超高效液相色谱-串联质谱法同时测定玉米、花生、麦仁中的9种真菌毒素 被引量：40

1

作者 廉慧锋 赵笑天 +2 位作者 王蓉珍 宋欢 林勤保 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第20期360-366,共7页

建立玉米、花生、麦仁中9种真菌毒素的超高效液相色谱-串联质谱确证方法。样品用甲醇-水溶液和磷酸缓冲液(PBS)双重提取后直接过真菌毒素免疫亲和柱净化;氮气吹干后用的乙腈-水溶液(50:50,V/V)定容,超高效液相色谱-串联质谱(LC-MS-MS)测... 建立玉米、花生、麦仁中9种真菌毒素的超高效液相色谱-串联质谱确证方法。样品用甲醇-水溶液和磷酸缓冲液(PBS)双重提取后直接过真菌毒素免疫亲和柱净化;氮气吹干后用的乙腈-水溶液(50:50,V/V)定容,超高效液相色谱-串联质谱(LC-MS-MS)测定,电喷雾正、负离子(ESI+、ESI-)多反应模式监测。结果表明,样品中真菌毒素在0.1～400μg/kg范围内时与其峰面积呈良好线性关系,定量限为0.1～20μg/kg,3个加标水平下平均回收率为59.5%～118.8%,相对标准偏差为2.4%～12.8%,符合痕量分析的要求。 展开更多

关键词 超高效液相色谱-串联质谱 真菌毒素 玉米 花生 麦仁

下载PDF 职称材料

食品中阿维菌素类药物残留检测方法研究进展 被引量：10

2

作者 廉慧锋 宋洁 +1 位作者 张文娟 宋欢 《山西农业科学》 2011年第8期918-921,共4页

阿维菌素类药物作为一种高效的抗生素类生物杀虫剂,被广泛应用于农业、畜牧业和水产业,属于高毒农药,被世界卫生组织列为高毒化合物,其在食品中的残留问题不容忽视。综述了阿维菌素类药物在农业、畜牧业和水产业中的残留检测技术。

关键词 阿维菌素类药物 残留 检测方法 研究进展

下载PDF 职称材料

禽流感病毒H1、H3、H5、N2亚型多重RT-PCR检测方法的初步研究 被引量：8

3

作者 韩雪清 林祥梅 +5 位作者 侯义宏 薄清如 廉慧锋 吴绍强 刘建 杨泽晓 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期993-996,共4页

目的根据禽流感病毒H1、H3、H5亚型的HA基因和N2型NA基因的保守序列,设计出四对RT-PCR引物,建立一步法多重RT-PCR对禽流感H1、H3、H5、N2四亚型进行快速检测。方法利用所设计的四对引物,通过对该方法扩增条件的优化,成功建立快速检测禽... 目的根据禽流感病毒H1、H3、H5亚型的HA基因和N2型NA基因的保守序列,设计出四对RT-PCR引物,建立一步法多重RT-PCR对禽流感H1、H3、H5、N2四亚型进行快速检测。方法利用所设计的四对引物,通过对该方法扩增条件的优化,成功建立快速检测禽流感病毒H1、H3、H5、N2四亚型的一步法多重RT-PCR。利用禽流感H1、H3、H5、N2四亚型毒株和其它相关标准毒株进行敏感性和特异性试验。结果与结论所建立的一步法多重RT-PCR具有较高的特异性和敏感性,与禽流感其它亚型和NDV、IBV、ARV?IBDV的核酸均无交叉反应。用该方法检测现场样品395份(4省20多个地区),结果与经典检测方法一致。 展开更多

关键词 禽流感病毒 多重RT-PCR H1亚型 H3亚型 H5亚型 N2亚型

下载PDF 职称材料

禽流感的研究进展 被引量：7

4

作者 廉慧锋 宋掌业 《山西农业科学》 2004年第3期65-72,共8页

主要从禽流感病原学、流行病学、诊断技术以及疫苗研制等几个方面综述了禽流感的研究进展,分析了禽流感防制工作目前存在的问题,提出了解决这些问题的措施。

关键词 禽流感 病原学 流行病学 诊断技术 疫苗

下载PDF 职称材料

气相色谱法同时测定食品接触材料纸制品中6种抗氧化剂 被引量：7

5

作者 廉慧锋 杜利君 +3 位作者 刘国红 刘红艳 姚亚婷 穆夏洁 《农产品加工（下）》 2013年第3期65-68,共4页

建立了气相色谱法同时测定食品接触材料纸制品中双酚A,丁羟基茴香醚(BHA)、特丁基对苯二酚(TBHQ)、2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)、2,4,6-三异丁基苯酚(TTBP)、2,2′-亚甲基双(4-乙基-6叔丁基酚)(AO425)共6种抗氧化剂的分析方法。纸制品加水... 建立了气相色谱法同时测定食品接触材料纸制品中双酚A,丁羟基茴香醚(BHA)、特丁基对苯二酚(TBHQ)、2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)、2,4,6-三异丁基苯酚(TTBP)、2,2′-亚甲基双(4-乙基-6叔丁基酚)(AO425)共6种抗氧化剂的分析方法。纸制品加水浸泡,然后用乙酸乙酯—正己烷混合溶剂匀浆提取,考察了提取溶剂、提取方法对抗氧化剂提取效率的影响。提取液经毛细管气相色谱柱DM-5(30 m×0.25 mm×0.25μm)分离,氢火焰检测器(FID)检测,外标法定量。结果表明,在抗氧化剂添加量为10.0～50.0 mg/kg范围内,双酚A,BHA,TBHQ,BHT,TTBP和AO425在纸制品中的平均添加回收率分别为82%～104%,82%～103%,83%～102%,85%～104%,85%～104%,84%～104%,相对标准偏差(RSD,n=10)分别为5.3%～6.8%,4.9%～6.7%,4.6%～6.6%,53%～6.9%,4.7%～6.6%,4.5%～6.9%,BHA,BHT,TBHQ,TTBP,双酚A,AO425测定低限(信噪比>10)为10.0mg/kg,线性范围1.0～100.0 g/mL,相关系数大于0.999。 展开更多

关键词 食品接触材料 抗氧化剂 纸制品 气相色谱法

下载PDF 职称材料

鸡滑液囊支原体的分离与鉴定 被引量：4

6

作者 郭建华 陈德威 +2 位作者 霍乃蕊 廉慧锋 陈伟 《中国家禽》 北大核心 1998年第6期21-22,共2页

某鸡场鸡群表现关节、爪垫肿胀、行走困难等症状，经血清平板凝集试验检测，鸡毒支原体呈阴性，鸡滑液囊支原体呈阳性。在此基础上，对关节囊内容物进行了病原体的分离和鉴定。分离菌落呈典型支原体菌落，能通过４５０ｎｍ滤膜，发酵葡... 某鸡场鸡群表现关节、爪垫肿胀、行走困难等症状，经血清平板凝集试验检测，鸡毒支原体呈阴性，鸡滑液囊支原体呈阳性。在此基础上，对关节囊内容物进行了病原体的分离和鉴定。分离菌落呈典型支原体菌落，能通过４５０ｎｍ滤膜，发酵葡萄糖，还原四氮唑，不利用精氨酸和尿素，菌落能吸附鸡红细胞，在固体培养基上的生长被鸡滑液囊支原体阳性血清所抑制。分离物在抑菌剂培养基上连续传代１０次，未见返祖Ｌ型细菌。用分离物对鸡做人工感染试验，出现与自然病例相同的症状，故认为分离物为鸡滑液囊支原体。 展开更多

关键词 鸡滑液囊支原体 血清学 平板凝集试验

下载PDF 职称材料

B细胞超抗原及其免疫学特性 被引量：3

7

作者 廉慧锋 马兴元 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B06期65-69,73,共6页

B细胞超抗原是一类主要由细菌和病毒产生的,能够非特异地刺激B细胞大量增殖,并促进其合成免疫球蛋白的抗原。其激活B细胞的机理与普通抗原和B细胞丝裂原显著不同,不同微生物超抗原的特征与这些微生物的致病机制有密切关系。本文就目前... B细胞超抗原是一类主要由细菌和病毒产生的,能够非特异地刺激B细胞大量增殖,并促进其合成免疫球蛋白的抗原。其激活B细胞的机理与普通抗原和B细胞丝裂原显著不同,不同微生物超抗原的特征与这些微生物的致病机制有密切关系。本文就目前研究比较多的几种B细胞超抗原的基本特征、免疫学特性及其对B淋巴细胞的作用机制与分子基础进行了综述,讨论了B-sAg在免疫谱库选择中的作用及其与一些疾病的关系。 展开更多

关键词 B细胞超抗原 抗原特征 B细胞激活 免疫谱库选择

下载PDF 职称材料

副结核分支杆菌Hed蛋白的抗原性分析及在间接ELISA中的应用 被引量：3

8

作者 刘倩 唐泰山 +3 位作者 廉慧锋 王凯民 张常印 雷治海 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期113-117,共5页

从副结核分支杆菌K-10菌株克隆出840 bp的hed基因片段,插入原核表达载体pET-32a(+),转化至Escherichia coliBL21(DE3),在0.8 mmol.L-1 IPTG诱导下进行表达,纯化重组蛋白,将其进行Western-blot分析、小鼠免疫试验,包被ELISA板,建立间接EL... 从副结核分支杆菌K-10菌株克隆出840 bp的hed基因片段,插入原核表达载体pET-32a(+),转化至Escherichia coliBL21(DE3),在0.8 mmol.L-1 IPTG诱导下进行表达,纯化重组蛋白,将其进行Western-blot分析、小鼠免疫试验,包被ELISA板,建立间接ELISA方法。结果显示:重组蛋白具有良好的抗原性,方阵滴定法确定了间接ELISA方法的抗血清最佳稀释度(100倍)和抗原包被浓度(4.4μg.mL-1),该方法具有较好的特异性和敏感性。 展开更多

关键词 副结核分支杆菌 Hed蛋白 抗原性分析 间接ELISA

下载PDF 职称材料

水貂阿留申病研究进展 被引量：2

9

作者 廉慧锋 胡传伟 +1 位作者 贾赟 肇慧君 《山东畜牧兽医》 2013年第10期91-92,共2页

由水貂阿留申病毒（Aleutiandiseaseofminkvirus，ADMV）~I起的水貂阿留申病（Aleutiandiseaseofmink，ADM），又称为浆细胞增多症。是主要侵害水貂的免疫系统，以浆细胞弥漫性增生和持续性病毒血症为特征的水貂慢性传染病。AMD的发病... 由水貂阿留申病毒（Aleutiandiseaseofminkvirus，ADMV）~I起的水貂阿留申病（Aleutiandiseaseofmink，ADM），又称为浆细胞增多症。是主要侵害水貂的免疫系统，以浆细胞弥漫性增生和持续性病毒血症为特征的水貂慢性传染病。AMD的发病率和死亡率都很高，同时病貂毛皮质量下降，对水貂养殖业造成巨大的经济损失。 展开更多

关键词 阿留申病毒 水貂 慢性传染病 免疫系统 病毒血症 毛皮质量 经济损失 浆细胞

下载PDF 职称材料

鸵鸟新城疫病毒微量血凝抑制试验影响因素的研究 被引量：2

10

作者 廉慧锋 《山西农业大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第4期328-331,共4页

对鸵鸟新城疫病毒微量血凝抑制试验进行了研究,找到了影响该试验的主要因素,即被检血清中的非特异血凝抑制因子和凝集因子、稀释剂及其pH值、实验室温度、鸡红细胞的来源等。消除这些因素的影响,可明显提高这一试验的准确性。

关键词 鸵鸟 新城疫病毒 微量血凝抑制试验 影响因素

下载PDF 职称材料

亚临床猪瘟的诊断报告

11

作者 廉慧锋 苏勤奋 《山西农业大学学报》 CAS 1998年第3期193-195,共3页

本文根据某机械化养猪场发生的非典型猪瘟的实例 ,分析了亚临床猪瘟的发病情况 ,综合了亚临床猪瘟在流行病学、临床症状 ,病理剖检等方面的资料 ,并结合实验室检验作出确诊。为今后类似该病的确诊和防制提供了一定参考。

关键词 诊断 亚临床猪瘟 猪 病毒

下载PDF 职称材料

利用多联PCR技术检测致病性大肠杆菌肠毒素

12

作者 廉慧锋 马兴元 +1 位作者 郑文云 刘明春 《畜牧与兽医》 北大核心 2005年第5期36-38,共3页

根据GenBank上登陆的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)产生的STⅠ和LTⅠ、产类志贺毒素大肠杆菌(SLTEC)产生的SLT3种毒素基因序列,利用DNAstar软件针对其保守区设计并合成3对PCR引物:Pa1与Pa2、Pb1和Pb2、Pc1和Pc2,以上述引物分别对已知携带有3... 根据GenBank上登陆的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)产生的STⅠ和LTⅠ、产类志贺毒素大肠杆菌(SLTEC)产生的SLT3种毒素基因序列,利用DNAstar软件针对其保守区设计并合成3对PCR引物:Pa1与Pa2、Pb1和Pb2、Pc1和Pc2,以上述引物分别对已知携带有3种毒素基因的质粒或菌株进行PCR扩增,将扩增产物连接入pGEMT-Vector,测序确认。随后进行了单项与二联PCR试验与优化,建立了较为特异和敏感的多联PCR反应体系,并对临床送检并分离鉴定的致病性大肠杆菌进行了肠毒素多联PCR检测。本研究建立的多联PCR技术可敏感、快速地检测大肠杆菌的肠毒素。 展开更多

关键词 致病性大肠杆菌 ST LT SLT 多联PCR

下载PDF 职称材料

一株水貂阿留申病细小病毒的分离与鉴定 被引量：1

13

作者 廉慧锋 胡传伟 +1 位作者 李叶 贾赟 《山东畜牧兽医》 2013年第11期8-10,共3页

本试验根据Genbank发表的水貂阿留申病毒(ADMV)的高度保守序列,设计了一对特异引物ADV-P1/P2,建立ADV的PCR检测方法。应用对流免疫电泳和聚合酶链式反应2种方法对辽宁某水貂养殖场的水貂进行ADV检测。结果表明,PCR产物应用序列分离到一... 本试验根据Genbank发表的水貂阿留申病毒(ADMV)的高度保守序列,设计了一对特异引物ADV-P1/P2,建立ADV的PCR检测方法。应用对流免疫电泳和聚合酶链式反应2种方法对辽宁某水貂养殖场的水貂进行ADV检测。结果表明,PCR产物应用序列分离到一株ADV病毒(LN-1),水貂群中流行阿留申病。应用建立的检测方法加强水貂群的检测,LN-1毒株的致病性需要进一步研究。 展开更多

关键词 水貂阿留申病毒 PCR方法 检测 LN-1

下载PDF 职称材料

鸡毒支原体特异膜抗原的制备

14

作者 杨百亮 赵翠萍 廉慧锋 《天津农学院学报》 CAS 1999年第3期22-25,共4页

采用 Ｓ Ｄ Ｓ聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化鸡毒支原体膜蛋白。选择切取１１０ Ｋ Ｄ、９８ Ｋ Ｄ、６６～６２ Ｋ Ｄ 和５６ Ｋ Ｄ 特异蛋白条带，以 Ｐ Ｂ Ｓ（ｐ Ｈ７．４）浸泡过夜，浸出液置于透析袋封口，透析袋外散布 Ｐ Ｅ... 采用 Ｓ Ｄ Ｓ聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化鸡毒支原体膜蛋白。选择切取１１０ Ｋ Ｄ、９８ Ｋ Ｄ、６６～６２ Ｋ Ｄ 和５６ Ｋ Ｄ 特异蛋白条带，以 Ｐ Ｂ Ｓ（ｐ Ｈ７．４）浸泡过夜，浸出液置于透析袋封口，透析袋外散布 Ｐ Ｅ Ｇ（ Ｍ ＝ ６ ０００）浓缩膜抗原后获得特异膜抗原，为鸡毒支原体特异诊断方法的建立和单克隆抗体的制备奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡毒支原体 SDS-PAGE 特异膜抗原

下载PDF 职称材料

调味粉中霉菌的霍华德计数方法研究 被引量：1

15

作者 廉慧锋 张敏爱 +2 位作者 张建军 王东彬 宋亚鹏 《中国调味品》 CAS 北大核心 2014年第1期14-17,共4页

目的:拟对调味粉中霉菌进行霍华德计数方法研究。方法:对各类调味粉的前处理方式进行优化,建立统一的前处理方法。通过添加试验制备100%,50%,20%,6%四个范围的阳性样品,制备好的样品利用霍华德计数玻片计数含有霉菌菌丝的视野数。结果:... 目的:拟对调味粉中霉菌进行霍华德计数方法研究。方法:对各类调味粉的前处理方式进行优化,建立统一的前处理方法。通过添加试验制备100%,50%,20%,6%四个范围的阳性样品,制备好的样品利用霍华德计数玻片计数含有霉菌菌丝的视野数。结果:所制备的阳性样品阳性视野的百分数在预期的范围之内,与添加结果相一致。结论:霍华德计数方法操作简便,对设施设备要求低,检测流程短,而且能够满足国外产品检测的需求,可以作为传统培养计数法的有效补充。 展开更多

关键词 调味粉 霉菌 霍华德计数

下载PDF 职称材料

基因表达系列分析技术及其应用领域

16

作者 廉慧锋 马兴元 《动物科学与动物医学》 2004年第12期11-12,共2页

关键词 基因表达系列分析 基因组表达 SAGE 新基因 丰度 EST 基因转录 定量研究 快速 发现

下载PDF 职称材料

荷兰禽流感防控现状分析

17

作者 顾小雪 廉慧锋 +2 位作者 王树成 刘环 黄保续 《中国动物检疫》 CAS 2016年第10期70-74,共5页

综合分析认为,荷兰禽流感防治能力不断提高,内部扩散风险明显下降,但仍有外部释放风险。荷兰禽流感防治的关键措施包括:一是家禽养殖环节生物安全水平总体较高,以封闭规模饲养为主,即使存在散养家禽,也采取了相应的生物安全措施(如防鸟... 综合分析认为,荷兰禽流感防治能力不断提高,内部扩散风险明显下降,但仍有外部释放风险。荷兰禽流感防治的关键措施包括:一是家禽养殖环节生物安全水平总体较高,以封闭规模饲养为主,即使存在散养家禽,也采取了相应的生物安全措施(如防鸟网等)。二是监测预警措施完善,不仅实施了针对所有养殖场的定期抽样检测制度,还特别针对高风险禽群增加抽样频率和监测系统的敏感度。三是禁止活禽上市,且建立了基于实验室检测的出证制度和家禽调运数据库,以此降低禽流感循环扩散风险,提升疫情追溯能力。四是完善禽流感应急处置机制,特别是补偿制度,使疫情传播扩散风险大幅下降。 展开更多

关键词 禽流感 风险 监测 活禽市场 补偿政策 荷兰

下载PDF 职称材料

丹麦养殖业沙门氏菌的控制措施及其效果

18

作者 廉慧锋 童晓辉 张琦 《中国动物保健》 2003年第12期24-26,共3页

为了减少养殖业沙门氏菌病,降低因食用动物传染而引起的人沙门氏菌病,保证出口动物产品的质量,丹麦政府在养殖业中实施了沙门氏菌控制计划。对肉用仔鸡、蛋鸡、蛋品和猪沙门氏菌进行控制。通过综合控制养殖场、屠宰场和食品加工厂,实施... 为了减少养殖业沙门氏菌病,降低因食用动物传染而引起的人沙门氏菌病,保证出口动物产品的质量,丹麦政府在养殖业中实施了沙门氏菌控制计划。对肉用仔鸡、蛋鸡、蛋品和猪沙门氏菌进行控制。通过综合控制养殖场、屠宰场和食品加工厂,实施畜禽监控、清除感染动物和根据风险将动物和动物产品进行分类管理等具体措施,养殖业中沙门氏菌感染明显减少,人的动物源性沙门氏菌病也显著下降,控制措施达到了预期的效果。成为世界上为数不多的成功控制沙门氏菌的国家之一。在2001年,丹麦社会因实施沙门氏菌控制计划而节省了2550万美元。 展开更多

关键词 丹麦 养殖业 猪 沙门氏菌 控制措施

下载PDF 职称材料

羊驼副结核病间接ELISA检测方法的建立

19

作者 唐泰山 廉慧锋 +4 位作者 刘倩 王凯民 祝长青 张常印 雷治海 《畜牧与兽医》 北大核心 2013年第11期21-25,共5页

利用副结核分支杆菌重组Hed蛋白,建立了检测羊驼副结核分支杆菌抗体的间接ELISA方法。确定了最适抗原包被浓度为3.75μg/mL,最适血清稀释度为1∶50,最佳封闭条件为2%明胶4℃封闭24 h,血清最适作用时间为1.0 h,酶标SPA最适稀释度为1∶5 0... 利用副结核分支杆菌重组Hed蛋白,建立了检测羊驼副结核分支杆菌抗体的间接ELISA方法。确定了最适抗原包被浓度为3.75μg/mL,最适血清稀释度为1∶50,最佳封闭条件为2%明胶4℃封闭24 h,血清最适作用时间为1.0 h,酶标SPA最适稀释度为1∶5 000,最适作用时间为1.0 h,底物最适作用条件为37℃避光显色10 min。用建立的ELISA方法检测47份羊驼临床血清,显示该方法具有较好的应用前景。 展开更多

关键词 羊驼 副结核病 重组Hed蛋白 间接ELISA

原文传递

抗鸡败血支原体单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量：1

20

作者 杨百亮 廉慧锋 +1 位作者 郭建华 赵翠萍 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第3期199-201,共3页

应用杂交瘤技术获得了４株抗鸡败血支原体单克隆抗体。４株单克隆抗体与鸡滑液支原体、传染性支气管炎病毒、鸡新城疫病毒、鸡白痢沙门氏菌和大肠杆菌抗原均无交叉反应。１株单克隆抗体为ＩｇＧ２ａ，其余３株单克隆抗体均为ＩｇＭ。４... 应用杂交瘤技术获得了４株抗鸡败血支原体单克隆抗体。４株单克隆抗体与鸡滑液支原体、传染性支气管炎病毒、鸡新城疫病毒、鸡白痢沙门氏菌和大肠杆菌抗原均无交叉反应。１株单克隆抗体为ＩｇＧ２ａ，其余３株单克隆抗体均为ＩｇＭ。４株杂交瘤细胞染色体均有少量中部或亚中部着丝点染色体。 展开更多

关键词 鸡败血支原体 单克隆抗体 杂交瘤细胞株

下载PDF 职称材料