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中国对虾中抗菌短肽的分离纯化与功能分析 被引量:6
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作者 安贤惠 梁建国 +6 位作者 李卫国 徐春花 吕毅 王旭 董靖 克云 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1012-1016,共5页
以水产病害的病原菌为目标菌,从中国对虾(Penaeus chinesis)体液中分离筛选抗菌肽,通过Sephadex G-50、RP-HPLC等分离纯化技术,得到一种抑制水产病原菌的抗菌肽PC-V-2。经初步鉴定,该抗菌肽具有广谱抗性,不仅抗鲁克氏耶尔森氏菌(Yersini... 以水产病害的病原菌为目标菌,从中国对虾(Penaeus chinesis)体液中分离筛选抗菌肽,通过Sephadex G-50、RP-HPLC等分离纯化技术,得到一种抑制水产病原菌的抗菌肽PC-V-2。经初步鉴定,该抗菌肽具有广谱抗性,不仅抗鲁克氏耶尔森氏菌(Yersinia ruckeri),而且对金黄色葡萄球菌(Staphyloccus aureus)、枯草杆菌(Bacillus subttilis)等革兰氏阳性菌,大肠杆菌(Escherichia coli)等革兰氏阴性菌和白色念珠菌(Candida albicans)等真菌也有较强的抗性。另外,该抗菌肽还有一定的抑制凝血的活性,但没有检测到溶血和丝氨酸蛋白酶抑制活性。经MALDI-TOF质谱分析,其分子量为1 848 D。 展开更多
关键词 中国对虾 抗菌肽 分离纯化 鲁克氏耶尔森氏菌
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鲁西南地区淡色库蚊抗药性评价 被引量:9
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作者 宋晓 程鹏 +9 位作者 王海防 郭秀霞 吕晔源 刘宏美 刘丽娟 赵玉强 寇景轩 王怀位 公茂庆 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期69-72,共4页
目的掌握鲁西南地区现场淡色库蚊对常用化学杀虫剂的抗药性,为制定合理有效的蚊虫防治措施提供参考。方法采用WHO生物测试法与药物复配法,2018年6-9月测试山东省西南地区济宁市、菏泽市、枣庄市淡色库蚊幼虫对氯氰菊酯、溴氰菊酯、敌敌... 目的掌握鲁西南地区现场淡色库蚊对常用化学杀虫剂的抗药性,为制定合理有效的蚊虫防治措施提供参考。方法采用WHO生物测试法与药物复配法,2018年6-9月测试山东省西南地区济宁市、菏泽市、枣庄市淡色库蚊幼虫对氯氰菊酯、溴氰菊酯、敌敌畏(DDVP)、残杀威、三氯杀虫酯5种化学杀虫剂的抗性,以及杀虫剂混合后的共毒系数。结果3个地区淡色库蚊对氯氰菊酯、溴氰菊酯、DDVP、残杀威、三氯杀虫酯的抗性倍数分别为144.43~557.54、118.17~445.33、6.44~19.00、2.37~8.10、0.88~2.98,除济宁与菏泽地区淡色库蚊对DDVP的抗性差异无统计学意义(P>0.05)外,其他地区间差异均有统计学意义(P均<0.05)。氯氰菊酯+DDVP、氯氰菊酯+残杀威、DDVP+三氯杀虫酯、残杀威+三氯杀虫酯复配后共毒系数分别为199.58~456.95、190.56~292.37、123.32~319.24、192.31~367.32,DDVP+残杀威复配效果不佳(共毒系数:99.87~108.36)。结论经过几十年的化学防治,鲁西南地区淡色库蚊对常用化学杀虫剂均表现出不同程度的抗性;应采取综合防治措施控制蚊虫孳生,以延缓抗药性的发展。 展开更多
关键词 淡色库蚊 化学杀虫剂 氯氰菊酯 溴氰菊酯 DDVP 残杀威 三氯杀虫酯 杀虫剂复配 抗药性
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中国对虾PC-Ⅲ系列抗菌肽的分离纯化及活性 被引量:6
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作者 安贤惠 吕毅 +5 位作者 李卫国 梁建国 徐春花 董靖 赖仞 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期410-415,共6页
以我国主要经济海产品中国对虾(Penuschinensis)为研究对象,通过SephadexG50、RPHPLC等技术分离纯化到PCⅢ系列中国对虾天然抗菌肽。经初步鉴定,该系列抗菌肽对革兰氏阴性和革兰氏阳性菌都表现出程度不一的抑菌活性,且不同程度地影响小... 以我国主要经济海产品中国对虾(Penuschinensis)为研究对象,通过SephadexG50、RPHPLC等技术分离纯化到PCⅢ系列中国对虾天然抗菌肽。经初步鉴定,该系列抗菌肽对革兰氏阴性和革兰氏阳性菌都表现出程度不一的抑菌活性,且不同程度地影响小白鼠离体回肠肌收缩,但无丝氨酸蛋白酶抑制剂活性。用MALDITOF质谱对样品进行分析,检测到分子量分别为1071Da和1311Da的两种抗菌肽。这些抗菌肽对对虾抵御微生物的侵袭具有重要的作用。 展开更多
关键词 中国对虾 抗菌肽 分离纯化
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山东省东平湖地区2021年淡色库蚊抗药性调查 被引量:7
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作者 吕文祥 程鹏 +7 位作者 彭荟 王海洋 王海防 郭秀霞 刘宏美 公茂庆 刘丽娟 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 北大核心 2022年第1期104-107,共4页
目的检测山东省东平湖地区淡色库蚊幼虫与成蚊对常用杀虫剂的抗性情况,为合理使用杀虫剂防控蚊虫提供依据。方法2021年7月7日从东平湖地区采集淡色库蚊野外幼虫带回实验室饲养至F1代,按照世界卫生组织生物测定法,幼虫测试采用浸渍法,计... 目的检测山东省东平湖地区淡色库蚊幼虫与成蚊对常用杀虫剂的抗性情况,为合理使用杀虫剂防控蚊虫提供依据。方法2021年7月7日从东平湖地区采集淡色库蚊野外幼虫带回实验室饲养至F1代,按照世界卫生组织生物测定法,幼虫测试采用浸渍法,计算半数致死浓度和回归方程;成蚊测试采用接触筒法测定抗性水平,并将结果录入Excel 2019软件进行统计分析。结果2021年,东平湖地区淡色库蚊幼虫对敌敌畏、残杀威、溴氰菊酯、氯氰菊酯、苏云金杆菌以色列亚种(Bti)的抗性倍数分别为8.55、6.52、180.00、100.50和1.50倍,对敌敌畏和残杀威表现为低度抗性,对溴氰菊酯和氯氰菊酯表现为高度抗性,对Bti表现为敏感;将淡色库蚊成蚊暴露于0.025%溴氰菊酯、0.025%高效氯氰菊酯、5%马拉硫磷和0.01%残杀威各1 h,24 h死亡率分别为16.00%、20.00%、100%和88.00%,成蚊对溴氰菊酯和高效氯氰菊酯呈高度抗性,对马拉硫磷和残杀威呈敏感和可疑抗性。结论山东省东平湖地区淡色库蚊对常用杀虫剂均产生了不同程度的抗药性,应当加强该地区蚊虫抗药性监测,采取合理的治理手段,延缓蚊虫抗药性发展,提高防控效果。 展开更多
关键词 淡色库蚊 抗药性 防治方法
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无指盘臭蛙皮肤分泌液中促胰岛素释放肽的分离纯化与活性初步研究 被引量:6
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作者 李宗杰 李建许 +5 位作者 王梅玉 吕毅 克云 洪晓月 赖仞 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期144-148,共5页
通过葡聚糖Sephadex G-50凝胶过滤和反相高压液相层析等手段,对无指盘臭蛙皮肤分泌液进行分离纯化,得到了高纯度的多肽分离峰。分别采用体外培养的大鼠胰岛和INS-1胰岛β细胞系检测分离峰的促胰岛素释放活性。结果表明,所得多肽既可促... 通过葡聚糖Sephadex G-50凝胶过滤和反相高压液相层析等手段,对无指盘臭蛙皮肤分泌液进行分离纯化,得到了高纯度的多肽分离峰。分别采用体外培养的大鼠胰岛和INS-1胰岛β细胞系检测分离峰的促胰岛素释放活性。结果表明,所得多肽既可促进原代培养的大鼠胰岛分泌胰岛素,又可以促进INS-1细胞胰岛素释放;运用飞行质谱仪测定该促胰岛素释放肽的相对分子质量,其大小为1 868。此外,利用鸡胚尿囊绒毛膜(CAM)体内模型检测,发现该多肽还具有显著的抑制血管生成活性。 展开更多
关键词 无指盘臭蛙 促胰岛素释放肽 胰岛素分泌 糖尿病
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山东省南水北调沿线蚊类密度及流行性乙型脑炎病毒自然感染状况研究 被引量:6
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作者 杨培培 李文娟 +7 位作者 程鹏 郭秀霞 王海防 王怀位 寇景轩 刘丽娟 公茂庆 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2016年第3期232-234,240,共4页
目的在山东省南水北调沿线选择微山韩庄、任城太白湖和泰安东平湖3个地区,调查蚊类密度消长及流行性乙型脑炎(乙脑)病毒自然感染状况,为当地蚊虫控制与乙脑防治工作提供科学依据。方法 2015年6-9月,采用人帐法在上述3个地区采集蚊虫标本... 目的在山东省南水北调沿线选择微山韩庄、任城太白湖和泰安东平湖3个地区,调查蚊类密度消长及流行性乙型脑炎(乙脑)病毒自然感染状况,为当地蚊虫控制与乙脑防治工作提供科学依据。方法 2015年6-9月,采用人帐法在上述3个地区采集蚊虫标本,分类计数;将蚊虫标本研磨后提取核酸,采用实时荧光定量PCR法检测乙脑病毒核酸。结果 2015年6-9月在3个监测点共捕获蚊虫6属17种16 711只,以三带喙库蚊(39.55%)和淡色库蚊(38.69%)为优势蚊种;蚊虫密度随季节消长均以8月最高。采用实时荧光定量PCR法,在三带喙库蚊、淡色库蚊、黄色轲蚊中检测到乙脑病毒核酸,批阳性率分别为22.96%、7.58%和16.67%。结论山东省南水北调沿线蚊虫密度依然较高,且多个蚊种中检测到乙脑病毒核酸,提示该地区存在乙脑病毒感染风险。 展开更多
关键词 蚊虫 季节消长 流行性乙型脑炎病毒 实时荧光定量PCR
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球抱白僵菌对中华按蚊的致病力测定 被引量:6
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作者 刘丽娟 郭秀霞 +5 位作者 王利磊 王海防 程鹏 刘宏美 王怀位 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第12期1420-1422,1428,共4页
目的测定球孢白僵菌对不同齡期和不同生境中华按蚊幼虫的致病力,探索球孢白僵菌对中华按蚊的生物防治潜能。方法中华按蚊按龄期和生境分为不同的处理组,采用球孢白僵菌孢子悬浮液处理,记录各处理组中华按蚊的累计死亡数,计算致死中时LTs... 目的测定球孢白僵菌对不同齡期和不同生境中华按蚊幼虫的致病力,探索球孢白僵菌对中华按蚊的生物防治潜能。方法中华按蚊按龄期和生境分为不同的处理组,采用球孢白僵菌孢子悬浮液处理,记录各处理组中华按蚊的累计死亡数,计算致死中时LTso。结果中华按蚊龄期越低,对球孢白傴菌的敏感性越高,处理10 d后,I.I、I龄幼虫死亡率达100%,与N齡幼虫和蛹死亡率比较差异有统计学意义(F=372.28,df=19,P<0.05)。与野外采集蚊虫相比,室内饲养中华按蚊死亡高峰期提前2~3d,不同栖境(BH、WS、DP、SX、M)按蚊幼虫的致死中时LTso分别为3.07.3.73.2.89.4.74.2.52 d,各组间幼虫累计死亡率比较差异有统计学意义(F=30.39,df=19,P<0.05)。结论实验室条件下的球孢白僵菌对中华按蚊各品系均有较强的致病力,有望用于中华按蚊的生物防治。 展开更多
关键词 中华按蚊 球抱白僵菌 致病力
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中华按蚊偏嗜血行为的实验观察 被引量:6
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作者 王海防 王怀位 +4 位作者 程鹏 郭秀霞 刘丽娟 公茂庆 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期459-461,共3页
目的观察人饵或牛饵诱捕的野外中华按蚊经实验室传代后嗜血行为的变化。方法在山东省单县水稻种植区分别利用人饵和牛饵诱捕大量未吸血的中华按蚊雌蚊,带回实验室分别标记为人饵组和牛饵组,用小白鼠血常规饲养传代;在一大型温室内应用标... 目的观察人饵或牛饵诱捕的野外中华按蚊经实验室传代后嗜血行为的变化。方法在山东省单县水稻种植区分别利用人饵和牛饵诱捕大量未吸血的中华按蚊雌蚊,带回实验室分别标记为人饵组和牛饵组,用小白鼠血常规饲养传代;在一大型温室内应用标记-释放-重捕法对两组蚊虫的亲代、子1代、子25代的嗜血性分别进行实验观察。结果 3次检测的重捕率分别为39.02%(1 332/3 414)、37.97%(2 583/6 803)和30.55%(1 523/4 986)。中华按蚊野外种群人饵组和牛饵组亲代仍在人饵帐和牛饵帐被捕获的比例分别为54.07%(339/627)和58.01%(409/705)(χ2=19.42,P﹤0.01);子1代成蚊两组比例分别为51.03%(669/1 311)和55.11%(701/1 272)(χ2=9.75,P﹤0.01);子25代成蚊两组比例分别为51.98%(342/658)和52.37%(453/865)(χ2=2.82,P﹥0.05)。结论中华按蚊偏嗜人血或牛血的行为经实验室传25代后可能发生改变。 展开更多
关键词 中华按蚊 嗜血性 帐诱法 标记-释放-重捕法
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蚊虫肠道共生菌功能的研究进展
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作者 辉红 《热带病与寄生虫学》 CAS 2024年第1期61-64,共4页
蚊虫肠道共生菌是指在蚊虫肠道内与其长期共同生活、维持肠道微生态稳定的菌群,其参与调控蚊虫生理功能的多个方面。本文简要综述了肠道共生菌的影响因素和其在蚊虫营养、免疫、繁殖以及抗药性等方面的功能,为进一步的研究提供参考。
关键词 蚊虫 肠道 共生菌 功能
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基于分子证据探讨松材线虫在中国的传播途径 被引量:6
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作者 孙捷 杨寿运 +3 位作者 崔春亮 林茂松 克云 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期55-60,共6页
采用11个随机引物对来自中国最早发病的5个省和日本疫区的松材线虫共10个居群进行遗传多样性分析和系统发育分析,拟从分子水平探讨松材线虫病在中国蔓延的可能途径。结果表明:中国松材线虫居群间 存在明显的遗传差异,遗传距离为0.06... 采用11个随机引物对来自中国最早发病的5个省和日本疫区的松材线虫共10个居群进行遗传多样性分析和系统发育分析,拟从分子水平探讨松材线虫病在中国蔓延的可能途径。结果表明:中国松材线虫居群间 存在明显的遗传差异,遗传距离为0.066—0.262;除了安徽明光的居群自成一支外,其他居群均与南京居群聚成一支,其中安徽皖南和浙江岱山居群与南京中山陵居群遗传距离最近,为0.066;安徽明光居群与南京居群的遗传距离最大,为0.262。表明发生在安徽皖南和浙江岱山等地的松材线虫病可能是由最早发病的南京地区扩散的;而发生在毗邻南京的安徽明光的松材线虫病不是由南京地区扩散的。该结果揭示,松木制品的调运等人为远距离传播是松材线虫在我国蔓延的主要途径之一。 展开更多
关键词 松材线虫病 松材线虫 RAPD 传播途径
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淡色库蚊对苏云金杆菌及化学杀虫剂的抗性研究 被引量:5
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作者 宋晓 程鹏 +7 位作者 王海防 刘宏美 郭秀霞 刘丽娟 赵玉强 王怀位 公茂庆 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2019年第1期13-16,共4页
目的探讨苏云金杆菌以色列亚种(Bti)与常用化学杀虫剂联合使用对东平湖地区淡色库蚊幼虫的杀灭效果。方法采用幼虫浸渍法测试现场淡色库蚊幼虫对Bti及5种化学杀虫剂的抗性,采用简单复配法检测Bti分别与5种化学杀虫剂混用的增效效果,增... 目的探讨苏云金杆菌以色列亚种(Bti)与常用化学杀虫剂联合使用对东平湖地区淡色库蚊幼虫的杀灭效果。方法采用幼虫浸渍法测试现场淡色库蚊幼虫对Bti及5种化学杀虫剂的抗性,采用简单复配法检测Bti分别与5种化学杀虫剂混用的增效效果,增效明显的2组再次进行复配验证。结果现场淡色库蚊幼虫对Bti、溴氰菊酯、氯氰菊酯、敌敌畏、残杀威、三氯杀虫酯的抗性倍数分别为1. 04、106. 00、83. 00、5. 03、3. 51、1. 01。Bti分别与5种化学杀虫剂简单复配时均有增效效果,Bti+残杀威增效效果最佳(19. 63),其次为Bti+氯氰菊酯(11. 59)。进一步复配结果显示,残杀威与Bti以不同比例复配时都具有增效作用,其中以1∶3比例复配时共毒系数最高(189);当氯氰菊酯与Bti以1∶1及1∶3比例复配时,表现出增效作用(共毒系数:114、135)。结论将Bti与化学杀虫剂联合应用(尤其是残杀威)对山东省东平湖地区淡色库蚊有较好的灭杀效果,可延缓抗药性的发展,是蚊虫抗性治理中较为重要的防治策略。 展开更多
关键词 苏云金杆菌以色列亚种 化学杀虫剂 淡色库蚊 联合应用 增效作用
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苏云金杆菌对微山湖湿地中华按蚊幼虫的室内生测效果 被引量:5
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作者 史琦琪 程鹏 +8 位作者 王海防 刘宏美 郭秀霞 刘丽娟 赵玉强 寇景轩 王怀位 公茂庆 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2017年第3期227-229,共3页
目的探讨苏云金杆菌以色列亚种(Bti)对中华按蚊不同龄期幼虫的杀灭效果。方法采用幼虫浸渍法,26℃环境下,用浓度为2、4、6、8、10、12、14 mg/L的Bti药液,分别对Ⅰ~Ⅳ龄期的中华按蚊幼虫进行实验测定。结果 Bti对微山湖湿地中华按蚊Ⅰ... 目的探讨苏云金杆菌以色列亚种(Bti)对中华按蚊不同龄期幼虫的杀灭效果。方法采用幼虫浸渍法,26℃环境下,用浓度为2、4、6、8、10、12、14 mg/L的Bti药液,分别对Ⅰ~Ⅳ龄期的中华按蚊幼虫进行实验测定。结果 Bti对微山湖湿地中华按蚊Ⅰ龄期幼虫杀灭作用最佳。其对中华按蚊Ⅰ~Ⅳ龄幼虫的LC_(50)值分别为6.11、8.03、9.66和10.50 mg/L。微山湖湿地Ⅰ~Ⅳ龄幼虫相对实验室敏感幼虫抗性倍数分别为1.15、1.08、1.11和1.12倍。结论 Bti对微山湖湿地中华按蚊幼虫均有不同程度的杀灭作用,同样浓度下幼虫龄期越小,杀灭效果越显著。而且Bti对微山湖湿地幼虫的杀灭效果与实验室敏感品系相差不大,提示当中华按蚊对化学杀虫剂产生抗性时,应用Bti等生物杀虫剂是较好的选择。 展开更多
关键词 苏云金杆菌以色列亚种 中华按蚊 不同龄期 生物测定
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基于mtDNA-COⅠ基因的山东省蚊种群遗传多样性分析 被引量:5
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作者 郭秀霞 程鹏 +5 位作者 刘丽娟 王海防 王怀位 公茂庆 马骏 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期37-41,共5页
目的探讨山东省不同地理株及实验室不同抗性品系淡色库蚊及5种常见蚊种的线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(mt DNA-COⅠ)基因序列特征,分析其遗传多样性。方法采用山东省济南、济宁、青岛等地现场采集及实验室选育的淡色库蚊成蚊,以济宁... 目的探讨山东省不同地理株及实验室不同抗性品系淡色库蚊及5种常见蚊种的线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(mt DNA-COⅠ)基因序列特征,分析其遗传多样性。方法采用山东省济南、济宁、青岛等地现场采集及实验室选育的淡色库蚊成蚊,以济宁市现场采集的5种蚊(淡色库蚊、三带喙库蚊、中华按蚊、白纹伊蚊、骚扰阿蚊)作为样本,PCR扩增mt DNA-COⅠ基因并测序,分析序列特征并构建系统进化树。结果 PCR特异扩增8个不同地理株及4个实验室抗性品系的淡色库蚊mt DNA-COⅠ区域,获得长度均为528 bp的扩增片段,A+T含量为67.4%,存在两个变异位点。不同地理株淡色库蚊mt DNA-COⅠ基因同源性为99.95%,不同抗性品系淡色库蚊基因序列相同,所有蚊虫COⅠ基因具有高度保守性。5种常见蚊虫的mt DNA-COⅠ基因片段长度均为528 bp,有408个保守位点,120个变异位点,42个简约信息位点,78个单态位点,A+T含量为65.7%~68.0%,同源性分析发现蚊种间基因同源性为86.17%~92.05%,所有蚊虫的COⅠ基因分子鉴定与其形态学相吻合。系统进化关系显示,同种和同属之间呈明显的聚集,但阿蚊属成单独的分支,与其他蚊种亲缘关系较远。结论线粒体COⅠ作为不同地理株及实验室不同品系淡色库蚊的遗传进化分子标记不够理想,但该基因具有种间和属间特异性,可用于蚊虫属和种的区分。 展开更多
关键词 mtDNA-COⅠ 种群遗传 山东省
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化学杀虫剂复配及生物杀虫剂对济宁市淡色库蚊灭效的现场研究 被引量:5
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作者 宋晓 程鹏 +9 位作者 吕晔源 史琦琪 刘宏美 王海防 刘丽娟 郭秀霞 赵玉强 王怀位 公茂庆 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2019年第3期296-299,共4页
目的探讨常用化学杀虫剂复配以及生物杀虫剂对现场淡色库蚊的杀灭效果,为制定合理有效的蚊虫防治措施提供科学依据。方法采用幼虫浸渍法及药物复配方法,测试现场淡色库蚊对2种生物杀虫剂与4种化学杀虫剂的抗性及增效系数。结果现场淡色... 目的探讨常用化学杀虫剂复配以及生物杀虫剂对现场淡色库蚊的杀灭效果,为制定合理有效的蚊虫防治措施提供科学依据。方法采用幼虫浸渍法及药物复配方法,测试现场淡色库蚊对2种生物杀虫剂与4种化学杀虫剂的抗性及增效系数。结果现场淡色库蚊对苏云金芽孢杆菌以色列亚种和球形芽孢杆菌的抗性倍数分别为1.02和1.08倍,对氯氰菊酯、溴氰菊酯、敌敌畏和残杀威的抗性倍数分别为97.00、59.08、6.44和2.36倍,溴氰菊酯+敌敌畏、溴氰菊酯+残杀威、氯氰菊酯+敌敌畏、氯氰菊酯+残杀威复配共毒系数分别为156.24~182.37、163.28~201.36、166.23~190.56和160.23~199.58,敌敌畏+残杀威复配效果不佳。结论济宁市城区淡色库蚊对常用化学杀虫剂产生不同程度抗性,对生物杀虫剂表现敏感,建议采取生物杀虫剂或化学杀虫剂复配方式控制蚊虫孳生,减缓抗药性发展。 展开更多
关键词 淡色库蚊 生物杀虫剂 杀虫剂复配 抗药性
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山东省济宁市白纹伊蚊对溴氰菊酯抗性与kdr等位基因突变观察 被引量:5
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作者 宋晓 黄晓丹 +10 位作者 杨琳琳 王洋 程鹏 王海防 刘丽娟 郭秀霞 赵玉强 王怀位 刘宏美 公茂庆 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2019年第5期403-406,共4页
目的了解山东省济宁市白纹伊蚊现场群体对溴氰菊酯的抗药性,并检测击倒抗性(kdr)等位基因突变情况,为kdr突变作为杀虫剂抗性检测的生物标记提供理论依据。方法WHO成蚊接触筒法测定白纹伊蚊对溴氰菊酯的抗性,PCR扩增电压门控钠离子通道(V... 目的了解山东省济宁市白纹伊蚊现场群体对溴氰菊酯的抗药性,并检测击倒抗性(kdr)等位基因突变情况,为kdr突变作为杀虫剂抗性检测的生物标记提供理论依据。方法WHO成蚊接触筒法测定白纹伊蚊对溴氰菊酯的抗性,PCR扩增电压门控钠离子通道(VGSC)基因部分片段,测序后检测kdr等位基因突变情况。结果WHO成蚊接触筒检测济宁白纹伊蚊雌蚊死亡率为44.58%,在VGSC基因1534氨基酸位点检测到3种等位基因类型:野生型TTC(F1534)(71.43%)和突变型TCC(F1534S)(13.69%)、TTG(F1534L)(14.88%);检测到5种等位基因型:野生型纯合子TTC/TTC,突变型纯合子TCC/TCC、TTG/TTG,以及野生/突变型杂合子TTC/TTG、TTC/TCC。结论济宁市白纹伊蚊对溴氰菊酯已产生抗药性,并监测到其1534氨基酸位点上存在2种kdr等位基因点突变,可能与杀虫剂的长期选择压力有关。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 抗药性 溴氰菊酯 kdr等位基因
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松材线虫RAPD-PCR反应体系的优化与分子鉴定标记的筛选 被引量:3
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作者 克云 +3 位作者 吕毅 徐春花 王旭 林茂松 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期61-65,共5页
应用随机引物S344、S356和S360比较分析了PCR热循环复性温度、Mg^2+浓度和模板浓度对松材线虫基因组DNA的RAPD扩增结果的影响,旨在建立松材线虫的最佳反应体系,并以此进行松材线虫的分子鉴定标记筛选。结果表明:37℃的复性温度、3.... 应用随机引物S344、S356和S360比较分析了PCR热循环复性温度、Mg^2+浓度和模板浓度对松材线虫基因组DNA的RAPD扩增结果的影响,旨在建立松材线虫的最佳反应体系,并以此进行松材线虫的分子鉴定标记筛选。结果表明:37℃的复性温度、3.0mmol·L^-1Mg^2+、10μL反应体系中松材线虫基因组DNA模板1~25ng是研究松材线虫RAPD特征的最佳反应体系。利用此反应体系,通过对100个随机引物的分析,获得了3条松材线虫区别于拟松材线虫的分子鉴定标记。 展开更多
关键词 松材线虫 RAPD优化反应体系 分子鉴定标记
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基于iTRAQ的定量蛋白质组学技术探索淡色库蚊越冬机制 被引量:4
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作者 石桂红 +3 位作者 郭秀霞 王海防 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期160-164,168,共6页
目的比较淡色库蚊越冬后与滞育准备阶段蛋白表达差异,探索淡色库蚊越冬休眠(滞育)的机制。方法采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术,对越冬滞育及准备阶段淡色库蚊进行定量蛋白质组学分析。结果淡色库蚊越冬滞育前后共鉴定出244种... 目的比较淡色库蚊越冬后与滞育准备阶段蛋白表达差异,探索淡色库蚊越冬休眠(滞育)的机制。方法采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术,对越冬滞育及准备阶段淡色库蚊进行定量蛋白质组学分析。结果淡色库蚊越冬滞育前后共鉴定出244种差异表达蛋白,其中上调蛋白126种、下调蛋白118种。生物信息学分析表明,这些差异表达蛋白与能量产生及转化、脂代谢、细胞骨架重塑、糖代谢、蛋白质转运、分子伴侣、应激耐受以及各种代谢酶等有关。结论本研究首次采用现代蛋白质组学工具鉴定淡色库蚊越冬滞育相关蛋白,初步揭示了与淡色库蚊越冬滞育相关的KEGG通路及蛋白,进一步扩展了对蚊媒越冬滞育机制的理解。 展开更多
关键词 淡色库蚊 成蚊越冬 定量蛋白质组学 同位素标记相对和绝对定量
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淡色库蚊嗅觉受体基因orco的克隆及组织表达谱分析 被引量:3
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作者 刘宏美 王利磊 +7 位作者 程鹏 黄晓丹 刘丽娟 王海防 郭秀霞 王怀位 公茂庆 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期868-871,882,共5页
目的 Orco是嗅觉功能的重要组成元件。本研究旨在克隆淡色库蚊的orco基因,分析其编码蛋白的氨基酸序列和orco基因组织表达谱。方法利用RT-PCR技术克隆Cpporco基因,对其编码蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析;利用软件MEGA 5.0对获得的... 目的 Orco是嗅觉功能的重要组成元件。本研究旨在克隆淡色库蚊的orco基因,分析其编码蛋白的氨基酸序列和orco基因组织表达谱。方法利用RT-PCR技术克隆Cpporco基因,对其编码蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析;利用软件MEGA 5.0对获得的Cpporco进行系统进化树分析;利用HMMTOP version 2.0和TMHMM server version 2.0软件预测CppOrco的跨膜结构域;利用RT-PCR检测雌、雄淡色库蚊的触角、下颚须、喙、头、体中的orco基因表达水平。结果从淡色库蚊中克隆出一个嗅觉受体共表达基因Cpporco,编码区全长1 443bp,编码481个氨基酸,Cpporco与其他蚊种的orco的氨基酸一致性为83.63%,与同属于库蚊属的致倦库蚊Cqorco基因编码的氨基酸序列一致性为98.96%。系统进化树分析CppOrco与CqOrco的亲缘关系较近。CppOrco属于TM7的GPCR,其N末端在胞内,C末端在胞外。Cpporco基因在雌、雄蚊的不同组织中表达量不同,其中在雌蚊触角和喙高表达。结论成功克隆了淡色库蚊orco基因序列全长,其编码蛋白主要在雌、雄蚊触角和喙高表达,为进一步研究蚊虫的嗅觉系统及其功能奠定了基础。 展开更多
关键词 淡色库蚊 嗅觉受体 组织特异性
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山东省潍坊市淡色库蚊越冬情况调查 被引量:3
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作者 程鹏 王怀位 +7 位作者 本光 郭秀霞 王海防 刘宏美 黄晓丹 公茂庆 刘丽娟 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2019年第2期132-134,共3页
目的调查研究淡色库蚊在山东省潍坊市的越冬情况。方法分别在2014年10月至2016年3月通过人工调查法对潍坊地区越冬蚊进行调查,并监测了整个越冬期内淡色库蚊的种群动态。结果淡色库蚊在潍坊地区以雌成蚊越冬,越冬场所种类多,其中密度较... 目的调查研究淡色库蚊在山东省潍坊市的越冬情况。方法分别在2014年10月至2016年3月通过人工调查法对潍坊地区越冬蚊进行调查,并监测了整个越冬期内淡色库蚊的种群动态。结果淡色库蚊在潍坊地区以雌成蚊越冬,越冬场所种类多,其中密度较高的越冬场所主要有地窖(135.5±8.75)、防空洞(113±9.56)、暖气管道(33.2±3.84)等,不同越冬场所内淡色库蚊越冬蚊密度存在显著差异(F=85.72,df=139,P<0.01)。越冬期内,各调查点淡色库蚊阳性率大致呈先增加后降低的趋势,捕获的蚊虫数量在越冬中期最多,其次为越冬前期,越冬后期捕获数量最少。结论本研究阐明了山东省潍坊市淡色库蚊的越冬场所和越冬种群的动态,为淡色库蚊的预测、预报和综合防治提供了理论依据。 展开更多
关键词 淡色库蚊 越冬 种群动态
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9种蚊虫细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因的分子进化分析 被引量:3
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作者 郭秀霞 程鹏 +5 位作者 刘丽娟 史琦琪 王海防 王怀位 公茂庆 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2017年第6期530-534,共5页
目的分析常见的9种蚊虫线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(mtDNA-COⅠ)基因序列特征,了解其分子系统进化关系。方法 2016年采用人饵帐诱捕法在济宁市北湖地区采集蚊虫,经实验室种类鉴定后,提取淡色库蚊、三带喙库蚊、二带喙库蚊、白纹伊... 目的分析常见的9种蚊虫线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(mtDNA-COⅠ)基因序列特征,了解其分子系统进化关系。方法 2016年采用人饵帐诱捕法在济宁市北湖地区采集蚊虫,经实验室种类鉴定后,提取淡色库蚊、三带喙库蚊、二带喙库蚊、白纹伊蚊、刺扰伊蚊、中华按蚊、骚扰阿蚊、常型曼蚊和黄色轲蚊的DNA,PCR扩增mtDNA-COⅠ基因并测序。在GenBank中进行同源性比对,采用Bioedit 7.0软件及DNAman软件对测序结果进行比对分析,通过DNAStar、Clustal X 1.81和Mega 6.0软件分析序列特征、颠换率、分化年代并构建系统进化树,探讨系统发生关系。结果 9种蚊虫的mtDNA-COⅠ基因成功扩增并测序,获得长度均为528 bp的基因片段,(A+T)含量为65.72%~69.32%,有375个保守位点,153个变异位点,104个简约信息位点,49个单态位点。不同蚊种间的颠换率为3.409%~9.470%,分化年代为1.482×10~6a~4.117×10~6a。不同蚊种间序列同源性为84.28%~92.94%。系统进化关系显示,所有蚊虫的COⅠ基因分子鉴定与形态学鉴定一致,同属间聚集,不同蚊种为独立分支。结论 mtDNA-COⅠ基因可用于蚊虫属和种的区分,为蚊虫的分子鉴定提供科学依据。 展开更多
关键词 蚊虫 线粒体DNA 细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ 分子进化
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