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中西医结合治疗早期糖尿病肾病的临床观察 被引量：19
1
作者 边芳 赵佩民 +7 位作者 张志深 李艳英 吴凤霞 张红梅 赵庆梅 姬淑君 闫树河 黄金秀 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期335-337,共3页
目的：探讨中西医结合治疗早期糖尿病肾病的疗效。方法：100例患者按随机原则分为两组（各50例），治疗组在采用西药有效控制血糖水平的基础上加用具有益气养阴、活血化瘀功效的中药降糖健肾灵胶囊治疗；对照组则采用单纯西药治疗，两... 目的：探讨中西医结合治疗早期糖尿病肾病的疗效。方法：100例患者按随机原则分为两组（各50例），治疗组在采用西药有效控制血糖水平的基础上加用具有益气养阴、活血化瘀功效的中药降糖健肾灵胶囊治疗；对照组则采用单纯西药治疗，两组均治疗3个月，并同时观察两组治疗前后症状、体征及实验室相关指标。结果：总有效率治疗组为90％，对照组为58％，两组比较有显著性差异（P＜0．05）。24h尿白蛋白排泄量，血糖，尿微量白蛋白，血、尿β2-微球蛋白及血脂，血液流变学等指标治疗组治疗后均较治疗前有显著改善（P＜0．05或P＜0．01）。结论：中西医结合治疗早期糖尿病肾病疗效明显优于单纯西药治疗。 展开更多
关键词 早期 糖尿病肾病 中西医结合治疗
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医院行政后勤岗位绩效考核的实践探索 被引量：23
2
作者 张志深 田立川 马海红 《中国医院管理》 2014年第11期66-67,共2页
医院行政后勤科室作为医院管理的关键岗位,其绩效考核一直是医院实施绩效考核的难点。以岗位管理为导向,以工作标准为考核依据,建立起"岗、责、编、绩、酬对应管理"与"日常KPI综合目标考核"相结合的医院行政后勤岗... 医院行政后勤科室作为医院管理的关键岗位,其绩效考核一直是医院实施绩效考核的难点。以岗位管理为导向,以工作标准为考核依据,建立起"岗、责、编、绩、酬对应管理"与"日常KPI综合目标考核"相结合的医院行政后勤岗位绩效考核体系,为医院内部分配提供了依据,使绩效管理转化为医院发展的内在驱动器。 展开更多
关键词 绩效考核 岗位评价 目标管理 分配制度
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转染survivin反义寡脱氧核苷酸对移植血管内膜增生的影响 被引量：9
3
作者 杨军 胡新华 +2 位作者 刘程伟 张志深 张强 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2006年第1期32-36,共5页
目的研究survivin基因的反义寡脱氧核苷酸（ASODN）对移植血管内膜增生的影响。方法Wistar大鼠60只，建立自体静脉移植模型，术后随机分为5组：对照组，survivin ASODN 50μg组，200μg组，正义对照组，lipoectin＋pluronic组。分别施... 目的研究survivin基因的反义寡脱氧核苷酸（ASODN）对移植血管内膜增生的影响。方法Wistar大鼠60只，建立自体静脉移植模型，术后随机分为5组：对照组，survivin ASODN 50μg组，200μg组，正义对照组，lipoectin＋pluronic组。分别施加不同的处理因素，在移植后1，2周取材。用组织形态学方法比较内膜增生程度；用半定量RT-PCR检测survivin基因的mRNA表达；Western blot检测survivin基因的蛋白产物表达；免疫组化方法检测survivin及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达，TUNEL法检测血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡。结果静脉移植1～2周内膜增生明显，局部转染50μg survivin ASODN后明显抑制内膜增生（P〈0．05），200μg组受抑制程度较50μg组更为显著（P〈0．05）。静脉移植后，对照组survivin的mRNA及蛋白产物表达显著增加，而survivin ASODN组却显著减少（P〈0．05），VSMC中PCNA表达也同时减少，而TUNEL阳性细胞明显增加。结论survivin ASODNs可显著抑制移植静脉的内膜增生；其作用可能是通过抑制survivin的基因及蛋白产物表达，促进VSMC凋亡而实现的。 展开更多
关键词 寡核苷酸类 反义/病理学 内皮 血管/药物作用 静脉移植
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同型半胱氨酸、叶酸及亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T突变在急性肠系膜静脉血栓形成发病中的作用 被引量：11
4
作者 胡新华 杨军 +6 位作者 李志文 张志深 何家安 杨德华 张强 辛世杰 段志泉 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期781-783,共3页
目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)、叶酸(FA)及5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T突变在急性肠系膜静脉血栓形成(AMVT)发病中的作用。方法采用高效液相色谱法测定63例AMVT患者和75例健康对照者血浆Hcy水平,放射免疫法测定血浆FA浓度... 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)、叶酸(FA)及5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T突变在急性肠系膜静脉血栓形成(AMVT)发病中的作用。方法采用高效液相色谱法测定63例AMVT患者和75例健康对照者血浆Hcy水平,放射免疫法测定血浆FA浓度,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法进行MTHFR C677T基因多态性的分析。结果AMVT组与对照组血浆Hcy水平分别为(23.5±8.8)μmol/L和(12.2±6.6)μmol/L,差异有非常显著意义(P<0.01)。Hcy水平与FA呈负相关(AMVT组:r=-0.42,P<0.01;对照组:r=-0.39,P<0.01)。MTHFR C677TTT基因型在AMVT组的分布频率(33.3%)高于对照组(17.3%),经χ2检验差异有统计学意义(χ2=6.31,P<0.05)。结论血浆高Hcy水平和低FA是AMVT形成的危险因素。MTHFR C677T多态性中TT基因型可能是AMVT形成的一个重要遗传风险因子。 展开更多
关键词 急性肠系膜静脉血栓形成 同型半胱氨酸 亚甲基四氢叶酸还原酶 多态性 叶酸
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RNA干扰沉默雷帕霉素靶蛋白基因表达对血管平滑肌细胞增殖活性的影响 被引量：8
5
作者 胡新华 张强 +3 位作者 杨军 杨德华 刘程伟 张志深 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1181-1183,共3页
目的构建靶向雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的RNA干扰表达载体,观察其对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖活性的影响。方法根据大鼠mTOR基因序列设计2个短发夹环RNA (shRNA)序列,化学法合成单链寡核苷酸序列,将cDNA序列插入逆转录病毒载体pLXIN,脂质体... 目的构建靶向雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的RNA干扰表达载体,观察其对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖活性的影响。方法根据大鼠mTOR基因序列设计2个短发夹环RNA (shRNA)序列,化学法合成单链寡核苷酸序列,将cDNA序列插入逆转录病毒载体pLXIN,脂质体介导转染包装细胞PT67后获得mTOR的重组逆转录病毒shRNA表达载体,感染VSMC,Northern blot和Western blot法检测mTOR及其下游底物真核细胞启动子4E结合蛋白(4E-BP1)、p70s6k等表达的变化,流式细胞仪检测VSMC细胞周期的变化,噻唑蓝(MTT)法检测VSMC增殖活性的改变。结果shRNA序列插入pLXIN载体并感染VSMC,证实其能够显著抑制mTOR的mRNA和蛋白产物表达,mTOR通路下游的核糖体蛋白S6激酶(p70s6k)表达相应减少,而4E-BP1的表达却显著增强；感染前VSMC细胞G_1/G_0,期比例为71%,S期为15%,凋亡细胞为2%；转染后72 h,G_1/ G_0期比例为87%,S期为6%,凋亡细胞为6%(P＜0．01)；表明G_0/G_1μ→S过程受阻,VSMC的分裂、增殖受到抑制,凋亡机制启动,更多细胞停滞在G_0/G_1期。结论成功构建靶向mTOR基因的shRNA表达载体,能够明显抑制VSMC分裂、分化和增殖。 展开更多
关键词 雷帕霉素 RNA干扰 血管 平滑肌细胞
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抑制核因子-κB减轻腹主动脉瘤破裂所致多脏器损伤的实验研究 被引量：8
6
作者 杨军 胡新华 +4 位作者 刘程伟 张志深 李铁民 杨德华 张强 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期237-241,共5页
目的研究抑制核因子-κB(NF-κB)激活对大鼠破裂腹主动脉瘤(RAAA)模型多脏器损伤的影响。方法Wistar大鼠45只,随机分为假手术组、实验组和吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)组(每组15只)。实验组和PDTC组均通过大鼠模型模拟腹主动脉瘤破裂... 目的研究抑制核因子-κB(NF-κB)激活对大鼠破裂腹主动脉瘤(RAAA)模型多脏器损伤的影响。方法Wistar大鼠45只,随机分为假手术组、实验组和吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)组(每组15只)。实验组和PDTC组均通过大鼠模型模拟腹主动脉瘤破裂的病理生理过程包括失血性休克期1h、腹主动脉阻断45min、再灌注2h。实验组和PDTC组在失血休克期分别静脉给予生理盐水或PDTC50mg/kg。取肺、小肠组织,观察组织形态学改变,测定肺组织湿/干重比、髓过氧化物酶(MPO)及小肠微循环血流量的变化。逆转录多聚酶链反应检测肺、小肠NF-κB p65和细胞间黏附分子(ICAM)-1的mRNA表达,免疫组织化学和Western印迹检测NF-κB p65、ICAM-1的蛋白产物表达。结果实验组中,肺PMN计数(39个±8个)/HP,湿/干重比(7.6±1.2),与假手术组(11个±3个/HP,3.3±0.8)比较差异均有统计学意义(P<0.01);小肠微循环血流量显著减少与假手术组(0.71ml.min-1.g-1±0.11ml.min-1.g-1)比较差异有统计学意义(P<0.01);实验组肺及小肠NF-κB p65和ICAM-1的mRNA及蛋白产物表达均明显增强;应用PDTC干预后,小肠微循环血流量(0.64ml.min-1.g-1±0.06ml.min-1.g-1)与实验组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论抑制NF-κB激活可以减轻大鼠RAAA模型多脏器功能损伤,其作用机制可能是通过抑制ICAM-1基因及其蛋白产物的表达,减少中性粒细胞的作用而实现的。 展开更多
关键词 核因子-κB 主动脉瘤 腹 多脏器功能衰竭 黏附分子-1
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急性肠系膜上静脉血栓形成的诊治分析 被引量：9
7
作者 张志深 胡新华 +1 位作者 杨军 张强 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期543-545,F0003,共4页
回顾性分析我科收治的46例急性肠系膜上静脉血栓形成(ASMVT)临床资料,探讨ASMVT的临床特点、诊断和治疗。ASMVT的早期症状与体征不符,极易误诊。本组手术治疗24例,保守治疗22例,死亡7例,死亡率为15%。B超、CT及肠系膜血管造影是诊断ASMV... 回顾性分析我科收治的46例急性肠系膜上静脉血栓形成(ASMVT)临床资料,探讨ASMVT的临床特点、诊断和治疗。ASMVT的早期症状与体征不符,极易误诊。本组手术治疗24例,保守治疗22例,死亡7例,死亡率为15%。B超、CT及肠系膜血管造影是诊断ASMVT的主要手段。早期无腹膜炎体征的病人可行抗凝、溶栓保守治疗;已出现腹膜炎体征,呕吐物、排泄物为血性或腹穿抽出血性渗出物是剖腹探查指征。术中、术后均应采取系统的抗凝、溶栓治疗。 展开更多
关键词 肠系膜上静脉 血栓形成 手术 抗凝 溶栓
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氮化硅泡沫陶瓷筋无包套热等静压致密化过程 被引量：5
8
作者 张勇 林均品 +3 位作者 陈国良 李冠兴 任永刚 张志深 《材料工程》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第2期30-32,共3页
通过无包套热等静压（ＨＩＰ）对氮化硅泡沫陶瓷的处理，发现ＨＩＰ有利于氮化硅泡沫陶瓷筋的致密化和筋显微硬度及弹性模量的提高，在略减少连通孔隙率的条件下，大幅度增加氮化硅泡沫陶瓷的整体抗压强度。Ｘ射线衍射结果表明，ＨＩＰ... 通过无包套热等静压（ＨＩＰ）对氮化硅泡沫陶瓷的处理，发现ＨＩＰ有利于氮化硅泡沫陶瓷筋的致密化和筋显微硬度及弹性模量的提高，在略减少连通孔隙率的条件下，大幅度增加氮化硅泡沫陶瓷的整体抗压强度。Ｘ射线衍射结果表明，ＨＩＰ处理促成了无压烧结残余α－Ｓｉ３Ｎ４向β－Ｓｉ３Ｎ４的转变。理论分析证明，致密化的主要机制是，筋内孔隙通过空位在ＨＩＰ压力的作用下向筋表面迁移而收缩或消失。 展开更多
关键词 无包套HIP 泡沫陶瓷 氮化硅 致密化过程
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反义寡核苷酸抑制Survivin基因表达对移植静脉内膜增生的影响 被引量：8
9
作者 杨军 胡新华 +3 位作者 张志深 刘程伟 陈哲 张强 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1516-1518,共3页
目的研究反义寡脱氧核苷酸(ASODN)抑制Survivin基因表达对移植静脉内膜增生的抑制作用。方法 Wistar大鼠60只,建立自体静脉移植模型,术后随机分为:对照组、Survivin A- SODN 50、200μg组、正义对照组、Lipofectin+pluronic等五个组,施... 目的研究反义寡脱氧核苷酸(ASODN)抑制Survivin基因表达对移植静脉内膜增生的抑制作用。方法 Wistar大鼠60只,建立自体静脉移植模型,术后随机分为:对照组、Survivin A- SODN 50、200μg组、正义对照组、Lipofectin+pluronic等五个组,施加不同的处理因素,在移植后1、 2周取材。组织形态学方法比较内膜增生程度,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Survivin基因的mRNA表达,Western blot检测Survivin基因的蛋白产物表达,免疫组织化学方法检测Survivin 及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,脱氧核苷酸转移酶末端标记法(TUNEL)检测血管平滑肌细胞 (VSMC)凋亡的变化。结果移植后1、2周内膜增生明显,局部转染50μg Survivin ASODN组内膜增生明显受抑制(P<0．05),200μg组受抑制程度更为明显(P<0．05);与对照组相比,Survivin A- SODN组Survivin的mRNA及蛋白产物表达显著减少(P<0．05),PCNA阳性表达同时减少,而 TUNEL阳性细胞却明显增加。结论 Survivin ASODN可显著抑制移植静脉的内膜增生,其作用可能是通过抑制Survivin基因及其蛋白产物表达,从而抑制VSMC增殖、促进其凋亡而实现的。 展开更多
关键词 静脉 SURVIVIN 寡脱氧核苷酸 基因表达 内膜增生 反义寡核苷酸
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急性肠系膜静脉血栓形成与MTHFR基因C677T突变的相关性研究 被引量：7
10
作者 李志文 胡新华 +8 位作者 杨军 张强 何家安 范玥尧 张志深 刘程伟 杨德华 辛世杰 段志泉 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2008年第12期1192-1195,共4页
目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T突变在急性肠系膜静脉血栓形成(AMVT)发病中的意义。方法采用高效液相色谱法测定63例AMVT患者和128名健康对照者血浆的同型半胱氨酸(Hcy)水平,放射免疫法测定血浆叶酸浓度;应用聚合酶链反... 目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T突变在急性肠系膜静脉血栓形成(AMVT)发病中的意义。方法采用高效液相色谱法测定63例AMVT患者和128名健康对照者血浆的同型半胱氨酸(Hcy)水平,放射免疫法测定血浆叶酸浓度;应用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性方法进行MTHFRC677T基因多态性分析,并进行基因型及等位基因频率的计数。结果AMVT组和对照组血浆Hcy水平分别为(23.5±8.8)μmol/L和(12.7±6.9)μmol/L,差异有统计学意义(P<0.01)。Hcy水平与叶酸呈负相关(AMVT组:r=-0.42,P<0.01;对照组:r=-0.39,P<0.01)。MTHFR C677TTT基因型在AMVT组的分布频率为33.3%,高于对照组的17.2%,差异有统计学意义(χ2=6.31,P<0.05)。结论血浆Hcy水平升高是AMVT形成的危险因素之一。MTHFR C677T多态性中TT基因型可能是AMVT形成的一个重要遗传风险因子。 展开更多
关键词 肠系膜血管闭塞/外科学 静脉血栓形成 肠系膜静脉 亚甲基四氢叶酸还原酶 多态性
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弘扬优秀文化传统 夯实中华民族共有精神家园的文化根基 被引量：5
11
作者 张志深 翟广瀛 《河北省社会主义学院学报》 2008年第3期45-46,共2页
民族的共有精神家园,是民族的凝聚力和生命力的根本所在。中国传统文化在构建中华民族共有精神家园中有着凝聚功能、激励功能和教化功能。筑牢中华民族共有精神家园的文化根基,就要坚持继承和弘扬中华民族的优秀文化传统,就要坚持文化... 民族的共有精神家园,是民族的凝聚力和生命力的根本所在。中国传统文化在构建中华民族共有精神家园中有着凝聚功能、激励功能和教化功能。筑牢中华民族共有精神家园的文化根基,就要坚持继承和弘扬中华民族的优秀文化传统,就要坚持文化发展方向、体现时代进步要求,就要坚持兼收并蓄,使中华文化具有更为鲜活的品质。 展开更多
关键词 优秀文化传统 中华民族 精神家园 根基
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碳化钛泡沫陶瓷的筋内组织 被引量：4
12
作者 张勇 林均品 +4 位作者 陈国良 任永刚 李冠兴 张世忠 张志深 《材料科学与工艺》 EI CAS CSCD 北大核心 1996年第2期62-69,共8页
本文研究了碳化钛泡沫陶瓷的筋断面组织，发现高真空烧结使筋结构网状化，钼的加入有利于筋的致密化，但不如降低烧结真空度致密化效果明显。
关键词 碳化钛 泡沫陶瓷 陶瓷材料 筋内组织
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肠道病毒71型感染致手足口病47例诊治体会 被引量：6
13
作者 孙秀荣 张志深 +1 位作者 于燕民 宫祥峰 《疑难病杂志》 CAS 2011年第4期310-311,共2页
肠道病毒71型（EV71）感染及其引发的手足口病近年多暴发疫情,导致部分婴幼儿伤残甚至死亡。致死原因主要为脑干脑炎及神经源性肺水肿。2010年5—10月我院收治EV71型病毒感染致手足口病患儿47例,治疗体会如下。
关键词 肠道病毒71型 手足口病 诊断 治疗
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缺氧诱导因子-1α及其相关基因在腹主动脉瘤中的表达及意义 被引量：5
14
作者 胡新华 杨军 +2 位作者 刘程伟 张志深 张强 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第24期1509-1512,共4页
目的研究缺氧诱导因子(HIF)-1α信号转导通路及其相关基因在腹主动脉瘤(AAA)中的表达,探讨AAA的发病机制。方法选取AAA标本22例,以5例腹主动脉(NA)标本作对照。采用Northern杂交、Western蛋白印迹及免疫组织化学方法检测HIF-1α的mRNA... 目的研究缺氧诱导因子(HIF)-1α信号转导通路及其相关基因在腹主动脉瘤(AAA)中的表达,探讨AAA的发病机制。方法选取AAA标本22例,以5例腹主动脉(NA)标本作对照。采用Northern杂交、Western蛋白印迹及免疫组织化学方法检测HIF-1α的mRNA及蛋白产物表达,Western蛋白印迹或免疫组织化学方法检测血管内皮生长因子(VEGF)及半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3的表达,免疫组织化学抗CD34染色法检测微血管密度(MVD)。结果 AAA组织中HIF-1α的mRNA及蛋白产物表达明显高于NA(P<0.01);caspase-3和VEGF表达亦明显增强(P<0.01),与HIF-1α表达呈显著正相关(r值分别为0.783和0.693,P<0.01)。HIF-1α表达主要分布在AAA中层血管平滑肌细胞及外膜处,与caspase-3和VEGF的分布部位基本一致。AAA中微血管密度明显增加(P<0.01))。结论HIF-1α在AAA疾病进展过程中可能发挥重要作用,其作用机制可能是通过调控VEGF或caspase-3的表达而实现的。 展开更多
关键词 表达 HIF-1α AAA 腹主动脉瘤 caspase-3 相关基因 免疫组织化学方法 印迹 RNA 标本
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反义寡脱氧核苷酸抑制survivin基因表达对移植静脉内膜增生的影响 被引量：3
15
作者 杨军 胡新华 +2 位作者 刘程伟 张志深 张强 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2006年第6期647-652,共6页
目的探讨生存素(survivin)的反义寡脱氧核苷酸(ASODNs)抑制survivin基因表达对移植静脉内膜增生的抑制作用。方法Wistar大鼠60只,建立自体静脉移植模型,然后随机均分为对照组、survivin ASODNs50μg和200μg组、正义寡脱氧核苷酸组(ODNs... 目的探讨生存素(survivin)的反义寡脱氧核苷酸(ASODNs)抑制survivin基因表达对移植静脉内膜增生的抑制作用。方法Wistar大鼠60只,建立自体静脉移植模型,然后随机均分为对照组、survivin ASODNs50μg和200μg组、正义寡脱氧核苷酸组(ODNs组)及Lipofectin+pluronic组共5组,施加不同的处理因素,分别在静脉移植术后7和14d取材。组织形态学方法比较移植静脉内膜增生程度,半定量RT-PCR法检测survivin基因mRNA的表达,Western blot检测survivin基因的蛋白产物表达,免疫组化法检测survivin及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,TUNEL检测血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的变化。结果对照组、ODNs组和Lipofectin+plu-ronic组移植术后7d、14d移植静脉内膜增生明显,但3组间差异无统计学意义(P>0.05),局部转染50μg survivinASODNs能明显抑制其内膜增生(P<0.05),200μg组受抑制程度更明显(P<0.05)。对照组survivin mRNA及蛋白产物表达显著增加,而survivin ASODNs组却显著减少(P<0.05),VSMC中PCNA表达也同时减少(P<0.05),而VSMC凋亡明显增加(P<0.05)。结论survivin ASODNs可显著抑制移植静脉内膜增生,其作用可能是通过抑制survivin的基因及蛋白产物表达,从而减轻VSMC增殖,促进其凋亡而实现的。 展开更多
关键词 内膜增生 生存素 寡脱氧核苷酸
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辨证论治配合背俞穴拔罐放血治疗面部痤疮52例 被引量：5
16
作者 马小允 张志深 张秋雨 《现代中西医结合杂志》 CAS 2011年第21期2661-2662,共2页
面部痤疮为皮肤科常见病,皮疹以丘疹性皮损为主,常反复发作。笔者2008年1月—2010年1月采用葛根芩连汤加味辨证论治配合背俞穴拔罐放血治疗面部痤疮患者52例,取得较好疗效,现报道如下。
关键词 面部痤疮 葛根芩连汤 辨证论治 背俞穴 拔罐放血
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RNA干扰沉默哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白基因表达对大鼠血管平滑肌细胞增殖活性及移植血管内膜增生的影响 被引量：3
17
作者 胡新华 张强 +3 位作者 杨军 刘程伟 张志深 杨德华 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期58-62,共5页
目的构建靶向哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因的 RNA 干扰表达载体,研究其对离体培养的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖活性及大鼠自体移植静脉内膜增生的影响。方法设计并合成针对大鼠 mTOR 基因的短发夹环 RNA(shRNA)序列和对照序列,插... 目的构建靶向哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因的 RNA 干扰表达载体,研究其对离体培养的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖活性及大鼠自体移植静脉内膜增生的影响。方法设计并合成针对大鼠 mTOR 基因的短发夹环 RNA(shRNA)序列和对照序列,插入逆转录病毒载体pLXIN,转染包装细胞获得重组的病毒载体。感染 VSMC,Northern 杂交和免疫蛋白印迹检测 mTOR及其下游底物4E-BP1和 p70s6k 表达的变化,流式细胞仪检测 VSMC 增殖周期的变化,MTT 法检测VSMC 增殖活性的改变。建立大鼠自体静脉移植模型54只,随机分成转基因组、对照组、空白对照组,术后7 d、14 d、28 d 取材,常规 HE 染色、免疫组织化学染色、免疫蛋白印迹检测 mTOR 表达,TUNEL 法检测 VSMC 凋亡。结果 shRNA 序列插入 pLXIN 载体,成功包装并且感染 VSMC,证实针对mTOR 基因的 pLXIN-shRNA 能够显著抑制 mTOR 表达,mTOR 通路下游的 p70s6k 表达减少,而4E-BP1的表达却显著增加;被感染 VSMC 的分裂、增殖过程受阻,更多细胞停滞在 G_0/G_1期;局部感染移植血管能够显著减少 mTOR 基因的 mRNA 及蛋白质产物表达(均 P<0.01),内膜增生程度亦较其他组明显减轻(P<0.01),凋亡细胞增多(P<0.01)。结论成功构建靶向 mTOR 基因的 RNA 干扰表达载体,沉默 mTOR 基因表达能够抑制 VSMC 分裂、分化和增殖,减轻内膜增生,增加 VSMC 凋亡。 展开更多
关键词 RNA 基因表达 肌 平滑 血管 血管内膜 大鼠
原文传递
雷帕霉素靶蛋白反义RNA真核表达载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达 被引量：5
18
作者 胡新华 杨军 +3 位作者 张志深 刘程伟 李铁民 张强 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期537-539,F0003,共4页
目的构建雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的反义RNA真核表达载体,观察其对血管平滑肌细胞(VSMC)功能的影响。方法提取人VSMC总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增 mTOR基因cDNA序列,经pGEM-T载体克隆后双酶切,将cDNA序列反向插入绿色荧光蛋白表... 目的构建雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的反义RNA真核表达载体,观察其对血管平滑肌细胞(VSMC)功能的影响。方法提取人VSMC总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增 mTOR基因cDNA序列,经pGEM-T载体克隆后双酶切,将cDNA序列反向插入绿色荧光蛋白表达载体pEGP-C1,转染VSMC,Western blot法检测反义表达载体对mTOR蛋白表达的影响,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果经RT-PCR获得664 bp产物,T载体克隆后,酶切确定该片段为 mTOR基因cDNA,进而构建反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-mTOR,测序证明序列正确后转染 VSMC,证实其能够显著抑制mTOR蛋白产物表达,转染72 h的mTOR蛋白产物表达抑制率达 82％,S期细胞由15％降低为7％,凋亡细胞增至9％。VSMC增殖过程在G1／G0期→S期受阻。结论成功构建mTOR基因的反义RNA真核表达载体。 展开更多
关键词 雷帕霉素 表达载体 血管 平滑肌细胞
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金属靶材料密度对抗弹性能影响的实验研究 被引量：3
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作者 孙庚辰 董家祥 +2 位作者 张志深 朱清敏 郭瑞萍 《兵工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1993年第4期75-78,共4页
述及了金属靶材的密度对其抗弹性能的影响所进行的实验研究。用100滑模拟钢弹和钨合金弹撞击钢、铝、铜、钛、铅、钨6种金属靶,实验结果表明长杆穿甲弹的侵彻深度与金属靶材料密度的0.36次幂成反比。建立了一个适合于长杆弹侵彻均质金... 述及了金属靶材的密度对其抗弹性能的影响所进行的实验研究。用100滑模拟钢弹和钨合金弹撞击钢、铝、铜、钛、铅、钨6种金属靶,实验结果表明长杆穿甲弹的侵彻深度与金属靶材料密度的0.36次幂成反比。建立了一个适合于长杆弹侵彻均质金属靶使用的关系式p/D_p=1.79(ρ_P/ρ_t)^(0.69)(ρ_tV^2/Y_t)^(1/3) 其中V是子弹的撞靶速度,ρ_p和ρ_t是弹材和靶材的密度,Y_t是靶材的动态屈服强度,P为侵彻深度,D_p为弹径。 展开更多
关键词 碰撞 穿甲 材料 金属靶 抗弹性能
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反义mTOR逆转录病毒载体对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用 被引量：4
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作者 胡新华 张强 +2 位作者 杨军 刘程伟 张志深 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2006年第12期912-916,共5页
目的观察反义雷帕霉素靶蛋白(mTOR)逆转录病毒载体对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖活性的影响。方法采用脂质体介导转染包装细胞后构建mTOR的反义重组逆转录病毒载体(pLX IN-AmTOR)感染VSMC,检测mTOR及其下游底物包括真核细胞启动子4 E结合... 目的观察反义雷帕霉素靶蛋白(mTOR)逆转录病毒载体对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖活性的影响。方法采用脂质体介导转染包装细胞后构建mTOR的反义重组逆转录病毒载体(pLX IN-AmTOR)感染VSMC,检测mTOR及其下游底物包括真核细胞启动子4 E结合蛋白1(4 E-BP 1)和核糖体蛋白S6激酶(p 7 0 S6 k)的表达变化,以及VSMC细胞增殖周期和增殖活性的改变。结果反义逆转录病毒载体转染PT6 7细胞后感染VSMC,能显著抑制mTOR的mRNA和蛋白产物表达,mTOR通路下游p 7 0 S6 k表达相应减少,而4 E-BP 1的表达却显著增强;感染后的VSMC的分裂、增殖过程受阻,更多细胞停滞在G1期。结论成功构建反义mTOR逆转录病毒载体;感染VSMC后能明显抑制VSMC的分裂、分化和增殖。 展开更多
关键词 雷帕霉素靶蛋白 肌 平滑 血管/病理学 细胞分裂
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