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鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF66截短蛋白多克隆抗体的制备及互作多肽筛选 被引量：2
1
作者 张小米 阙顺政 +2 位作者 龙晨 王浩 吕利群 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期796-802,共7页
为深入探究鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)在感染过程中的生物学功能,构建了ORF66截短基因的原核表达质粒pET28a-tORF66,转化至BL21感受态细胞后利用IPTG(Isopropyl-beta-Dthiogalactopyranoside)16℃诱导蛋白表达,经... 为深入探究鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)在感染过程中的生物学功能,构建了ORF66截短基因的原核表达质粒pET28a-tORF66,转化至BL21感受态细胞后利用IPTG(Isopropyl-beta-Dthiogalactopyranoside)16℃诱导蛋白表达,经尿素溶解透析获得溶解的重组蛋白后免疫6周龄小鼠,制备鼠抗tORF66多克隆抗体。将纯化后重组蛋白进行噬菌体展示以此来筛选互作蛋白。经Western Blot检测显示,抗体能够识别感染鲫鳍条细胞系GICF细胞中的鲤疱疹病毒Ⅱ型,效价较高,特异性较好。噬菌体淘选结果通过生物信息学分析显示,得到一条出现频次最高的多肽N′-LHLHQNRMSLSR-C′。该多肽与金鱼基因组中的3个基因有较高的同源性,推断其可能与rORF66重组蛋白相互作用。这将为深入探究ORF66在CyHV-2病毒感染过程中的生物学功能、开发抗CyHV-2病毒新药物及寻找潜在的药物靶点提供新依据。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒Ⅱ型 ORF66截短蛋白 原核表达 多克隆抗体 噬菌体展示
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电视专题片摄像构图艺术探究 被引量：5
2
作者 张小米 《新媒体研究》 2016年第13期182-183,共2页
从画面效果来看,电视与摄影、绘画一样也是一种视觉艺术。具有造型艺术的基本特点电视画面的构图要有固定的横幅格式,画面的视点可变。电视屏幕上镜头呈现出来的是活动,同时还需加入一些和时间有关条件的因素,摄录的内容要与排录手法相... 从画面效果来看,电视与摄影、绘画一样也是一种视觉艺术。具有造型艺术的基本特点电视画面的构图要有固定的横幅格式,画面的视点可变。电视屏幕上镜头呈现出来的是活动,同时还需加入一些和时间有关条件的因素,摄录的内容要与排录手法相联合。专题片的摄像构图必须要具备本身独特的特点,文章对专题片摄录镜头画面构图的特点和基本形式进行了深入的探索。 展开更多
关键词 电视 专题片 摄像构图
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近20年欧美女性研究的现状与启示——基于5本女性研究类期刊的纵向文献计量分析
3
作者 张庆鹏 张小米 《中华女子学院学报》 2023年第2期119-128,共10页
女性研究是国内外社会科学研究领域持续关注的重点,在特定年代区间内梳理并分析欧美女性研究在学术关注点、主题演进、知识增量方向以及领域更迭等方面的现状与趋势,对于提升我国女性研究水平具有重要的学术借鉴意义。通过运用Cite Spac... 女性研究是国内外社会科学研究领域持续关注的重点,在特定年代区间内梳理并分析欧美女性研究在学术关注点、主题演进、知识增量方向以及领域更迭等方面的现状与趋势,对于提升我国女性研究水平具有重要的学术借鉴意义。通过运用Cite Space软件从合作集群、热点主题变迁及相关的知识基础三个方面分析欧美女性研究的5本代表性学术期刊在2001—2020年刊载的3704篇论文发现,欧美女性研究主要为瞬时作者,部分核心作者的学术影响力较大;形成了三大类研究机构的合作集群;性别差异、两性关系、家庭关系、女性生理现象、实证研究方法等是近20年来欧美女性研究的热点主题;涵盖了定量研究方法、质性研究方法的工具书以及围绕性别议题的4种高被引经典文献和7篇关键性文献,构成了欧美女性研究的知识基础。建议我国女性研究在研究方法上提升质性和量化研究相结合的水平,在研究机制上加强学术合作。 展开更多
关键词 女性研究 CITESPACE 可视化分析 知识图谱
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鲤疱疹病毒Ⅱ型抗体胶体金检测试纸条的制备和分析
4
作者 孙瑜翀 张小米 +2 位作者 计晓花 谢佳容 吕利群 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5449-5458,共10页
【背景】由鲤疱疹病毒Ⅱ型(cyprinid herpesvirus-2,CyHV-2)引起的疱疹病毒性造血坏死病在鲫和金鱼中的暴发给水产养殖业造成了巨大的经济损失。【目的】开发一种快速、现场检测鲫是否感染过CyHV-2和监测鲫CyHV-2 IgM抗体水平的胶体金... 【背景】由鲤疱疹病毒Ⅱ型(cyprinid herpesvirus-2,CyHV-2)引起的疱疹病毒性造血坏死病在鲫和金鱼中的暴发给水产养殖业造成了巨大的经济损失。【目的】开发一种快速、现场检测鲫是否感染过CyHV-2和监测鲫CyHV-2 IgM抗体水平的胶体金检测试纸条。【方法】将CyHV-2与胶体金结合作为金标抗原、Protein A作为检测线、兔源rORF66多克隆抗体进行划线作为质控线,分析胶体金试纸条最佳制备及组装条件,确定胶体金标记最适pH、金标抗原最适浓度,以及检测线(test line,T线)、质控线(control line,C线)最适划线浓度等。【结果】本研究制备的CyHV-2抗体胶体金试纸条可以使用全血测试,与常见的其他鱼类抗体血清无交叉反应,如草鱼呼肠孤病毒抗体阳性血清、鳜虹彩病毒抗体阳性血清等。试纸条最低限度可以检测到1:100稀释的阳性血清抗体,由试纸条检测线的深浅可以初步判断鱼体中抗体水平。试纸条通过对10条鲫鱼血清样品检测并和金鱼造血器官坏死病毒检测方法(GB/T 36194—2018)进行Kappa分析,Kappa值为0.80,表明二者有较高的符合率。【结论】本研究制备的试纸条具有较高的灵敏度和特异性,具有操作简单和成本较低的特点,对鱼类检疫、鱼体抗体水平评价等具有实际应用价值。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒Ⅱ型 胶体金试纸条 抗体 现场检测
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真正的程序员
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作者 Joe 张小米（摘） 《现代计算机（中旬刊）》 2009年第1期137-137,共1页
真正的程序员从来不写注释，难写的程序必定也难读。 真正的程序员不写应用程序，他们直接从最底层的裸机开始编程。 真正的程序员不画流程图，流程图是没文化的人的文档，居住在山洞里的人才在岩壁上画流程图。
关键词 程序员 流程图 应用程序 编程 文档
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