变。c.806delG是中国人群特有的一个热点突变。 展开更多
关键词 RETT综合征 细胞周期蛋白质依赖激酶类 突变 甲基化CpG结合蛋白2基因
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RNA干扰技术及其在神经科学研究中的应用 被引量:1
8
作者 王汉森 张玉 +1 位作者 潘虹 吴希如 《中国神经科学杂志》 CSCD 2003年第5期332-336,共5页
RNA干扰 (RNAi)是指生物体内由双链RNA介导同源序列mRNA的特异性降解 ,从而导致基因沉默的现象。近年来 ,随着对RNAi研究的不断深入 ,其作用机制正在逐步被阐明 ;同时作为阻断基因表达的新手段 ,RNAi技术也日趋完善和成熟。以其高效性... RNA干扰 (RNAi)是指生物体内由双链RNA介导同源序列mRNA的特异性降解 ,从而导致基因沉默的现象。近年来 ,随着对RNAi研究的不断深入 ,其作用机制正在逐步被阐明 ;同时作为阻断基因表达的新手段 ,RNAi技术也日趋完善和成熟。以其高效性和特异性 ,RNAi为反向遗传学在神经科学研究中的应用提供了有力的工具。本文仅就RNAi技术的有关研究进展及其在神经科学研究中的应用作一概述。 展开更多
关键词 RNA干扰技术 神经元 神经科学 临床应用 反向遗传学 研究进展
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Rett综合征患儿MECP2基因型和表型关系研究 被引量:1
9
作者 李美蓉 潘虹 +4 位作者 包新华 朱兴旺 曹广娜 张玉 吴希如 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期124-128,共5页
目的寻找中国Rett综合征(RTT)患儿甲基化CpG结合蛋白2基因(MECP2)突变的基因型和表型之间的相互关系,为临床诊断和治疗提供帮助。方法对126例经分子遗传学方法诊断的RTT患儿的临床表型参照Kerr等和Scala等评分标准进行打分,采用SP... 目的寻找中国Rett综合征(RTT)患儿甲基化CpG结合蛋白2基因(MECP2)突变的基因型和表型之间的相互关系,为临床诊断和治疗提供帮助。方法对126例经分子遗传学方法诊断的RTT患儿的临床表型参照Kerr等和Scala等评分标准进行打分,采用SPSS12.0软件包进行统计分析。结果分析MECP2突变类型、基因功能区和表型的关系显示,位于基因不同功能区的突变:甲基化CpG结合区(MBD)、转录抑制区(TRD)和C末端(CTS)对RTT表型的影响差异无统计学意义(P〉0.05);不同突变类型:错义、无义、移码和大片段缺失突变对RTT表型的影响差异无统计学意义(P〉0.05)。分析MECP2突变类型和基因功能区共同对表型的影响显示:同位于MBD的无义和错义突变相比较,前者临床严重性评分高于后者,差异有统计学意义(P=0.016),而位于TRD的无义和错义突变临床严重性评分之间差异无统计学意义(P〉0.05);位于MBD和TRD的错义突变的临床严重性评分之间差异无统计学意义(P〉0.05),位于MBD和TRD的无义突变的临床严重性评分之间差异无统计学意义(P〉0.05)。分析MECP2最常见突变类型和表型的关系显示:P.T158M、P.R168X、c.806delG和P.R255X对RTT表型总的影响差异无统计学意义(P〉0.05),但在语言功能的受累程度上,以上4种突变之间差异有统计学意义(P=0.028),且语言能力受损的发生率差异也有统计学意义(P=0.019)。结论MECP2基因型和表型之间存在一些相互关系:位于MBD的无义突变病情较严重;在〈5岁组中发生频率较高的4种突变对语言功能和语言能力受损发生率方面存在不同,其中P.R168X受损最重。 展开更多
关键词 RETT综合征 甲基-CpG-结合蛋白质2 基因型 表型
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Rett综合征患儿2例MECP2基因大片段缺失突变分析 被引量:1
10
作者 李美蓉 潘虹 +2 位作者 包新华 张玉 吴希如 《山西医科大学学报》 CAS 2006年第5期452-455,共4页
目的研究Rett综合征患儿2例MECP2基因用常规突变筛查方法未检出异常者是否存在大片段的缺失突变。方法用标准的盐析法从外周血提取基因组DNA,用多重连接依赖的探针扩增法(MLPA)进行突变分析,对存在突变的样本进一步用长片段PCR-DNA直接... 目的研究Rett综合征患儿2例MECP2基因用常规突变筛查方法未检出异常者是否存在大片段的缺失突变。方法用标准的盐析法从外周血提取基因组DNA,用多重连接依赖的探针扩增法(MLPA)进行突变分析,对存在突变的样本进一步用长片段PCR-DNA直接测序进行验证,同时确定突变在基因组序列中的位置。结果2例典型的Rett综合征患儿发现第四外显子有大片段缺失突变。例1用MLPA方法发现在第四外显子的4d探针位置存在缺失,长片段PCR-DNA直接测序证实在cDNA的第905至1138位之间缺失234个核苷酸,并且插入三个核苷酸(c.905-1138delinsCAC);例2用MLPA方法发现在第四外显子的4d和4a探针位置存在缺失,长片段PCR-DNA直接测序证实在cDNA的第1047至1198位之间缺失152个核苷酸(c.1047-1198del152)。结论对于常规的突变筛查不能检出MECP2有突变的Rett综合征患儿,进一步进行MLPA筛查是必要的。MLPA不仅简便、快速,而且能够发现大片断缺失。 展开更多
关键词 RETT综合征 甲基化CpG结合蛋白2基因 基因大片段缺失 多重连接依赖的探针扩增 聚合酶链反应 长片段
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发育中Wistar大鼠大脑皮层甲基化结合蛋白-2基因表达变化 被引量:1
11
作者 张玉 潘虹 +2 位作者 王汉森 包新华 吴希如 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期379-382,共4页
目的 :研究甲基化结合蛋白 2 (methyl CpG bindingprotein 2 ,mecp2 )基因在发育中正常Wistar大鼠大脑皮层表达水平的变化。方法 :应用实时定量PCR(real timePCR) ,Northern印迹杂交对mecp2基因在正常Wistar大鼠发育的不同阶段 :胚胎第... 目的 :研究甲基化结合蛋白 2 (methyl CpG bindingprotein 2 ,mecp2 )基因在发育中正常Wistar大鼠大脑皮层表达水平的变化。方法 :应用实时定量PCR(real timePCR) ,Northern印迹杂交对mecp2基因在正常Wistar大鼠发育的不同阶段 :胚胎第 1 5天 (E1 5 )、第 1 7天 (E1 7)、第 1 9天 (E1 9)、出生当日 (P0 ) ,生后第 7天 (P7)、生后第 1 4天 (P1 4 )、生后第 2 8天 (P2 8) ,成年期大鼠mRNA的表达水平进行定性、定量分析 ;应用Western印迹杂交对MeCP2的表达水平进行半定量分析。结果 :mecp2基因是在正常Wistar大鼠大脑皮层中表达的mRNA ,约为 1 0kb。从胚胎至成年期的发育过程中 ,mecp2基因mRNA的表达虽有波动 ,但差异无显著性。mecp2基因在正常Wistar大鼠大脑皮层中仅表达一种MeCP2 ,相对分子质量为 75 0 0 0。在不同发育阶段其表达水平表现为 ,胚胎E1 5表达水平最低 ,自胚胎E1 9始至成年期MeCP2表达水平较E1 5明显增高。生后第 7日至成年期 ,各时间点间表达水平的变化差异没有显著性。结论 :随着正常Wistar大鼠大脑皮层神经元的发育成熟 ,MeCP2的表达水平逐渐增高 ,说明MeCP2对神经元的成熟有重要作用 。 展开更多
关键词 生长发育 WISTAR 大鼠 大脑皮层 甲基化结合蛋白-2 基因表达 胚胎
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Rett综合征和DNA甲基化
12
作者 李美蓉 张玉 潘虹 《国际遗传学杂志》 CAS 2006年第5期384-388,共5页
DNA甲基化是一种在生物界普遍存在的生命现象,在染色体失活和基因印记以及基因沉默方面起着重要的作用。甲基化CpG结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein2,MeCP2)作为一种转录抑制因子能够与甲基化的DNA结合,在基因的转录过程中发挥主... DNA甲基化是一种在生物界普遍存在的生命现象,在染色体失活和基因印记以及基因沉默方面起着重要的作用。甲基化CpG结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein2,MeCP2)作为一种转录抑制因子能够与甲基化的DNA结合,在基因的转录过程中发挥主要作用,其编码基因MECP2是神经发育性遗传病-Rett综合征的主要致病基因,现主要介绍DNA甲基化和Rett综合征之间的关系。 展开更多
关键词 RETT综合征 DNA甲基化 甲基化CpG结合蛋白2 甲基化CpG结合蛋白2基因
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大鼠Mecp_2基因的RNA干扰有效序列筛选
13
作者 张玉 王汉森 +4 位作者 潘虹 李美蓉 包新华 金靖 吴希如 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期529-532,共4页
目的:以RNAi技术寻找抑制大鼠Mecp2基因表达的有效序列。方法:首先构建大鼠Mecp2基因与红色荧光蛋白(RFP)的融合基因表达质粒,然后分别与针对大鼠Mecp2基因的4个备选小干扰RNA(siRNA,small interference RNA)共转染HEK293T细胞... 目的:以RNAi技术寻找抑制大鼠Mecp2基因表达的有效序列。方法:首先构建大鼠Mecp2基因与红色荧光蛋白(RFP)的融合基因表达质粒,然后分别与针对大鼠Mecp2基因的4个备选小干扰RNA(siRNA,small interference RNA)共转染HEK293T细胞,构成外源基因系统,以此对于4个备选的siRNA对大鼠Mecp2基因的抑制有效性进行筛选。然后将筛选到的有效序列siRNA转染自身表达大鼠Mecp2基因的PC12细胞,以免疫荧光染色显示大鼠Mecp2蛋白的表达情况,通过内源大鼠Mecp2基因表达被抑制的情况验证所筛选序列的RNA干扰有效性。结果:针对大鼠Mecp2基因mRNA918—936位核苷酸的siRNA(序列:5'-GCUGUGAAGGAAUCUUCUA-3’)是对大鼠Mecp2基因进行RNA干扰的有效序列。此有效siRNA序列所在的位置相当于大鼠Mecp2基因第4外显子,推测可同时抑制大鼠Mecp2α和大鼠Mecp2β的表达。且此靶序列位于大鼠Mecp2基因编码区,推测可同时抑制1.9kb和10kh的大鼠Mecp2基因mRNA的表达。结论:本研究为建立稳定的大鼠神经元Mecp2基因表达敲低的神经细胞模型和研究脑发育过程中Mecp2基因的功能打下了基础。 展开更多
关键词 DNA结合蛋白质类 DNA甲基化 RNA 小分子干扰
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系统性红斑狼疮自身抗体的研究
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作者 张玉 《医学研究通讯》 2001年第5期38-39,25,共3页
系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosis,SLE)是一种典型的自身免疫性疾病.其特点是免疫调节性T细胞的功能缺陷和B细胞的高反应性.无论哪一方面的缺陷都会导致各种自身抗体的产生.
关键词 系统性红斑狼疮 自身抗体 种类 抗核抗体 抗核蛋白抗体 类型
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先力腾治疗小儿细菌性痢疾19例临床观察
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作者 胡彦宏 侯安存 +5 位作者 孙素婉 刘力戈 张忠浩 吴岚林 张玉 魏田力 《宁夏医学杂志》 CAS 1999年第1期56-56,共1页
我院儿科自1997年7月~11月用第三代头孢菌素先力腾(头孢布烯Ceftibuten)口服治疗小儿细菌性痢疾19例,并与吡哌酸口服治疗小儿细菌性痢疾24例比较,获得较好的疗效,报告如下。1对象和方法1.1对象:全部病... 我院儿科自1997年7月~11月用第三代头孢菌素先力腾(头孢布烯Ceftibuten)口服治疗小儿细菌性痢疾19例,并与吡哌酸口服治疗小儿细菌性痢疾24例比较,获得较好的疗效,报告如下。1对象和方法1.1对象:全部病人均系在我科住院或门诊就诊的患儿,... 展开更多
关键词 痢疾 细菌性 儿童 药物疗法 先力腾
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新生儿缺血缺氧性脑病血液酸碱失调的分析与处理
16
作者 张玉 《中国临床医生杂志》 2001年第7期34-34,共1页
关键词 缺血缺氧性脑病 血液 酸碱失调 新生儿
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