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几种不同基因免疫途径的比较研究 被引量：8
1
作者 段明星 庄峰锋 +3 位作者 周志红 张芳 昌增益 郑昌学 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1999年第5期275-276,279,共3页
以乙肝表面抗原基因疫苗为模型， 采用肌肉注射、腹腔注射、表皮划痕三种免疫途径和不同剂量的裸露质粒ＤＮＡ免疫小鼠， 以ＥＬＩＳＡ方法检测小鼠血清中抗ＨＢｓＡｇ 抗体变化。实验结果表明表皮划痕方式免疫小鼠免疫反应阳性率高，... 以乙肝表面抗原基因疫苗为模型， 采用肌肉注射、腹腔注射、表皮划痕三种免疫途径和不同剂量的裸露质粒ＤＮＡ免疫小鼠， 以ＥＬＩＳＡ方法检测小鼠血清中抗ＨＢｓＡｇ 抗体变化。实验结果表明表皮划痕方式免疫小鼠免疫反应阳性率高，且在相同剂量下其抗体滴度水平最高； 肌肉注射方式免疫小鼠， 抗体反应可维持较长时间； 腹腔注射方式免疫小鼠， 抗体反应产生快， 但维持时间较短。 展开更多
关键词 核酸疫苗 乙肝表面抗原 免疫途径
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利用CRISPR/Cas9技术构建Bpi基因敲除小鼠 被引量：3
2
作者 张雨 郭中坤 +4 位作者 付彬 雷战 聂爱蕊 庄峰锋 王可洲 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第6期39-46,共8页
目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术高效构建Bpi基因敲除的小鼠模型,并继续繁殖、鉴定及建立稳定遗传的Bpi基因敲除小鼠品系。方法针对C57BL/6小鼠Bpi基因的第2~3外显子两端设计敲除靶点,筛选高活性gRNA(guide RNA)靶点,体外转录得到sgRNA... 目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术高效构建Bpi基因敲除的小鼠模型,并继续繁殖、鉴定及建立稳定遗传的Bpi基因敲除小鼠品系。方法针对C57BL/6小鼠Bpi基因的第2~3外显子两端设计敲除靶点,筛选高活性gRNA(guide RNA)靶点,体外转录得到sgRNA(small guide RNA)并与Cas9 mRNA一起显微注射到C57BL/6小鼠的受精卵内,经胚胎移植至代孕母鼠体内,获得F0代小鼠后,通过基因型鉴定和DNA测序获得基因突变的阳性子代鼠。结果筛选到高活性gRNA靶点并成功获得体外转录产物sgRNA;与Cas9 mRNA一起通过显微注射的方式获得了64枚状态良好的受精卵并成功移植到2只代孕母鼠体内;获得了22只F0代小鼠,经PCR鉴定和DNA测序后选择一只单链缺失708 bp碱基的阳性小鼠进行扩繁,并在F1、F2代检测到该突变,且F2代成功繁育出纯合子小鼠。结论成功构建Bpi基因敲除小鼠模型,为进一步研究Bpi基因及其表达产物的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 BPI 基因敲除小鼠 CRISPR/Cas9技术 基因型鉴定
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TALEN构建Fndc5基因敲除小鼠及初步分析 被引量：1
3
作者 吴子环 胡雄兵 +8 位作者 毛凤仪 王超 张彬 庄峰锋 胡克平 孙晓波 刘晓 匡世焕 金文 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第6期37-41,47,共6页
目的通过构建Fndc5基因敲除小鼠,为后续的研究提供动物模型。方法运用TALEN技术在Fndc5基因FNIII domain中造成缺失突变,并通过测序进行基因型鉴定。通过配对建立稳定遗传系并在mRNA和DNA水平鉴定出生小鼠基因型;对不同年龄段出生小鼠... 目的通过构建Fndc5基因敲除小鼠,为后续的研究提供动物模型。方法运用TALEN技术在Fndc5基因FNIII domain中造成缺失突变,并通过测序进行基因型鉴定。通过配对建立稳定遗传系并在mRNA和DNA水平鉴定出生小鼠基因型;对不同年龄段出生小鼠进行体重、血糖分析;通过q PCR确定Fndc5在肾脏、肝脏、大脑、肌肉、心脏等组织中的表达情况。结果成功构建并鉴定得到4种不同的Fndc5基因敲除小鼠品系;不同年龄段出生小鼠体重、血糖未见显著性差异;确定Fndc5在肌肉、心脏等组织中高表达。结论本实验在国际上成功构建了Fndc5基因敲除小鼠,并进行了初步分析,为深入研究Fndc5基因在体内中的功能提供了动物模型。 展开更多
关键词 骨骼肌 Fndc5基因 纤维连接蛋白 TALEN
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