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题名细胞因子预处理对体外扩增NK细胞活性的影响
被引量：2
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作者
申重阳
幸倚帆
谭小虎
陈勇军
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机构
成都中医药大学基础医学院
成都康景生物科技有限公司
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出处
《中国现代医学杂志》
CAS
2018年第28期33-38,共6页
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基金
国家自然科学基金(No:81603478)
成都中医药大学校基金(No:ZRQN1612)
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文摘
目的采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血单个核细胞(PBMCs)进行自然杀伤细胞(NK)的扩增培养,培养过程中白细胞介素IL-2、IL-12、IL-15、IL-18以不同组合及不同方式添加,探究体外培养NK细胞的细胞因子最佳组合和添加方式。方法根据细胞因子组合及添加方式的不同,将NK培养分为3组。A组:IL-2+IL-15组,B组:IL-2+IL-12+IL-15+IL-18组,C组:IL-12+IL-15+IL-18预处理/IL-2组。培养过程中第7天和第14天分别取样统计各组细胞因子培养后的细胞数量,并使用流式细胞仪检测NK细胞表面分子表达;将NK细胞与K562细胞共培养,然后ELISA测定NK细胞的IFNγ释放量,CSFE/7-AAD法检测NK细胞的杀伤活性。结果 3组不同的培养方式所得细胞的扩增倍数差异无统计学意义,随着培养时间的增加,NK细胞的比例也逐渐上升,3组间NK细胞比例差异无统计学意义(P>0.05)。NK细胞表面CD25(IL-2Rα)的表达情况比较,差异有统计学意义(P <0.05),C组的阳性率高于A和B组。IFN-γ的释放量和NK细胞的体外杀伤活性一致,均为C组高于A和B组。对肿瘤患者的NK细胞,C组的细胞因子添加方式也能很好的进行扩增(CD3-CD56+细胞比例大于50%)。结论 C组中的细胞因子预处理方式能够高效扩增NK细胞,与A或B组联合添加的方式比较,该方式能显著激活NK细胞的杀伤活性。
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关键词
外周血单个核细胞
自然杀伤细胞
细胞因子预处理
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Keywords
PBMCs
natural killer cell
cytokine pretreatment
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分类号
R392.12
[医药卫生—免疫学]
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题名不同来源血液NK细胞大体系培养质量统计分析
被引量：2
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作者
左凤琼
程威
邓安彦
高放
廖再波
幸倚帆
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机构
四川大学华西医学中心
成都康景生物科技有限公司
南充市中心医院
四川大学华西医院
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出处
《西部医学》
2020年第8期1238-1240,F0003,共4页
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文摘
目的分离外周血、脐血中的单个核细胞,经过体外大体系培养扩增其中的NK细胞,对比两种来源的NK细胞在扩增倍数、数量、比例上的差异。方法收集外周血和脐血,通过同样的培养方法扩增NK细胞,检测起始细胞数、细胞总数、增殖倍数并通过流式方法检测其中CD3^-CD56^+细胞的比例。结果同样体积的外周血中分离的单核细胞(起始细胞)数量比脐血中的单核细胞数量多,差异有统计学意义(P<0.05)。经过同样大体系方法培养后,脐血来源扩增的细胞总数多于外周血来源扩增的细胞总数(P<0.01);脐血来源NK细胞扩增倍数、CD3^-CD56^+细胞比例高于外周血来源,但两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论同样的大体系细胞培养方案既可以扩增培养外周血来源NK细胞,也可以扩增培养脐血来源的NK细胞;培养后的NK细胞总数有差异,造成差异的主要原因是起始细胞数量的不同。
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关键词
外周血
脐血
单个核细胞
自然杀伤细胞
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Keywords
Peripheral Blood
Cord blood
Mononuclear cell
Natural killer
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分类号
R331.1
[医药卫生—人体生理学]
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