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蟾毒灵诱导骨肉瘤细胞株凋亡的蛋白质组学研究 被引量：2
1
作者 谢显彪 温丽丽 +5 位作者 尹军强 廖鸿益 邹昌业 王博 黄纲 沈靖南 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期2739-2743,共5页
目的:探索蟾毒灵诱导骨肉瘤细胞株凋亡的作用及相关分子机制。方法:利用MTT法检测蟾毒灵处理骨肉瘤细胞株U2OS,U2OS/MTX300(甲氨蝶呤耐药细胞株),SAOS2,IOR/OS9后24,48,72 h的生长抑制作用,通过流式细胞仪检测蟾毒灵处理48 h后上述细胞... 目的:探索蟾毒灵诱导骨肉瘤细胞株凋亡的作用及相关分子机制。方法:利用MTT法检测蟾毒灵处理骨肉瘤细胞株U2OS,U2OS/MTX300(甲氨蝶呤耐药细胞株),SAOS2,IOR/OS9后24,48,72 h的生长抑制作用,通过流式细胞仪检测蟾毒灵处理48 h后上述细胞凋亡率,双向凝胶电泳联合MALDI-TOF/TOF质谱技术筛选蟾毒灵处理U2OS细胞48 h后差异表达的蛋白,Western blot法验证相关蛋白表达。结果:蟾毒灵对四株骨肉瘤细胞株生长抑制作用呈时间及剂量依赖性,蟾毒灵对甲氨蝶呤敏感细胞株U2OS及耐甲氨蝶呤细胞株U2OS/MTX300的72 h IC50分别为(37.43±4.1),(32.24±5.3)nmol·L-1。流式细胞仪检测结果证实蟾毒灵可显著诱导四株骨肉瘤细胞凋亡。蛋白质组学筛选、鉴定出蟾毒灵处理U2OS 48 h后24种差异表达蛋白,进一步Western blot验证发现凋亡相关蛋白中热休克蛋白27表达变化最为显著,并且过表达热休克蛋白27可部分逆转蟾毒灵诱导U2OS及U2OS/MTX300细胞凋亡的作用。结论:蟾毒灵具有显著诱导骨肉瘤凋亡作用,其中热休克蛋白27蛋白水平下调在蟾毒灵诱导的骨肉瘤细胞凋亡中具有重要作用。 展开更多
关键词 蟾毒灵 骨肉瘤 凋亡 热休克蛋白27
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靶向β_2-肾上腺素受体抗骨肉瘤的实验研究 被引量：1
2
作者 廖鸿益 谢显彪 +5 位作者 温丽丽 汪校帅 刘伟海 利洪艺 尹军强 黄纲 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期217-221,共5页
【目的】探索靶向β_2-肾上腺素受体诱导骨肉瘤细胞凋亡的作用及相关分子机制。【方法】利用MTT法检测靶向β_2-肾上腺素受体对骨肉瘤细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期阻滞及凋亡,Western blot法检测β_2-肾上腺素受体抑制剂I... 【目的】探索靶向β_2-肾上腺素受体诱导骨肉瘤细胞凋亡的作用及相关分子机制。【方法】利用MTT法检测靶向β_2-肾上腺素受体对骨肉瘤细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期阻滞及凋亡,Western blot法检测β_2-肾上腺素受体抑制剂ICI118,551处理后相关信号通路的变化。【结果】β_2-肾上腺素受体抑制剂对骨肉瘤细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测结果证明ICI118,551可显著诱导骨肉瘤细胞周期阻滞及凋亡,以p-ERK蛋白水平表达变化最为显著。【结论】靶向β_2-肾上腺素受体能显著诱导骨肉瘤细胞凋亡,其中ERK通路在靶向β_2-肾上腺素受体诱导的骨肉瘤细胞凋亡中具有重要作用。 展开更多
关键词 β2-肾上腺素受体 骨肉瘤 凋亡
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