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牛附红细胞体体外培养试验 被引量：59
1
作者 张守发 张国宏 +1 位作者 宋建臣 许应天 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期27-29,共3页
用RPMI 164 0、M 199、D MEM 3种培养液作为基础培养基 ,再分别按体积分数加入 40 %的犊牛血清 ,采用普通恒温培养箱 (3 7℃ )进行牛附红细胞体体外培养。结果表明 ,牛附红细胞体在RPMI 164 0培养基中 ,每 12h更换 1次培养液 ,并补充适... 用RPMI 164 0、M 199、D MEM 3种培养液作为基础培养基 ,再分别按体积分数加入 40 %的犊牛血清 ,采用普通恒温培养箱 (3 7℃ )进行牛附红细胞体体外培养。结果表明 ,牛附红细胞体在RPMI 164 0培养基中 ,每 12h更换 1次培养液 ,并补充适量正常红细胞 ,获得了高达 99%的感染率 ;连续传代培养可达 44代以上。 展开更多
关键词 牛 附红细胞体 体外培养 试验 感染率
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附红细胞体病 被引量：27
2
作者 张守发 张国宏 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第7期30-32,共3页
关键词 附红细胞体病 附红细胞体 流行病学 症状 病理变化 诊断 防治
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珲春市牛瑟氏泰勒虫病的调查研究 被引量：26
3
作者 张守发 许应天 +2 位作者 宋建臣 何希君 金松柱 《延边大学农学学报》 1997年第1期52-54,共3页
关键词 牛病 黄牛 瑟氏泰勒虫病 调查
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牛泰勒虫病的诊断及预防研究进展 被引量：27
4
作者 许应天 张守发 +1 位作者 李顺玉 金明虎 《延边大学农学学报》 1997年第4期271-275,共5页
关键词 牛病 泰勒虫病 诊断 预防
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鉴别猪瘟强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法的建立 被引量：26
5
作者 李艳 仇华吉 +5 位作者 王秀荣 张守发 朱庆虎 李娜 李国新 童光志 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1907-1914,共8页
【目的】建立一种能区分猪瘟病毒(classicalswinefever,CSFV)强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法。【方法】根据GenBank上登录的现有CSFV基因组全序列,选择高度保守区设计了一对CSFV通用引物,并在该对引物跨... 【目的】建立一种能区分猪瘟病毒(classicalswinefever,CSFV)强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法。【方法】根据GenBank上登录的现有CSFV基因组全序列,选择高度保守区设计了一对CSFV通用引物,并在该对引物跨越区域的内部设计了猪瘟兔化弱毒疫苗和强毒特异性引物,建立了一种能区分猪瘟强毒和弱毒的RT-nPCR鉴别诊断方法。【结果】应用该方法从猪瘟兔化弱毒疫苗和石门强毒株基因组中扩增出了大小分别为447和343bp的一条特异性片段,从两种病毒基因组混合物中扩增出了大小为447和343bp的两条特异性片段,但对牛病毒性腹泻病毒和其它常见猪源病毒细胞培养物以及正常细胞基因组进行检测时均为阴性。该方法可以检测出0.04pg的CSFVRNA。对从黑龙江省采集的15份疑似猪瘟病料进行了检测,结果表明,有14份类似猪瘟强毒,1份类似弱毒疫苗。限制性片段长度多态性和种系发生分析证实了RT-nPCR的检测结果。【结论】本研究建立的RT-nPCR可以有效区分猪瘟强毒和弱毒,减少了未感染的免疫猪被误杀的可能性。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 反转录-复合套式聚合酶链式反应 限制性片段长度多态性分析
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应用间接血凝试验诊断猪附红细胞体病 被引量：14
6
作者 张守发 张国宏 +1 位作者 王浩然 汪明 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第8期17-18,共2页
关键词 间接血凝试验 猪 附红细胞体病 诊断
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犬附红细胞体病的感染情况调查及临床观察 被引量：19
7
作者 张守发 张国宏 +2 位作者 宋建臣 董君艳 姜涛 《畜牧与兽医》 北大核心 2003年第1期23-24,共2页
采用鲜血压滴标本法结合末梢血液涂片染色法 ,调查了 80条犬感染附红细胞体的结果 ,犬附红细胞体阳性率为 91 2 5 % ;其中具有明显临床表现的犬占 1 0 % ,多数为隐性感染。对其中 1 0条阳性犬进行部分血液生理指标测定及临床症状观察 ... 采用鲜血压滴标本法结合末梢血液涂片染色法 ,调查了 80条犬感染附红细胞体的结果 ,犬附红细胞体阳性率为 91 2 5 % ;其中具有明显临床表现的犬占 1 0 % ,多数为隐性感染。对其中 1 0条阳性犬进行部分血液生理指标测定及临床症状观察 ,感染附红细胞体的犬均表现出不同程度的红细胞压积、血红蛋白、红细胞总数下降 ;嗜酸性白细胞 ,淋巴细胞略低于正常值 ;白细胞总数升高 ;嗜中性白细胞、单核细胞有所升高。此外 ,感染犬体温持续偏高 ,食欲略有下降 ,贫血、黄疸症状较轻。未见腹泻、呕吐等明显临床表现。 展开更多
关键词 犬 附红细胞体病 感染情况 临床观察
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猪附红细胞体Dot-ELISA检测方法的建立 被引量：16
8
作者 张守发 张国宏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期96-98,共3页
本试验建立了一种检测猪附红细胞体抗体的Dot-ELISA方法,并确定了试验程序中最适抗原包被浓度、被检血清最适稀释度等工作条件。特异性和重复性试验结果表明,所建立的Dot-ELISA不与猪瘟等常见猪病阳性血清发生交叉反应,且稳定性高;用所... 本试验建立了一种检测猪附红细胞体抗体的Dot-ELISA方法,并确定了试验程序中最适抗原包被浓度、被检血清最适稀释度等工作条件。特异性和重复性试验结果表明,所建立的Dot-ELISA不与猪瘟等常见猪病阳性血清发生交叉反应,且稳定性高;用所建立的Dot-ELISA与IHA对70头份被检血清进行平行检测,阳性率分别为90%和60%;对20份阳性血清进行检测,Dot-ELISA和IHA平均抗体滴度分别为1∶1 012和1∶160。表明所建立的Dot-ELISA是一种比较敏感、特异和稳定的血清学检测方法,能用于猪附红细胞体的抗体检测和疾病诊断。 展开更多
关键词 猪附红细胞体 DOT-ELISA 血清学试验
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间接荧光抗体试验对牛瑟氏泰勒虫病的诊断 被引量：15
9
作者 张守发 许应天 +1 位作者 梁晚枫 姜涛 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期59-61,共3页
关键词 牛 瑟氏泰勒虫病 诊断 间接荧光抗体试验 症状
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猪附红细胞体PCR检测方法的建立 被引量：18
10
作者 王妍 张守发 +1 位作者 刘思国 王春来 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期2153-2156,共4页
根据已发表的部分猪附红细胞体序列设计了一对特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出了一条约936bp的基因片段,并成功地将该基因克隆于克隆载体PMD18-T,经酶切分析和PCR进一步鉴定后进行序列测定,结果表明,所克隆的目的基因与GenBan... 根据已发表的部分猪附红细胞体序列设计了一对特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出了一条约936bp的基因片段,并成功地将该基因克隆于克隆载体PMD18-T,经酶切分析和PCR进一步鉴定后进行序列测定,结果表明,所克隆的目的基因与GenBank中发表的序列一致。并利用特异性引物初步建立了猪附红细胞体病PCR检测技术。 展开更多
关键词 猪 附红细胞体 克隆 PCR PCR检测方法 猪附红细胞体病 聚合酶链式反应 GENBANK 特异性引物 序列设计
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牛瑟氏泰勒虫病PCR诊断方法的建立 被引量：21
11
作者 金春梅 许应天 +2 位作者 张守发 王笑玉 于龙政 《畜牧与兽医》 北大核心 2007年第5期46-48,共3页
为建立特异、敏感、快速的诊断方法,根据本实验室已测得的瑟氏泰勒虫P33表面蛋白基因序列,设计一对特异性引物,扩增出大小为499 bp的基因片断,经克隆、测序分析,与已知基因序列同源性为100%。用该对引物建立的牛瑟氏泰勒虫病PCR诊断方法... 为建立特异、敏感、快速的诊断方法,根据本实验室已测得的瑟氏泰勒虫P33表面蛋白基因序列,设计一对特异性引物,扩增出大小为499 bp的基因片断,经克隆、测序分析,与已知基因序列同源性为100%。用该对引物建立的牛瑟氏泰勒虫病PCR诊断方法,通过对75份牛血液样本检测,检出率为72%(54/75)。该方法具有特异性好、敏感性强等优点,可用于牛瑟氏泰勒虫病的诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 瑟氏泰勒虫 PCR 诊断方法
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附红细胞体体外杀灭试验 被引量：14
12
作者 张守发 李艳 张国宏 《畜牧与兽医》 北大核心 2004年第6期10-12,共3页
以RPMI 1640为基础培养液,加入20%犊牛血清。选用贝尼尔、红弓、华蜍素、特效米先、附红净、大蒜素、土霉素等药物,在5%CO2的气体条件下对猪附红细胞体和牛附红细胞体进行了体外杀灭试验。结果表明,贝尼尔对猪附红细胞体杀灭作用最好,... 以RPMI 1640为基础培养液,加入20%犊牛血清。选用贝尼尔、红弓、华蜍素、特效米先、附红净、大蒜素、土霉素等药物,在5%CO2的气体条件下对猪附红细胞体和牛附红细胞体进行了体外杀灭试验。结果表明,贝尼尔对猪附红细胞体杀灭作用最好,华蜍素次之;红弓对牛附红细胞体杀灭作用最好,特效米先次之。其余药物杀灭作用不明显。 展开更多
关键词 附红细胞体 体外培养 杀灭作用
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猪附红细胞体实验动物模型的建立 被引量：18
13
作者 刘冰 张守发 +2 位作者 于龙政 贾立军 田野 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期12-15,共4页
为建立一种合适的猪附红细胞体病动物模型,利用摘除脾和/或注射地塞米松的昆明小白鼠,以腹腔注射方式人工感染猪附红细胞体,通过血液涂片镜检、PCR检测、临床症状观察及病理剖检对感染情况进行了鉴定。结果显示,猪附红细胞体能够经腹腔... 为建立一种合适的猪附红细胞体病动物模型,利用摘除脾和/或注射地塞米松的昆明小白鼠,以腹腔注射方式人工感染猪附红细胞体,通过血液涂片镜检、PCR检测、临床症状观察及病理剖检对感染情况进行了鉴定。结果显示,猪附红细胞体能够经腹腔注射感染昆明小白鼠,且感染鼠表现出与猪附红细胞体病相似的临床症状。结果表明,猪附红细胞体实验动物模型已成功建立,并证实啮齿类动物在附红细胞体的传播过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 猪附红细胞体 昆明小白鼠 实验动物模型 PCR
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贝尼尔缓释剂的研制及其对牛瑟氏泰勒虫病的防治效果 被引量：11
14
作者 张守发 许应天 +3 位作者 金永春 金在云 鞠玉琳 鲁承 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期367-369,共3页
选用β－环糊精制备了贝尼尔缓释剂。该制剂为细颗粒状悬浮液，颗粒大小为０．２～０．４μｍ，分布均匀，粘度小，流动性好，稳定性较好，便于肌肉注射。通过兔、牛体内的免疫学测定，证明该缓释剂的药物释放时间比对照水剂延长０．８... 选用β－环糊精制备了贝尼尔缓释剂。该制剂为细颗粒状悬浮液，颗粒大小为０．２～０．４μｍ，分布均匀，粘度小，流动性好，稳定性较好，便于肌肉注射。通过兔、牛体内的免疫学测定，证明该缓释剂的药物释放时间比对照水剂延长０．８～１倍。贝尼尔缓释剂对瑟氏泰勒虫感染的预防试验结果表明，按每公斤体重５ｍｇ的剂量一次肌注，无论对本地牛还是外地引进牛，在２个月的保护率均达１００％，染虫率仅为０．１％～１％，呈现一定水平的带虫现象，而对照贝尼尔水剂组的保护期仅为２０ｄ。在牛瑟氏泰勒虫病的早期（１０ｄ以内）使用该缓释剂进行治疗，治愈率可达１００％，区域试验结果也证明了这一点，但剂量要适当加大，按每公斤体重用药７～１０ｍｇ。 展开更多
关键词 贝尼尔缓释剂 牛病 瑟氏泰勒虫病 预防 治疗
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以P33重组蛋白为诊断抗原建立牛瑟氏泰勒虫病乳胶凝集试验 被引量：11
15
作者 许应天 张守发 +1 位作者 郑寓硕 张桓 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期347-349,共3页
本试验用P33重组蛋白建立了牛瑟氏泰勒虫病乳胶凝集试验。对81份被检血清的检测结果,阳性率为44.4%,明显高于血涂片镜检法的21.0%(P<0.01),而且在该病流行地区的不同牧场、不同性别和不同年龄牛的阳性率之间未见显著差异。试验表明,... 本试验用P33重组蛋白建立了牛瑟氏泰勒虫病乳胶凝集试验。对81份被检血清的检测结果,阳性率为44.4%,明显高于血涂片镜检法的21.0%(P<0.01),而且在该病流行地区的不同牧场、不同性别和不同年龄牛的阳性率之间未见显著差异。试验表明,以P33重组蛋白作为诊断抗原具有特异性强、抗原易纯化和成本低等优点。 展开更多
关键词 牛 瑟氏泰勒虫病 乳胶凝集试验 P33重组蛋白 诊断抗原
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猪附红细胞体病的病理学观察 被引量：8
16
作者 董梅 张守发 崔成都 《延边大学农学学报》 2003年第1期44-46,共3页
用常规病理学方法,对5头患有附红细胞体病的仔猪进行病理解剖学和病理组织学观察.病理解剖学主要变化是血液稀薄,凝固不良,全身皮肤及粘膜、脂肪和脏器黄染,肝、脾肿大;病理组织学主要变化是肝、脾、肾等器官有含铁血黄素沉积和广泛的... 用常规病理学方法,对5头患有附红细胞体病的仔猪进行病理解剖学和病理组织学观察.病理解剖学主要变化是血液稀薄,凝固不良,全身皮肤及粘膜、脂肪和脏器黄染,肝、脾肿大;病理组织学主要变化是肝、脾、肾等器官有含铁血黄素沉积和广泛的器官损害. 展开更多
关键词 猪 附红细胞体病 病理组织学观察
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不同抗原在兔豆状囊尾蚴病血清学诊断中的研究 被引量：16
17
作者 张守发 鞠玉琳 +1 位作者 李学一 吴相律 《延边农学院学报》 1994年第2期98-102,共5页
本试验首次应用兔三状囊尾蚴的囊液分馏物和猪细颈囊尾蚴的囊液作抗原，同兔豆状囊尾蚴的囊液和头节、囊壁抗原，用炭凝集试验检测了兔豆状囊尾蚴病的阳性血清及阴性血清，分析、比较了各种抗原诊断兔豆状囊尾蚴病的应用效果。结果：兔... 本试验首次应用兔三状囊尾蚴的囊液分馏物和猪细颈囊尾蚴的囊液作抗原，同兔豆状囊尾蚴的囊液和头节、囊壁抗原，用炭凝集试验检测了兔豆状囊尾蚴病的阳性血清及阴性血清，分析、比较了各种抗原诊断兔豆状囊尾蚴病的应用效果。结果：兔豆状囊尾蚴囊液通过葡聚糖凝胶Ｇ－２００过柱，所得第二峰蛋白抗原性最强，特异性最好，阳性符合率最高；其次是兔豆状囊尾蚴的液囊抗原；猪细颈囊尾蚴囊液抗原性，特异性都较上两种抗原低，但对兔体内寄生１０个以上豆状囊尾蚴的检出率还是较理想的；而免豆状囊尾蚴的头节、囊壁抗原性小，不能用于该病的诊断。 展开更多
关键词 豆状囊尾蚴病 兔病 抗原血清学
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吉林省部分地区马梨形虫病的流行病学调查 被引量：14
18
作者 刘冰 于龙政 +1 位作者 贾立军 张守发 《动物医学进展》 CSCD 2005年第9期114-115,共2页
为了解吉林省部分地区马梨形虫病流行情况,以血液涂片染色镜检虫体的方法对吉林、延边、通化3个地区的130匹马进行了马梨形虫病的流行病学调查。结果表明,以上3个地区马梨形虫感染率分别为12.50%,26.09%,9.09%,其中以延边地区流行较为严... 为了解吉林省部分地区马梨形虫病流行情况,以血液涂片染色镜检虫体的方法对吉林、延边、通化3个地区的130匹马进行了马梨形虫病的流行病学调查。结果表明,以上3个地区马梨形虫感染率分别为12.50%,26.09%,9.09%,其中以延边地区流行较为严重;3个地区流行的马梨形虫均以马巴贝斯虫为主。通过调查,吉林省是马梨形虫病的流行地区。 展开更多
关键词 血液涂片 马梨形虫病 流行病学调查
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猪附红细胞体几种染色方法的比较 被引量：11
19
作者 薛书江 贾立军 +1 位作者 田万军 张守发 《畜牧与兽医》 北大核心 2005年第11期35-37,共3页
为了筛选出比较理想的染色方法,使猪附红细胞体病的诊断和研究得到可靠的技术保证,本试验对附红细胞体病猪的同一份血液样本,分别采用了12种染色方法进行染色,并比较其染色效果。结果显示,丫啶橙染色和姬-瑞氏混合液染色效果最好,其次... 为了筛选出比较理想的染色方法,使猪附红细胞体病的诊断和研究得到可靠的技术保证,本试验对附红细胞体病猪的同一份血液样本,分别采用了12种染色方法进行染色,并比较其染色效果。结果显示,丫啶橙染色和姬-瑞氏混合液染色效果最好,其次为亚伯特氏、瑞氏和姬姆萨氏等染色方法。 展开更多
关键词 猪 附红细胞体 染色方法
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吉林省部分地区羊泰勒虫病流行病学调查及分类鉴定 被引量：13
20
作者 田万年 薛书江 +2 位作者 贾立军 张守发 李国江 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第10期13-16,共4页
为了解吉林省部分地区羊泰勒虫病的流行情况,试验采用PCR方法对采自吉林省部分地区羊血液样本235份进行羊泰勒虫检测,并对部分阳性样本进行测序分析,建立系统发育树。结果显示,羊泰勒虫阳性率为28.08%,为吕氏泰勒虫单独感染,没有检测到... 为了解吉林省部分地区羊泰勒虫病的流行情况,试验采用PCR方法对采自吉林省部分地区羊血液样本235份进行羊泰勒虫检测,并对部分阳性样本进行测序分析,建立系统发育树。结果显示,羊泰勒虫阳性率为28.08%,为吕氏泰勒虫单独感染,没有检测到尤氏泰勒虫和绵羊泰勒虫感染。系统发育树分析表明,吉林省吕氏泰勒虫与青海分离株分布于同一分支,亲缘关系最近,与绵羊泰勒虫、尤氏泰勒虫亲缘关系较远。此次调查为吉林省羊泰勒虫病的综合防治提供了理论依据。 展开更多
关键词 羊泰勒虫病 流行病学调查 聚合酶链反应 18S RRNA 系统发育树
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