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TIPE3上调P-gp表达降低乳腺癌细胞对阿霉素的敏感性
1
作者 廉开礼 李炎 +2 位作者 张娜 靳桂媛 刘素侠 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2017年第5期36-42,共7页
目的探讨新的促癌分子肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样蛋白3(TIPE3)是否影响乳腺癌细胞MCF-7对阿霉素的敏感性及其机制。方法以0、0.5、1.0、1.5μg/m L阿霉素作用于TIPE3表达质粒转染的MCF-7细胞,分别采用细胞活性检测试剂盒(CCK-8)、流式... 目的探讨新的促癌分子肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样蛋白3(TIPE3)是否影响乳腺癌细胞MCF-7对阿霉素的敏感性及其机制。方法以0、0.5、1.0、1.5μg/m L阿霉素作用于TIPE3表达质粒转染的MCF-7细胞,分别采用细胞活性检测试剂盒(CCK-8)、流式细胞术分析TIPE3对阿霉素作用的MCF-7细胞相对活性及细胞周期分布的影响;采用Annexin V/PI染色流式细胞术检测分析TIPE3对阿霉素作用的MCF-7细胞凋亡的影响;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法和蛋白印记(Western blotting)法检测核因子-kappa B(NF-κB)信号通路活化情况、多药耐药基因1(MDR 1)及多药耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)的表达。结果过表达TIPE3增加了阿霉素处理MCF-7细胞的相对存活率和G2/M期细胞数,降低细胞凋亡率;NF-κB信号通路活化水平增加,多药耐药基因MDR1及其表达蛋白P-gp的表达水平升高。结论 TIPE3通过活化NF-κB信号通路上调P-gp的表达进而降低MCF-7细胞对阿霉素的敏感性。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样蛋白3 乳腺癌 P-糖蛋白 核因子-KAPPA B 阿霉素
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分子体积排阻高效液相色谱法测定低浓度重组人源化抗BCMA/CD3双特异性抗体药物的浓度
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作者 廉开礼 崔岩 +4 位作者 彭伟 曹宇 刘忠 张贵民 赵丽丽 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1365-1370,共6页
目的:建立定量测定溶剂中低浓度重组人源化抗BCMA/CD3双特异性抗体药物浓度的分子体积排阻高效液相色谱法(SEC-HPLC法)。方法:采用TSKgel G3000SWxl(7.8 mm×300 mm,5μm)体积排阻色谱柱,高效液相紫外检测器在214 nm处测定抗体药物... 目的:建立定量测定溶剂中低浓度重组人源化抗BCMA/CD3双特异性抗体药物浓度的分子体积排阻高效液相色谱法(SEC-HPLC法)。方法:采用TSKgel G3000SWxl(7.8 mm×300 mm,5μm)体积排阻色谱柱,高效液相紫外检测器在214 nm处测定抗体药物吸收度。对SEC-HPLC法进行专属性、系统残留、线性、精密度、稳定性方法学验证,并使用该方法和紫外-可见分光光度法测定样品浓度,进行准确度分析。结果:SEC-HPLC法对抗体药物浓度的测定无干扰;在0.01~0.32 mg·mL^-1浓度范围内,SECHPLC法线性良好(相关系数R2=1.000);不同实验者不同时间使用该方法可准确测定抗体药物浓度,RSD均≤2.0%,回收率均处于90.0%~110.0%之间;-80℃反复冻融和2~8℃存放24 h后,SEC-HPLC法仍能准确测定抗体药物浓度,稳定性良好(RSD≤2.0%)。SEC-HPLC法能准确测定样品浓度,RSD≤2.0%,回收率均处于90.0%~110.0%之间,而紫外-可见分光光度法不能准确测定低浓度(0.01 mg·m L^-1)样品的浓度,RSD为5.7%,回收率为131.6%。结论:SEC-HPLC测定浓度法准确性和精密度良好,能准确测定溶媒剂中0.01~0.32 mg·mL^-1范围内抗体药物浓度,能避免紫外-可见分光光度法测定0.01 mg·mL^-1样品不准确的局限性,可作为测定低浓度重组人源化抗BCMA/CD3双特异性抗体药物浓度的有效方法之一。 展开更多
关键词 分子体积排阻高效液相色谱法(SEC-HPLC) 紫外-可见分光光度法 抗体药物 方法验证 浓度
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