目的 Orco是嗅觉功能的重要组成元件。本研究旨在克隆淡色库蚊的orco基因,分析其编码蛋白的氨基酸序列和orco基因组织表达谱。方法利用RT-PCR技术克隆Cpporco基因,对其编码蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析;利用软件MEGA 5.0对获得的...目的 Orco是嗅觉功能的重要组成元件。本研究旨在克隆淡色库蚊的orco基因,分析其编码蛋白的氨基酸序列和orco基因组织表达谱。方法利用RT-PCR技术克隆Cpporco基因,对其编码蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析;利用软件MEGA 5.0对获得的Cpporco进行系统进化树分析;利用HMMTOP version 2.0和TMHMM server version 2.0软件预测CppOrco的跨膜结构域;利用RT-PCR检测雌、雄淡色库蚊的触角、下颚须、喙、头、体中的orco基因表达水平。结果从淡色库蚊中克隆出一个嗅觉受体共表达基因Cpporco,编码区全长1 443bp,编码481个氨基酸,Cpporco与其他蚊种的orco的氨基酸一致性为83.63%,与同属于库蚊属的致倦库蚊Cqorco基因编码的氨基酸序列一致性为98.96%。系统进化树分析CppOrco与CqOrco的亲缘关系较近。CppOrco属于TM7的GPCR,其N末端在胞内,C末端在胞外。Cpporco基因在雌、雄蚊的不同组织中表达量不同,其中在雌蚊触角和喙高表达。结论成功克隆了淡色库蚊orco基因序列全长,其编码蛋白主要在雌、雄蚊触角和喙高表达,为进一步研究蚊虫的嗅觉系统及其功能奠定了基础。展开更多
文摘目的 Orco是嗅觉功能的重要组成元件。本研究旨在克隆淡色库蚊的orco基因,分析其编码蛋白的氨基酸序列和orco基因组织表达谱。方法利用RT-PCR技术克隆Cpporco基因,对其编码蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析;利用软件MEGA 5.0对获得的Cpporco进行系统进化树分析;利用HMMTOP version 2.0和TMHMM server version 2.0软件预测CppOrco的跨膜结构域;利用RT-PCR检测雌、雄淡色库蚊的触角、下颚须、喙、头、体中的orco基因表达水平。结果从淡色库蚊中克隆出一个嗅觉受体共表达基因Cpporco,编码区全长1 443bp,编码481个氨基酸,Cpporco与其他蚊种的orco的氨基酸一致性为83.63%,与同属于库蚊属的致倦库蚊Cqorco基因编码的氨基酸序列一致性为98.96%。系统进化树分析CppOrco与CqOrco的亲缘关系较近。CppOrco属于TM7的GPCR,其N末端在胞内,C末端在胞外。Cpporco基因在雌、雄蚊的不同组织中表达量不同,其中在雌蚊触角和喙高表达。结论成功克隆了淡色库蚊orco基因序列全长,其编码蛋白主要在雌、雄蚊触角和喙高表达,为进一步研究蚊虫的嗅觉系统及其功能奠定了基础。