期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到3篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
下调PAK1对MPLW515L突变的MPN细胞分化、凋亡及6133/MPL移植小鼠存活的影响
1
作者 张启岗 王淑瑾 +3 位作者 于翔茹 张丽伟 徐开林 付春玲 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1472-1478,共7页
目的:探讨下调p21蛋白激活激酶1(PAK1)对血小板生成素受体(MPL)密码子515突变(MPLW515L)的MPN细胞(6133/MPL)增殖、分化、凋亡及移植小鼠存活的影响。方法:使用慢病毒介导的shRNA转染技术干扰6133/MPL细胞中PAK1的蛋白表达水平;CCK-8法... 目的:探讨下调p21蛋白激活激酶1(PAK1)对血小板生成素受体(MPL)密码子515突变(MPLW515L)的MPN细胞(6133/MPL)增殖、分化、凋亡及移植小鼠存活的影响。方法:使用慢病毒介导的shRNA转染技术干扰6133/MPL细胞中PAK1的蛋白表达水平;CCK-8法检测下调PAK1对6133/MPL细胞增殖能力的影响,细胞计数法检测其集落形成能力;流式细胞术检测敲低PAK1对6133/MPL细胞中多倍体DNA形成能力和细胞凋亡的影响;Western blot法检测细胞周期蛋白cyclin D1、cyclin D3和细胞凋亡相关蛋白Bax的表达;HE染色法观察移植小鼠脾脏和骨髓的肿瘤细胞浸润情况。结果:下调PAK1能显著抑制6133/MPL细胞的增殖并降低细胞集落形成能力;敲低PAK1后,6133/MPL细胞中多倍体DNA含量从31.8%增加到57.5%和48.0%,凋亡比例约增至10.8%;下调PAK1能够减少6133/MPL移植小鼠脾脏和骨髓肿瘤细胞的浸润,从而延长其生存期。结论:下调PAK1能显著抑制6133/MPL细胞生长促进多倍体DNA的形成,诱导6133/MPL细胞凋亡,延长6133/MPL移植小鼠的生存时间。 展开更多
关键词 骨髓增殖性肿瘤 巨核细胞 p21蛋白激活激酶1 细胞凋亡 多倍化
下载PDF
下调极光激酶B对CALR突变MARIMO细胞增殖、凋亡的影响及相关基因、信号通路的变化
2
作者 于翔茹 胡雪婷 +3 位作者 王淑瑾 张启岗 徐开林 付春玲 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2023年第4期320-330,共11页
目的探讨下调极光激酶(AURK)B对CALR突变MARIMO细胞增殖、凋亡的影响,以及相关基因和信号通路的变化情况。方法选择来源于1例68岁CALR突变阳性骨髓增殖性肿瘤(MPN)女性患者的MARIMO细胞为研究对象。采用慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)转... 目的探讨下调极光激酶(AURK)B对CALR突变MARIMO细胞增殖、凋亡的影响,以及相关基因和信号通路的变化情况。方法选择来源于1例68岁CALR突变阳性骨髓增殖性肿瘤(MPN)女性患者的MARIMO细胞为研究对象。采用慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)转染MARIMO细胞,并根据shRNA不同,将该细胞分为sh-AURKA、sh-AURKB和sh-无关序列对照(CTRL)组。采用倒置荧光显微镜观察各组MARIMO细胞株,采用流式细胞术(FCM)检测其绿色荧光蛋白(GFP)阳性率。通过FCM、5-乙炔基-2′-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)/4′,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐(DAPI)染色、Annexin V/PE试剂对sh-AURKB和sh-CTRL组MARIMO细胞增殖、凋亡情况进行分析。采用RNA转录组测序(RNA-Seq)技术分析sh-AURKB和sh-CTRL组MARIMO细胞差异表达基因(DEG)的富集情况,对其进行基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,筛选显著DEG。通过实时荧光定量-PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹法对DEG的mRNA和蛋白质相对表达水平进行验证。定量资料的2组比较,采用t检验。3组总体比较,采用单因素方差分析;两两比较,采用最小显著差异(LSD)法。本研究遵循的程序符合2013年修订版《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果①转染72 h后,sh-AURKB组MARIMO细胞数量较sh-CTRL组减少[(0.62±0.03)×10^(5)比(12.44±0.08)×10^(5)],差异有统计学意义(t=257.20,P<0.0001)。与sh-CTRL组相比,sh-AURKB组处于S期的MARIMO细胞比例降低[(33.37±0.75)%比(42.77±0.91)%],处于G2-M期的MARIMO细胞比例增高[(27.83±0.69)%比(17.90±0.40)%],细胞凋亡比例增高[(16.47±0.70)%比(2.75±0.13)%],并且差异均有统计学意义(t=13.83,P=0.0002;t=23.78,P<0.0001;t=33.28,P<0.0001)。②RNA-Seq检测结果显示,与sh-CTRL组相比,sh-AURKB组MARIMO细胞中有2787个基因表达上调,2420个基因表达下调。③sh-AURKB和sh-CTRL组DEG主要注释于细胞内区域、细胞内膜边界细胞器、膜边界细� 展开更多
关键词 极光激酶A 极光激酶B 钙网蛋白 RNA测序 细胞增殖 细胞凋亡 信号传导 MARIMO细胞
原文传递
骨髓增殖性肿瘤小鼠模型的构建及评价体系的建立
3
作者 王淑瑾 于翔茹 +3 位作者 张启岗 李艳杰 付春玲 徐开林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1113-1118,共6页
目的:构建携带JAK2-V617F,MPLW515L及CALR-Type I基因突变的骨髓增殖性肿瘤(MPN)移植小鼠模型,并建立移植小鼠模型构建成功的评价体系。方法:获取小鼠骨髓c-kit+细胞:颈椎脱位处死小鼠,分离股骨、胫骨及髂骨,收集骨髓细胞,经过CD117磁... 目的:构建携带JAK2-V617F,MPLW515L及CALR-Type I基因突变的骨髓增殖性肿瘤(MPN)移植小鼠模型,并建立移植小鼠模型构建成功的评价体系。方法:获取小鼠骨髓c-kit+细胞:颈椎脱位处死小鼠,分离股骨、胫骨及髂骨,收集骨髓细胞,经过CD117磁珠孵育,分选出c-kit+细胞。构建小鼠原代突变细胞:利用逆转录病毒体系构建GFP标记的基因突变载体,将带有基因突变的逆转录病毒载体经Platinum-E细胞包装后,获取病毒上清,感染小鼠的骨髓c-kit+细胞。构建MPN移植小鼠模型:收集感染后含有突变基因的小鼠原代c-kit+细胞,再经尾静脉植入经致死剂量(8.0 Gy)γ射线照射的同种雌性受鼠体内。评价MPN移植小鼠模型:移植后定期通过尾静脉采血检测小鼠外周血血象变化;观察小鼠脾脏大小及骨髓纤维化的程度。结果:成功获得携带突变基因的小鼠骨髓c-kit+细胞。成功构建MPN移植小鼠:移植小鼠外周血细胞中携带外源植入的GFP阳性细胞,且白细胞(WBC)、血小板(PLT)以及红细胞压积(HCT)均升高;移植小鼠重量减轻、饮水量与摄食量减少;病理分析显示移植小鼠脾脏肿大,并伴有骨髓纤维化,提示MPN模型构建成功。根据MPN模型建立过程中3种移植小鼠表现出的共性和异性,归纳总结出可以作为判定MPN模型构建成功的一个初步评价体系,主要包括以下指标:小鼠外周血GFP阳性细胞比例;WBC、PLT及HCT计数;脾脏肿大程度及骨髓纤维化程度。结论:成功建立JAK2-V617F、MPLW515L及CALR-Type I逆转录病毒介导的MPN小鼠模型,可为针对MPN发病机制及药物靶向治疗的研究提供重要的实验动物模型。 展开更多
关键词 骨髓增殖性肿瘤 动物模型 评价指标 JAK2-V617F MPLW515L CALR-TypeⅠ
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部