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复方中药多糖对鸡免疫器官形态学的影响 被引量:68
1
作者 张乐 王金宝 +3 位作者 孙月平 马端忠 史美丽 王中华 《中国兽医科技》 CSCD 1998年第8期26-28,共3页
复方中药多糖对鸡免疫器官形态学的影响1)张乐萃王金宝孙月平马端忠史美丽王中华(山东省莱阳农学院265200)近年来,国内外学者对中药免疫调节作用的研究取得了一定进展,中药多糖作为免疫增强剂而引起人们的广泛关注,现已发... 复方中药多糖对鸡免疫器官形态学的影响1)张乐萃王金宝孙月平马端忠史美丽王中华(山东省莱阳农学院265200)近年来,国内外学者对中药免疫调节作用的研究取得了一定进展,中药多糖作为免疫增强剂而引起人们的广泛关注,现已发现多种多糖具有免疫调节作用,如黄芪... 展开更多
关键词 免疫器官形态学 复方中药多糖
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新城疫中药多糖佐剂油乳苗对鸡免疫器官发育的影响 被引量:29
2
作者 张乐 王金宝 +3 位作者 孙月平 刘文华 史美丽 巩青军 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期378-381,共4页
420只7日龄健康罗曼雏鸡随机分为7组,每组60只。第1组肌注新城疫(ND)黄芪多糖佐剂油乳苗,第2组肌注ND香菇多糖佐剂油乳苗,第3组肌注ND复方多糖(1)佐剂油乳苗,第4组肌注ND复方多糖(2)佐剂油乳苗,第5组... 420只7日龄健康罗曼雏鸡随机分为7组,每组60只。第1组肌注新城疫(ND)黄芪多糖佐剂油乳苗,第2组肌注ND香菇多糖佐剂油乳苗,第3组肌注ND复方多糖(1)佐剂油乳苗,第4组肌注ND复方多糖(2)佐剂油乳苗,第5组肌注ND复方多糖(3)佐剂油乳苗,第6组肌注ND油乳苗(对照),第7组肌注生理盐水(空白对照)。分别于注苗后5、10、15、25、35d,每组随机取10只鸡称重,并取免疫器官脾、法氏囊用10%福尔马林固定后称重,作统计学处理。结果表明,中药多糖作为新城疫油乳苗佐剂有明显的增加免疫器官重量的作用,复方中药多糖对脾、法氏囊的增重效果优于单一多糖。 展开更多
关键词 中药多糖 新城疫油乳苗 免疫增强剂 免疫器官
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黄芪多糖对免疫抑制鸡某些免疫指标影响的研究 被引量:18
3
作者 孙月平 王金宝 +2 位作者 张乐 史美丽 刘文华 《莱阳农学院学报》 1999年第1期61-63,共3页
 280 只健康罗曼雏鸡,应用黄芪多糖和环磷酰胺后,检测某些免疫指标。结果表明, 环 磷酰胺能使外周血中淋巴细胞总数、淋巴细胞百分含量、 A N A E 阳性淋巴细胞百分率和新城疫 H I 抗体水平下降。黄芪多糖能使这几个指标...  280 只健康罗曼雏鸡,应用黄芪多糖和环磷酰胺后,检测某些免疫指标。结果表明, 环 磷酰胺能使外周血中淋巴细胞总数、淋巴细胞百分含量、 A N A E 阳性淋巴细胞百分率和新城疫 H I 抗体水平下降。黄芪多糖能使这几个指标上升。黄芪多糖并能使环磷酰胺的这种作用逆转。 展开更多
关键词 黄芪多糖 环磷酰胺 免疫增强 HI抗体
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抗应激添加剂对热应激肉鸡甲状腺和肾上腺组织结构的影响 被引量:15
4
作者 张乐 王述柏 +2 位作者 单虎 马端忠 侯世忠 《饲料研究》 CAS 北大核心 1998年第5期1-2,共2页
150只28日龄健康艾维茵肉鸡随机分为三组,每组50只。A、B组鸡舍温度模拟夏季昼夜温度变化,间歇性控制在28~36℃,A组饲料中添加0.2%的抗应激添加剂;B组为热应激组,C组为常温对照组。42日龄时称重、解剖、取... 150只28日龄健康艾维茵肉鸡随机分为三组,每组50只。A、B组鸡舍温度模拟夏季昼夜温度变化,间歇性控制在28~36℃,A组饲料中添加0.2%的抗应激添加剂;B组为热应激组,C组为常温对照组。42日龄时称重、解剖、取材作石蜡切片,观察甲状腺、肾上腺和肝脏的组织结构变化,结果表明,B组鸡体重明显低于A、C组(P<0.05),A组与C组间无显著性差异。热应激对甲状腺、肾上腺及肝脏均有不同程度的损伤性不良影响,抗应激添加剂能有效地对抗这种不良影响,促进肉鸡生长,提高抗病力,防止热应激的产生。 展开更多
关键词 添加剂 热应激 甲状腺 肾上腺 肉鸡
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热应激对肉鸡免疫器官形态学影响的研究 被引量:14
5
作者 张乐 刘世华 +2 位作者 王述柏 侯世忠 刘永庆 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第7期24-25,共2页
热应激对肉鸡免疫器官形态学影响的研究张乐萃刘世华王述柏(莱阳农学院,山东265200)侯世忠(胜利油田农业公司肉鸡场,山东257102)刘永庆(山东省农科院家禽所,济南250100)在我国大部分地区夏季出现持续性高温... 热应激对肉鸡免疫器官形态学影响的研究张乐萃刘世华王述柏(莱阳农学院,山东265200)侯世忠(胜利油田农业公司肉鸡场,山东257102)刘永庆(山东省农科院家禽所,济南250100)在我国大部分地区夏季出现持续性高温、高湿天气,在温度超过30℃时,鸡... 展开更多
关键词 鸡病 热应激 免疫器官 形态学
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抗应激药物对热应激肉鸡免疫器官的组织学影响 被引量:14
6
作者 张乐 宋春阳 +3 位作者 单虎 马端忠 张刚 侯世忠 《中国家禽》 北大核心 1998年第8期11-13,共3页
200只14日龄健康艾维茵肉仔鸡随机等分为四组,A、B两组分别在饲料中添加0.225%的抗应激Ⅰ号和抗应激Ⅱ号,C组为热应激对照组,D组为常温对照组。A、B、C三组鸡舍温度为28,32~36℃,49日龄时称重、杀死、... 200只14日龄健康艾维茵肉仔鸡随机等分为四组,A、B两组分别在饲料中添加0.225%的抗应激Ⅰ号和抗应激Ⅱ号,C组为热应激对照组,D组为常温对照组。A、B、C三组鸡舍温度为28,32~36℃,49日龄时称重、杀死、取材作石蜡切片,观察免疫器官的组织学结构。结果表明,C组体重明显低于A、B、D组,A、B组鸡体重与D组间差异不显著。热应激对各免疫器官有明显的损伤性和免疫抑制样变化,而抗应激药物对免疫器官有明显的保护作用,从组织学角度看,抗应激药物可明显地对抗热应激所造成的免疫抑制,使免疫器官组织学结构接近正常水平。 展开更多
关键词 药物 热应激 肉仔鸡 免疫器官
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2014-2017年我国部分地区10株鸽副黏病毒的分布及其分子特征 被引量:13
7
作者 罗瑶瑶 王静静 +9 位作者 王云平 魏润宇 吕艳 赵云玲 郑东霞 于松梅 张乐 刘华雷 王志亮 单虎 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1883-1886,1931,共5页
为了解我国鸽群新城疫病毒的感染情况,于2014-2017年在国内部分地区开展了基于风险的新城疫主动监测,结果从部分地区活禽市场的鸽群及环境样本中成功分离到10株新城疫病毒,并对其F基因全长进行扩增和遗传进化分析。结果显示,10株新城疫... 为了解我国鸽群新城疫病毒的感染情况,于2014-2017年在国内部分地区开展了基于风险的新城疫主动监测,结果从部分地区活禽市场的鸽群及环境样本中成功分离到10株新城疫病毒,并对其F基因全长进行扩增和遗传进化分析。结果显示,10株新城疫病毒F基因编码区长度均为1 662bp,共编码553个氨基酸,核苷酸和氨基酸同源性分别为96.7%~99.9%、95.7%~99.6%,表明不同地区分离株之间具有较高的同源性。所有分离株F蛋白裂解位点均为112R-R-Q-K-R-F117,具有新城疫病毒强毒株典型的分子特征。遗传进化分析结果显示,10株病毒均属于ClassⅡ基因Ⅵb亚型,表明基因VIb亚型为近年来我国鸽群中流行的新城疫病毒优势基因型。 展开更多
关键词 鸽副黏病毒 基因VIb亚型 遗传进化分析 新城疫病毒
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牛肠道病毒2型VP1^+表达和间接ELISA方法的建立与应用 被引量:10
8
作者 郭金玉 高志强 +2 位作者 张鹤晓 张乐 吴丹 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2014年第11期40-43,共4页
根据2005年从北京某牛场分离得到的一株牛肠道病毒2型(BEV-2)毒株序列,设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增BEV-2包含VP1(840 bp)蛋白基因片段的VP1+(1 275 bp)序列,扩增产物克隆到p MD-T19,进行测序验证。验证该序列为目的片段后,将其... 根据2005年从北京某牛场分离得到的一株牛肠道病毒2型(BEV-2)毒株序列,设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增BEV-2包含VP1(840 bp)蛋白基因片段的VP1+(1 275 bp)序列,扩增产物克隆到p MD-T19,进行测序验证。验证该序列为目的片段后,将其克隆到表达载体p ET-32a。重组质粒转化至Rosetta,经IPTG诱导后,SDS-PAGE显示重组蛋白在大肠杆菌中高效表达。将重组蛋白作检测抗原包被酶标板,成功建立了检测牛肠道病毒2型抗体的间接ELISA方法。上述工作,为下一步BEV-2单克隆抗体的制备打下了基础。 展开更多
关键词 牛肠道病毒2型 重组表达 间接ELISA
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中药对免疫抑制鸡免疫器官形态学影响的研究 被引量:8
9
作者 张乐 王金宝 +3 位作者 周克年 孙月平 任慧英 吕永艳 《中兽医医药杂志》 北大核心 1998年第2期9-11,共3页
将60只星杂288雏鸡随机分为A、B、C、D4组,每组15只,A组只应用中药;B组在应用氢化可的松的同时使用中药;C组只使用氢化可的松;D组为空白对照组。4组鸡均在9日龄、28日龄时ND弱毒疫苗免疫,35日龄称重、剖... 将60只星杂288雏鸡随机分为A、B、C、D4组,每组15只,A组只应用中药;B组在应用氢化可的松的同时使用中药;C组只使用氢化可的松;D组为空白对照组。4组鸡均在9日龄、28日龄时ND弱毒疫苗免疫,35日龄称重、剖解、取材做石蜡切片,观察鸡免疫器官的形态学变化。结果表明,氢化可的松可使鸡免疫器官发育不良,抑制免疫活性细胞的生成,而中药对免疫抑制有调节作用,可使氢化可的松造成的免疫抑制转至正常水平。 展开更多
关键词 中药 氢化可的松 免疫器官
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海水养殖鱼类鳗弧菌(Vibrio anguillarum)临床分离株的血清型和抗生素耐药谱 被引量:9
10
作者 赵鲁宁 李贵阳 +3 位作者 李杰 李晨 张乐 莫照兰 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1109-1118,共10页
鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是常见的海水鱼类病原菌,有23种血清型,其中O1—O3为主要的致病血清型。我国海水养殖鱼类鳗弧菌的血清型种类尚未明确。本研究对实验室分离和收集自海水养殖鱼类的31株鳗弧菌临床菌株进行了生理生化、16S r ... 鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是常见的海水鱼类病原菌,有23种血清型,其中O1—O3为主要的致病血清型。我国海水养殖鱼类鳗弧菌的血清型种类尚未明确。本研究对实验室分离和收集自海水养殖鱼类的31株鳗弧菌临床菌株进行了生理生化、16S r RNA基因序列、血清分型、抗生素敏感性的分析,旨在系统了解存在于我国海水养殖环境的鳗弧菌血清学型及耐药特征。首先用API ID32E生化反应鉴定系统对鳗弧菌进行生理生化鉴定,结果未能将待测菌株鉴定到种的水平;然后测定鳗弧菌的16S r RNA基因序列并构建系统发育树,结果显示所有分离株聚为一簇,与鳗弧菌有最近的亲缘关系(相似性99%—100%),据此可将临床菌株鉴定为鳗弧菌。以鳗弧菌O1—O5血清型标准菌株为O抗原制备兔抗血清,采用玻片凝集反应对鳗弧菌菌株进行血清学分析,结果显示属于O1、O2、O3、O5血清型菌株分别有16、5、3、1株,表明我国海水鱼类养殖存在3种血清型的致病性鳗弧菌,O1为主要流行的血清型。用ATB药敏检测系统检测鳗弧菌对28种抗生素的敏感性,结果显示菌株对7种抗生素(林可霉素、夫西地酸、甲硝唑、阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、苯唑西林、青霉素)的耐药率为100%,对3种抗生素(红霉素、原始霉素、泰洛星)的耐药率为94.4%(34株),有83%以上的菌株(30株)对12种以上的抗生素产生耐药,表明我国海水鱼类养殖鳗弧菌普遍存在多重耐药性。研究结果为进一步揭示鳗弧菌的流行病学规律和防控弧菌病奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 鳗弧菌 生理生化反应 16S RRNA基因 血清学鉴定 抗生素敏感性
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复方中药对蛋雏鸡感染IBDV后免疫器官的形态学影响 被引量:4
11
作者 张乐 王金宝 +3 位作者 张宗敏 马端忠 孙月平 宋玉芹 《中国家禽》 北大核心 1998年第9期10-11,共2页
200只30日龄健康海兰蛋雏鸡随机分为四组,每组50只。A组饲料中添加复方中药,接种IBDV;B组饲料中添加中药,接种IBDV;C组不添加中药,接种IBDV;D组不作任何处理为对照组。在接种后7d剖检、取材作石蜡切片... 200只30日龄健康海兰蛋雏鸡随机分为四组,每组50只。A组饲料中添加复方中药,接种IBDV;B组饲料中添加中药,接种IBDV;C组不添加中药,接种IBDV;D组不作任何处理为对照组。在接种后7d剖检、取材作石蜡切片,观察鸡免疫器官的形态学变化。结果表明,传染性IBD野毒可使鸡免疫器官发育不良,主要导致法氏囊的淋巴细胞变性坏死,抑制免疫活性细胞的生成,导致免疫抑制;中药促进免疫器官发育及免疫活性细胞生成,提高免疫活性,调节免疫抑制,使免疫器官的组织结构保持或恢复正常水平;复方中药抗IBDV感染的效果优于中药。 展开更多
关键词 中药 IBDV 免疫器官 鸡病 形态学
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Internet对我国传统农业生产模式的影响(上) 被引量:8
12
作者 臧运平 张乐 +1 位作者 盖明媚 王政军 《农业网络信息》 2006年第6期80-81,85,共3页
本文阐述了我国农业信息网络发展的概况,分析了农业信息网络发展的特征及其迅速发展的技术原因和社会原因。论述了Internet对我国传统农业生产模式的宏观影响,这些影响主要表现在Internet的发展对农民传统的生产观念的影响,对政府指导... 本文阐述了我国农业信息网络发展的概况,分析了农业信息网络发展的特征及其迅速发展的技术原因和社会原因。论述了Internet对我国传统农业生产模式的宏观影响,这些影响主要表现在Internet的发展对农民传统的生产观念的影响,对政府指导农业生产形式的影响,对农业信息网络发展的影响,对数字农业发展的影响等方面。 展开更多
关键词 INTERNET 传统农业 宏观影响 生产模式
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中药对法氏囊病病毒感染仔鸡免疫器官形态学的影响 被引量:5
13
作者 张乐 王金宝 +3 位作者 马端忠 孙月平 任慧英 周克年 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第8期42-43,共2页
中药对法氏囊病病毒感染仔鸡免疫器官形态学的影响*张乐萃王金宝马端忠孙月平任慧英周克年(莱阳农学院动科系,山东265200)法氏囊病(IBD)是鸡的一种急性病毒性传染病,是危害养鸡业发展的主要疾病之一,鸡感染本病后,主... 中药对法氏囊病病毒感染仔鸡免疫器官形态学的影响*张乐萃王金宝马端忠孙月平任慧英周克年(莱阳农学院动科系,山东265200)法氏囊病(IBD)是鸡的一种急性病毒性传染病,是危害养鸡业发展的主要疾病之一,鸡感染本病后,主要危害其免疫器官-法氏囊,导致免疫... 展开更多
关键词 仔鸡 免疫器官 法氏囊病毒 中药
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甲型流感病毒血凝素基因在昆虫杆状病毒系统中的表达 被引量:7
14
作者 付金奇 郭建强 +4 位作者 姚立红 陈爱珺 刘晓宇 张乐 张智清 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第9期1007-1012,共6页
目的利用昆虫杆状病毒系统表达甲型流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)蛋白。方法 PCR扩增去除信号肽的甲型H1N1(A/PR/8/34)流感病毒HA基因,与pFastBacdual载体(pFBd)连接,构建转移载体pFBd-HA,转化含Bacmid的DH10Bac感受态细胞,获得穿... 目的利用昆虫杆状病毒系统表达甲型流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)蛋白。方法 PCR扩增去除信号肽的甲型H1N1(A/PR/8/34)流感病毒HA基因,与pFastBacdual载体(pFBd)连接,构建转移载体pFBd-HA,转化含Bacmid的DH10Bac感受态细胞,获得穿梭质粒rBacmid-HA。rBacmid-HA转染sf9昆虫细胞,获得重组病毒rBac-HA。采用噬斑形成法检测病毒滴度,PCR法检测重组杆状病毒基因组HA基因,间接免疫荧光法、Western blot法和ELISA法检测HA蛋白的表达。结果穿梭质粒rBacmid-HA经PCR鉴定构建正确;第3代rBac-HA的滴度为3×107 pfu/ml;感染rBac-HA的sf9细胞经PCR扩增可见4 216 bp的特异性条带,间接免疫荧光检测可见绿色荧光,Western blot鉴定与鼠抗甲型流感病毒HA(H1)单抗和鸡抗流感病毒(California株)多抗发生特异性反应,ELISA检测与鼠抗流感病毒(PR8株)多抗特异性结合的能力强于与鸡抗流感病毒(California株)多抗结合的能力。结论 利用昆虫杆状病毒表达系统成功表达了甲型流感病毒HA蛋白。 展开更多
关键词 血凝素糖蛋白类 流感病毒 杆状病毒 SF9细胞
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动物源空肠弯曲杆菌的分离及耐药性试验 被引量:7
15
作者 杨胜男 王娟 +4 位作者 郑增忍 张乐 曲志娜 黄秀梅 李玉清 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第8期116-119,共4页
为了解不同来源空肠弯曲杆菌耐药性情况,采用E-Test药敏试纸条法进行药物敏感性试验。从青岛屠宰场采集120份鸡盲肠内容物分离到22株空肠弯曲杆菌,分离率达到18.33%,采集50份猪盲肠内容物棉拭子,分离到16株空肠弯曲杆菌,分离率为32%。... 为了解不同来源空肠弯曲杆菌耐药性情况,采用E-Test药敏试纸条法进行药物敏感性试验。从青岛屠宰场采集120份鸡盲肠内容物分离到22株空肠弯曲杆菌,分离率达到18.33%,采集50份猪盲肠内容物棉拭子,分离到16株空肠弯曲杆菌,分离率为32%。分别测定所得的空肠弯曲杆菌耐药性。结果表明,鸡源和猪源空肠弯曲杆菌对红霉素耐药性都较高,超过80%;对萘啶酸、四环素的耐药性超过50%,鸡源空肠弯曲杆菌对庆大霉素较为敏感,敏感度达到86%;而猪源空肠弯曲杆菌对阿奇霉素和克林霉素较为敏感,敏感度分别达到81.2%、87.5%。说明本地区的不同来源的空肠弯曲杆菌分离率和耐药性都有不同程度的差异。 展开更多
关键词 空肠弯曲杆菌 分离 耐药性 聚合酶链反应
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香菇多糖的化学性能研究 被引量:3
16
作者 史美丽 王金宝 +2 位作者 孙月平 袁月莲 张乐 《莱阳农学院学报》 1999年第1期47-49,共3页
对均一性的香菇多糖( Lentinan) 通过层析分析法,光谱分 析法研究了其化学性能,以及 采用凝胶层析法; 分光光度法、浊度滴定法、粘度测定法研究了其高分子性能。[α]35 D= - 26 .6 ,纸层离 Rf =0 .... 对均一性的香菇多糖( Lentinan) 通过层析分析法,光谱分 析法研究了其化学性能,以及 采用凝胶层析法; 分光光度法、浊度滴定法、粘度测定法研究了其高分子性能。[α]35 D= - 26 .6 ,纸层离 Rf =0 .688 ~0 .755 , I R 显示618 .2c m - 1 ,111 6 .7c m - 1 ,3405 .7c m - 1 处有特征吸收峰, U V 显示197 .0 n m 处有特征峰,彻底水解为 D- 葡萄糖、 D- 甘露糖、 D- 半乳糖、 L- 岩藻糖。硅胶柱层离分为二个 级分, 分子量分别为1 .0 ×10 4 ,8 .9 ×104 ,Θ T = 22 .2 ±0 .02 ℃,Θ 溶 剂 为: V水: V丙酮= 80 .45 :19 .55 。 Mark ─ Ho w wink 方程[η] = 5 .25 ×10 - 3 M0 .45 。 展开更多
关键词 香菇多糖 化学性能 高分子性能 多糖
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H9N2亚型禽流感病毒辽宁分离株HA1蛋白的原核表达 被引量:4
17
作者 陈欣 张乐 +1 位作者 卢春晓 尹燕博 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第10期89-91,共3页
为表达H9N2亚型禽流感病毒的HA1蛋白,从H9N2亚型禽流感病毒辽宁分离株中扩增其HA1基因片段,将扩增得到的HA1基因克隆至原核表达载体pGEX-6p-1中,转化到BL21(DE3)中进行表达。结果表明,IPTG诱导融合蛋白表达条件确定最佳诱导时间为8h,IPT... 为表达H9N2亚型禽流感病毒的HA1蛋白,从H9N2亚型禽流感病毒辽宁分离株中扩增其HA1基因片段,将扩增得到的HA1基因克隆至原核表达载体pGEX-6p-1中,转化到BL21(DE3)中进行表达。结果表明,IPTG诱导融合蛋白表达条件确定最佳诱导时间为8h,IPTG最佳终浓度为0.8mmol/L。经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,表达产物的分子质量约为61ku。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 疫苗 大肠埃希菌 表达
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水疱性口炎病毒荧光RT-PCR鉴别检测方法的建立与应用 被引量:4
18
作者 臧京帅 高志强 +6 位作者 王丽萍 郭金玉 傅毅 牛建蕊 刘文晓 张乐 张鹤晓 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第5期73-76,共4页
本研究建立荧光定量RT-PCR鉴别检测水疱性口炎病毒的方法。针对Gen Bank登录的水疱性口炎两血清型-新泽西型(VSV-NJ)和印第安纳型(VSV-IND)的L基因保守区,设计1对引物和2条探针。通过对荧光定量RT-PCR反应条件的优化,建立了Taq Man荧光... 本研究建立荧光定量RT-PCR鉴别检测水疱性口炎病毒的方法。针对Gen Bank登录的水疱性口炎两血清型-新泽西型(VSV-NJ)和印第安纳型(VSV-IND)的L基因保守区,设计1对引物和2条探针。通过对荧光定量RT-PCR反应条件的优化,建立了Taq Man荧光定量RT-PCR快速检测VSV的方法。与常规RT-PCR试验比较表明,所建立的荧光RT-PCR检测技术快速、敏感,检测时限3 h以内,具有很好的特异性和重复性,可以实现水疱性口炎病毒的快速检测分型。通过对342份临床样品进行检测,结果表明,所建立的检测方法适用于样品中水疱性口炎病毒的直接检测。 展开更多
关键词 水疱性口炎病毒 荧光RT-PCR TCID50 鉴别检测
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新城疫强毒株荧光定量RT-PCR检测技术的建立及应用 被引量:5
19
作者 罗瑶瑶 王静静 +9 位作者 吕艳 赵云玲 郑东霞 魏润宇 于松梅 左媛媛 张乐 单虎 刘华雷 王志亮 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期541-549,共9页
基于国内流行的新城疫病毒强毒株F蛋白裂解位点分子特征设计特异性引物及Taqman探针,建立了一种可检测新城疫强毒株的一步法实时荧光定量RT-PCR方法。通过体外转录法制备cRNA标准品作为阳性模板制作标准曲线以及临床样品的检测绘制出RO... 基于国内流行的新城疫病毒强毒株F蛋白裂解位点分子特征设计特异性引物及Taqman探针,建立了一种可检测新城疫强毒株的一步法实时荧光定量RT-PCR方法。通过体外转录法制备cRNA标准品作为阳性模板制作标准曲线以及临床样品的检测绘制出ROC曲线,对诊断指标进行系统评价。结果显示:该方法的标准曲线为Y=-3.390X+38.23,相关系数R2为0.9999;灵敏度试验显示,该方法的最低检测限为2拷贝/μL,比常规RTPCR高10倍;特异性试验显示该方法与常见禽病病毒无交叉反应;重复性试验的组内和组间的变异系数分别低于1%和1.5%。通过检测1 974份临床样品绘制ROC曲线显示,ROC曲线下面积为0.9861,当Youden Index为93.12时,cutoff值设为35,诊断的敏感性和特异性分别为94.82%、98.3%,与病毒分离方法的Kappa系数为0.919。本研究建立的方法敏感性高、特异性强、重复性好、诊断准确性极好,给实验室提供一种快速、实用的检测临床样品的方法。 展开更多
关键词 新城疫病毒(NDV) 强毒 荧光定量RT-PCR ROC曲线
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表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白重组腺病毒的构建及免疫原性的初步分析 被引量:3
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作者 宋菲菲 康震 +4 位作者 齐艳君 袁颖烁 张守峰 张乐 扈荣良 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1449-1454,共6页
拟构建表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)QS10株S1蛋白的重组复制缺陷型人5型腺病毒,并在本动物上进行初步的免疫学试验。通过RT-PCR获得S1基因,插入腺病毒表达系统穿梭质粒,构建重组穿梭质粒pac-Ad5CMV-S1,转染293AD细胞获得表达S1蛋白的... 拟构建表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)QS10株S1蛋白的重组复制缺陷型人5型腺病毒,并在本动物上进行初步的免疫学试验。通过RT-PCR获得S1基因,插入腺病毒表达系统穿梭质粒,构建重组穿梭质粒pac-Ad5CMV-S1,转染293AD细胞获得表达S1蛋白的重组腺病毒。PCR检测显示,S1基因已重组到腺病毒基因组;间接免疫荧光和Western blot检测证明该重组病毒在293AD细胞中真实表达了具有免疫反应性的IBV S1糖蛋白。重组病毒培养滴度可达到107 TCID50.mL-1。免疫接种SPF鸡后,通过ELISA检测,免疫鸡产生了针对IBV的特异性抗体。作者成功构建了表达IBV S1蛋白的重组腺病毒,该重组病毒可在SPF鸡体内诱导产生IBV特异性抗体。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 S1蛋白 人5型腺病毒载体 免疫原性
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