期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
PCR假阳性的原因分析及控制措施 被引量：13
1
作者 南文龙 张悦勇 陈义平 《中国动物检疫》 CAS 2015年第8期56-58,共3页
近二十年来,PCR作为一种重要的分子生物学技术,广泛应用于动物疫病的病原学、诊断方法、基因工程疫苗研究、检验检疫、疫病诊断、疫情监测及流行病学调查等动物疫病防控实际工作。如何控制好PCR检测的质量,减少假阳性,一直是研究者普遍... 近二十年来,PCR作为一种重要的分子生物学技术,广泛应用于动物疫病的病原学、诊断方法、基因工程疫苗研究、检验检疫、疫病诊断、疫情监测及流行病学调查等动物疫病防控实际工作。如何控制好PCR检测的质量,减少假阳性,一直是研究者普遍关注的问题。本文分析了PCR假阳性形成的原因,提出预防及控制措施,为促进实验室PCR实践工作提供参考。 展开更多
关键词 PCR 假阳性 原因分析 控制措施
下载PDF
三种不同灭活方法对新城疫病毒血凝和RT-PCR试验结果的影响 被引量：2
2
作者 陈羽琪 南文龙 +3 位作者 秦立得 巩明霞 张悦勇 陈义平 《中国兽药杂志》 北大核心 2016年第9期11-14,共4页
为研究热灭活、甲醛、β-丙内酯（BPL）三种不同灭活方法对新城疫病毒（NDV）血凝和RT-PCR试验结果的影响,将收获的NDV鸡胚尿囊液分别用浓度为0.1%-0.5%的甲醛37℃灭活24 h或4℃灭活48 h、浓度为0.02%-0.2%的BPL 37℃灭活9 h、60℃热灭... 为研究热灭活、甲醛、β-丙内酯（BPL）三种不同灭活方法对新城疫病毒（NDV）血凝和RT-PCR试验结果的影响,将收获的NDV鸡胚尿囊液分别用浓度为0.1%-0.5%的甲醛37℃灭活24 h或4℃灭活48 h、浓度为0.02%-0.2%的BPL 37℃灭活9 h、60℃热灭活30-90 min,并于灭活前后进行血凝试验和RT-PCR检测。结果表明,用0.02%的BPL 37℃灭活9 h或0.1%的甲醛4℃灭活48 h,不影响NDV的血凝价;采用热灭活30 min或0.02%的BPL 37℃灭活9 h,不影响NDV核酸检测。本研究可为相关病原检测以及诊断制品制备过程中灭活方法的选择提供参考。 展开更多
关键词 新城疫病毒 灭活 血凝 RT-PCR
下载PDF
猪伪狂犬病毒纳米PCR检测方法的建立 被引量：6
3
作者 张悦勇 南文龙 +4 位作者 秦立得 巩明霞 吴发兴 单虎 陈义平 《中国动物检疫》 CAS 2017年第3期102-105,共4页
[目的 ]快速灵敏检测猪伪狂犬病毒(PRV)[方法 ]根据PRV g B基因设计特异性引物,建立了PRV纳米PCR检测方法。[结果 ]PRV纳米PCR方法的最低检出限为10拷贝/μL,其敏感性比未添加纳米金的对照PCR提高100倍;建立的纳米PCR与猪细小病毒、猪... [目的 ]快速灵敏检测猪伪狂犬病毒(PRV)[方法 ]根据PRV g B基因设计特异性引物,建立了PRV纳米PCR检测方法。[结果 ]PRV纳米PCR方法的最低检出限为10拷贝/μL,其敏感性比未添加纳米金的对照PCR提高100倍;建立的纳米PCR与猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒等常见猪病毒性病原均无交叉反应。应用纳米PCR和PRV国家标准中的PCR方法,对2014—2016年期间采集自17个省市发病猪场的148份临床样品进行平行检测,PRV纳米PCR的阳性检出率为49.3%(73/148),PRV国标PCR方法的阳性检出率为23.6%(35/148),并且PRV纳米PCR检测为阳性,而PRV国标PCR方法检测为阴性的38份样品,测序结果均确认为PRV阳性。[结论 ]本研究建立的纳米PCR检测方法敏感特异,可用于猪伪狂犬病的病原学检测。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 纳米PCR g B基因
下载PDF
鸡传染性法氏囊病血清抗体间接ELISA检测方法的建立 被引量：4
4
作者 张华 南文龙 +3 位作者 巩明霞 张悦勇 彭大新 陈义平 《中国动物检疫》 CAS 2015年第9期72-76,共5页
为建立可检测鸡传染性法氏囊病血清抗体的间接ELISA检测方法,本研究经RT-PCR扩增IBDV VP2(1nt-708nt)基因片段,并应用p ET28a载体进行原核表达,亲和层析纯化重组蛋白作为包被抗原,建立检测IBDV血清抗体的间接ELISA方法。应用所建方法和I... 为建立可检测鸡传染性法氏囊病血清抗体的间接ELISA检测方法,本研究经RT-PCR扩增IBDV VP2(1nt-708nt)基因片段,并应用p ET28a载体进行原核表达,亲和层析纯化重组蛋白作为包被抗原,建立检测IBDV血清抗体的间接ELISA方法。应用所建方法和IDEXX试剂盒,对采自不同地区的156份鸡血清样品进行平行检测和比较。结果表明,RT-PCR扩增获得708bp的VP2基因片段;含重组表达质粒p ET28a-VP2的大肠杆菌BL21经IPTG诱导后,表达了约27k Da的VP2重组蛋白,表达量约占菌体蛋白的30.1%;建立的间接ELISA检测方法与IDEXX试剂盒比较,其特异性、敏感性和符合率分别达到90.24%、95.65%和94.23%。由此可见,本研究所建立的间接ELISA方法敏感、特异,适用于IBDV血清抗体的检测。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病 VP2 原核表达 间接ELISA
下载PDF
布鲁氏菌5种蛋白的原核表达及其作为间接ELISA检测用抗原的适用性比较 被引量：3
5
作者 王勇 南文龙 +3 位作者 巩明霞 张悦勇 彭大新 陈义平 《中国动物检疫》 CAS 2015年第10期72-75,88,共5页
为比较布鲁氏菌蛋白BP26、OMP16、CP39、SP41、ery C作为间接ELISA检测用抗原的适用性,本研究原核表达并纯化了这5种蛋白,分别以其作为包被抗原,对反应条件进行优化,建立了布鲁氏菌病5种血清抗体间接ELISA检测方法。结果显示,重组蛋白B... 为比较布鲁氏菌蛋白BP26、OMP16、CP39、SP41、ery C作为间接ELISA检测用抗原的适用性,本研究原核表达并纯化了这5种蛋白,分别以其作为包被抗原,对反应条件进行优化,建立了布鲁氏菌病5种血清抗体间接ELISA检测方法。结果显示,重组蛋白BP26、OMP16、CP39、SP41、ery C大小分别约为32 ku、21ku、30 ku、51 ku和38 ku,均可被布鲁氏菌阳性血清所识别,具有良好的免疫反应性。利用5种重组蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA方法,与牛结核、牛病毒性腹泻等常见牛病阳性血清之间无交叉反应;对28份阴、阳性参考血清进行检测,以BP26作为包被抗原建立的间接ELISA P/N值最高。利用建立的方法和IDEXX试剂盒对48份临床血清样品进行平行检测,重组蛋白BP26、OMP16、CP39、SP41、ery C相应ELISA方法的符合率分别为87.5%、87.5%、89.6%、85.4%、79.2%。结合敏感性、特异性等因素综合分析,以重组蛋白BP26作为检测抗原建立的间接ELISA方法效果较为理想,可适用于临床布鲁氏菌感染的检测。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 重组蛋白 间接ELISA 适用性
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部