Notch通路在鼻息肉中的表达及其与调节性T细胞表达和嗜酸粒细胞浸润的相关性研究 被引量：14

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作者 李帅祥 李霞 +7 位作者 陈晓红 吴喜福 黄健聪 赖晓萍 杨洛盈 黄子真 张革化 常利红 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CSCD 北大核心 2021年第2期124-132,共9页

目的探讨Notch通路在鼻息肉中的表达及其与调节性T细胞(Treg细胞)表达和嗜酸粒细胞(Eos)浸润的相关性。方法选择2012年11月至2018年8月期间在中山大学附属第三医院接受鼻内镜手术的慢性鼻窦炎(CRS)和鼻中隔偏曲的患者,分别作为CRS组和... 目的探讨Notch通路在鼻息肉中的表达及其与调节性T细胞(Treg细胞)表达和嗜酸粒细胞(Eos)浸润的相关性。方法选择2012年11月至2018年8月期间在中山大学附属第三医院接受鼻内镜手术的慢性鼻窦炎(CRS)和鼻中隔偏曲的患者,分别作为CRS组和对照组。收集慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)患者(30例,男14例,女16例,年龄18~63岁)、慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)患者(58例,男38例,女20例,年龄18~65岁)的窦口鼻道复合体黏膜组织、鼻息肉,对照组(29例,男19例,女10例,年龄20~57岁)患者的下鼻甲黏膜组织。通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察组织中的Eos浸润情况,并将CRSwNP分为嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴息肉(Eos-CRSwNP)和非嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴息肉(non-Eos-CRSwNP)。通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)的方法检测4组患者Notch通路受体Notch-1、Notch-2、Notch-3、Notch-4及其配体Jagged-1、Jagged-2、Delta-1、Delta-3和Delta-4的表达,Th2型细胞因子[白细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-13]、嗜酸粒细胞阳离子蛋白(eosinophilic cationic protein,ECP)以及Treg细胞关键转录因子Foxp3的表达。采用流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在4组患者鼻黏膜组织中的表达。采用SPSS 20.0软件进行统计学分析,多组间均数比较采用单因素方差分析,相关性分析采用Spearman检验。结果与对照组、CRSsNP组和non-Eos-CRSwNP组相比,Eos-CRSwNP组的IL-4、IL-5、IL-13表达水平最高(F值分别为16.930、9.197、9.116,P值均<0.05);Foxp3的表达水平最低(F=2.780,P<0.05);Foxp3与ECP呈负相关(r=-0.326,P<0.05)。Eos-CRSwNP组中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占比低于对照组、CRSsNP组、non-Eos-CRSwNP组(F=13.140,P<0.01)。Notch-1、Jagged-1在Eos-CRSwNP组中表达高于non-Eos-CRSwNP组,差异有统计学意义(F值分别为5.953、 6.380,P值均<0.05);且在鼻息肉组中Notch-1/Jagged-1与Foxp3表达呈� 展开更多

关键词 鼻窦炎 鼻息肉 Notch受体 调节性T细胞 嗜酸粒细胞

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汉防己甲素对人鼻咽癌CNE1和CNE2细胞株的放疗增敏作用 被引量：12

2

作者 王君 常利红 +6 位作者 李霞 陈贤珍 吴喜福 王志远 黄子真 黄健聪 张革化 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1611-1618,共8页

目的:探讨最大非毒性剂量汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放疗增敏机制。方法:分别采用最大非毒性剂量Tet(对CNE1细胞为1.5μmol/L;对CNE2细胞为1.8μmol/L)、4 Gy放疗和最大非毒性剂量Tet联合放疗处理CNE1和C... 目的:探讨最大非毒性剂量汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放疗增敏机制。方法:分别采用最大非毒性剂量Tet(对CNE1细胞为1.5μmol/L;对CNE2细胞为1.8μmol/L)、4 Gy放疗和最大非毒性剂量Tet联合放疗处理CNE1和CNE2细胞;流式细胞术检测各组细胞周期分布,Western blot检测各组细胞γ-H2AX、cleaved caspase-3、p-CDC25C、CDK1、p-CDK1、cyclin B1、ERK和p-ERK的蛋白水平。结果:最大非毒性剂量Tet联合放疗后可上调CNE1和CNE2细胞中γ-H2AX的表达。放疗组CNE1和CNE2细胞G_2/M期的比例分别为(18.09±0.42)%和(18.48±1.32)%,联合处理组CNE1和CNE2细胞G_2/M期的比例降为(15.88±1.04)%和(13.80±0.82)%,与放疗组比较差异有统计学意义(P<0.05)。联合处理可增加放疗所致的cleaved caspase-3的蛋白水平(P<0.05)。不同浓度Tet处理CNE1和CNE2细胞后,p-CDC25C和p-CDK1的蛋白水平随Tet浓度增加而升高(P<0.05),CDK1的表达无明显改变;最大非毒性剂量Tet不影响p-CDC25C、p-CDK1和CDK1的蛋白水平。在CNE1和CNE2细胞中,联合处理可明显降低放疗引起的p-CDC25C和p-CDK1的蛋白水平(P<0.05),上调放疗后cyclin B1的表达,而对总CDK1的表达无明显调节作用;联合处理可显著抑制放疗所致的pERK蛋白水平(P<0.05)。结论:最大非毒性剂量Tet可以增加放疗引起的CNE1和CNE2细胞的DNA断裂及细胞凋亡,其放疗增敏的机制可能与Tet调控ERK/CDC25C/CDK1/cyclin B1通路、去除放疗导致的G2/M期阻滞有关。 展开更多

关键词 汉防已甲素 鼻咽癌 G2/M期阻滞 ERK/CDC25C/CDK1/cyclin B1通路

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IL-19及其受体与慢性鼻-鼻窦炎组织重塑的相关性研究 被引量：12

3

作者 李霞 常利红 +4 位作者 黄子真 王志远 陈贤珍 王君 张革化 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期919-924,共6页

目的:探讨白细胞介素19(interleukin-19,IL-19)及其受体(IL-20R1/IL-20R2)在不同类型慢性鼻-鼻窦炎[慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSw NP)和慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis witho... 目的:探讨白细胞介素19(interleukin-19,IL-19)及其受体(IL-20R1/IL-20R2)在不同类型慢性鼻-鼻窦炎[慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSw NP)和慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis without nasal polyps,CRSs NP)]患者中表达的差异,并分析其与慢性鼻-鼻窦炎组织重塑的相关性。方法:研究共分3组:CRSw NP组(30例)、CRSs NP组(15例)和对照组(鼻中隔偏曲患者15例)。实时荧光定量PCR检测IL-19及其受体(IL-20R1/IL-20R2)和组织重塑因子基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、金属蛋白酶组织抑制物(TIMP)-1的mRNA相对表达量;免疫组化检测IL-19及其受体的蛋白表达量;ELISA检测MMP-9、TIMP-1的蛋白表达量。结果:CRSw NP组IL-19、IL-20R1、IL-20R2和MMP-9的mRNA和蛋白表达量高于CRSs NP组和对照组(P<0.05),CRSs NP组TIMP-1的mRNA和蛋白的表达量均高于CRSw NP组和对照组(P<0.05);MMP-2的mRNA和蛋白的表达量在各组无显著差异。CRSw NP组IL-19、IL-20R1和IL-20R2均与MMP-9的mRNA相对表达量呈正相关(P<0.05);IL-19及其受体与TIMP-1的mRNA相对表达量无明显相关。结论:IL-19及其受体的mRNA在CRSw NP中高表达,且与MMP-9 mRNA表达呈正相关,提示二者可能存在交互作用,可能参与慢性鼻-鼻窦炎的组织重塑。 展开更多

关键词 慢性鼻-鼻窦炎 组织重塑 白细胞介素19 基质金属蛋白酶9 金属蛋白酶组织抑制物1

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鼻中隔偏曲患者精神心理特征初步分析 被引量：11

4

作者 李文婷 陈贤珍 +4 位作者 涂为娟 黄子真 常利红 王君 张革化 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期655-660,共6页

目的初步探讨鼻中隔偏曲患者的精神心理特征。方法对2015年5—12月期间在中山大学附属第三医院住院的鼻中隔偏曲患者（44例）及同期住院的声带息肉患者（37例，对照组）进行90项症状自评量表（symptom checklist 90，SCL－90）、Zung抑... 目的初步探讨鼻中隔偏曲患者的精神心理特征。方法对2015年5—12月期间在中山大学附属第三医院住院的鼻中隔偏曲患者（44例）及同期住院的声带息肉患者（37例，对照组）进行90项症状自评量表（symptom checklist 90，SCL－90）、Zung抑郁自评量表（self－rating depression scale，SDS）、Zung焦虑自评量表（self－rating anxiety scale，SAS）评分，并收集鼻中隔偏曲患者的鼻塞视觉模拟量表（visual analogue scale，VAS）评分及鼻阻力值，分析鼻中隔偏曲患者的精神心理特征及其与主观症状、客观体征的相关性。以SPSS 20.0软件对数据进行统计学分析。结果鼻中隔偏曲组SCL－90总分为（130.4±48.3）分，总分及总均分与中国常模相比，差异均无统计学意义（t值分别为0.469、0.112，P值均﹥0.05）；与对照组相比，差异均无统计学意义（t值分别为1.575、1.564，P值均〉0.05），但躯体化、抑郁、焦虑项目因子分高于对照组，差异有统计学意义（t值分别为2.380、2.133、1.969，P值均〈0.05）；两组在躯体化、抑郁、焦虑三个项目中异常患者的比例差异有统计学意义（χ^2值分别为11.585、9.610、5.429，P值均〈0.05）。鼻中隔偏曲组SDS、SAS评分分别为（46.0±10.6）、（43.0±10.2）分，高于中国常模和对照组，差异有统计学意义（t值分别为5.342、6.236、1.476、3.013，P值均〈0.05）；其中焦虑、抑郁状态患者分别有9例（20.5%、20.5%），同时具有焦虑、抑郁状态患者5例（11.4%）。SDS得分与SCL－90抑郁项目得分呈正相关（Z＝0.415，P＝0.005）；SAS得分与SCL－90焦虑项目得分呈正相关（Z＝0.445，P＝0.002）；SDS与SAS得分呈正相关（Z＝0.392，P＝0.008）。鼻中隔偏曲患者鼻塞VAS评分为（6.0±3.2）分，吸气相总阻力为（0.202±0.140）kPa·S/cm^3，呼气相总阻力为（0.230±0.161）kPa·S/cm^3。VAS评分与SCL－90总分及抑郁、焦虑 展开更多

关键词 鼻中隔 疾病 抑郁 焦虑

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miR-18a促进自噬增强人鼻咽癌细胞株放疗敏感性的研究 被引量：6

5

作者 常利红 姚周周 +5 位作者 鲍宏伟 李越 陈晓红 赖晓萍 黄子真 张革化 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CSCD 北大核心 2021年第7期736-745,共10页

目的:探索miR-18a过表达和抑制表达对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2放疗敏感性的影响及可能的机制。方法:采用miR-18a过表达质粒miR-18a模拟物和抑制表达质粒miR-18a遏制物及空白对照质粒转染人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2细胞,实时荧光定量反... 目的:探索miR-18a过表达和抑制表达对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2放疗敏感性的影响及可能的机制。方法:采用miR-18a过表达质粒miR-18a模拟物和抑制表达质粒miR-18a遏制物及空白对照质粒转染人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2细胞,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(WB)检测其对毛细血管扩张性共济失调症突变(ataxia telangiectasia mutated,ATM)基因和蛋白表达的影响。构建miR-18a过表达和抑制表达的人鼻咽癌细胞CNE1和CNE2细胞株。四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测miR-18a过表达和抑制表达联合放疗处理前后对人鼻咽癌细胞株生长的影响,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,克隆形成实验检测细胞放疗敏感性,吖啶橙染色结合WB检测细胞自噬水平及自噬相关蛋白表达。采用SPSS 16.0软件进行统计学分析,2组间均数比较采用独立样本t检验。结果:100、200 nmol/L miR-18a模拟物转染CNE1和CNE2细胞48 h后,与对照组相比,ATM mRNA表达受到显著抑制(CNE1相对表达量为0.174±0.139和0.003±0.001,t值为9.939和19470.783;CNE2:相对表达量为0.024±0.008和0.019±0.012,t值为270.230和137.746,P值均<0.001),72 h后,ATM蛋白水平显著下降;100、200 nmol/L miR-18a遏制物转染48 h后,CNE1细胞中ATM转录显著增加(CNE1相对表达量为9.419±2.495和2.500±1.063,t值为-4.427和-41.241,P值均<0.05);CNE2细胞中ATM转录亦显著增加(相对表达量为7.210±0.171和115.875±15.805,t值为-62.789和-12.589,P值均<0.05),72 h后,ATM蛋白水平增高。miR-18a过表达的CNE1和CNE2细胞放疗后与CNE1和CNE2细胞单纯放疗相比,细胞增殖受到明显抑制(P值均<0.05);稳定抑制miR-18a表达与单纯放疗相比,细胞增殖能力增加(P值均<0.01)。100 nmol/L miR-18a模拟物转染联合放疗组与单纯放疗组相比,CNE1细胞凋亡率增加[(22.9±2.1)%比(16.3±1.0)%,t=-4.870,P<0.01]。稳定过表达miR-18a联合放疗与单纯放疗相比,G1期和G2/M期的细胞 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 miR-18a 放疗敏感性 自噬

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上皮钙黏蛋白表达与喉癌淋巴结转移和预后的关系 被引量：6

6

作者 常利红 黎景佳 +3 位作者 杨新明 唐青来 叶进 庄士民 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2014年第6期299-303,共5页

目的检测上皮钙黏蛋白(E-cadherin)在喉癌组织中的表达及其与喉癌临床病理特征、预后的关系,探讨其在喉癌发生、发展中的作用及临床应用价值。方法采用免疫组化方法检测64例喉癌组织和30例癌旁非肿瘤组织中E-cadherin蛋白表达水平,分析E... 目的检测上皮钙黏蛋白(E-cadherin)在喉癌组织中的表达及其与喉癌临床病理特征、预后的关系,探讨其在喉癌发生、发展中的作用及临床应用价值。方法采用免疫组化方法检测64例喉癌组织和30例癌旁非肿瘤组织中E-cadherin蛋白表达水平,分析E-cadherin表达与喉癌临床病理特征之间的关系,结合临床随访资料,用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Log-rank法比较E-cadherin高表达组和E-cadherin低表达组5年生存率,Cox多因素回归法分析喉癌预后的独立预测因素。结果喉癌组织中E-cadherin平均染色分数明显低于癌旁非肿瘤组织(F=10.587,P<0.001);喉癌组织中E-cadherin表达水平与淋巴结转移(χ2=2.469,P<0.001)有明显相关性,而与患者年龄、肿瘤临床分型、T分级和病理分级无关;E-cadherin高表达组5年生存率为74.1%,E-cadherin低表达组5年生存率为42.9%,二者差异有统计学意义;多变量Cox风险比例模型分析表明,仅淋巴结转移是喉癌预后的独立预测因子,E-cadherin表达水平不能单独预测疾病的预后。结论E-cadherin在喉癌组织中表达减低,其表达水平可能作为预测喉癌颈淋巴结隐匿性转移的潜在肿瘤标志物。 展开更多

关键词 癌 鳞状细胞 预后 回归分析 上皮钙粘蛋白 转移

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颈深部筋膜间隙感染诊治体会 被引量：6

7

作者 黎景佳 叶进 +3 位作者 庄士民 常利红 王涛 陈愈彬 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2015年第3期138-141,共4页

目的探讨颈深部筋膜间隙感染的临床表现和诊断治疗方法。方法回顾性分析2012年1月~2014年8月我院耳鼻咽喉头颈外科收治的105例颈深部间隙感染患者的临床资料,总结其发病特征和诊治策略。结果 105例颈深部间隙感染患者中,70例行脓肿切开... 目的探讨颈深部筋膜间隙感染的临床表现和诊断治疗方法。方法回顾性分析2012年1月~2014年8月我院耳鼻咽喉头颈外科收治的105例颈深部间隙感染患者的临床资料,总结其发病特征和诊治策略。结果 105例颈深部间隙感染患者中,70例行脓肿切开引流,4例行脓肿穿刺抽液,31例行静脉抗生素消炎治疗,仅2例颈深部多筋膜间隙感染患者分别并发呼吸困难、纵隔感染,所有患者均治愈出院。结论颈深部筋膜间隙感染一经确诊脓肿形成,应及时切开引流,根据药敏试验结果选用合适抗生素,控制基础疾病及严重并发症。 展开更多

关键词 颈 软组织感染 扁桃体周脓肿 引流术 咽旁间隙脓肿

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变应性鼻炎免疫治疗前后外周血不同T细胞亚群基因表达的研究 被引量：6

8

作者 郑瑞 黄雪琨 +3 位作者 常利红 陈玉莲 杨钦泰 张革化 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2014年第9期477-480,共4页

目的探讨变应性鼻炎（AR）屋尘螨特异性免疫治疗前后外周血调节性T细胞（T regulatory cells,Treg）Foxp3基因和γδT细胞抗原识别受体（T cell receptor,TCR）Vγ亚家族基因表达的变化情况。方法选择22例屋尘螨皮下注射免疫治疗1年有效... 目的探讨变应性鼻炎（AR）屋尘螨特异性免疫治疗前后外周血调节性T细胞（T regulatory cells,Treg）Foxp3基因和γδT细胞抗原识别受体（T cell receptor,TCR）Vγ亚家族基因表达的变化情况。方法选择22例屋尘螨皮下注射免疫治疗1年有效的AR患者,采用RT-PCR检测治疗前后外周血Foxp3与TCR VγⅠ～Ⅲ基因表达水平。10例健康志愿者为对照。结果 22例AR患者免疫治疗前Foxp3、TCR VγⅠ～Ⅲ水平明显低于对照组（Z=-2.155,Z=-2.114,t=4.101、t=3.108,P均〈0.05）,治疗后Foxp3、VγⅢ明显升高（t=-4.577,Z=-3.416,P均〈0.05）;治疗前Foxp3与VγⅠ、Ⅱ、Ⅲ呈正相关,治疗后Foxp3与VγⅢ呈正相关。结论免疫治疗1年有效的AR患者中,治疗前后外周血Treg细胞和γδT细胞亚群之间存在动态平衡关系,患者免疫治疗早期症状的改善可能与T细胞的免疫重塑相关。 展开更多

关键词 变态反应和免疫学 鼻炎 变应性 常年性 抗原 尘螨属 脱敏法 免疫 T淋巴细胞 调节性

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IL-17A激活NLRP3炎性小体在CRSwNP中的作用及临床意义 被引量：1

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作者 李越 张雅娜 +5 位作者 常利红 黄伟强 吴浩天 吴喜福 黄子真 张革化 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CSCD 北大核心 2023年第7期690-698,共9页

目的探讨慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)中白细胞介素(IL)-17A激活NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)的作用及临床意义。方法收集自2020年1月至2021年12月期间在中山大学附属第... 目的探讨慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)中白细胞介素(IL)-17A激活NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)的作用及临床意义。方法收集自2020年1月至2021年12月期间在中山大学附属第三医院接受鼻内镜手术治疗的患者标本,其中CRSwNP患者28例(男性19例,女性9例,年龄19~67岁),慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)患者22例(男性14例,女性8例,年龄26~66岁),对照组患者22例(男性13例,女性9例,年龄20~57岁)。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测IL-17A、NLRP3、IL-1β及IL-18在3组中的表达,分析其相关性;组织免疫荧光三染定位分析IL-17A、NLRP3、IL-18在鼻黏膜组织中的位置;蛋白免疫印迹法及酶联免疫吸附试验检测IL-17A刺激原代鼻黏膜上皮细胞及使用IL-17A受体抑制剂后NLRP3、IL-1β及IL-18在细胞中的表达;细胞免疫荧光观察IL-17A刺激原代鼻黏膜上皮细胞后,NLRP3、IL-1β、IL-18蛋白的表达,以及使用IL-17A受体抑制剂和NLRP3抑制剂(MCC950)后,IL-17A刺激原代鼻黏膜上皮细胞NLRP3、IL-1β、IL-18蛋白的表达。分析NLRP3、IL-1β及IL-18与CRSwNP患者CT评分、鼻内镜评分、视觉模拟量表(VAS)评分和鼻腔鼻窦结局测试(SNOT)22评分之间的相关性。采用SPSS 20.0软件对数据进行统计。结果CRSwNP组IL-17A、NLRP3、IL-1β及IL-18 mRNA表达明显高于CRSsNP组(P=0.018,P<0.001,P=0.005,P<0.016)及对照组(P值均<0.001),且IL-17A与NLRP3、IL-1β、IL-18的表达存在正相关(r值分别为0.643、0.650、0.629,P值均<0.05)。息肉组织中,IL-17A与NLRP3、IL-18共同定位于上皮层。IL-17A刺激原代鼻黏膜上皮细胞后,NLRP3、IL-1β、IL-18表达增高;使用IL-17A受体抑制剂后,可明显下调NLRP3、IL-1β、IL-18的表达;使用NLRP3抑制剂MCC950后则明显下调IL-17A促进NLRP3、IL-1β及IL-18表达的作用。NLRP3、IL-1β、IL-18的表达与CRSwNP患者CT、鼻内镜、VAS和SNOT22评分存在正相关。结论CRSwN 展开更多

关键词 鼻窦炎 鼻息肉 IL-17A NLRP3炎性小体

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最大非毒性剂量汉防己甲素对人鼻咽癌细胞放疗增敏作用的研究 被引量：4

10

作者 王凯 张革化 +5 位作者 常利红 吴喜福 黎景佳 庄士民 王君 Daqing Li 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期227-231,共5页

目的 探讨最大非毒性剂量汉防己甲素（tetrandrine,Tet）对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放射增敏作用.方法 采用单纯放射线照射和Tet联合放射线照射对CNE1和CNE2细胞株进行处理,中性彗星电泳检测不同方式处理组中CNE1和CNE2细胞DNA损伤,... 目的 探讨最大非毒性剂量汉防己甲素（tetrandrine,Tet）对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放射增敏作用.方法 采用单纯放射线照射和Tet联合放射线照射对CNE1和CNE2细胞株进行处理,中性彗星电泳检测不同方式处理组中CNE1和CNE2细胞DNA损伤,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率.结果 单纯放射线照射组CNE1和CNE2细胞平均彗星尾矩（tail moment,TM）分别为（7.13±3.70）（x±s）、（11.52±4.04）,Tet联合放射线照射组平均TM分别为（13.61 ±5.45）、（18.85±6.18）,差异有统计学意义（t值分别为2.784和3.089,P值均＜0.05）.单纯放射线照射组CNE1和CNE2细胞周期以G2期为主,分别为（42.62±2.07）％、（34.82±2.74）％,Tet联合放射线照射组分别为（17.02±1.87）％、（19.64±4.82）％,差异有统计学意义（t值分别为23.173和16.500,P值均＜0.01）.单纯放射线照射组CNE1和CNE2细胞凋亡率分别为（17.24％±0.99）％、（16.68％±0.27）％,Tet联合放射线照射组分别为（19.11±1.24）％、（18.51±2.41）％,差异无统计学意义（P值均＞0.05）.结论 最大非毒性剂量Tet能增加人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放射敏感性,其机制可能与去除放射线照射诱导的G2/M期阻滞,降低细胞修复DNA双链断裂能力有关. 展开更多

关键词 苄异喹啉类 鼻咽肿瘤 辐射耐受性 彗星试验 细胞凋亡

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CD8^(+)Treg细胞在慢性鼻窦炎中的表达及其与嗜酸粒细胞浸润的研究 被引量：3

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作者 常利红 陈晓红 +4 位作者 李帅祥 李霞 黄子真 黄健聪 张革化 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CSCD 北大核心 2022年第2期142-152,共11页

目的明确CD8^(+)调节性T细胞(Treg细胞)在慢性鼻窦炎(CRS)患者鼻黏膜组织和外周血中的表达情况,及其与鼻黏膜组织中嗜酸粒细胞(Eos)浸润的关系。方法对2017年3月至2018年10月于中山大学附属第三医院的33例慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)、2... 目的明确CD8^(+)调节性T细胞(Treg细胞)在慢性鼻窦炎(CRS)患者鼻黏膜组织和外周血中的表达情况,及其与鼻黏膜组织中嗜酸粒细胞(Eos)浸润的关系。方法对2017年3月至2018年10月于中山大学附属第三医院的33例慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)、26例慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)及27例对照组患者采集鼻黏膜组织及外周血,其中男59例,女27例,年龄18~72岁。苏木精-伊红染色检测鼻黏膜组织中Eos计数,将CRS患者分为嗜酸粒细胞性CRS(eosinophilic CRS,ECRS)和非嗜酸粒细胞性CRS(non-eosinophilic CRS,Non-ECRS)两组类型。采用流式细胞术检测各组患者鼻黏膜组织及外周血中CD4^(+)及CD8^(+)T细胞的比例、细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocytes,Tc)1、Tc2及Tc17细胞的比例、CD8^(+)Foxp3^(+)和CD8^(+)Foxp3^(-)IL-10^(+)两种CD8^(+)Treg细胞的比例,以及产转化生长因子β(TGF-β)及白细胞介素(IL)-10的CD8^(+)Foxp3^(+)Treg细胞的比例。采用Graphpad 7.0进行作图,所有数据采用M(IQR)表示,采用SPSS 16.0软件进行统计学分析。结果CD8^(+)T细胞在所有患者鼻黏膜组织淋巴细胞中的比例高于CD4^(+)T细胞[37.75%(17.35%)比4.72%(4.29%),Z=-5.70,P<0.001],而在外周血淋巴细胞中的比例低于CD4^(+)T细胞[23.60%(9.33%)比44.05%(10.93%),t=9.72,P<0.001]。CRSwNP患者鼻黏膜组织中Tc2细胞和Tc17细胞比例显著高于CRSsNP患者及对照组[1.82%(1.22%)比0.84%(0.79%)比1.09%(0.92%),1.93%(2.32%)比0.54%(1.04%)比0.47%(0.51%),P值均<0.05]。与CRSsNP[0.43%(1.45%)]和对照组[0.48%(0.83%)]相比,CRSwNP患者鼻黏膜组织中CD8^(+)Foxp3^(+)Treg细胞占淋巴细胞比例最低[0.10%(0.32%),Z值分别为-2.24、-2.22,P值分别为0.025、0.027];CRSwNP患者鼻黏膜组织中产TGF-β和IL-10的CD8^(+)Foxp3^(+)Treg细胞占总CD8^(+)T细胞的比例显著低于对照组(Z值分别为1.46、0.49,P值均为0.001)。CRSwNP患者鼻黏膜组织中CD8^(+)Foxp3^(-)IL-10^(+)Treg细胞占总CD8^(+)T细胞的比例显著低于CRSsNP患� 展开更多

关键词 鼻窦炎 CD8^(+)Treg细胞 嗜酸粒细胞

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腐植酸在西瓜种子发芽过程中的影响研究 被引量：4

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作者 崔海涛 常利红 +1 位作者 王蕊 李文德 《化工技术与开发》 CAS 2008年第5期17-21,共5页

研究了不同浓度黄腐酸、腐植酸和原料风化煤对西瓜种子生长发育的影响。研究结果表明,腐植酸类物质对西瓜种子生长有明显的促进作用,表现在选用合适浓度的溶液处理后,种子萌发率提高,萌发整齐,幼苗粗壮,种子的活力指数提高。浓度对其促... 研究了不同浓度黄腐酸、腐植酸和原料风化煤对西瓜种子生长发育的影响。研究结果表明,腐植酸类物质对西瓜种子生长有明显的促进作用,表现在选用合适浓度的溶液处理后,种子萌发率提高,萌发整齐,幼苗粗壮,种子的活力指数提高。浓度对其促进作用有较大的影响,浓度过大时反而对种子的萌发有抑制作用。 展开更多

关键词 腐植酸(HA) 黄腐酸(FA) 生物活性 活力指数

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白细胞介素17A在非嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉中的表达及来源研究 被引量：4

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作者 陈晓红 常利红 +7 位作者 黄健聪 李霞 赖晓萍 吴喜福 黄子真 王志远 鲍宏伟 张革化 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期604-610,共7页

目的探讨非嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉(non-eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps,nECRSwNP)中白细胞介素(interleukin,IL)17A的表达、细胞来源及表达差异的可能原因。方法收集2017年1月至2018年5月在中山大学... 目的探讨非嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉(non-eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps,nECRSwNP)中白细胞介素(interleukin,IL)17A的表达、细胞来源及表达差异的可能原因。方法收集2017年1月至2018年5月在中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科住院并行鼻内镜手术治疗的42例慢性鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP)患者的组织标本,其中男33例,女9例,年龄18~65岁。嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉(eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps,ECRSwNP)组14例,nECRSwNP组28例。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测IL-17A在2组鼻黏膜组织中的表达,流式细胞术检测IL-17A在2组中的表达及来源细胞;并探讨IL-17A主要来源细胞在2组中数量及分化能力的差异;通过ELISA分析促产IL-17A细胞分化的细胞因子在CRSwNP中的表达及与IL-17A的相关性。运用SPSS 20.0进行统计学分析。结果nECRSwNP组鼻黏膜组织中IL-17A的蛋白表达水平及产IL-17A的淋巴细胞比例均显著高于ECRSwNP组,差异均有统计学意义{158.56(167.76)pg/ml[M(QR),后同]比9.42(11.33)pg/ml,10.21%±1.54%(±s,后同)比3.93%±0.80%,Z=2.95,t=3.62,P值均<0.01}。nECRSwNP组和ECRSwNP组中IL-17A均主要来源于Tc17细胞(产IL-17A的CD8+T细胞)和Th17细胞(产IL-17A的CD4+T细胞)。ECRSwNP组与nECRSwNP组中CD8+和CD4+T细胞比例无明显差异,但nECRSwNP组中CD8+和CD4+T细胞分化为Tc17和Th17细胞的能力强于ECRSwNP组。nECRSwNP组中促Tc17/Th17细胞分化的细胞因子IL-6和转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)的表达均显著高于ECRSwNP组[56.07(234.25)pg/ml比8.27(12.51)pg/ml,(5.44±0.34)pg/ml比(4.17±0.22)pg/ml,Z=2.426,t=2.294,P值均<0.05],但IL-23在2组间的差异无统计学意义。IL-17A与IL-6之间存在正相关关系(r=0.615,P=0.009),IL-17A与TGF-β之间、IL-17A与IL-23之间无相关性。结论nECRSwNP患者鼻黏膜中IL-17A的表达显著高于ECRSwNP,为Tc17/Th 展开更多

关键词 鼻窦炎 鼻息肉 非嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉 白细胞介素17A

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ACE2在慢性鼻窦炎伴鼻息肉中的表达及调控分析 被引量：2

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作者 黄伟强 黄子真 +6 位作者 赖晓萍 李越 陈晓红 吴浩天 常利红 张雅娜 张革化 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CSCD 北大核心 2022年第6期692-698,共7页

目的初步分析血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)在慢性鼻窦炎伴鼻息肉中的表达及潜在的调控机制。方法纳入2020年2月至2021年5月期间,于中山大学附属第三医院行鼻内镜手术的患者23例,其中男性17例,女性6例,年龄2... 目的初步分析血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)在慢性鼻窦炎伴鼻息肉中的表达及潜在的调控机制。方法纳入2020年2月至2021年5月期间,于中山大学附属第三医院行鼻内镜手术的患者23例,其中男性17例,女性6例,年龄23~66岁。通过免疫组织化学染色方法检测ACE2在非慢性鼻窦炎对照组、非嗜酸性慢性鼻窦炎伴鼻息肉(non-eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps,non-ECRSwNP)组和嗜酸性慢性鼻窦炎伴鼻息肉(eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps,ECRSwNP)组中的表达。利用GSE72713芯片分析ACE2与干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13、IL-25、IL-33、胸腺基质淋巴细胞生成素、骨膜蛋白等Th1/Th2细胞因子的相关性。通过string数据库构建ACE2互作蛋白网络,cibersort算法评估GSE72713芯片免疫细胞浸润情况,并通过微小核糖核酸(miRNA)调控网络、基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)和药理学分析对ACE2进行综合分析。使用GraphPad 7.0及SPSS 20.0软件对实验结果进行统计学分析。结果ACE2在non-ECRSwNP组较ECRSwNP组高表达。芯片分析显示ACE2表达与IFN-γ呈正相关,与IL-5、IL-13和骨膜蛋白呈负相关。免疫分析显示ACE2与M1型巨噬细胞浸润呈正相关,与M2型巨噬细胞浸润呈负相关。GSEA结果显示,干扰素相关通路在non-ECRSwNP组显著上调,而靶向ACE2的miRNA-200B/miRNA-200C/miRNA-429通路在ECRSwNP组上调。药理学分析结果显示,氨苄青霉素可上调ACE2表达,对乙酰氨基酚可下调ACE2表达。结论ACE2在ECRSwNP和non-ECRSwNP中具有不同的表达模式,这可能与组织炎性因子浸润不同以及miRNA调控通路差异相关。 展开更多

关键词 血管紧张素转化酶2 嗜酸性慢性鼻窦炎伴鼻息肉 非嗜酸性慢性鼻窦炎伴鼻息肉 干扰素γ 白细胞介素5 白细胞介素13 miRNA 巨噬细胞

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细胞焦亡在相关疾病中的研究进展 被引量：3

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作者 李越 常利红 张革化 《国际耳鼻咽喉头颈外科杂志》 2021年第3期165-169,共5页

细胞焦亡是一种新的程序性细胞死亡,为半胱氨酸蛋白酶-1/半胱氨酸蛋白酶-4/5/11依赖,并伴有细胞膨胀破裂、大量炎症因子释放的炎性反应过程。国内外研究显示细胞焦亡在心血管病、免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤等发生发展过程中发挥着重... 细胞焦亡是一种新的程序性细胞死亡,为半胱氨酸蛋白酶-1/半胱氨酸蛋白酶-4/5/11依赖,并伴有细胞膨胀破裂、大量炎症因子释放的炎性反应过程。国内外研究显示细胞焦亡在心血管病、免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤等发生发展过程中发挥着重要作用。焦亡机制的研究有望为疾病治疗提供新的方向与策略。本文就细胞焦亡在相关疾病中的研究进展做一综述。 展开更多

关键词 细胞焦亡 半胱氨酸蛋白酶-1 炎性小体

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miR-18a过表达及抑制表达人鼻咽癌细胞株的构建 被引量：3

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作者 常利红 黄子真 +4 位作者 黄健聪 王君 陈晓红 赖晓萍 张革化 《中山大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期119-129,共11页

【目的】建立稳定miR-18a过表达及表达的人鼻咽癌细胞系,为研究miR-18a在鼻咽癌发生发展中的功能奠定基础。【方法】将miR-18a前体的编码基因片段及miR-18a反义寡核苷酸克隆到慢病毒载体中,DNA测序鉴定;将构建好的载体转染293T细胞,获... 【目的】建立稳定miR-18a过表达及表达的人鼻咽癌细胞系,为研究miR-18a在鼻咽癌发生发展中的功能奠定基础。【方法】将miR-18a前体的编码基因片段及miR-18a反义寡核苷酸克隆到慢病毒载体中,DNA测序鉴定;将构建好的载体转染293T细胞,获得重组miR-18a过表达及抑制表达的慢病毒载体,感染人鼻咽癌细胞CNE1和CNE2,嘌呤霉素筛选获得稳定干扰miR-18a表达及过表达miR-18a的细胞系,PCR及western blot鉴定。【结果】成功构建真核表达的慢病毒miR-18a干扰载体及过表达载体,滴度均为3×10~8TU/mL;转染miR-18a抑制表达的慢病毒载体的CNE1和CNE2中ATM表达增高;与对照病毒转染相比,转染miR-18a过表达慢病毒载体的CNE1(20.3倍,P<0.01)和CNE2(122.5倍,P<0.01)中miR-18a表达显著增高,靶蛋白ATM表达下调。【结论】成功构建人miR-18a慢病毒抑制表达和过表达载体,并获得相应的慢病毒稳转人鼻咽癌细胞株。 展开更多

关键词 miR-18a 慢病毒 过表达载体 抑制载体 鼻咽癌细胞

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雷贝拉唑和克拉霉素联合阿莫西林疗法治疗胃溃疡的疗效观察 被引量：4

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作者 常利红 《临床医学》 CAS 2016年第9期95-96,共2页

目的探讨阿莫西林、克拉霉素及雷贝拉唑联合治疗胃溃疡的临床效果。方法选取2012年12月至2015年12月收治的胃溃疡患者120例,按照随机数字表法随机分成观察组和对照组,每组60例。对照组采用阿莫西林、克拉霉素及奥美拉唑进行联合治疗,观... 目的探讨阿莫西林、克拉霉素及雷贝拉唑联合治疗胃溃疡的临床效果。方法选取2012年12月至2015年12月收治的胃溃疡患者120例,按照随机数字表法随机分成观察组和对照组,每组60例。对照组采用阿莫西林、克拉霉素及奥美拉唑进行联合治疗,观察组采用阿莫西林、克拉霉素及雷贝拉唑进行联合治疗,最后对两组患者的腹痛好转时间、好转率、临床疗效及不良反应等进行观察和比较分析。结果治疗后,治疗组治疗总有效率(96.67%)远高于对照组(86.67%),组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。在治疗过程中,治疗组不良反应发生率明显低于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论阿莫西林、克拉霉素及雷贝拉唑联合治疗胃溃疡患者疗效确切,能够缩短患者的腹痛时间,提高腹痛好转率及临床疗效,安全性较高,进而能够有效加快患者的康复,值得临床推广。 展开更多

关键词 克拉霉素 阿莫西林 雷贝拉唑 胃溃疡

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慢病毒介导的类表皮生长因子域7基因沉默抑制喉癌Hep-2细胞增殖和侵袭的研究 被引量：2

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作者 黎景佳 叶进 +4 位作者 庄士民 王涛 王志远 常利红 张革化 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期643-648,共6页

目的 探讨小干扰RNA（siRNA）重组慢病毒介导的类表皮生长因子域7（epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7）基因沉默对体外培养喉癌Hep-2细胞增殖和侵袭潜能的影响.方法 采用RNA干扰技术,构建靶向EGFL7的shRNA重组慢病毒并转染H... 目的 探讨小干扰RNA（siRNA）重组慢病毒介导的类表皮生长因子域7（epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7）基因沉默对体外培养喉癌Hep-2细胞增殖和侵袭潜能的影响.方法 采用RNA干扰技术,构建靶向EGFL7的shRNA重组慢病毒并转染Hep-2细胞,通过Real-timePCR和Western blot在mRNA及蛋白水平鉴定转染结果;实验分为空白对照组（NC）、空白慢病毒感染组（Lenti-NC）和EGFL7基因沉默慢病毒感染组（Lenti-EGFL7）,采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Transwell侵袭实验观察细胞侵袭能力.结果 Real-time PCR检测说明Lenti-EGFL7组mRNA相对表达量较NC组下降达94％（P＜0.001）,Western blot检测证实Lenti-EGFL7组EGFL7蛋白相对表达量为（0.07 ±0.04）较NC组的（0.39 ±0.12）明显减低（P ＜0.001）,表明成功构建稳定沉默EGFL7基因的喉癌Hep-2细胞株.CCK-8细胞增殖实验说明靶向沉默EGFL7表达导致喉癌细胞增殖明显抑制（P＜0.01）,流式细胞术检测证实,与NC组和Lenti-NC组相比,Lenti-EGFL7组S期细胞百分比明显升高（P＜0.01）,G1期细胞百分比下降（P＜0.05）,细胞凋亡检测证实Lenti-EGFL7组细胞凋亡率为（66.2±1.28）％较NC组的（6.09±3.28）％和Lenti-NC组的（9.86±2.13）％明显增加（P ＜0.001）.Transwell侵袭实验发现Lenti-EGFL7组穿过Matrigel到达下室的平均细胞数较NC组和Lenti-NC组均明显减少（P＜0.01）.结论 靶向沉默EGFL7基因能抑制体外培养喉癌Hep-2细胞的增殖并降低细胞侵袭能力. 展开更多

关键词 RNA 小分子干扰 喉肿瘤 表皮生长因子 细胞增殖 肿瘤侵润 慢病毒属 肿瘤细胞 培养的

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糖皮质激素受体mRNA在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者外周血单个核细胞中的表达 被引量：2

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作者 何丰 黎景佳 +5 位作者 常利红 黄肇通 王志远 李培 王海峰 叶进 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2016年第3期159-162,共4页

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)mRNA的表达及其意义。方法采用实时荧光定量PCR检测30例中重度男性OSAHS... 目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)mRNA的表达及其意义。方法采用实时荧光定量PCR检测30例中重度男性OSAHS患者和27例正常男性PBMC中GRαmRNA和GRβmRNA的表达,探讨其与呼吸暂停低通气指数、体质量指数、颈围、腰围、最低动脉血氧饱和度、平均动脉血氧饱和度、Epworth嗜睡量表评分、空腹血糖、心率及血压之间的关系。结果 OSAHS组的GRαmRNA表达水i砰较对照组低(t=2.25,P<0.05);GRβmRNA的表达水平在两组间无显著差异(t=1.43,P>0.05)。在OSAHS组中并未发现GRαmRNA的表达与各参数之间存在显著相关性。结论中重度男性OSAHS患者PBMC中GRαmRNA的表达水平较对照组下降,这种改变的机制目前尚不清楚。 展开更多

关键词 睡眠呼吸暂停 阻塞性 受体 糖皮质激素 外周血单个核细胞

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突变型Rad50腺病毒载体的制备及其在人鼻咽癌细胞株CNE1中的最适感染量测定 被引量：2

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作者 严睿成 黄健聪 +5 位作者 朱玲 常利红 黎景佳 吴喜福 叶进 张革化 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS 北大核心 2015年第24期2143-2146,共4页

目的:测定携带突变型Rad50基因的重组腺病毒载体Ad-Rad50-GFP在人鼻咽癌细胞株CNE1中的表达及其对CNE1的最适感染倍率(MOI)。方法:终点稀释法测定Ad-Rad50-GFP生物滴度,细胞生长曲线观察重组腺病毒载体对CNE1生长的影响,荧光显微镜下计... 目的:测定携带突变型Rad50基因的重组腺病毒载体Ad-Rad50-GFP在人鼻咽癌细胞株CNE1中的表达及其对CNE1的最适感染倍率(MOI)。方法:终点稀释法测定Ad-Rad50-GFP生物滴度,细胞生长曲线观察重组腺病毒载体对CNE1生长的影响,荧光显微镜下计算重组腺病毒载体的转染效率;免疫印迹实验检测以最适感染量感染后CNE1细胞内突变型Rad50蛋白的表达。结果:Ad-Rad50-GFP生物滴度为1.26×10^(11)pfu/ml,重组腺病毒载体以不高于50的感染倍率转染时对CNE1生长无明显影响,且MOI=50时转染24h后GFP表达水平最高,可检出高表达的突变型Rad50蛋白,在转染72h后仍维持约70%的转染效率。结论:重组腺病毒载体Ad-Rad50-GFP能有效转染CNE1细胞并使其表达突变型Rad50蛋白,MOI=50为Ad-Rad50-GFP对CNE1的最适感染倍率。 展开更多

关键词 重组腺病毒 鼻咽肿瘤 感染倍率

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