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金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分型和分布 被引量:116
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作者 严峻 俊彦 +3 位作者 梅玲玲 王志刚 朱敏 王赞信 《中国卫生检验杂志》 CAS 2005年第6期682-684,共3页
目的:建立金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测方法。初步研究生牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分布状况。方法:应用PCR扩增经分离鉴定的金黄色葡萄球菌肠毒素基因SEA-SEJ,电泳检测扩增结果。结果:建立了金黄色葡萄球菌肠毒素基因PCR检... 目的:建立金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测方法。初步研究生牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分布状况。方法:应用PCR扩增经分离鉴定的金黄色葡萄球菌肠毒素基因SEA-SEJ,电泳检测扩增结果。结果:建立了金黄色葡萄球菌肠毒素基因PCR检测方法。从生牛奶中分离的29株金黄色葡萄球菌检测到SEA-SED和SEG-SEJ基因,没有检测到SEE基因。毒素基因携带率为65.5%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占37.9%。有SEA基因的占51.7%,含其它传统的毒素基因类型SEB、SEC、SED和SEE基因的菌株只占17.2%,携带新发现的毒素基因SEG、SEH、SEI和SEJ的菌株占41.4%。结论:建立的PCR检测金黄色葡萄球菌的肠毒素基因的方法可用于金黄色葡萄球菌肠毒素基因分型和分布的研究。研究表明,生牛奶中分离的金黄色葡萄球菌带毒率高,而且携带新发现的肠毒素基因的较多。 展开更多
关键词 肠毒素基因 金黄色葡萄球菌肠毒素 PCR检测方法 PCR扩增 基因携带率 SEA基因 生牛奶 分布状况 分离鉴定 电泳检测 基因类型 基因分型 E基因 步研究 菌株 SEB SEC SED SEG 带毒率 新发
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浙江省2008-2009年手足口病疫情及病原学分析 被引量:85
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作者 吕华坤 严峻 +4 位作者 缪梓萍 蔡剑 秦淑文 龚黎明 陈直平 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期105-107,共3页
目的分析浙江省手足口病流行特征,探讨适宜防控措施。方法收集中国疾病监测信息报告系统和浙江省2008-2009年手足口病重症病例和死亡病例个案资料,采用描述性流行病学方法进行分析比较。结果浙江省2008年手足口病报告病例36 726例,报告... 目的分析浙江省手足口病流行特征,探讨适宜防控措施。方法收集中国疾病监测信息报告系统和浙江省2008-2009年手足口病重症病例和死亡病例个案资料,采用描述性流行病学方法进行分析比较。结果浙江省2008年手足口病报告病例36 726例,报告发病率为72.6/10万,死亡病例7例,病死率为1.9/万;2009年报告69 285例,报告发病率为135.3/10万,死亡病例8例,病死率为1.2/万;2009年1-6月份以人类肠道病毒71型(HEV71)为主,8月份后以柯萨奇A组16型(CoxA16)为主;HEV71均为C4a亚型;重症病例比例与HEV71构成比成正相关关系(r=0.709,P=0.000)。结论浙江省手足口病疫情具有地区持续性,重症死亡发生与手足口病病原谱(HEV71构成)改变有关。 展开更多
关键词 手足口病 流行特征 病原学
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301份海水产品副溶血性弧菌定量检测分析 被引量:49
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作者 俊彦 梅玲玲 +4 位作者 朱敏 严峻 潘雪霞 石雅素 郑官增 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第3期509-510,共2页
目的:了解副溶血性弧菌在浙江省部分海水产品中的污染情况。方法:按3个季节,分别从不同的农贸市场采取鱼、虾、贝类标本,采用MPN法定量检测副溶血性弧菌,参照GB/T4789.7方法分离、鉴定副溶血性弧菌,采用血清凝集试验对菌株进行血清型分... 目的:了解副溶血性弧菌在浙江省部分海水产品中的污染情况。方法:按3个季节,分别从不同的农贸市场采取鱼、虾、贝类标本,采用MPN法定量检测副溶血性弧菌,参照GB/T4789.7方法分离、鉴定副溶血性弧菌,采用血清凝集试验对菌株进行血清型分析。结果:301份海水产品共检出副溶血性弧菌133份,阳性率为44.19%,其中副溶血性弧菌检出率虾类和贝类样品显著高于鱼类样品(P<0.01),副溶血性弧菌平均浓度虾类样品显著高于其它两类样品(P<0.01);夏季采集的海水产品副溶血性弧菌检出率显著高于其它季节(P<0.01);分离的副溶血性弧菌血清型主要为O5、O1和O4,占分离菌株的62%。结论:我省零售海产品中副溶血性弧菌污染十分严重,夏季尤其突出,因此我省应重点防止由海产品引起的副溶血性弧菌食物中毒或食源性疾病。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 定量检测 血清型
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金黄色葡萄球菌食品和病人分离株肠毒素基因和耐药性比较 被引量:30
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作者 严峻 王志刚 +2 位作者 程苏云 朱敏 俊彦 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第1期33-35,共3页
目的:对金黄色葡萄球菌食品(不含生牛奶)分离株和病人分离株的肠毒素基因进行分型和耐药性检测,比较两种分离菌株的肠毒素基因分布和耐药性差异。方法:用国标方法分离鉴定金黄色葡萄球菌,VITEK32生化验证,PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素基... 目的:对金黄色葡萄球菌食品(不含生牛奶)分离株和病人分离株的肠毒素基因进行分型和耐药性检测,比较两种分离菌株的肠毒素基因分布和耐药性差异。方法:用国标方法分离鉴定金黄色葡萄球菌,VITEK32生化验证,PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素基因(肠毒素SEA-SEJ基因),VITEK32测定分离菌株抗生素的耐药性。结果:从病人分离的80株金黄色葡萄球菌检测到9种基因。肠毒素基因携带率为85.0%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占76.3%,含传统肠毒素基因(SEA-SEE)的菌株占43.8%,有新发现肠毒素基因(SEG-SEJ)的菌株占71.3%。从食品中分离的51株金黄色葡萄球菌检测到7种肠毒素基因。肠毒素基因携带率为68.7%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占21.6%。有SEA基因的占27.5%,含其它传统的毒素基因类型(SEB-SEE)基因的菌株占23.5%,携带新发现的毒素基因SEG、SEH、SEI的菌株只占9.8%。金黄色葡萄球菌病人分离株与食品分离株的耐药谱和耐药率有较大差异。结论:金黄色葡萄球菌食品分离株和病人分离株的肠毒素基因分布不同,其耐药性有明显区别。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素 基因 耐药性
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浙江省发热伴血小板减少综合征病例临床与流行病学特征分析 被引量:28
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作者 柴程良 孙继民 +4 位作者 林君芬 施旭光 严峻 侯娟 《中国预防医学杂志》 CAS 2012年第12期904-907,共4页
目的分析发热伴血小板减少综合征病例临床与流行病学特征,为进一步研究提供线索。方法采用流行病学个案调查与描述性分析方法,收集发热伴血小板减少综合征确诊与疑似病例发病、诊治、检测与流行病学史等资料,分析病例临床与流行病学特... 目的分析发热伴血小板减少综合征病例临床与流行病学特征,为进一步研究提供线索。方法采用流行病学个案调查与描述性分析方法,收集发热伴血小板减少综合征确诊与疑似病例发病、诊治、检测与流行病学史等资料,分析病例临床与流行病学特征。结果浙江省6类地形中有3类存在发热伴血小板减少综合征疫情,病例以丘陵山区50岁以上人群为主(87.50%),6~7月为发病高峰(65.00%)。所有病例均有发热,体温最低37.6℃,最高40.6℃,平均39.2℃,且发热为主要首发症状。大部分病例有畏寒(67.50%)、乏力(67.50%)、食欲减退(52.50%)等非特异性症状。病例临床表现为发热伴白细胞和血小板减少,白细胞和血小板进行性减少可持续至发病后14~15d,且血小板进行性减少持续时间更长,未发现人传人现象。结论浙江省发热伴血小板减少综合征病例临床与流行病学特征与其他省份比较存在差异,有待于进一步研究解决。 展开更多
关键词 发热伴血小板减少综合征 临床特征 流行病学特征
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浙江省首次发现新型布尼亚病毒感染病例及分离病毒分子鉴定 被引量:24
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作者 严峻 +4 位作者 丁钢强 严杰 冯岑 严菊英 梁米芳 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1107-1111,共5页
目的 了解浙江省是否存在新型布尼亚病毒潜在自然疫源地,分离疑似病例血清中新型布尼亚病毒并进行鉴定.方法 免疫荧光法检测浙江省台州地区野生啮齿动物不同组织标本中新型布尼亚病毒抗原.实时荧光定量RT-PCR检测疑似病人血清中新型布... 目的 了解浙江省是否存在新型布尼亚病毒潜在自然疫源地,分离疑似病例血清中新型布尼亚病毒并进行鉴定.方法 免疫荧光法检测浙江省台州地区野生啮齿动物不同组织标本中新型布尼亚病毒抗原.实时荧光定量RT-PCR检测疑似病人血清中新型布尼亚病毒核酸,扩增产物进行序列测定.Vero细胞分离疑似病人血清中新型布尼亚病毒,以新型布尼亚病毒株核衣壳蛋白编码基因为靶基因,采用RT-PCR及扩增产物测序对分离的疑似新型布尼亚病毒株进行鉴定,另对该序列进行同源性分析和比较.结果 70只野生啮齿动物中,免疫荧光法检测阳性率为5.71%.实时荧光定量RT-PCR检测结果显示,4例疑似病人血清中有两例检测结果阳性.1例阳性血清样本中分离出1株疑似新型布尼亚病毒,RT-PCR和测序结果证实该病毒确为新型布尼亚病毒,其核衣壳蛋白编码基因序列与湖北省新型布尼亚病毒分离株相似性高达92.2%,但与国内其他地区新型布尼亚病毒分离株序列差异较大.结论 首次证实浙江省存在新型布尼亚病毒自然疫源地及感染病人,不同群新型布尼亚病毒分布可能存在一定的地理差异. 展开更多
关键词 新型布尼亚病毒 病毒分离 分子鉴定 同源性分析
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低温和几丁质酶处理对棉铃虫围食膜的影响 被引量:15
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作者 严峻 谭军 林玉清 《中国生物防治》 CSCD 2000年第4期152-155,共4页
应用扫描电镜观察了经低温处理 (5℃ ,2 4h)和几丁质酶处理的棉铃虫围食膜的形态变化。结果表明 ,正常围食膜致密平滑 ,没有孔或缝。低温处理的围食膜产生了孔和缝 ,孔径可达15 0 nm,使核多角体病毒能进入中肠细胞。经几丁质酶处理的围... 应用扫描电镜观察了经低温处理 (5℃ ,2 4h)和几丁质酶处理的棉铃虫围食膜的形态变化。结果表明 ,正常围食膜致密平滑 ,没有孔或缝。低温处理的围食膜产生了孔和缝 ,孔径可达15 0 nm,使核多角体病毒能进入中肠细胞。经几丁质酶处理的围食膜也出现孔和缝。处理时间越长 ,破坏越大。几丁质酶处理围食膜对蛋白质含量有一定影响 。 展开更多
关键词 棉铃虫 围食膜 低温 几丁质酶
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浙江省2008-2009年三起诺如病毒胃肠炎暴发的病原分子特征分析 被引量:21
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作者 龚黎明 葛琼 +5 位作者 陈寅 卢亦愚 严峻 严菊英 周敏 史雯 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期490-493,共4页
目的分析浙汀省3起病毒性胃肠炎暴发疫情的诺如病毒分子特征。方法收集监测期间病毒性胃肠炎暴发疫情患者的粪便标本,采用荧光定量RT-PCR方法检测诺如病毒,并选择部分阳性标本扩增部分多聚酶区(RdRp)和衣壳蛋白区,同时采用3’RACE... 目的分析浙汀省3起病毒性胃肠炎暴发疫情的诺如病毒分子特征。方法收集监测期间病毒性胃肠炎暴发疫情患者的粪便标本,采用荧光定量RT-PCR方法检测诺如病毒,并选择部分阳性标本扩增部分多聚酶区(RdRp)和衣壳蛋白区,同时采用3’RACE(rapid amplification of cDNA 3’ends)扩增诺如病毒基因组3’末端,获得完整的开放读码框架(ORF)2和ORF3序列。结果3起暴发疫情共检测标本62份,诺如病毒阳性41份,其中诺如病毒Ⅰ(GⅠ)基因组阳性27例,Ⅱ基因组(GⅡ)阳性9例,GⅠ+GⅡ阳性5例。结果显示,引起浙江省2008—2009年3起病毒性胃肠炎暴发疫情的诺如病毒具有病毒基因型的多样性,包括GⅠ.8、GⅡ.b、GⅠ.2与GⅠ.6重组株、GⅠ.8和GⅡ.b混合感染。结论诺如病毒是浙江省病毒性腹泻暴发疫情的重要病原体,呈现出病毒基冈型的多样性,并在省内首次检测到诺如病毒的重组和混合感染毒株。 展开更多
关键词 诺如病毒 分子特征 重组 混合感染
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2009年浙江省义乌市登革热暴发疫情实验诊断和病原分子溯源 被引量:17
9
作者 严菊英 严峻 +5 位作者 茅海燕 林君芬 陈劲华 凌峰 王欣莹 卢亦愚 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1091-1096,共6页
目的 对2009年浙江省义乌市发生疑似登革热暴发疫情进行实验诊断和病原分子溯源.方法 对40份疑似患者的血清样本同时进行登革病毒抗体、病毒核酸检测和病毒分离.对分离毒株提取病毒核酸后用RT-PCR方法扩增E基因,进行核苷酸序列测定和同... 目的 对2009年浙江省义乌市发生疑似登革热暴发疫情进行实验诊断和病原分子溯源.方法 对40份疑似患者的血清样本同时进行登革病毒抗体、病毒核酸检测和病毒分离.对分离毒株提取病毒核酸后用RT-PCR方法扩增E基因,进行核苷酸序列测定和同源性与进化分析.结果 40份血清样本中登革病毒IgM抗体阳性17份(42.5%),IgG抗体阳性4份(10.0%);核酸阳性34份(85.0%);分离到登革病毒3型(D3)28株(70.0%).选取13株D3分离株测序,E基因全长均为1479个核苷酸(nt),无插入或缺失突变,推导编码493个氨基酸(aa).13株浙江D3分离株之间E基因同源性为100.0%.浙江D3株与2004年沙特阿拉伯分离株(Sandi Arabia/2004)的同源性最高,nt和aa同源性分别为99.3%和100.0%;与原型株(D3/H87/1956)相比同源性分别为93.4%和97.4%;与1980年中国广西D3分离株在该区域的同源性分别为93.6%和97.4%.E基因进化树显示浙江D3分离株在GⅢ进化支上,与浙江株亲缘关系最近的毒株为沙特阿拉伯株,均在同一进化支上.结论 引起2009年浙江省义乌市登革热暴发疫情的病原是登革3型GⅢ亚型,该病毒最有可能来源于沙特阿拉伯. 展开更多
关键词 疾病暴发流行 登革热病毒 免疫表型分型
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浙江省2006-2007年暴发性胃肠炎中诺如病毒的分子流行病学分析 被引量:18
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作者 龚黎明 葛琼 +4 位作者 卢亦愚 严峻 严菊英 周敏 余昭 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期147-150,共4页
目的分析浙江省2006-2007年暴发性病毒性胃肠炎中诺如病毒感染的分子流行病学特征。方法收集监测期间暴发性病毒性胃肠炎疫情患者的粪便标本及相关流行病学资料。采用RT-PCR及荧光定量RT-PCR检测诺如病毒。随机选择部分阳性标本扩增部... 目的分析浙江省2006-2007年暴发性病毒性胃肠炎中诺如病毒感染的分子流行病学特征。方法收集监测期间暴发性病毒性胃肠炎疫情患者的粪便标本及相关流行病学资料。采用RT-PCR及荧光定量RT-PCR检测诺如病毒。随机选择部分阳性标本扩增部分多聚酶区和衣壳蛋白片段,进行序列测定,结合诺如病毒I(GI)、Ⅱ(GⅡ)基因型参考株进行进化分析。结果诺如病毒感染暴发性胃肠炎共5起,发生时间均集中于9-12月,送检标本63份,诺如病毒检测阳性45份。序列分析结果显示,浙江省诺如病毒序列与诺如病毒GⅡ/4型参考株同源性最高,其中与北京2006年、荷兰2006年诺如病毒GⅡ/4型变异株最为接近,核苷酸同源性分别为99.7%和98.5%-99.0%。诺如病毒与北京、荷兰流行的GⅡ/4型变异株处于同一分支。结论诺如病毒是浙江省病毒性腹泻暴发疫情的重要病原体,流行时间集中于秋季,其流行株为GⅡ/4型变异病毒株。 展开更多
关键词 诺如病毒 暴发性病毒性胃肠炎 分子流行病学
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食品中单增李斯特菌血清型及耐药性监测 被引量:15
11
作者 潘军航 梅玲玲 +4 位作者 严峻 汪炜 朱敏 潘雪霞 俊彦 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期107-108,共2页
关键词 单增李斯特菌 耐药性监测 各类食品 血清型 单核细胞增生李斯特菌 散装熟肉制品 食源性疾病 病致病菌
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食品中沙门菌污染状况及耐药性研究 被引量:17
12
作者 潘雪霞 朱敏 +4 位作者 梅玲玲 严峻 俊彦 汪炜 潘军航 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第9期1103-1104,共2页
目的:了解浙江省食品中沙门菌的污染状况和耐药水平。方法:根据GB4789.4—94进行沙门菌的分离鉴定;用VITEK微生物分析系统GNS121药敏卡片测定沙门菌的耐药性。结果:从1047份生肉、生奶、生水产品和生食蔬菜中分离到74株沙门菌,总... 目的:了解浙江省食品中沙门菌的污染状况和耐药水平。方法:根据GB4789.4—94进行沙门菌的分离鉴定;用VITEK微生物分析系统GNS121药敏卡片测定沙门菌的耐药性。结果:从1047份生肉、生奶、生水产品和生食蔬菜中分离到74株沙门菌,总阳性率为7.07%。主要血清型为德尔卑沙门菌、鼠伤寒沙门菌和圣保罗沙门菌。对其中66株沙门菌的耐药性测定结果表明,对1种以上的抗生素敏感的沙门菌占51.52%,对5种以上抗生素耐药的多重耐药株占7.58%。在15种药敏试剂中,对呋喃妥因、安苄西林、哌拉西彬他唑巴坦、阿莫西彬克拉维酸和妥布霉素的耐药性达33.33%、16.67%、12.12%、9.09%和9.09%;对环丙沙星、庆大霉素和复方新诺明存在一定的耐药菌株(约达5%-8%);所有菌株对丁氨卡那霉素、头孢曲松、头孢替坦、头孢他啶和亚胺培南均敏感。结论:与2001年所测菌株的耐药性相比,被测菌株的耐药性有所增强,耐药谱有所变宽。 展开更多
关键词 沙门菌 污染状况 耐药性
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浙江省发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒的宿主媒介调查 被引量:17
13
作者 马婷 龚震宇 +6 位作者 严峻 孙继民 施旭光 任江萍 蒋健敏 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2015年第4期353-356,共4页
目的调查浙江省发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)传播媒介蜱和宿主鼠形动物的种群分布、季节消长及其带病毒情况。方法 2013年分4个季度在浙江省7个市(县)采取人工布旗法和动物体表采集法采集游离蜱和寄生蜱;用鼠笼法捕获鼠形动... 目的调查浙江省发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)传播媒介蜱和宿主鼠形动物的种群分布、季节消长及其带病毒情况。方法 2013年分4个季度在浙江省7个市(县)采取人工布旗法和动物体表采集法采集游离蜱和寄生蜱;用鼠笼法捕获鼠形动物,取肝、脾标本;用RT-PCR方法检测SFTSV核酸。结果共捕蜱751只,隶属于1科6属10种,其中长角血蜱为优势蜱种,占58.5%(439/751),不同县(区)蜱种类分布不完全相同(χ2=1198.409,P<0.05)。3-10月为蜱的活动期,第二季度为蜱的活动高峰期。共捕获鼠形动物1078只,其中啮齿动物3科7属13种,食虫目动物2科2属2种;黑线姬鼠和黑腹绒鼠分别占捕获总数的32.9%(355/1078)和30.2%(326/1078),不同地区的鼠种构成不同(χ2=1623.480,P<0.05)。蜱及鼠形动物标本新布尼亚病毒核酸检测均为阴性。结论浙江省具有SFTSV媒介蜱及宿主鼠形动物的分布,但其传播媒介和可能宿主需要进一步调查研究。 展开更多
关键词 发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒 媒介 宿主
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棉铃虫围食膜的结构和组成 被引量:11
14
作者 严峻 谭军 林玉清 《浙江农业学报》 CSCD 2000年第3期140-143,共4页
应用电子显微技术和生化技术 ,研究了棉铃虫Helicoverpaarmigera (Hiibner)围食膜的超微结构和表面形态 ,初步分析了围食膜蛋白质的种类 ,测定了蛋白质和糖的含量。结果表明 ,围食膜分三层 ,表面平滑致密 ,没有孔和缝。围食膜的蛋白质... 应用电子显微技术和生化技术 ,研究了棉铃虫Helicoverpaarmigera (Hiibner)围食膜的超微结构和表面形态 ,初步分析了围食膜蛋白质的种类 ,测定了蛋白质和糖的含量。结果表明 ,围食膜分三层 ,表面平滑致密 ,没有孔和缝。围食膜的蛋白质种类很多 ,小分子量的蛋白质含量较高。围食膜中 ,蛋白质占 34 .74 % ,糖占 7.61%。 展开更多
关键词 棉铃虫 围食膜 结构 组成 核多角体病毒杀虫剂
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棉铃虫辐射不育效应研究 被引量:13
15
作者 顾伟平 杨荣新 +1 位作者 夏大荣 严峻 《核农学报》 CAS CSCD 2000年第1期40-43,共4页
本文报道了棉铃虫经辐照诱导的不育效应。用60 Coγ射线处理棉铃虫蛹,成虫的羽化率随着剂量的升高而降低,畸形率和死蛹率增加。不同时期辐照蛹对成虫羽化率有明显影响。棉铃虫辐射不育以采用羽化前2d 的老熟蛹辐照为好,其羽化率为86-5... 本文报道了棉铃虫经辐照诱导的不育效应。用60 Coγ射线处理棉铃虫蛹,成虫的羽化率随着剂量的升高而降低,畸形率和死蛹率增加。不同时期辐照蛹对成虫羽化率有明显影响。棉铃虫辐射不育以采用羽化前2d 的老熟蛹辐照为好,其羽化率为86-54 % 。卵的不育率随剂量的升高而升高。根据F1 代辐射遗传不育效应的研究认为:棉铃虫当代亚不育剂量以300 Gy 为宜。 展开更多
关键词 棉铃虫 辐射不育 物理防治 剂量 遗传效应
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一起食物中毒金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测 被引量:13
16
作者 王赞信 俊彦 +1 位作者 朱敏 严峻 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第6期665-666,688,共3页
目的:检测从食物中毒中分离的金黄色葡萄球菌的肠毒素基因,明确肠毒素的基因型。对所分离的金黄色葡萄球菌进行药敏试验,检测其耐药性。方法:应用PCR扩增金黄色葡萄球菌SEA-SEJ基因,电泳检测扩增结果;用VITEK32检测药敏结果。结果:检测... 目的:检测从食物中毒中分离的金黄色葡萄球菌的肠毒素基因,明确肠毒素的基因型。对所分离的金黄色葡萄球菌进行药敏试验,检测其耐药性。方法:应用PCR扩增金黄色葡萄球菌SEA-SEJ基因,电泳检测扩增结果;用VITEK32检测药敏结果。结果:检测到金黄色葡萄球菌的肠毒素基因SEG和SEI,菌株的耐药性不强。结论:金黄色葡萄球菌的肠毒素SEG和SEI可能是这起食物中毒的因子。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素 基因 PCR
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麻疹病毒H基因的特异性逆转录-聚合酶链反应检测 被引量:11
17
作者 傅燕 卢亦愚 严峻 《中国计划免疫》 2001年第1期20-22,共3页
采用逆转录 聚合酶链反应 (RT -PCR)直接从麻疹疫苗沪191株、Edmonston株以及临床麻疹患者的含漱液和咽拭子中检测出 6 35bp的特异性H基因目的条带 ;而对风疹病毒和流行性感冒甲1型、甲3 型、乙型病毒均未检测到相应条带。通过对RT -PC... 采用逆转录 聚合酶链反应 (RT -PCR)直接从麻疹疫苗沪191株、Edmonston株以及临床麻疹患者的含漱液和咽拭子中检测出 6 35bp的特异性H基因目的条带 ;而对风疹病毒和流行性感冒甲1型、甲3 型、乙型病毒均未检测到相应条带。通过对RT -PCR产物的第 2次扩增 ,可以使检测的灵敏度达到 0 0 1TCID50 。针对麻疹患者发病初期血清中IgM抗体阳性率偏低的特点 。 展开更多
关键词 麻疹病毒 逆转录-聚合酶链反应 H基因 麻疹
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浙江省-年一犬伤多人事件调查分析 被引量:13
18
作者 任江萍 王玮 +7 位作者 王欣莹 刘社兰 吕华坤 龚震宇 柴程良 林君芬 严峻 孙继民 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2015年第2期168-171,共4页
目的分析浙江省一犬伤多人事件的流行病学分布特征及处置情况,为进一步做好狂犬病的防控提供依据。方法收集浙江省2011-2013年一犬伤多人事件的调查报告进行统计学分析。结果 2011-2013年浙江省共发生55起一犬伤多人事件,主要分布在浙... 目的分析浙江省一犬伤多人事件的流行病学分布特征及处置情况,为进一步做好狂犬病的防控提供依据。方法收集浙江省2011-2013年一犬伤多人事件的调查报告进行统计学分析。结果 2011-2013年浙江省共发生55起一犬伤多人事件,主要分布在浙中西部地区,肇事犬的狂犬病病毒阳性率为85.00%。共有352名暴露者,以农民为主,狂犬病疫苗及免疫球蛋白的接种率分别为95.73%和80.63%。有2名暴露者因未接受暴露后的规范化处置而死亡,患病率为0.57%。结论一犬伤多人事件危害大,要加强监测及健康教育,做好暴露后的规范化处置。 展开更多
关键词 一犬伤多人事件 狂犬病 调查
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温州市2009-2016年儿童流感监测分析 被引量:13
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作者 陈栋 孙宝昌 +5 位作者 严峻 杜垚强 虞成超 吴矛矛 吴可可 郑文力 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2018年第3期292-296,共5页
目的对温州市2009—2016年儿童流感监测结果的病原学型别及流行病学特征进行分析,为儿童流感防控提供依据。方法通过对哨点医院的门急诊数和流感样病例(influenza-like illness,ILI)进行流行病学分析,对采集的儿童ILI标本进行核酸... 目的对温州市2009—2016年儿童流感监测结果的病原学型别及流行病学特征进行分析,为儿童流感防控提供依据。方法通过对哨点医院的门急诊数和流感样病例(influenza-like illness,ILI)进行流行病学分析,对采集的儿童ILI标本进行核酸检测和病毒分离培养、测序,并对结果进行统计和分析。结果8年间哨点医院共监测门急诊病例10 577 089例,ILI共有337 896例,ILI病例就诊比例平均为3.19%。共检测儿童ILI标本4 046份,流感阳性511份,阳性率为12.63%,检出的流感型别中以乙型最多,H3N2次之;6个年龄组中,0~3岁组流感患者数最多,10~12岁组阳性率最高(35.03%)。甲、乙型流感HA分别有28和45个氨基酸序列突变,其中甲型391位和145位氨基酸发生多次突变;系统进化分析显示乙型不同年份毒株差异较大,且Yamagata进化为Y1和Y2两个分支。结论本市这8年间儿童流感主要以乙型、H3N2型、A(H1N1)型3个亚型交替流行为主,需重点加强学龄前儿童和中小学生的流感防治。 展开更多
关键词 流感 监测 流感病毒 儿童
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多重荧光PCR结合Allglo探针技术检测艰难梭菌相关毒素基因 被引量:12
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作者 金大智 罗芸 +7 位作者 罗丽 叶菊莲 严峻 吴方 方小飞 李辉 王贤军 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期32-35,共4页
目的采用多重荧光PCR结合Allglo探针技术,建立一种快速、特异、灵敏的鉴定艰难梭菌相关毒素基因的方法,并对浙江杭州地区腹泻患者的产毒型艰难梭菌感染现状进行调查研究。方法应用型研究。针对艰难梭菌毒素tcdA和tcdB基因设计引物和... 目的采用多重荧光PCR结合Allglo探针技术,建立一种快速、特异、灵敏的鉴定艰难梭菌相关毒素基因的方法,并对浙江杭州地区腹泻患者的产毒型艰难梭菌感染现状进行调查研究。方法应用型研究。针对艰难梭菌毒素tcdA和tcdB基因设计引物和相应的Allglo探针,优化PCR扩增体系,并评价其特异性、灵敏度、重复性。收集2012年8至12月杭州市第一人民医院的门诊腹泻患者粪便标本共180份,对粪便中携带tcdA和tcdB基因的产毒型艰难梭菌进行鉴定,同时通过对tcdA和tcdB基因直接测序进一步验证荧光PCR检测结果的可靠性。结果本试验建立的结合Allglo探针的多重荧光PCR方法可同时、准确、特异地鉴定艰难梭菌tcdA和tcdB基因,灵敏度可达10CFU/mI。定量检测tcdA基因的循环阈值(Ct)值变异系数分别为2.30%、0.42%、0.81%,检测tcdB基因的ct值变异系数分别为1.91%、1.02%、1.18%,均小于5%。在180份腹泻粪便样本中,检测m26份阳性样本,阳性率为14.4%,其中tcdA和tcdB毒素基因均阳性的样本为23份(23/26,88.5%),仅tcdA毒素基因阳性的样本为2份(2/26,7.7%);仅tcdB毒素基因阳性的样本为1份(1/26,3.8%)。同时,采用直接测序方法对样本进行扩增检测和序列比对,与荧光定量PCR结果完全一致。结果显示浙江杭州地区腹泻患者感染的产毒型艰难梭菌以同时携带tcdA和tcdB毒素基因的菌株为主。结论本研究建立的Allglo探针的多重荧光PCR方法可用于临床上快速、准确地检测产毒型艰难梭菌。 展开更多
关键词 梭菌 难辨 细菌毒素类 肠毒素类 细胞毒素类 荧光 聚合酶链反应
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