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紫杉醇产生菌分离的研究 被引量：85
1
作者 周东坡 平文祥 +5 位作者 孙剑秋 周晓辉 刘晓兰 杨德柱 张建平 郑喜群 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2001年第1期18-19,32,共3页
报道了 1993年从东北红豆杉树 (TaxuscuspidataSieb .etZucc)的枝条与树皮中分离获得了 2 0余种内生真菌 ,并经代谢产物的薄层层析 (TLC)技术的筛选与高效液相色谱仪 (HPLC)的验证 ,有 3株真菌 (HQ33 ,HQ48,HQ5 4)均是紫杉醇的产生菌。... 报道了 1993年从东北红豆杉树 (TaxuscuspidataSieb .etZucc)的枝条与树皮中分离获得了 2 0余种内生真菌 ,并经代谢产物的薄层层析 (TLC)技术的筛选与高效液相色谱仪 (HPLC)的验证 ,有 3株真菌 (HQ33 ,HQ48,HQ5 4)均是紫杉醇的产生菌。其发酵液中紫杉醇的含量为 5 1.0 6～ 12 5 .70 μg/L。 展开更多
关键词 内生真菌 紫杉醇 东北红豆杉 产生菌
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药用植物内生真菌多样性及生态分布 被引量：74
2
作者 孙剑秋 郭良栋 +2 位作者 臧威 平文祥 迟德富 《中国科学（C辑）》 CSCD 北大核心 2008年第5期475-484,共10页
从北京植物园4科6种药用植物的1144个组织块中分离到内生真菌973株，根据形态特征将778株产生孢子的菌株鉴定为21个分类单元，其中腔孢菌11种、子囊菌6种、丝孢菌4种．从每种植物中分离的内生真菌种数为5～8种，其中Alternaria alternat... 从北京植物园4科6种药用植物的1144个组织块中分离到内生真菌973株，根据形态特征将778株产生孢子的菌株鉴定为21个分类单元，其中腔孢菌11种、子囊菌6种、丝孢菌4种．从每种植物中分离的内生真菌种数为5～8种，其中Alternaria alternata是这6种植物内生真菌的优势种，同时Microsphaeropsis conielloides也是杜仲的优势种．这6种植物具有较高的内生真菌定殖率（47．9％．63．1％）和分离率（0．70～0．93），而且枝条的内生真菌定殖率和分离率明显高于叶片；随着枝条年龄的增长，内生真菌的定殖率和分离率呈明显递增趋势．内生真菌群落组成的相似性和聚类分析结果表明，部分内生真菌具有一定的宿主和组织偏好性． 展开更多
关键词 内生真菌 药用植物 多样性 宿主和组织偏好性
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中国一新记录属——多节孢属 被引量：52
3
作者 周东坡 孙剑秋 +2 位作者 于寒颖 平文祥 郑喜群 《菌物系统》 CSCD 北大核心 2001年第2期277-278,共2页
关键词 中国 多节孢菌 内生真菌 红豆杉
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解磷微生物的研究进展 被引量：55
4
作者 金术超 杜春梅 +2 位作者 平文祥 关洪宇 徐宝兴 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期73-78,共6页
磷是植物生长必需的矿质元素之一,而土壤中可溶性磷的含量比较低。土壤中有大量的微生物存在,其中有一些微生物能够将土壤中的不溶性磷转化成可溶性磷,主要对解磷微生物的种类、数量、分布、解磷机制及应用方面的有关情况进行综述。
关键词 解磷微生物 解磷 解磷机制
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通过灭活原生质体融合选育啤酒酵母新菌株 被引量：38
5
作者 周东坡 平文祥 +3 位作者 孙剑秋 张宝国 王超 国晓秋 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期454-460,共7页
将生产用啤酒酵母（ Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ） ＬＱ１６ 和ＱＳＢ７ 分别进行单倍体化，并筛选ＬＱ１６（Ｉｌｅ － ，Ｄａｔｒ） 和ＱＳＢ７（Ａｌａ－ ，Ｈ２Ｓ－ ） 的遗传标记。经摇振培养后，酶解制备原... 将生产用啤酒酵母（ Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ） ＬＱ１６ 和ＱＳＢ７ 分别进行单倍体化，并筛选ＬＱ１６（Ｉｌｅ － ，Ｄａｔｒ） 和ＱＳＢ７（Ａｌａ－ ，Ｈ２Ｓ－ ） 的遗传标记。经摇振培养后，酶解制备原生质体，对前者进行紫外灭活，而后者进行热灭活，再利用ＰＥＧ 进行融合，在ＭＭＲ 和ＳＭＭＲ 培养基上再生，挑选融合子。连续传代稳定后鉴定融合子ＱＳＢＸＩ６ 。通过细胞体积和生物量的测定，以及遗传型的分析和细胞ＤＮＡ 含量测定等均证实了获得的是融合子。经对啤酒感观评价，双乙酰含量测定与多种成分的气相色谱分析以及啤酒的发酵度，絮凝性、稳定性测定，并经连续多次生产试验证实ＱＳＢＸＩ６ 是一株口味独特、发酵度高、絮凝性强、遗传性能稳定兼具有多种优良性状的啤酒酵母生产新菌株。 展开更多
关键词 啤酒酵母 灭活 原生质体融合 融合子QSB-XI6
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酱香型白酒酒醅中霉菌群落组成与功能酶活性 被引量：41
6
作者 孙剑秋 刘雯雯 +2 位作者 臧威 沈国娟 平文祥 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第8期239-247,共9页
为了研究酱香型白酒酿造过程中酒醅内霉菌的数量变化、群落结构与功能酶活性，在被誉为”北国茅台”的酱香型白酒北大仓的窖池中采集酒醅样本，通过平板培养技术和经典真菌分类方法，比较不同发酵阶段的酒醅中霉菌数量、种类组成及其多... 为了研究酱香型白酒酿造过程中酒醅内霉菌的数量变化、群落结构与功能酶活性，在被誉为”北国茅台”的酱香型白酒北大仓的窖池中采集酒醅样本，通过平板培养技术和经典真菌分类方法，比较不同发酵阶段的酒醅中霉菌数量、种类组成及其多样性指数和相似性系数，检测每种真菌产生功能酶的种类和性能。研究发现：酱香型白酒窖池的上、中、下层酒醅中霉菌数量的变化规律基本一致，即发酵开始后霉菌数量急剧下降，发酵至第7天霉菌数量短暂回升，发酵后期菌体数量再次呈现出减少态势，直至发酵结束。从酒醅内分离到的霉菌被鉴定为13属23种，其中链格孢、曲霉、枝孢、散囊菌、地霉、红曲、脉孢菌、拟青霉、青霉、葡萄穗霉和毛霉等在酒醅发酵某个阶段的相对频率在10％以上，而曲梗霉和帚霉两个类群在酒醅中属于出现频率较低的稀有种类。根据多样性指数和相似性系数，在白酒酿造过程中酒醅内霉菌的种类组成表现出动态变化的特点。霉菌的总体多样性处于较高水平。酒醅内霉菌的最高多样性指数（2．57）出现在封窖初期，这时（1～3d）霉菌组成比较相似。几乎始终以较高频率存在于酒醅内的曲霉和青霉两类霉菌产生功能酶的种类比较丰富，与其它类群的霉菌协同作用．对北大仓白酒酿造原料的利用与风味物质的形成产生重要影响。 展开更多
关键词 霉菌 群落组成 酶活性 酒醅 白酒
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启动子克隆方法研究进展 被引量：20
7
作者 李姗姗 迟彦 +4 位作者 李凌飞 马玺 平文祥 于冲 周东坡 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期9-16,共8页
启动子是基因表达调控的重要顺式元件,也是基因工程表达载体的一个重要组成部分。启动子的克隆对于构建基因工程载体,表达目的蛋白有着重要的意义。启动子克隆的方法很多,从常用的利用启动子探针型载体筛选启动子到PCR方法的应用,此后... 启动子是基因表达调控的重要顺式元件,也是基因工程表达载体的一个重要组成部分。启动子的克隆对于构建基因工程载体,表达目的蛋白有着重要的意义。启动子克隆的方法很多,从常用的利用启动子探针型载体筛选启动子到PCR方法的应用,此后相继问世的一些基于PCR法的克隆启动子技术,像I-PCR、P-PCR、SSP-PCR、YADE、TAIL-PCR等,为克隆启动子提供了更可靠,更合理的方法。对这几种方法进行了简要综述,比较了不同方法的优缺点,并展望了今后的研究前景。 展开更多
关键词 研究进展 克隆方法 启动子探针型载体 TAIL-PCR SSP-PCR 基因表达调控 基因工程载体 启动子克隆 PCR方法 顺式元件 组成部分 表达载体 目的蛋白 PCR法 研究前景 优缺点
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内生真菌发酵生产紫杉醇的研究现状与展望 被引量：36
8
作者 赵凯 平文祥 周东坡 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期403-407,共5页
抗癌药物紫杉醇已在临床上广泛应用,但受原料红豆杉树木短缺的制约,存在巨大的供需差距,而内生真菌发酵生产紫杉醇是解决紫杉醇药源问题的很有前景的途径之一。结合课题组多年来开展的科学试验研究工作,概述了内生真菌发酵生产紫杉醇的... 抗癌药物紫杉醇已在临床上广泛应用,但受原料红豆杉树木短缺的制约,存在巨大的供需差距,而内生真菌发酵生产紫杉醇是解决紫杉醇药源问题的很有前景的途径之一。结合课题组多年来开展的科学试验研究工作,概述了内生真菌发酵生产紫杉醇的优势、产紫杉醇内生真菌的分离研究现状和生物多样性及提高内生真菌生物合成紫杉醇量的途径。 展开更多
关键词 紫杉醇 生物合成 内生真菌
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树状多节孢发酵生产紫杉醇工艺条件的初步研究 被引量：25
9
作者 刘晓兰 周东坡 +5 位作者 孙剑秋 平文祥 于寒颖 张鹏 解玉红 凌洪博 《菌物系统》 CSCD 北大核心 2002年第2期246-251,共6页
研究了树状多节孢HQD33内生真菌融合子TPF-1摇瓶发酵工艺条件,进行了2.8L和10L通用式机械搅拌罐的发酵试验。结果表明,HQD33适宜发酵工艺条件是:发酵时间16～18d,培养基中蔗糖、苯丙氨酸、醋酸钠、酪氨酸、2,4-二氯苯氧乙酸和亚油酸的... 研究了树状多节孢HQD33内生真菌融合子TPF-1摇瓶发酵工艺条件,进行了2.8L和10L通用式机械搅拌罐的发酵试验。结果表明,HQD33适宜发酵工艺条件是:发酵时间16～18d,培养基中蔗糖、苯丙氨酸、醋酸钠、酪氨酸、2,4-二氯苯氧乙酸和亚油酸的加量分别为10g/L、1mg/L、1.5g/L、15mg/L、5mg/L和15mg/L,摇瓶装量为150ml/500ml,在此条件下摇瓶发酵液中紫杉醇平均含量为448.52 g/L; 2.8L和10L罐发酵液中紫杉醇含量达406.95和395.12g/L(平均值)。 展开更多
关键词 发酵生产 工艺条件 树状多节孢 紫杉醇
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产紫杉醇菌株原生质体诱变育种的研究 被引量：23
10
作者 赵凯 周东坡 +3 位作者 平文祥 刘军 马玺 金涛 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期848-851,共4页
对紫杉醇产生菌NCEU_1的原生质体进行了紫外线和氯化锂复合诱变,筛选制霉菌素抗性突变株,共筛选出了4株正突变株。经发酵筛选试验,获得了一株遗传性状稳定、高产紫杉醇的原生质体诱变菌株———UL04-5,其紫杉醇产量从出发菌株的314.07... 对紫杉醇产生菌NCEU_1的原生质体进行了紫外线和氯化锂复合诱变,筛选制霉菌素抗性突变株,共筛选出了4株正突变株。经发酵筛选试验,获得了一株遗传性状稳定、高产紫杉醇的原生质体诱变菌株———UL04-5,其紫杉醇产量从出发菌株的314.07μgL提高至418.24μgL。 展开更多
关键词 紫杉醇 紫杉醇产生菌 原生质体诱变
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根癌农杆菌介导的真菌遗传转化及其应用 被引量：15
11
作者 迟彦 周东坡 +2 位作者 平文祥 李姗姗 朱婧 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期612-619,共8页
关键词 根癌农杆菌介导 真菌 遗传转化 ASPERGILLUS 应用 生物技术领域 植物病理学 分子生物学 次级代谢产物 生命活动
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HPLC法同时测定五味子不同部位中三种木脂素成分含量 被引量：25
12
作者 郑春英 李宏涛 +3 位作者 吴桐 牛雯颖 陆欣媛 平文祥 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第7期376-379,共4页
目的:采用HPLC法同时测定五味子不同部位中五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素含量。方法:采用Symmetry C18柱,甲醇-乙腈-水(1:1:1)作流动相,流速1ml/min,检测波长250nm。结果五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素含量测定方法的线性关... 目的:采用HPLC法同时测定五味子不同部位中五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素含量。方法:采用Symmetry C18柱,甲醇-乙腈-水(1:1:1)作流动相,流速1ml/min,检测波长250nm。结果五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素含量测定方法的线性关系良好,线性范围和相关系数为0.04～0.2mg/ml(r=0.9999);回收率分别为103.03%、99.83%和101.55%;RSD分别为0.99%、2.15%、1.39%(n=10)。结论:该方法精密度、重现性和分离效果好,分析快速准确,适合于该药材中五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素含量的测定,不同部位三成分均存在一定的差别。 展开更多
关键词 HPLC 五味子 五味子醇甲 五味子甲素 五味子乙素
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微生物发酵生产紫杉醇研究进展 被引量：21
13
作者 王世伟 马玺 +1 位作者 平文祥 周东坡 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期561-565,共5页
概述了微生物发酵法生产紫杉醇的研究进展,包括产紫杉醇内生真菌的多样性和真菌产紫杉醇的优势,内生真菌分离、紫杉醇纯化和含量测定方法,同时对如何提高内生真菌紫杉醇产量进行了比较全面的综述。
关键词 紫杉醇 微生物发酵 内生真菌 产量
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传统发酵豆酱中酵母菌的分离、筛选及功能酵母的鉴定 被引量：25
14
作者 柴洋洋 葛菁萍 +3 位作者 宋刚 陈丽 凌宏志 平文祥 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第3期183-188,共6页
酵母菌在豆酱发酵过程中发酵糖类产生小分子醛、酸、酯等物质,增加酱的风味。本文以自然发酵的豆酱样品为研究对象,采用传统的分离培养方法、18SrDNA序列测定及ITSrDNA序列测定技术,研究自然发酵豆酱样品的酵母菌群分布。研究结果表明,... 酵母菌在豆酱发酵过程中发酵糖类产生小分子醛、酸、酯等物质,增加酱的风味。本文以自然发酵的豆酱样品为研究对象,采用传统的分离培养方法、18SrDNA序列测定及ITSrDNA序列测定技术,研究自然发酵豆酱样品的酵母菌群分布。研究结果表明,分离出的88株酵母菌属于5个属,分别是接合酵母属、酵母属、假丝酵母属、德巴利酵母属和毕赤酵母属。将耐盐酵母菌HDY-6的18S rDNA和ITS rDNA测序结果与GenBank数据库比较,结果与鲁氏接合酵母属于同一种。 展开更多
关键词 酵母菌 分离鉴定 18S RDNA ITSrDNA
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副干酪乳杆菌HD1.7产生抗菌物质的初步研究 被引量：21
15
作者 雷虹 李秀凉 +3 位作者 庄海霁 张铁丹 周东坡 平文祥 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期16-19,共4页
对从乳酸菌酸菜发酵液中分离到的能产生抑菌物质的菌株进行了鉴定,并对该菌的发酵产物进行了提取和性质研究。经形态学、生理生化与16SrDNA序列分析鉴定该菌株为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。抑菌谱试验表明:除酵母菌外,该... 对从乳酸菌酸菜发酵液中分离到的能产生抑菌物质的菌株进行了鉴定,并对该菌的发酵产物进行了提取和性质研究。经形态学、生理生化与16SrDNA序列分析鉴定该菌株为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。抑菌谱试验表明:除酵母菌外,该抑菌物质对革兰氏阳性、阴性菌和多种致病菌均有较强的抑制作用。经有机溶剂萃取法获得了抑菌物质的粗提物,胰蛋白酶水解证明抑菌物质具有蛋白质性质,尿素-SDS-PAGE不连续凝胶电泳法测得抑菌物质的分子量为14000左右。 展开更多
关键词 副干酪乳杆菌 抑菌谱 抑菌物质 提取 蛋白质性质
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副干酪乳杆菌的应用研究进展 被引量：23
16
作者 庄海霁 雷虹 +2 位作者 张铁丹 周东坡 平文祥 《生物技术通讯》 CAS 2006年第6期989-991,共3页
副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)属于乳杆菌属中的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)群。本文简单介绍了副干酪乳杆菌的分布、分类学地位及其主要鉴定手段,综述了该菌种及其细菌素和质粒在L-乳酸的工业生产、食品发酵及防腐、医... 副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)属于乳杆菌属中的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)群。本文简单介绍了副干酪乳杆菌的分布、分类学地位及其主要鉴定手段,综述了该菌种及其细菌素和质粒在L-乳酸的工业生产、食品发酵及防腐、医疗保健、废料的循环利用和科学研究等方面的应用。 展开更多
关键词 副干酪乳杆菌 应用
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紫杉醇高产菌株的原生质体诱变选育及其遗传变异初探 被引量：20
17
作者 赵凯 平文祥 +2 位作者 马玺 刘军 周东坡 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期355-358,共4页
以紫杉醇产生菌NCEU_1为出发菌株,分别采用紫外线和紫外线与氯化锂复合诱变方法对其原生质体进行诱变,获得了两株高产紫杉醇的突变株———UV4 0 - 1 9和UL50 - 6 ,其紫杉醇产量从出发菌株的314 0 7μg L分别提高至376 38μg L和392 ... 以紫杉醇产生菌NCEU_1为出发菌株,分别采用紫外线和紫外线与氯化锂复合诱变方法对其原生质体进行诱变,获得了两株高产紫杉醇的突变株———UV4 0 - 1 9和UL50 - 6 ,其紫杉醇产量从出发菌株的314 0 7μg L分别提高至376 38μg L和392 6 3μg L ;同时,又采用RAPD和同工酶技术对出发菌株NCEU_1与两高产株UV4 0 - 1 9和UL50 - 6 间的遗传差异进行了研究。结果表明,出发菌株与诱变菌株之间以及两诱变菌株之间都存在明显差异。 展开更多
关键词 紫杉醇产生菌 原生质体诱变 遗传差异
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酸菜发酵液中乳酸菌的分离与鉴定 被引量：21
18
作者 葛菁萍 邹鹏 +3 位作者 宋刚 凌宏志 赵丹 平文祥 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期83-84,共2页
从乳酸发酵的酸菜汁中分离筛选到8株产酸能力较高的乳酸菌,通过形态特征、菌落特征、生理生化特征和API试剂条鉴定,结果表明其中有7株菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),1株菌为短乳杆菌(Lactobacillus brevis)。
关键词 发酵液 乳酸菌 分离鉴定
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肽类抑菌物质效价的测定 被引量：17
19
作者 李秀凉 雷虹 +2 位作者 孟博 平文祥 周东坡 《食品科技》 CAS 北大核心 2006年第3期113-115,共3页
采用琼脂扩散法以Nisin为标准样品,对副干酪乳杆菌(LactobacillusparacaseiHD1.7)产生的肽类抑菌物质效价测定条件进行了研究,结果表明在2号检测培养基中添加0.75%琼脂、以浓度为106cfu/mL枯草芽孢杆菌为指示菌是最佳检测效价的条件,在... 采用琼脂扩散法以Nisin为标准样品,对副干酪乳杆菌(LactobacillusparacaseiHD1.7)产生的肽类抑菌物质效价测定条件进行了研究,结果表明在2号检测培养基中添加0.75%琼脂、以浓度为106cfu/mL枯草芽孢杆菌为指示菌是最佳检测效价的条件,在此条件下测得的肽类抑菌物质的效价为1.6×104IU/g。 展开更多
关键词 肽类抑菌物质 效价 琼脂扩散法
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基于26S rDNA D1/D2序列分析酱香型白酒酒醅中酵母菌的群落结构 被引量：21
20
作者 孙剑秋 刘雯雯 +2 位作者 臧威 沈国娟 平文祥 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1290-1296,共7页
【目的】比较分析不同发酵阶段的酱香型白酒北大仓酒醅中酵母菌的群落结构。【方法】酒醅样本采集自黑龙江省北大仓白酒不同阶段的发酵窖池,采用平板分离技术获得大量酵母菌纯培养物;基于26S rDNA D1/D2区域的碱基序列,准确鉴定酒醅中... 【目的】比较分析不同发酵阶段的酱香型白酒北大仓酒醅中酵母菌的群落结构。【方法】酒醅样本采集自黑龙江省北大仓白酒不同阶段的发酵窖池,采用平板分离技术获得大量酵母菌纯培养物;基于26S rDNA D1/D2区域的碱基序列,准确鉴定酒醅中的酵母菌;根据酵母菌的数量变化、种类组成、相对频率、多样性指数及其相似性系数,研究酱香型北大仓白酒酒醅中酵母菌的群落结构特征。【结果】北大仓白酒酒醅中酵母菌数量在酿造过程中的变化,遵循着"升高-降低-升高-降低"的规律;第1轮"升高-降低"的过程表现出急剧的"速升速降"特点,而第2轮"升高-降低"的过程则具有相对来说比较温和的"缓升缓降"特征。酒醅内的酵母菌鉴定为8属13种,总体多样性指数处于较高的水平,发酵初期酵母菌多样性指数逐渐增加,最高的多样性指数(1.89)出现在发酵第5 d的酒醅内;然后又逐渐下降,发酵至第11 d时降至最低(0.66);酒醅发酵至13 d时开始直至发酵末期,多样性指数呈现出波动性变化。北大仓白酒酒醅中酵母菌的种类组成总体来说比较接近,大多数情况下相似性系数都高于0.5,说明在白酒酿造过程中酵母菌的组成和分布处于一个相对稳定的状态。对于北大仓白酒酒醅内存在的常见酵母菌来说,Issatchenkia orientalis、Pichia kudriavzevii和Saccharomyces cerevisiae可能在酿造过程中发挥更重要的作用。【结论】北大仓等酱香型白酒的酒醅内存在着丰富的酵母菌资源,阐明酒醅内酵母菌的群落结构可以为解析酱香型白酒的发酵机理提供基础数据和理论基础。 展开更多
关键词 酵母菌 群落结构 RDNA D1/D2区域 酒醅 酱香型
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