目的基于酪氨酸激酶/信号传导及转录激活蛋白(Janus kinase/signal transducer and activator of transcription,JAK/STAT)信号通路与免疫缺陷性疾病中CD4^(+)T细胞占比减少的相关性,探讨免疫缺陷大鼠CD4^(+)T淋巴细胞分化的机制。方法...目的基于酪氨酸激酶/信号传导及转录激活蛋白(Janus kinase/signal transducer and activator of transcription,JAK/STAT)信号通路与免疫缺陷性疾病中CD4^(+)T细胞占比减少的相关性,探讨免疫缺陷大鼠CD4^(+)T淋巴细胞分化的机制。方法将SPF级SD大鼠48只,随机分为正常大鼠(24只)和模型大鼠(24只),采用环孢素制备免疫缺陷模型。每组随机选6只验证造模效果,将剩余36只大鼠分为正常组、低鲁组、高鲁组、模型组、模型低鲁组、模型高鲁组,每组6只。低鲁组和模型低鲁组分别注射1.75 mg·kg^(-1)鲁索利替尼,高鲁组和模型高鲁组分别注射3.5 mg·kg^(-1)鲁索利替尼,正常组和模型组注射1.75 mg·kg^(-1)生理盐水,隔日1次,共注射6次。采用流式细胞术检测CD4^(+)T和CD8^(+)T淋巴细胞百分比,计算大鼠脾脏和胸腺指数,HE染色法观察脾脏和胸腺病理改变,ELISA检测白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)细胞因子表达量,Western blot检测脾脏组织中酪氨酸激酶2(Janus kinase 2,JAK2)、T盒家族转录因子表达蛋白(T-box family transcription factor expression protein,T-bet)、信号传导及转录激活蛋白4(signal transducer and activator of transcription 4,STAT4)、信号传导及转录激活蛋白6(signal transducer and activator of transcription 6,STAT6)和GATA结合蛋白-3(GATA-binding protein-3,GATA3)蛋白表达量。结果模型组大鼠CD4^(+)T淋巴细胞百分比、胸腺指数较正常组明显下降(P<0.05)。与正常组比较,模型组CD4^(+)T淋巴细胞百分比减少(P<0.05),IL-2、IFN-γ和IL-12表达量下降(P<0.01),IL-10表达量升高(P<0.05);与模型组相比,模型高鲁组CD4^(+)T淋巴细胞百分比、胸腺和脾脏指数、IL-2、IFN-γ显著下降(P<0.05),而GATA3、STAT6蛋白表达量升高(P<0.05),IL-6�展开更多
文摘目的基于酪氨酸激酶/信号传导及转录激活蛋白(Janus kinase/signal transducer and activator of transcription,JAK/STAT)信号通路与免疫缺陷性疾病中CD4^(+)T细胞占比减少的相关性,探讨免疫缺陷大鼠CD4^(+)T淋巴细胞分化的机制。方法将SPF级SD大鼠48只,随机分为正常大鼠(24只)和模型大鼠(24只),采用环孢素制备免疫缺陷模型。每组随机选6只验证造模效果,将剩余36只大鼠分为正常组、低鲁组、高鲁组、模型组、模型低鲁组、模型高鲁组,每组6只。低鲁组和模型低鲁组分别注射1.75 mg·kg^(-1)鲁索利替尼,高鲁组和模型高鲁组分别注射3.5 mg·kg^(-1)鲁索利替尼,正常组和模型组注射1.75 mg·kg^(-1)生理盐水,隔日1次,共注射6次。采用流式细胞术检测CD4^(+)T和CD8^(+)T淋巴细胞百分比,计算大鼠脾脏和胸腺指数,HE染色法观察脾脏和胸腺病理改变,ELISA检测白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)细胞因子表达量,Western blot检测脾脏组织中酪氨酸激酶2(Janus kinase 2,JAK2)、T盒家族转录因子表达蛋白(T-box family transcription factor expression protein,T-bet)、信号传导及转录激活蛋白4(signal transducer and activator of transcription 4,STAT4)、信号传导及转录激活蛋白6(signal transducer and activator of transcription 6,STAT6)和GATA结合蛋白-3(GATA-binding protein-3,GATA3)蛋白表达量。结果模型组大鼠CD4^(+)T淋巴细胞百分比、胸腺指数较正常组明显下降(P<0.05)。与正常组比较,模型组CD4^(+)T淋巴细胞百分比减少(P<0.05),IL-2、IFN-γ和IL-12表达量下降(P<0.01),IL-10表达量升高(P<0.05);与模型组相比,模型高鲁组CD4^(+)T淋巴细胞百分比、胸腺和脾脏指数、IL-2、IFN-γ显著下降(P<0.05),而GATA3、STAT6蛋白表达量升高(P<0.05),IL-6�
