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何首乌中大黄素对L02肝细胞CYP亚酶表达及细胞毒性的影响 被引量：22
1
作者 汪美汐 王宇光 +6 位作者 徐焕华 张照研 马增春 肖成荣 谭洪玲 汤响林 高月 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1543-1548,共6页
目的研究何首乌中大黄素(emodin)对L02肝细胞CYP450酶主要亚型表达的影响,探讨其对L02肝细胞的细胞毒性机制。方法不同浓度的Emodin处理L02细胞,通过MTS法检测细胞的存活率,测定LDH释放率评价细胞损伤程度,Real time PCR法检测Emodin各... 目的研究何首乌中大黄素(emodin)对L02肝细胞CYP450酶主要亚型表达的影响,探讨其对L02肝细胞的细胞毒性机制。方法不同浓度的Emodin处理L02细胞,通过MTS法检测细胞的存活率,测定LDH释放率评价细胞损伤程度,Real time PCR法检测Emodin各给药组CYP450酶亚型mRNA表达的变化。结果 MTS结果显示,随着Emodin浓度的增加,呈现明显的细胞损伤效应,细胞的存活率逐渐降低并呈现浓度和时间依赖性;同时,LDH释放率在给药48 h时相比于空白组均明显增高。在基因水平上,与空白组相比,Emodin能明显提高CYP450各亚型mRNA表达,并可剂量依赖性诱导CYP1A1、CYP1B1的表达。结论何首乌中大黄素对人正常肝细胞具有明显损伤作用,并能诱导CYP450酶mRNA表达。 展开更多
关键词 何首乌 大黄素 CYP450 肝损伤 L02肝细胞 ABT mRNA表达
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银翘散对H1N1流感病毒感染小鼠的保护作用 被引量：11
2
作者 张照研 张会敏 +1 位作者 周喆 王升启 《世界中西医结合杂志》 2015年第6期771-773,787,共4页
目的研究银翘散对流感病毒FM1感染小鼠的保护作用。方法以亚洲流感病毒甲型鼠肺适应株(FM1)滴鼻感染Balb/c小鼠为动物模型,银翘散灌胃治疗。感染病毒1 d后开始给药,连续给药6 d。分别于攻毒后第1、3、5、7、9、11、13 d观察小鼠的状态,... 目的研究银翘散对流感病毒FM1感染小鼠的保护作用。方法以亚洲流感病毒甲型鼠肺适应株(FM1)滴鼻感染Balb/c小鼠为动物模型,银翘散灌胃治疗。感染病毒1 d后开始给药,连续给药6 d。分别于攻毒后第1、3、5、7、9、11、13 d观察小鼠的状态,称重,取肺组织并称重,提取肺组织总RNA,反转录,并进行Real-Time PCR(实时荧光聚合酶链式反应)等实验。结果银翘散组平均体重在各个时间点要高于模型组,可显著提高小鼠的生存率(P<0.01)降低肺指数(P<0.05),降低肺组织中流感病毒拷贝(P<0.05)。结论银翘散对流感病毒FM1株感染的小鼠具有保护作用。 展开更多
关键词 银翘散 肺指数 生存率 病毒拷贝
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银翘散抗流行性感冒的临床运用和实验研究 被引量：11
3
作者 张照研 周喆 《中医学报》 CAS 2015年第3期438-440,共3页
临床中,外感风热证运用银翘散的频率最高,银翘散中的黄酮类和牛蒡子苷等是抗流感病毒作用的主要物质。体内实验表明,银翘散可以降低炎性因子的表达,从而减少炎性损伤,同时抑制毒宿主细胞过度凋亡,抑制流感病毒增殖,但其抗流感机制不成体... 临床中,外感风热证运用银翘散的频率最高,银翘散中的黄酮类和牛蒡子苷等是抗流感病毒作用的主要物质。体内实验表明,银翘散可以降低炎性因子的表达,从而减少炎性损伤,同时抑制毒宿主细胞过度凋亡,抑制流感病毒增殖,但其抗流感机制不成体系,需要进一步深入研究。 展开更多
关键词 流行性感冒 银翘散 外感风热证 黄酮类 牛蒡子苷
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银翘散不同复方配伍HPLC指纹图谱 被引量：10
4
作者 张会敏 曲新艳 +2 位作者 张照研 周喆 王升启 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期47-50,共4页
目的:建立银翘散(YQS)不同复方配伍组及君(J),臣(C),佐(Z),使(S)关系的HPLC指纹图谱,找出配伍前后物质基础变化及复方配伍过程中物质基础相互作用关系,从整体上探讨YQS复方配伍关系。方法:利用Ulti Mate 3000 XRS型超快速液相色谱仪,The... 目的:建立银翘散(YQS)不同复方配伍组及君(J),臣(C),佐(Z),使(S)关系的HPLC指纹图谱,找出配伍前后物质基础变化及复方配伍过程中物质基础相互作用关系,从整体上探讨YQS复方配伍关系。方法:利用Ulti Mate 3000 XRS型超快速液相色谱仪,Thermo C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.05%磷酸水梯度洗脱,检测波长237 nm,流速1 m L·min-1,对YQS及君臣佐(J,C,Z),君臣使(J,C,S),君佐使(J,Z,S),君臣(J,C),J,C,Z,S不同配伍关系进行HPLC指纹图谱研究;利用指纹图谱处理软件对各组间HPLC指纹图谱进行数据分析。结果:YQS与各配伍组相似度由高到低为J,C,S(0.981)>J,C(0.959)>J,C,Z(0.953)>J,Z,S(0.806);YQS与J,C,Z,S组相似度由高到低为J(0.749)>C(0.573)>Z(0.136)>S(0.104)。YQS配伍合煎与单煎相加后的指纹图谱相比,14个峰面积降低,63个峰面积增加。结论:君臣药是YQS物质基础主要来源;本文从物质基础组成的角度,对YQS中J,C,Z,S在全方中的重要性进行了数据分析,使传统方解更具有说服力。 展开更多
关键词 银翘散 复方配伍 君臣佐使 指纹图谱
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辛伐他汀联合依折麦布对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响 被引量：1
5
作者 李建华 周喆 +3 位作者 张照研 豆峰娜 周叶 晏沐阳 《解放军医学院学报》 CAS 2014年第4期353-356,共4页
目的观察辛伐他汀联合依折麦布对高脂喂养的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的作用。方法选取8周龄雄性AopE-/-小鼠36只,随机分为模型组、辛伐他汀组和联合组,辛伐他汀组给予辛伐他汀20 mg/kg灌胃,联合组给予20 mg/kg辛伐他汀和10 mg/kg依... 目的观察辛伐他汀联合依折麦布对高脂喂养的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的作用。方法选取8周龄雄性AopE-/-小鼠36只,随机分为模型组、辛伐他汀组和联合组,辛伐他汀组给予辛伐他汀20 mg/kg灌胃,联合组给予20 mg/kg辛伐他汀和10 mg/kg依折麦布灌胃,模型组给予等量磷酸盐缓冲液(PBS)灌胃。灌胃1次/d,连续8周后,取主动脉全程进行油红O染色,计算斑块面积百分比。结果辛伐他汀组及联合组的血清甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平明显低于模型组(P<0.01),其中联合组TG和LDL-C水平降低更明显(与辛伐他汀组比较,P<0.01),联合组HDL-C/LDL-C比值较模型组和辛伐他汀组明显升高(P<0.001)。辛伐他汀组和联合组主动脉斑块面积百分比显著小于模型组(P<0.05),联合组减小更显著(P<0.01)。结论辛伐他汀联合依折麦布对动脉粥样硬化的抑制作用更明显。 展开更多
关键词 辛伐他汀 依折麦布 动脉粥样硬化 ApoE基因敲除鼠
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何首乌中THSG和蒽醌类成分对人孕烷X受体介导的CYP3A4的调控作用 被引量：8
6
作者 张照研 杨亮 +5 位作者 黄小燕 汪美汐 马增春 汤响林 王宇光 高月 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第24期4827-4833,共7页
该文探讨何首乌主要化学成分2,3,5,4'-四羟基芪-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2,3,5,4'-tetrahydroxystilbene-2-O-β-Dglucopyranoside,THSG)、蒽醌类(大黄素、大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚)对人孕烷X受体(human pregnant... 该文探讨何首乌主要化学成分2,3,5,4'-四羟基芪-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2,3,5,4'-tetrahydroxystilbene-2-O-β-Dglucopyranoside,THSG)、蒽醌类(大黄素、大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚)对人孕烷X受体(human pregnant X receptor,PXR)介导的CYP3 A4的转录调控作用。利用前期建立的PXR介导的CYP3 A4药物诱导快速筛选技术,采用MTS细胞检测方法考察何首乌中主要化学成分对细胞活性的影响,计算IC50;利用双荧光素酶报告基因系统,将PXR表达载体和含CYP3 A4转录调控区的报告基因载体共转染Hep G2细胞,10μmol·L^(-1)利福平(RIF)为阳性对照,10μmol·L–1酮康唑(TKZ)为阴性对照,用THSG(2.5,5,10μmol·L^(-1))和蒽醌类成分(2.5,5,10μmol·L^(-1))分别处理24 h,进行双荧光素酶活性检测。结果表明,空载质粒pc DNA3.1与p GL4.17-CYP3A4共转染时,THSG、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、芦荟大黄素对CYP3A4的调控多为抑制效应,大黄素对CYP3A4产生诱导作用;pc DNA3.14-PXR与p GL4.17-CYP3A4共转染时,THSG、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、芦荟大黄素均产生诱导效应。综上,THSG和蒽醌类成分均可对CYP3A4产生抑制或激活效应,PXR参与后,上述成分对CYP3A4均产生诱导效应,提示何首乌中主要成分对CYP3A4的诱导作用是通过PXR实现的。以上结果提示在与何首乌联合用药时应注意潜在的药物相互作用,提高中药的安全性和有效性。 展开更多
关键词 何首乌 THSG 蒽醌类成分 人孕烷X受体 细胞色素P450 3A4
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麦冬皂苷D通过上调CYP2J3/EET减轻H2O2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤 被引量：4
7
作者 黄小燕 张照研 +1 位作者 陈伯钧 高月 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期161-170,共10页
目的探讨麦冬皂苷D(OP-D)对H2O2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤的保护作用及机制。方法通过H2O2诱导建立H9c2细胞氧化损伤模型,细胞分为正常对照组(予以无血清培养基培养28 h)、H2O2损伤模型组(H2O2400μmol·L-1处理3 h)、OP-D 5,10... 目的探讨麦冬皂苷D(OP-D)对H2O2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤的保护作用及机制。方法通过H2O2诱导建立H9c2细胞氧化损伤模型,细胞分为正常对照组(予以无血清培养基培养28 h)、H2O2损伤模型组(H2O2400μmol·L-1处理3 h)、OP-D 5,10和20μmol·L-1预处理组(OP-D预处理24 h后+H2O2400μmol·L-1处理3 h)、花生四烯酸CYP环氧酶活性抑制剂6-(2-炔丙基羟苯基)己酸(PPOH)干预组(OP-D20μmol·L-1+PPOH 10μmol·L-1,PPOH于OP-D处理前1 h加入细胞)。MTT法测定细胞活性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测环氧-二十碳-三烯酸(11,12-DHET和14,15-DHET)含量,ELISA法检测细胞内丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量及乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,流式细胞术(FCM)检测活性氧(ROS)水平及细胞凋亡水平、Western印迹法检测细胞色素P450 2J3(CYP2J3)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白和磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-e NOS)蛋白在细胞中的表达,利用PPOH进一步验证OP-D减轻细胞氧化应激的可能内在机制。结果 H2O2400μmol·L-1明显抑制H9c2细胞存活率(P<0.01),OP-D可明显增加H2O2损伤后细胞存活率(P<0.01);不同浓度OP-D增加11,12-DHET和14,15-DHET含量(P<0.05,P<0.01);OP-D增加H2O2损伤后细胞NO含量(P<0.05,P<0.01)、增强SOD活性(P<0.05)及降低MDA、LDH含量(P<0.05,P<0.01);OP-D显著降低H2O2损伤后细胞氧化应激及凋亡水平(P<0.05,P<0.01);OP-D预处理上调H2O2损伤后细胞CYP2J3蛋白和m RNA表达(P<0.05,P<0.01)、激活PI3K/Akt-e NOS通路的磷酸化水平(P<0.05,P<0.01);提前给予PPOH后,OP-D保护效应被抑制(P<0.05,P<0.01)。结论 OP-D能减轻H2O2所致的H9c2细胞损伤,可能是通过诱导CYP2J3表达及增加11,12-DHET和14,15-DHET含量,激活PI3K通路促进其下游因子Akt和e NOS磷酸化发挥作用。 展开更多
关键词 麦冬皂苷D 细胞色素P4502J3 磷脂酰肌醇激酶 氧化应激
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非诺贝特对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其抑制NF-κB信号通路的作用机制 被引量：3
8
作者 黄小燕 张为章 +1 位作者 张照研 高月 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1181-1186,共6页
目的:探讨PPARα的激动剂非诺贝特对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌保护作用及对NF-κB通路的影响。方法:健康雄性SD大鼠45只,随机分为3组:假手术组、缺血再灌注模型组、非诺贝特组。采用左冠状动脉前降支结扎30 min,再灌注2 h方法,建立大... 目的:探讨PPARα的激动剂非诺贝特对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌保护作用及对NF-κB通路的影响。方法:健康雄性SD大鼠45只,随机分为3组:假手术组、缺血再灌注模型组、非诺贝特组。采用左冠状动脉前降支结扎30 min,再灌注2 h方法,建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。非诺贝特组于手术前以80 mg·kg-1·d-1灌胃(ig)给药2周,最后1次于术前1 h给药,假手术组及模型组每天予以等量的生理盐水。观察心电图变化、心功能指标,计算心肌梗死百分比,蛋白免疫印迹法检测心肌组织PPARα,NF-κB p65蛋白核转移及IκBα蛋白磷酸化水平。结果:与假手术组比较,模型组心肌组织PPARα蛋白表达明显下降、NF-κB蛋白核内转移及IκBα蛋白磷酸化水平上调,同时心电图ST段明显抬高、心脏室壁运动减弱、射血分数下降、心肌梗死面积百分比增加;与模型组比较,非诺贝特组明显逆转上述指标、提高心功能、保护缺血损伤心肌。结论:非诺贝特对大鼠心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用,其机制可能是通过激活PPARα进而调节NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 非诺贝特 过氧化物酶体增殖物激活受体Α 心肌缺血再灌注损伤 核因子-ΚB
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何首乌6种成分对人孕烷X受体介导的CYP3A4的调控作用 被引量：3
9
作者 张照研 王宇光 +5 位作者 黄小燕 汪美汐 杨亮 马增春 汤响林 高月 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第20期4104-4110,共7页
该文探讨何首乌中6种化学成分(没食子酸、槲皮素、山柰酚、木犀草素、白藜芦醇、芹黄素)对人孕烷X受体(humanpregnant X receptor,PXR)介导的CYP3A4的转录调控作用。利用前期建立的PXR介导的CYP3A4药物诱导快速筛选技术,采用MTS细胞检... 该文探讨何首乌中6种化学成分(没食子酸、槲皮素、山柰酚、木犀草素、白藜芦醇、芹黄素)对人孕烷X受体(humanpregnant X receptor,PXR)介导的CYP3A4的转录调控作用。利用前期建立的PXR介导的CYP3A4药物诱导快速筛选技术,采用MTS细胞检测方法考察化学成分对细胞活性的影响,计算IC50;利用双荧光素酶报告基因系统,将PXR表达载体和含CYP3A4转录调控区的报告基因载体共转染HepG2细胞,10μmol·L-1利福平为阳性对照,10μmol·L-1酮康唑为阴性对照,用何首乌中6种成分--没食子酸、槲皮素、山柰酚、木犀草素、白藜芦醇、芹黄素(5,10,20μmol·L-1)分别处理24 h,进行双荧光素酶活性检测。结果表明,空载质粒pc DNA3. 1与p GL4. 17-CYP3A4共转染时没食子酸、白藜芦醇对CYP3A4的调控为抑制效应,槲皮素、山柰酚、木犀草素对CYP3A4产生诱导作用;pc DNA3. 14-PXR与p GL4. 17-CYP3A4共转染时,槲皮素、山柰酚、木犀草素、白藜芦醇、芹黄素均产生诱导效应。综上所述,6种成分对CYP3A4产生抑制或激活效应,PXR参与后,5种成分对CYP3A4产生诱导效应,其中3种成分的诱导效应具有显著性差异。该研究提示,在与何首乌联合用药时应注意潜在的药物相互作用,提高安全性和有效性。 展开更多
关键词 何首乌 肝损伤成分 人孕烷X受体 CYP3A4 中药安全性
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CYP7A1基因启动子克隆及萤光素酶报告基因载体构建 被引量：1
10
作者 张照研 王宇光 高月 《生物技术通讯》 CAS 2018年第5期647-652,共6页
目的:克隆细胞色素P450 7A1(CYP7A1)基因启动子,构建以CYP7A1基因启动子为启动序列的双萤光素酶报告基因系统并分析其活性,为研究CYP7A1基因转录调控提供有效筛选工具。方法:采用PCR方法克隆CYP7A1基因启动子序列,连接到pUC57载体中,双... 目的:克隆细胞色素P450 7A1(CYP7A1)基因启动子,构建以CYP7A1基因启动子为启动序列的双萤光素酶报告基因系统并分析其活性,为研究CYP7A1基因转录调控提供有效筛选工具。方法:采用PCR方法克隆CYP7A1基因启动子序列,连接到pUC57载体中,双酶切后连接至萤光素酶报告质粒pGL3-Basic上,构建重组萤光素酶报告质粒pGL3-CYP7A1-promoter-luc。结果:重组质粒经双酶切和测序,证实构建正确;pGL3-CYP7A1-promoter-luc质粒2、3转染HepG2细胞均具有显著性启动子活性,pGL3-CYP7A1-promoter-luc2转染24和48 h后经检测分别为对照组(pGL3-basic空载体)的13.1±2.8倍(P<0.001)和23.3±2.9倍(P<0.001);pGL3-CYP7A1-promoter-luc3转染24、48 h后,荧光响应值分别是对照组的8.4±1.6倍(P<0.001)和22.1±1.9倍(P<0.01),呈现强启动子活性。结论:构建了CYP7A1基因启动子萤光素酶报告基因重组质粒pGL3-CYP7A1-promoter-luc,为后续深入研究药物对其调控作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 细胞色素P4507A1(CYP7A1) 报告基因法 载体构建
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