期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
白头翁散煎剂发酵物对感染猪流行性腹泻病毒仔猪肠道屏障功能的影响 被引量：2
1
作者 常伟辰 李帅奇 +5 位作者 李琰 闫微 张红英 王彦彬 杨明凡 张昂克 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期4403-4410,共8页
试验旨在研究白头翁散对感染猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)仔猪肠道屏障功能的影响。将24头7日龄体重相近的仔猪(杜×长×大)随机分为4组,分别为对照组、PEDV组、煎剂组和发酵组。试验期为12 d,第4天... 试验旨在研究白头翁散对感染猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)仔猪肠道屏障功能的影响。将24头7日龄体重相近的仔猪(杜×长×大)随机分为4组,分别为对照组、PEDV组、煎剂组和发酵组。试验期为12 d,第4天,对照组仔猪接种生理盐水,其他3组仔猪每头以10~(4.5)TCID_(50)(50%组织培养感染剂量)的剂量接种PEDV(HN2021),第5~9天,煎剂组和发酵组仔猪每天灌服煎剂和发酵液(0.2 mL·kg^(-1))。评估仔猪的生长性能、腹泻指数、病毒拷贝量、肠道细菌组成、肠道形态、肠道屏障功能,以及血清和肠道中的抗氧化指标。结果表明:煎剂和发酵液可显著提高PEDV感染仔猪平均日增重(average daily gain,ADG),降低腹泻率,抑制肠道内病毒复制(P<0.05),还可调节肠道细菌组成,显著提高乳酸杆菌和双歧杆菌数量(P<0.05);给药缓解了PEDV感染造成的仔猪肠道绒毛高度(villus height,VH)显著下降和隐窝深度(crypt depth,CD)增加,改善肠道形态,显著提高血清中D-木糖含量,降低肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)浓度,从而增强肠道屏障功能(P<0.05)。此外,煎剂和发酵液可降低氧化应激,表现为总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性显著升高,丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05)。这些数据表明白头翁散可增强感染PEDV仔猪的肠道屏障功能。 展开更多
关键词 白头翁散 发酵 PEDV 生长性能 肠道屏障功能 抗氧化功能
下载PDF
非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体制备和鉴定
2
作者 侯浩宇 郑南南 +7 位作者 吴宏举 陈寅龙 李潮 张昂克 姬鹏超 万博 杜永坤 张改平 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1241-1249,共9页
【目的】制备非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p30蛋白的单克隆抗体,为非洲猪瘟快速诊断检测方法的建立和疫苗研究提供材料。【方法】构建p30原核表达质粒pET-30a(+)-p30,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达... 【目的】制备非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p30蛋白的单克隆抗体,为非洲猪瘟快速诊断检测方法的建立和疫苗研究提供材料。【方法】构建p30原核表达质粒pET-30a(+)-p30,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,通过镍柱亲和层析获得目的蛋白。p30复性后,每2周对BALB/c小鼠免疫3次,将免疫小鼠的脾脏与骨髓瘤细胞融合制备单克隆抗体,通过ELISA方法和亚克隆筛选分泌抗体的杂交瘤细胞。将筛选出的单克隆细胞注射进小鼠腹腔制备腹水,通过Western blotting检测、免疫荧光测定(IFA)和抗体亚型分析来鉴定单克隆抗体。【结果】试验成功构建了p30蛋白的原核表达质粒,并使用IPTG诱导、纯化获得了原核系统表达的重组p30蛋白;成功制备出4株能稳定分泌针对ASFV p30蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为:1H3B4、3F2F5、6E3A1和9D6B9。经ELISA测定抗体腹水效价在1∶100000~1∶1000000之间。经Western blotting和IFA鉴定筛选得到的单克隆抗体与p30蛋白能发生特异性反应。经亚型鉴定,3F2F5和9D6B92株单克隆抗体的重链均为IgG2b,轻链均为Kappa;6E3A1株单克隆抗体的重链为IgM,轻链为Kappa;1H3B4株单克隆抗体的重链为IgG2b,轻链为Lambda。【结论】试验成功制备了4株针对ASFV p30蛋白的单克隆抗体,并分析了单克隆抗体的免疫学特性,为p30蛋白的生物学功能研究和ASFV血清学检测提供依据。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒(ASFV) p30蛋白 单克隆抗体 CP 204 L基因
下载PDF
非洲猪瘟病毒H240R蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备 被引量：4
3
作者 李佳佳 东梦珂 +5 位作者 郑南南 吴宏举 张昂克 张改平 万博 杜永坤 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第3期101-106,共6页
非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的急性、高热、严重出血、致死率极高的动物传染病,给我国养殖业造成严重的经济损失。本研究将非洲猪瘟病毒H240R基因克隆至pET-28a(+)载体中,成功构建了pET-28a(+)-H240R原核表达载体,将重组... 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的急性、高热、严重出血、致死率极高的动物传染病,给我国养殖业造成严重的经济损失。本研究将非洲猪瘟病毒H240R基因克隆至pET-28a(+)载体中,成功构建了pET-28a(+)-H240R原核表达载体,将重组载体转化入BL21感受态细胞,用IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western blot鉴定结果表明,成功获得了H240R重组蛋白,将其纯化后作为抗原免疫新西兰大白兔,分离血清并分析其反应特异性。ELISA检测结果显示,血清抗体效价达到1∶256000。Western blot和间接免疫荧光(IFA)鉴定结果表明,制备的兔源多克隆抗体能够同时与原核和真核表达的H240R蛋白反应。本研究成功制备针对ASFV H240R蛋白的多克隆抗体,该多克隆抗体具有良好的反应活性及特异性,为建立针对ASFV抗原、抗体的免疫学检测方法提供了新的思路。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 H240R蛋白 原核表达 多克隆抗体
下载PDF
非洲猪瘟病毒K205R蛋白的原核表达与单克隆抗体制备 被引量：1
4
作者 陈寅龙 郑南南 +6 位作者 吴宏举 侯浩宇 李潮 张昂克 韩世充 吴亚楠 杜永坤 《动物医学进展》 北大核心 2023年第11期1-7,共7页
为研发非洲猪瘟病毒的免疫检测试剂提供素材,制备非洲猪瘟病毒K205R蛋白的单克隆抗体。采用PCR方法扩增K205R基因,构建重组表达质粒pET-30a-K205R,将重组质粒pET-30a-K205R转化到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中并通过IPTG诱导表达ASFV K205R... 为研发非洲猪瘟病毒的免疫检测试剂提供素材,制备非洲猪瘟病毒K205R蛋白的单克隆抗体。采用PCR方法扩增K205R基因,构建重组表达质粒pET-30a-K205R,将重组质粒pET-30a-K205R转化到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中并通过IPTG诱导表达ASFV K205R蛋白。将纯化出的蛋白乳化后免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞。将筛选出来的单克隆细胞注射至小鼠腹腔中,待小鼠腹部膨大时收集腹水,通过ELISA方法鉴定腹水效价、Western blot和IFA鉴定单克隆抗体特异性及反应原性,并对单克隆抗体亚型进行鉴定。经SDS-PAGE鉴定,重组ASFV K205R蛋白成功表达。Western blot分析显示,His标签抗体能够特异性识别重组表达的ASFV K205R蛋白,表明其具有良好的特异性以及反应原性。通过细胞融合和细胞筛选得到1株能稳定分泌抗ASFV K205R蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,将其命名为1C3G6。ELISA检测腹水中抗体效价为1∶100000。Western blot和IFA鉴定结果显示单克隆抗体1C3G6与K205R蛋白反应性良好。通过亚型鉴定,单克隆抗体1C3G6的重链为IgG2b类,轻链为Kappa型。经Western blot和IFA鉴定,筛选得到的1C3G6单克隆抗体可以特异性识别原核系统和真核系统表达的K205R蛋白,说明该抗体具有良好的特异性。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 K205R蛋白 原核表达 单克隆抗体 Western blot鉴定
下载PDF
非洲猪瘟病毒K205R蛋白特异性纳米抗体的筛选与鉴定
5
作者 吴书雅 赵慧君 +7 位作者 任佳慧 董昊鑫 张铭芳 李嘉骥 杜永坤 万博 张昂克 张改平 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2023年第2期307-315,共9页
【目的】利用噬菌体展示技术筛选非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)K205R蛋白的特异性纳米抗体。【方法】将原核表达、纯化的ASFV K205R蛋白免疫双峰驼,采集全血,分离外周血淋巴细胞,提取总RNA并反转录,巢式PCR扩增VHH基因... 【目的】利用噬菌体展示技术筛选非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)K205R蛋白的特异性纳米抗体。【方法】将原核表达、纯化的ASFV K205R蛋白免疫双峰驼,采集全血,分离外周血淋巴细胞,提取总RNA并反转录,巢式PCR扩增VHH基因,构建VHH噬菌体文库,利用噬菌体展示技术筛选K205R特异性纳米抗体。【结果】成功构建库容量为5×10^(8)的VHH噬菌体文库,然后利用噬菌体展示技术经过3轮淘选,特异性VHH噬菌体得到明显富集,氨基酸序列比对显示共筛选出5株K205R蛋白的特异性纳米抗体,分别为ASFV-K205R-Nb1、ASFV-K205R-Nb14、ASFV-K205R-Nb35、ASFV-K205R-Nb64和ASFV-K205R-Nb82。【结论】筛选的5株纳米抗体均具有良好的特异性,其中ASFV-K205R-Nb1、ASFV-K205R-Nb35和ASFV-K205R-Nb82具有更好的亲和力,为以纳米抗体作为灵敏探针建立的特异性强、灵敏度高、成本低的新型ASFV血清学诊断方法提供依据。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 K205R蛋白 VHH噬菌体文库 噬菌体展示 纳米抗体
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部