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Trap抗原诱导细胞免疫对S.aureus免疫保护作用的研究
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作者 韩先乐 +7 位作者 申雪 王蓝悦 王森 刘骓 马鑫月 崔玉东 宋博翠 佟春玉 《黑龙江八一农垦大学学报》 2022年第1期79-86,共8页
金黄色葡萄球菌(S.aureus)是奶牛乳房炎的主要致病菌。实验利用S.aureus的Trap基因构建Trap/PET-32a表达质粒,IPTG诱导表达后柱层析纯化Trap蛋白,与弗氏佐剂混合制备疫苗,小鼠肌肉免疫,二免后7 d,分离小鼠脾细胞,经Trap抗原刺激后检测... 金黄色葡萄球菌(S.aureus)是奶牛乳房炎的主要致病菌。实验利用S.aureus的Trap基因构建Trap/PET-32a表达质粒,IPTG诱导表达后柱层析纯化Trap蛋白,与弗氏佐剂混合制备疫苗,小鼠肌肉免疫,二免后7 d,分离小鼠脾细胞,经Trap抗原刺激后检测细胞因子,二免后14 d,小鼠眼球采血制备血清检测抗体,小鼠腹腔S.aureus Newman株攻毒2 d后,取小鼠的肝、脾、肺、肾,涂板检测细菌荷载量,攻毒7 d后制作病理组织切片。结果显示Trap蛋白免疫组比标签蛋白PET-32a对照组极显著增强了细胞因子IFN-γ,IL-4和IL-17A的表达水平与特异性IgG的表达水平;显著降低了细菌对小鼠各个器官的损伤与定植,攻毒保护保护率为56%。实验验证了S.aureus的Trap抗原小鼠免疫既增强了体液免疫又提高了细胞免疫水平,对小鼠有理想的免疫保护作用。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 疫苗 免疫保护 Trap蛋白 细胞免疫
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scFv-DEC205-Trap重组包涵体靶向抗原复性及过程的优化
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作者 佟春玉 +4 位作者 王森 郑小会 韩玉芳 崔玉东 宋博翠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第15期1866-1871,共6页
目的:疫苗防治将成为金黄色葡萄球菌防控的主要方式,如何解决靶向亚单位疫苗生产中包涵体靶向抗原的复性问题,将是蛋白亚单位疫苗生产的核心问题。方法:构建靶向树突状细胞DEC205受体的金黄色葡萄球菌重组scFv-DEC205-Trap质粒进行PCR... 目的:疫苗防治将成为金黄色葡萄球菌防控的主要方式,如何解决靶向亚单位疫苗生产中包涵体靶向抗原的复性问题,将是蛋白亚单位疫苗生产的核心问题。方法:构建靶向树突状细胞DEC205受体的金黄色葡萄球菌重组scFv-DEC205-Trap质粒进行PCR、测序鉴定,IPTG诱导表达。对表达后形成的包涵体各项溶解条件:溶液、溶解温度、溶解时间以及是否振荡进行单因素优化;对复性缓冲液的不同添加剂和稀释浓度进行条件优化,最大限度提高包涵体蛋白复性率,Western blot检测复性蛋白抗原性。结果:离心力大于400 g,离心3 min以上,96%的包涵体蛋白沉降;含8 mol/L的尿素溶液在4~40℃溶解0.5 h以上可使包涵体蛋白充分溶解;3 mol/L精氨酸的100 mmol/L Tris-HCl缓冲液稀释5倍复性率最高,抗原性好。结论:实验证明通过适宜的溶解条件和复性条件可以从表达包涵体中获得良好抗原性的重组靶向抗原。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌TRAP scFv-DEC205-Trap重组抗原 变性 复性
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Laser-Chirp Controlled Terahertz Wave Generation from Air Plasma
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作者 徐行 黄崟东 +9 位作者 刘金磊 娄菁 高明鑫 吴世有 方广有 赵增秀 陈燕萍 盛政明 常超 《Chinese Physics Letters》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第4期34-39,共6页
We report the laser-chirp controlled terahertz(THz) wave generation from two-color-laser-induced air plasma.Our experimental results reveal that the THz wave is affected by both the laser energy and chirp,leading to r... We report the laser-chirp controlled terahertz(THz) wave generation from two-color-laser-induced air plasma.Our experimental results reveal that the THz wave is affected by both the laser energy and chirp,leading to radiation minima that can be quantitatively reconstructed using the linear-dipole-array model.The phase difference between the two colors,determined by the chirp and intensity of the laser,can account for the radiation minima.Furthermore,we observe an asynchronous variation in the generated THz spectrum,which suggests a THz frequency-dependent phase matching between the laser pulse and THz wave.These results highlight the importance of laser chirp during the THz wave generation and demonstrate the possibility of modulating the THz yields and spectrum through chirping the incident laser pulse.This work can provide valuable insights into the mechanism of plasma-based THz wave generation and offer a unique means to control THz emissions. 展开更多
关键词 SPECTRUM MATCHING DIPOLE
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