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铜绿假单胞菌临床菌株TTSS表达水平及相关因素分析 被引量:7
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作者 吴国营 杨洪江 +4 位作者 李群 吴海鹏 林书祥 王维 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期158-163,共6页
Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,TTSS)是铜绿假单胞菌的重要致病因子.分析临床菌株中TTSS的表达水平,对于研究铜绿假单胞菌的致病机制具有重要意义.本研究通过测定融合报告基因exsA-lacZ和exoT-lacZ编码的β-半乳糖苷酶活力,分析... Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,TTSS)是铜绿假单胞菌的重要致病因子.分析临床菌株中TTSS的表达水平,对于研究铜绿假单胞菌的致病机制具有重要意义.本研究通过测定融合报告基因exsA-lacZ和exoT-lacZ编码的β-半乳糖苷酶活力,分析了150株铜绿假单胞菌临床菌株exsA和exoT基因的表达水平,发现71株(47.33%)细菌exsA基因的表达为阳性6,5株(43.33%)细菌exoT基因的表达为阳性,基因exsA与exoT表达水平存在正相关(P<0.001),且不同菌株间两者表达水平差异较大.采用统计学方法对实验结果进一步分析发现,TTSS表达与呼吸道感染等临床症状相关(P<0.05);与标本的分离时间相关(P=0.029);与菌株亚胺青霉烯耐药性存在负相关(P<0.05).本研究结果显示,铜绿假单胞菌临床菌株TTSS表达水平差异较大,与多种因素存在相关性. 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 Ⅲ型分泌系统(TTSS) Β-半乳糖苷酶 相关性 耐药性
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结直肠癌Septin9基因甲基化检测的临床应用价值初探 被引量:7
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作者 刘彦魁 王弢 +4 位作者 浦柯艳 殷志刚 齐晓薇 李雪虹 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期631-632,共2页
Septin9基因是Septin基因家族的一员,它定位于人类17q25.3.含有17个外显子,编码Septin9蛋白,具有多个亚型。Septin9基因与肿瘤的发生直接相关,且在不同的肿瘤中其表达及功能不尽相同;Vatandoost等研究发现,在结直肠癌中,Septin... Septin9基因是Septin基因家族的一员,它定位于人类17q25.3.含有17个外显子,编码Septin9蛋白,具有多个亚型。Septin9基因与肿瘤的发生直接相关,且在不同的肿瘤中其表达及功能不尽相同;Vatandoost等研究发现,在结直肠癌中,Septin9基因有一定的甲基化发生率,但其在结直肠良性病变及消化道其他肿瘤的发生状况尚不清楚。 展开更多
关键词 基因家族 甲基化检测 结直肠癌 临床应用价值 结直肠良性病变 外显子 肿瘤 发生率
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铜绿假单胞菌主要RND外排泵表达与β-内酰胺类抗生素耐药性的相关性研究 被引量:5
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作者 吴国营 杨洪江 +5 位作者 林书祥 李群 秦旭颖 吴海鹏 王维 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期459-464,共6页
目的探讨铜绿假单胞菌4种主要RND外排泵的表达水平与β-内酰胺类抗生素耐药性间关系。方法采用药敏实验检测临床菌株β-内酰胺类抗生素耐药性;构建转录融合报告基因mexA-lacZ、mexC-lacZ、mexE-lacZ和mexX-lacZ,通过测定β-半乳糖苷酶活... 目的探讨铜绿假单胞菌4种主要RND外排泵的表达水平与β-内酰胺类抗生素耐药性间关系。方法采用药敏实验检测临床菌株β-内酰胺类抗生素耐药性;构建转录融合报告基因mexA-lacZ、mexC-lacZ、mexE-lacZ和mexX-lacZ,通过测定β-半乳糖苷酶活力,分析和比较4种RND外排泵表达水平的差异,及其表达水平与菌株抗生素耐药性的相关性。结果共检测151株临床菌株,对羧苄西林、替卡西林、氨曲南和头孢他啶的耐药性分别为19.87%、9.93%、2.65%和26.49%。选择耐2种及以上抗生素的菌株23株和对4种抗生素全部敏感的菌株19株,测定β-半乳糖苷酶活力。耐药菌株的mexA、mexC和mexX基因的表达水平与敏感菌株之间的差异有统计学意义(P均<0.05)。多元线性回归分析发现,mexA、mexC和mexX基因的表达水平分别与羧苄西林、替卡西林和氨曲南的抑菌圈直径存在高度或中度负相关性;贝塔权重数据显示mexA基因表达水平是影响羧苄西林(-0.595)、替卡西林(-0.483)和氨曲南(-0.553)3种抗菌素耐药性的主要因素。结论外排泵MexAB-OprM、MexCD-OprJ和MexXY-OprM的表达水平与β-内酰胺类抗生素耐药性存在显著相关性,MexAB-OprM对临床菌株β-内酰胺类抗生素耐药性具有主要影响。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 Β-内酰胺类 RND外排泵 融合报告基因 相关性
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铜绿假单胞菌亚胺培南中介菌株oprD基因分析 被引量:3
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作者 孙庆惠 杨白雪 +2 位作者 吴国营 杨洪江 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期177-181,共5页
目的分析铜绿假单胞菌临床分离株对亚胺培南耐药机制。方法采用VITEK32系统分析临床菌株耐药性;纸片协同法和纸片扩散法分析金属β内酰胺酶和AmpC β内酰胺酶活性;十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法分析临床菌株的外膜蛋... 目的分析铜绿假单胞菌临床分离株对亚胺培南耐药机制。方法采用VITEK32系统分析临床菌株耐药性;纸片协同法和纸片扩散法分析金属β内酰胺酶和AmpC β内酰胺酶活性;十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法分析临床菌株的外膜蛋白OprD的表达;PCR法扩增基因oprD并测序分析;随机扩增多态性DNA标记方法对临床菌株进行分型。结果 7株菌确认为亚胺培南中介株,其中2株菌外膜通道蛋白OprD可能存在缺失,进一步分析发现其编码基因被插入序列ISRP10阻断。其余5株菌OprD蛋白大小存在差异,相应编码区大小为427~443个氨基酸,OprD蛋白二级结构转角区域L1-L8处均存在多种氨基酸替代或缺失。结论铜绿假单胞菌被插入序列ISRP10阻断失能,或其外膜蛋白基因oprD及OprD蛋白二级结构转角区域的氨基酸突变,导致临床分离株对亚胺培南呈中介。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 亚胺培南中介 ISRPIO oprD基因
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一株铜绿假单胞菌临床菌株耐药的分子机制研究 被引量:2
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作者 杨洪江 +2 位作者 林书祥 吴国营 王维 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期515-518,共4页
目的研究1株铜绿假单胞菌临床分离菌株对亚胺培南耐药的分子机制。方法采用药敏分析系统(VITEK32)和纸片扩散法分析菌株的耐药性,实时定量PCR分析相关耐药基因的表达,PCR和测序法分析相关耐药基因的序列。结果药敏分析结果显示,该菌株... 目的研究1株铜绿假单胞菌临床分离菌株对亚胺培南耐药的分子机制。方法采用药敏分析系统(VITEK32)和纸片扩散法分析菌株的耐药性,实时定量PCR分析相关耐药基因的表达,PCR和测序法分析相关耐药基因的序列。结果药敏分析结果显示,该菌株对亚胺培南耐受,对美罗培南中介,对其余抗生素均表现为敏感。与对照菌株相比,外膜通道基因oprD的相对表达量仅为0.000 17,有明显下降;而外排泵编码基因mexE的相对表达量为0.60,无显著下降;oprD全基因测序发现第372位甲硫氨酸变成异亮氨酸,氨基酸极性没有发生变化。结论该临床菌株对亚胺培南的耐药性可能是由外膜通道基因oprD表达量下降造成,但不能完全排除氨基酸突变的影响。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 亚胺培南 耐药
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