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严重急性呼吸综合征急性期T淋巴细胞亚群异常改变 被引量：75
1
作者 李太生 邱志峰 +14 位作者 韩扬 张宏伟 王仲 刘正印 范宏伟 吕玮 于莺 王焕玲 张惠媛 谢静 周宝桐 马小军 倪安平 王爱霞 邓国华 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期297-299,共3页
目的　研究严重急性呼吸综合征 (SARS)患者T淋巴细胞改变特点 ,探讨其发病机制 ,提高对SARS的早期诊断水平。方法　收集本院急诊留观的 30例确诊为SARS患者和 5 6名健康献血员的抗凝血 ,用特异性荧光抗体标记 ,通过流式细胞仪检测其CD4+... 目的　研究严重急性呼吸综合征 (SARS)患者T淋巴细胞改变特点 ,探讨其发病机制 ,提高对SARS的早期诊断水平。方法　收集本院急诊留观的 30例确诊为SARS患者和 5 6名健康献血员的抗凝血 ,用特异性荧光抗体标记 ,通过流式细胞仪检测其CD4+ 和CD8+ 的T淋巴细胞亚群变化 ,对其中 2例恢复后的SARS病人复查CD4+ 和CD8+ 的T淋巴细胞亚群 ,并与人类免疫缺陷病毒(HIV)、巨细胞病毒 (CMV)和EB病毒 (EBV)感染患者的T淋巴细胞亚群改变进行比较。结果　与正常人相比 ,SARS患者的CD4+ T淋巴细胞 (简称“T4细胞”)和CD8+ T淋巴细胞 (简称“T8细胞”)数量均显著减少 (2 84± 187个 /mm3 和 2 88± 16 7个 /mm3 ) ,所有SARS患者的T4细胞计数均低于正常 (最低仅4 9个 /mm3 ) ,恢复期 2例SARS病人的T4和T8细胞恢复正常 ;与HIV、CMV、EBV感染者相比 ,SARS患者的T4细胞和T8细胞数量也均显著减少 ,而T8细胞数量的减少则更为严重 ;与正常人相比 ,HIV感染者T4细胞数量也均显著减少 ,但HIV、CMV、EBV感染者的T8细胞数量均显著增加。结论　SARS患者的T淋巴细胞数量显著降低 ,但可逆转 ;T4和T8细胞的检测有助于早期诊断SARS病人。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 急性期 T淋巴细胞亚群异常 发病机制 诊断 病因 发病机制 治疗 传染性非典型肺炎
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电阻抗法检测食品中沙门氏菌 被引量：40
2
作者 陈广全 张惠媛 +1 位作者 饶红 袁军 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第9期66-70,共5页
介绍电阻抗法快速检测食品中沙门氏菌方法,通过对沙门氏菌选择培养基四硫磺酸盐煌绿增菌培养基(TTB)的改进,加入氧化三甲氨以增加培养基的电阻抗变化灵敏度,连续检测沙门氏菌代谢所引起培养基的电阻抗变化值,通过培养机电阻抗降低的百... 介绍电阻抗法快速检测食品中沙门氏菌方法,通过对沙门氏菌选择培养基四硫磺酸盐煌绿增菌培养基(TTB)的改进,加入氧化三甲氨以增加培养基的电阻抗变化灵敏度,连续检测沙门氏菌代谢所引起培养基的电阻抗变化值,通过培养机电阻抗降低的百分比判定沙门氏菌的存在。经与常规培养法进行比较,对加入食品中的21种已知沙门氏菌属的检测,电阻抗法19个为阳性,检出率在90%以上,常规法检出18个,检测结果与常规培养法相一致,对于阴性结果能在48h内出具结果。结果表明电阻抗法能够快速、可靠地检测食品中的沙门氏菌。 展开更多
关键词 电阻抗法 检测 沙门氏菌 食品 卫生检验
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利用PCR方法快速检测食品中的沙门氏菌 被引量：32
3
作者 汪琦 张昕 +1 位作者 张惠媛 陈广全 《检验检疫科学》 2005年第6期26-28,共3页
本文介绍了一种快速检测食品中沙门氏菌的方法。操作步骤为,在缓冲蛋白胨水(BPW)中增菌18-24h,生理盐水洗菌2次后煮沸裂解细胞,以invA为目的基因进行PCR,琼脂糖凝胶电泳检测,两天时间即能得到明确结果。以全脂奶粉、生牛肉和加工过的鸡... 本文介绍了一种快速检测食品中沙门氏菌的方法。操作步骤为,在缓冲蛋白胨水(BPW)中增菌18-24h,生理盐水洗菌2次后煮沸裂解细胞,以invA为目的基因进行PCR,琼脂糖凝胶电泳检测,两天时间即能得到明确结果。以全脂奶粉、生牛肉和加工过的鸡肉为实验对象,人为添加沙门氏菌,检测结果与传统培养方法和BAX(r)系统检测结果一致。实验检出限为100cfu/25g,准确性达100%。 展开更多
关键词 沙门氏菌 PCR 人为添加 PCR方法 快速检测 食品 实验对象 检测结果 琼脂糖凝胶 操作步骤
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水稻资源全生育期耐盐性鉴定筛选 被引量：34
4
作者 孙现军 姜奇彦 +5 位作者 胡正 张惠媛 徐长兵 邸一桓 韩龙植 张辉 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1656-1663,共8页
对来自国内外不同地区的550份水稻资源进行全生育期耐盐性鉴定。设置淡水、0.3%和0.5%盐溶液浇灌3个处理,插秧10d后,通过浇灌不同体积的淡水与海水调至设计浓度对水稻进行不同浓度的盐胁迫处理。分别调查了淡水及0.3%盐处理下水稻株高... 对来自国内外不同地区的550份水稻资源进行全生育期耐盐性鉴定。设置淡水、0.3%和0.5%盐溶液浇灌3个处理,插秧10d后,通过浇灌不同体积的淡水与海水调至设计浓度对水稻进行不同浓度的盐胁迫处理。分别调查了淡水及0.3%盐处理下水稻株高、有效分蘖数、主穗长度、主穗结实率、单株产量、抽穗期6项农艺性状和0.5%盐处理下的水稻耐盐表型。与淡水浇灌相比,全生育期在0.3%盐溶液处理下,550份水稻(100%)株高显著降低;124份(22.55%)水稻有效分蘖数(90份增加,34份减少)、414份(75.27%)水稻主穗长度(405份变短、9份增长)、145份(26.36%)水稻主穗结实率(84份减少,61份增加)、375份(68.18%)水稻单株产量(343份减少,32份增加)存在(极)显著差异;水稻资源的抽穗期无显著差异。主成分分析表明,主穗结实率、有效分蘖数及单株产量3项性状累计贡献77.25%的变异。根据产量耐盐系数筛选了121份耐盐水稻资源(产量耐盐系数≥0.8),在0.5%盐胁迫持续处理42d后,筛选了78份耐盐水稻资源(耐盐表型为3级),其中25份水稻资源全生育期在0.3%盐处理下单株产量耐盐系数≥0.8,在0.5%盐胁迫持续处理42d后的耐盐表型为3级。筛选的耐盐水稻资源为培育耐盐新品种及深入研究耐盐机制提供材料。 展开更多
关键词 水稻种质资源 全生育期盐处理 农艺性状 耐盐评价
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特高压双回线路并联电抗器中性点小电抗的优化设计 被引量：12
5
作者 刘海军 韩民晓 +2 位作者 文俊 张惠媛 肖湘宁 《电力自动化设备》 EI CSCD 北大核心 2009年第11期87-91,共5页
对特高压同塔双回线路中的并联电抗器中性点接小电抗补偿潜供电流的方法进行了研究,分析了该方法补偿潜供电流的原理,得到了4种不同补偿方案下的中性点小电抗的计算公式。以淮南-上海的同塔双回特高压输电线路为例,针对实际线路中的所... 对特高压同塔双回线路中的并联电抗器中性点接小电抗补偿潜供电流的方法进行了研究,分析了该方法补偿潜供电流的原理,得到了4种不同补偿方案下的中性点小电抗的计算公式。以淮南-上海的同塔双回特高压输电线路为例,针对实际线路中的所采用补偿方案,确定出中性点小电抗的取值范围。使用PSCAD/EMTDC仿真软件搭建数学模型,通过计算潜供电流、熄弧时间等主要的技术指标,从中选出抑制潜供电流效果最好的一组中性点小电抗参数。使用优选出的参数,分别对4种方案在不同故障类型、不同故障点位置的潜供电流进行综合比较分析,得到一种最优的补偿方案。并结合补偿效果和经济性,推荐了混合补偿方案,给设计者提供一个有价值的参考。 展开更多
关键词 特高压 潜供电流 恢复电压 中性点小电抗 最优补偿方案
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食源性致病病毒基因芯片方法检测 被引量：12
6
作者 陈广全 曾静 +6 位作者 张惠媛 魏海燕 臧庆伟 汪琦 饶红 张昕 张西萌 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期635-637,共3页
目的将基因芯片技术用于食源性致病病毒诺如病毒、轮状病毒、甲肝病毒、星状病毒和脊髓灰质炎病毒的检测,达到同时检测2种以上病毒的需求。方法采用基因芯片方法检测贝类食品中引起人类腹泻的5种食源性致病病毒。结果所研制的检测5种病... 目的将基因芯片技术用于食源性致病病毒诺如病毒、轮状病毒、甲肝病毒、星状病毒和脊髓灰质炎病毒的检测,达到同时检测2种以上病毒的需求。方法采用基因芯片方法检测贝类食品中引起人类腹泻的5种食源性致病病毒。结果所研制的检测5种病毒的基因芯片具有良好的特异性,在5种病毒之间无交叉反应;其灵敏度与荧光PCR方法基本一致;芯片在4℃条件下,保存7.5个月,性能稳定。结论建立了检测5种食源性病毒的基因芯片方法,同时该方法也可用于医疗检验目的。为基因芯片在微生物检测领域的应用提供基础依据。 展开更多
关键词 基因芯片 食源性病毒 荧光PCR
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生物传感器在食源性致病菌检测中的应用 被引量：12
7
作者 张捷 陈广全 +6 位作者 乐加昌 张惠媛 顾德周 唐茂芝 王佩荣 汪琦 张昕 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期453-457,共5页
目前传统的检测食源性致病菌的方法主要依赖培养基对存活的细胞进行选择分离和传代,虽然这种方法很有效,但其检测周期长、程序复杂等缺点已经不能满足现代检测的要求。随着科学技术不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发... 目前传统的检测食源性致病菌的方法主要依赖培养基对存活的细胞进行选择分离和传代,虽然这种方法很有效,但其检测周期长、程序复杂等缺点已经不能满足现代检测的要求。随着科学技术不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,人们已经建立了不少快速、简便、特异、敏感、低耗的检测技术。本文对应用生物传感器对食源性致病菌检测方法的发展及其前景进行了综述。 展开更多
关键词 生物传感器 食源性致病菌 快速检测
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小麦转录因子基因TaWRKY33的耐盐性分析 被引量：14
8
作者 张惠媛 刘永伟 +8 位作者 杨军峰 张双喜 于太飞 陈隽 陈明 周永斌 马有志 徐兆师 付金东 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第24期4591-4602,共12页
【目的】WRKY转录因子是植物转录调节因子家族之一,参与调控植物病原菌的防御、生长发育和抗逆应答等多种生理过程。小麦WRKY转录因子基因TaWRKY33可以提高转基因拟南芥对干旱和高温的抗性。通过分析TaWRKY33的耐盐性,检测TaWRKY33转录... 【目的】WRKY转录因子是植物转录调节因子家族之一,参与调控植物病原菌的防御、生长发育和抗逆应答等多种生理过程。小麦WRKY转录因子基因TaWRKY33可以提高转基因拟南芥对干旱和高温的抗性。通过分析TaWRKY33的耐盐性,检测TaWRKY33转录因子的转录活性,深入分析转录因子基因TaWRKY33的功能,以解析其耐盐调控机制。【方法】以盐胁迫处理的小麦cDNA为模板,利用实时荧光定量PCR检测TaWRKY33在盐胁迫条件下的表达模式;将TaWRKY33的CDS序列插入带有CaMV35S启动子的pCAMBIA1302表达载体中,构建表达载体pCAMBIA1302-TaWRKY33,转入农杆菌,侵染野生型拟南芥获得转基因株系;同时利用pWMB110-TaWRKY33双元载体创建了过表达小麦株系。用转TaWRKY33的拟南芥和小麦进行耐盐性鉴定。构建诱饵载体pGBKT7-TaWRKY33,通过单转法将诱饵载体pGBKT7-TaWRKY33重组质粒和文库质粒逐步转化到酵母AH109感受态细胞。通过SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade和X-α-gal显蓝反应筛选得到阳性克隆,进行测序和BLAST分析。制备小麦原生质体,通过瞬时表达试验共转化报告子和效应子质粒,计算相对荧光值分析转录因子的转录活性。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,TaWRKY33受盐胁迫的诱导表达。双荧光素酶瞬时表达试验表明TaWRKY33在小麦细胞中可以激活相应荧光素酶的活性。从功能分析,在正常生长条件下转基因拟南芥和野生型拟南芥没有明显差异;在盐处理条件下,转基因拟南芥的根长大于野生型拟南芥的根长;过表达拟南芥的鲜重大于野生型,呈显著性差异。重要的是,在盐处理下,鲜重、相对电导率和Na+含量表明,过表达TaWRKY33的小麦较其受体对照有更好的耐盐性。对TaWRKY33候选互作蛋白分析表明,这些候选互作蛋白主要参与植物体的信号转导或免疫过程,表明TaWRKY33在植物的逆境信号转导、基因转录调控过程中发挥着重要作用。【 展开更多
关键词 小麦 WRKY转录因子 酵母双杂 蛋白互作 耐盐性
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阴道彩超与腹部彩超诊断异位妊娠的价值比较 被引量：14
9
作者 张惠媛 《当代医学》 2014年第31期81-82,共2页
目的对比分析阴道彩超与腹部彩超诊断异位妊娠的临床价值。方法选取新余市人民医院2011年11月-2013年11月经阴道彩超诊断并经手术病理证实的异位妊娠患者56例为研究对象,对患者进行阴道彩超诊断和腹部彩超诊断,分析诊断效果。结果经阴... 目的对比分析阴道彩超与腹部彩超诊断异位妊娠的临床价值。方法选取新余市人民医院2011年11月-2013年11月经阴道彩超诊断并经手术病理证实的异位妊娠患者56例为研究对象,对患者进行阴道彩超诊断和腹部彩超诊断,分析诊断效果。结果经阴道彩超诊断异位妊娠确诊53例,诊断符合率为94.64%;经腹部彩超诊断异位妊娠确诊42例,诊断符合率为75.00%。两种诊断符合率比较,经阴道彩超诊断符合率高于经腹部彩超诊断符合率,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论经阴道彩超诊断异位妊娠诊断准确率更高,发现更及时,可以为临床诊断和治疗提供依据。 展开更多
关键词 阴道彩超 腹部彩超 异位妊娠 价值比较
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细菌磁小体的修饰及其在病原物检测中的应用 被引量：9
10
作者 李爱华 唐涛 +3 位作者 张惠媛 汪琦 田杰生 李颖 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期680-690,共11页
趋磁细菌可以在细胞内合成Fe3O4或F3S4颗粒,称为磁小体。磁小体粒径为纳米级,晶形稳定,有质膜包被,在免疫检测、临床诊断、靶向治疗、污水处理等方面均有很好的应用前景。文章主要介绍采用化学法和生物法对磁小体进行修饰,并利用修饰后... 趋磁细菌可以在细胞内合成Fe3O4或F3S4颗粒,称为磁小体。磁小体粒径为纳米级,晶形稳定,有质膜包被,在免疫检测、临床诊断、靶向治疗、污水处理等方面均有很好的应用前景。文章主要介绍采用化学法和生物法对磁小体进行修饰,并利用修饰后的磁小体对病原物进行免疫磁性分离、前期诊断和痕量检测的方法。 展开更多
关键词 磁小体 磁小体-抗体复合物 免疫磁性分离 免疫检测
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用RT-PCR法检测食品中诺沃克样病毒 被引量：9
11
作者 陈广全 饶红 +2 位作者 张惠媛 付溥博 冯骞 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期106-112,共7页
使用RTPCR法对贝类样品中的诺沃克样病毒进行了检测。对食品中不同的病毒富集方法进行了研究,评价了CHCl3和Frezon去除RTPCR抑制剂的效果,筛选出最佳的病毒富集方法即2次PEG6000(终浓度12%PEG6000,03mol/LNaCl)沉降病毒,并使用CHCl3除去... 使用RTPCR法对贝类样品中的诺沃克样病毒进行了检测。对食品中不同的病毒富集方法进行了研究,评价了CHCl3和Frezon去除RTPCR抑制剂的效果,筛选出最佳的病毒富集方法即2次PEG6000(终浓度12%PEG6000,03mol/LNaCl)沉降病毒,并使用CHCl3除去RTPCR抑制剂。此富集方法的回收率为135%。另外,对不同的RNA提取方法的灵敏度进行了比较,最终确认硅胶膜法为简便、快速、有效的RNA提取方法。并且,使用了Superscript反转录酶进行反转录,提高了检测的灵敏度。选用了289和290混合引物进行食品中NLVs的检测,这一引物组合可同时检测Ⅰ型和Ⅱ型NLVs,扩增出1个319bp的特异性片段。通过以上条件的优化,建立了通过RTPCR检测贝类中NLVs的有效方法。该方法的NLVs最低检出限为10×103RT-PCR50/15g。对32件贝类样品进行了NLVs的检测,其中2份毛蚶中被检出NLVs。 展开更多
关键词 诺沃克样病毒 RT-PCR法 CHC 检出 抑制剂 食品 检测 贝类 RNA提取方法 引物
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利用12S rRNA基因的限制性酶切末端片段长度多态性鉴定动物种类 被引量：9
12
作者 汪琦 张昕 +3 位作者 赵大贺 马海萍 陈广全 张惠媛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期214-219,共6页
目的:建立一种精确可靠的鉴定常见的10种动物(猪、狗、牛、山羊、绵羊、马、鸡、鼠、三文鱼和鹿)的方法。方法:利用12SrRNA基因的限制性酶切末端片段长度多态性(terminal restriction fragment length polymorphism,T-RFLP)鉴别动物种... 目的:建立一种精确可靠的鉴定常见的10种动物(猪、狗、牛、山羊、绵羊、马、鸡、鼠、三文鱼和鹿)的方法。方法:利用12SrRNA基因的限制性酶切末端片段长度多态性(terminal restriction fragment length polymorphism,T-RFLP)鉴别动物种类。将线粒体12S rRNA基因通过引物的5'端用FAM荧光标记,从基因组DNA中扩增450bp的目的片段。引物对1(下游引物FAM标记,上游引物不标记)扩增的PCR产物用限制性内切酶AluⅠ酶切。引物对2(上游引物FAM标记,下游引物不标记)扩增的PCR产物用限制性内切酶Tru9Ⅰ酶切。得到的酶切产物分别在遗传分析仪ABI3100上进行毛细管电泳,片段大小用Peak Scanner 1.0软件分析。结果:根据AluⅠ酶切图谱能够区分鸡、马、猪和三文鱼,而鹿和牛、山羊和绵羊、鼠和狗因酶切图谱相同无法分开。根据Tru9Ⅰ酶切图谱,能够进一步将鹿和牛、山羊和绵羊、鼠和狗分开。同一种动物不同个体的酶切图谱完全相同,结果具有可重复性。没有出现物种内多态的现象。大多数情况下,实际得到的末端片段长度与理论值非常接近,只存在2～5bp的差异。结论:该方法操作简单、结果精确,适用于鉴定动物种类。 展开更多
关键词 限制性酶切末端片段长度多态性T—RFLP 种类鉴定 12S RRNA
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蜂胶中四环素族抗生素残留的测定 被引量：7
13
作者 袁军 刘玉萍 +1 位作者 陈广全 张惠媛 《现代商检科技》 1998年第3期21-23,共3页
蜂胶中四环素族抗生素残留的测定袁军刘玉萍陈广全张惠媛（北京商检局）蜂胶是工蜂从植物体上采集的树脂与其上颚腺分泌物和蜂蜡等形成的涂抹在巢脾房眼壁缝上的粘性固体胶状混合物，是蜜蜂用来填补蜂巢裂缝的密封剂和蜂巢内动物尸体的... 蜂胶中四环素族抗生素残留的测定袁军刘玉萍陈广全张惠媛（北京商检局）蜂胶是工蜂从植物体上采集的树脂与其上颚腺分泌物和蜂蜡等形成的涂抹在巢脾房眼壁缝上的粘性固体胶状混合物，是蜜蜂用来填补蜂巢裂缝的密封剂和蜂巢内动物尸体的防腐剂，具有抗细菌、抗病毒、抗真菌... 展开更多
关键词 蜂胶 抗生素 四环素族 残留 测定
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分子马达传感器对沙门氏菌快速检测方法的初步研究 被引量：9
14
作者 张捷 顾德周 +6 位作者 张惠媛 杨泽慧 王佩荣 张雷 齐玮 陈广全 乐加昌 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期93-96,共4页
利用F0F1-ATP合酶的旋转特性及对H+敏感的荧光物质F-DHPE作为指示剂来检测样本中有无目标物。通过生物素-亲和素系统将特异性invA核酸探针连接在F0F1-ATPase的ε亚基上构建生物传感器;将待测样品和阴性对照分别与生物传感器结合后,比较... 利用F0F1-ATP合酶的旋转特性及对H+敏感的荧光物质F-DHPE作为指示剂来检测样本中有无目标物。通过生物素-亲和素系统将特异性invA核酸探针连接在F0F1-ATPase的ε亚基上构建生物传感器;将待测样品和阴性对照分别与生物传感器结合后,比较其催化ATP合成30min后的ATP产生量,依此对样品中的沙门氏菌DNA进行检测。结果表明,该方法对沙门氏菌DNA的检测时间为1h,检出限为10ng/mL。从食品样本分离得到的30株细菌,利用分子马达生物传感器的检测结果与PCR检测的结果一致。 展开更多
关键词 沙门氏菌 F0F1-ATP合酶 分子马达传感器 快速检测
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荞麦壳水提物调控糖尿病大鼠肠道菌群结构的研究 被引量：8
15
作者 张芹 周中凯 张惠媛 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第4期31-36,43,共7页
为研究荞麦壳水提物对糖尿病大鼠粪便菌群的影响,选取12只Wistar大鼠,糖尿病模型建立后随机分为糖尿病组和荞麦壳组,每组6只,于第5周末无菌采集大鼠粪便,对粪便菌群16SrRNA的V1-V3区进行扩增,利用Miseq高通量测序平台测定基因序列,最后... 为研究荞麦壳水提物对糖尿病大鼠粪便菌群的影响,选取12只Wistar大鼠,糖尿病模型建立后随机分为糖尿病组和荞麦壳组,每组6只,于第5周末无菌采集大鼠粪便,对粪便菌群16SrRNA的V1-V3区进行扩增,利用Miseq高通量测序平台测定基因序列,最后进行比对、分类。结果表明,荞麦壳水提物组和糖尿病组大鼠粪便中菌群结构及多样性有较大差别,在目(Order)的水平上,荞麦壳组Lactobacillales含量高于糖尿病组,糖尿病组Clostridiales含量高于荞麦壳组;在属(Genus)的水平上,荞麦壳组Lactococcus、Blautia、Prevotella、Klebsiella含量高于糖尿病组,糖尿病组Ruminococcaceae_uncultured、Ruminococcaceae_unclassified、Clostridium_sensu_stricto_1、Turicibacter和Oligella含量较荞麦壳组增加。说明糖尿病导致肠道菌群紊乱,大鼠通过饮用荞麦壳水提物可改善肠道菌群的结构。 展开更多
关键词 荞麦壳水提物 糖尿病 肠道菌群 高通量测序
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基于分子马达生物传感器技术的副溶血性弧菌分子分型方法的初步研究 被引量：7
16
作者 张捷 李兆杰 +10 位作者 王煜 张惠媛 陆琳 王静 刘岩 顾德周 汪琦 张昕 王佩荣 乐加昌 陈广全 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1279-1289,共11页
【目的】建立基于分子马达技术的简便快速的分子分型方法,对携带和非携带毒力基因的副溶血性弧菌进行快速分类。【方法】以F0F1-ATPase为核心构建分子马达,以副溶血性弧菌毒力基因tdh、trh和种特异性基因tlh、toxR为靶基因设计4个探针... 【目的】建立基于分子马达技术的简便快速的分子分型方法,对携带和非携带毒力基因的副溶血性弧菌进行快速分类。【方法】以F0F1-ATPase为核心构建分子马达,以副溶血性弧菌毒力基因tdh、trh和种特异性基因tlh、toxR为靶基因设计4个探针。通过生物素-亲和素系统将探针与分子马达连接构建F0F1-ATPase分子马达生物传感器,对10株副溶血性弧菌分离株进行分类,并与PCR-电泳-凝胶成像结果进行比较;同时对生物传感器的检测灵敏度和特异性进行研究。【结果】10株试验菌株中10株tdh阳性,0株trh阳性,而10株菌都携带tlh和toxR,与PCR-电泳-凝胶成像结果一致;分子马达生物传感器的最低检测限为1 pg/反应体系,且能够对副溶血性弧菌特异性识别,PCR-电泳-凝胶成像方法的最低检测限为10 pg/PCR反应体系。【结论】建立了基于分子马达的分子分型方法,能够对副溶血性弧菌的致病性进行快速诊断,检测灵敏度比PCR-电泳-凝胶成像方法高了10倍,而且特异性非常高。该方法简便、快速、省时、省力,适用于地方疾控部门和口岸检疫部门的基层实验室开展副溶血性弧菌监测和流行病学溯源工作。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 分子马达 分子分型 毒力基因
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检测致病性李斯特氏菌的培养基 被引量：6
17
作者 张昕 汪琦 +1 位作者 张惠媛 陈广全 《检验检疫科学》 2008年第1期76-79,共4页
要检出单核增生李斯特氏菌,前增菌和分离是非常重要的步骤。本文概述了李斯特氏菌选择性增菌肉汤和选择性显色培养基的种类和设计原理,对它们的应用效果进行了讨论。
关键词 致病性李斯特氏菌 培养基 检测
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荧光PCR检测副溶血性弧菌致病基因方法的建立 被引量：7
18
作者 韩玥 张惠媛 +2 位作者 马师良 吕雨莎 李秋阳 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2013年第5期397-400,共4页
目的建立一种准确、快速、特异地检测副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)致病基因的荧光PCR方法。方法用7株已知其致病基因的VP标准菌株和检出菌分别对6种VP致病基因荧光PCR检测文献方法和本文建立的方法进行验证比较,并用6种常... 目的建立一种准确、快速、特异地检测副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)致病基因的荧光PCR方法。方法用7株已知其致病基因的VP标准菌株和检出菌分别对6种VP致病基因荧光PCR检测文献方法和本文建立的方法进行验证比较,并用6种常见食源性病原菌对新建方法的特异性进行检验。结果所建方法能够同时检测VP的3种溶血素,其检测结果与菌株的溯源结果及普通PCR结果完全一致,且与常见食源性病原菌无交叉反应。结论本文建立的荧光PCR体系能够准确、快速、特异地检测VP的致病基因,具有较好的实用性。 展开更多
关键词 荧光PCR 副溶血性弧菌 食源性致病菌 致病基因 食品安全
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北京口岸进口鲜活海产品中副溶血性弧菌致病性分析 被引量：6
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作者 陈广全 汪琦 +3 位作者 曾静 张惠媛 张昕 张西萌 《中国食品卫生杂志》 2007年第3期245-247,253,共4页
目的调查从北京口岸进口的鲜活海产品中是否存在致病性副溶血性弧菌。方法对2005年从北京口岸进口的鲜活海产品中分离的267株副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的尿素酶活性、神奈川现象和毒性基因(tdh和trh)进行了检测。结果267... 目的调查从北京口岸进口的鲜活海产品中是否存在致病性副溶血性弧菌。方法对2005年从北京口岸进口的鲜活海产品中分离的267株副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的尿素酶活性、神奈川现象和毒性基因(tdh和trh)进行了检测。结果267株副溶血性弧菌中27株尿素酶呈阳性,其中14株菌tdh基因和trh基因呈阳性。tdh基因和trh基因呈阳性的14株菌中有10株菌神奈川现象为阳性,并且全部分离自从加拿大进口的象拔蚌。结论北京口岸进口的鲜活海产品中存在致病性副溶血性弧菌,主要集中在象拔蚌中。应对从加拿大进口的象拔蚌加强监管,防止致病性副溶血性弧菌引起食物中毒发生。 展开更多
关键词 弧菌 副溶血性 海味 毒力 蚌科
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利用分子马达技术检测霍乱弧菌 被引量：6
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作者 张捷 向丽萍 +8 位作者 汪琦 张惠媛 张昕 王宇 顾德周 王佩荣 温铮 陈广全 乐加昌 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期161-164,共4页
利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立了应用在食品检测中的快速检测方法。首先在ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-ompW探针,将待测霍乱弧菌和阴性对照分别与此生物传感器结合,比... 利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立了应用在食品检测中的快速检测方法。首先在ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-ompW探针,将待测霍乱弧菌和阴性对照分别与此生物传感器结合,比较其催化ATP合成30 min后的ATP产生量,进而对霍乱弧菌的DNA进行检测。ATP合成的量可以通过环境H+的量进行测定,H+的量通过F-DHPE所体现的荧光强度大小标定。结果表明,Chro ompW的浓度在0.078 mg/mL,单核增生李斯特菌DNA浓度在40 ng/mL为最适检测条件。通过与实际检测样品的传统检测方法及PCR检测方法对照,具有良好的检测符合性。 展开更多
关键词 F0F1-ATPase分子马达 霍乱弧菌 ompW探针 快速检测
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