沙利度胺联合三氧化二砷腹腔注射对肝癌细胞SMMC7721移植瘤生长的影响及机制 被引量：6

1

作者 鲁光平 常仁安 +3 位作者 刘春 于志坚 巫荣华 黄华 《山东医药》 CAS 2013年第27期29-32,共4页

目的观察沙利度胺(Tha)联合三氧化二砷(AsT)对肝癌细胞SMMC7721裸鼠移植瘤生长的影响,并探讨其可能作用机制。方法将35只雄性BALB/c裸鼠随机分为7组各5只,均于颈部皮下接种人肝癌细胞株SMMC7721细胞悬液(密度为5×107/mL)0.2 mL,其... 目的观察沙利度胺(Tha)联合三氧化二砷(AsT)对肝癌细胞SMMC7721裸鼠移植瘤生长的影响,并探讨其可能作用机制。方法将35只雄性BALB/c裸鼠随机分为7组各5只,均于颈部皮下接种人肝癌细胞株SMMC7721细胞悬液(密度为5×107/mL)0.2 mL,其后按如下方法处理:高、低剂量Tha组分别腹腔注射Tha 25、2.5 mg/kg,AsT组腹腔注射AsT 2.5 mg/kg,高、低剂量Tha联合AsT组分别同前联合给予Tha、AsT,阳性对照组腹腔注射环磷酰胺(CTX)20 mg/kg,阴性对照组腹腔注射生理盐水20 mL/kg,均连续给药4周。观察各组裸鼠皮下移植瘤体积变化及裸鼠行动、对外界刺激的反应;用药结束后处死裸鼠,取部分瘤组织采用RT-PCR法检测血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达,免疫组化法检测Bax、Caspase-3表达。结果裸鼠移植瘤成瘤率100%,瘤体积在高剂量Tha联合AsT组<低剂量Tha联合AsT组<高剂量Tha组<低剂量Tha组<AsT单药组<阳性对照组<阴性对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);移植瘤组织VEGF mRNA表达变化规律同上;移植瘤组织Bax、Caspase-3表达在高剂量Tha联合AsT组>低剂量Tha联合AsT组>AsT单药组>高剂量Tha组>低剂量Tha组>阳性对照组>阴性对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 Tha联合AsT对SMMC 7721移植瘤的生长具有显著抑制作用,效果优于两单药;机制分别与通过下调VEGF mRNA表达抑制肿瘤血管生成、上调Bax及Caspase-3蛋白表达促进肿瘤细胞凋亡相关。 展开更多

关键词 沙利度胺 三氧化二砷 移植瘤 血管内皮生长因子 肝癌细胞

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PBL教学法在研究生分子生物学技术课程中的探索和实践 被引量：6

2

作者 董张及 巫荣华 刘梅 《交通医学》 2017年第5期490-492,共3页

旨在探索将基于项目的学习(project-based learning,PBL)教学法在分子生物学技术课程中的应用,依照研究生科研项目的工作实例,重新设计分子生物学技术的课程内容,通过课前提出项目要求、课上实施解决项目问题,促进研究生在掌握分子生物... 旨在探索将基于项目的学习(project-based learning,PBL)教学法在分子生物学技术课程中的应用,依照研究生科研项目的工作实例,重新设计分子生物学技术的课程内容,通过课前提出项目要求、课上实施解决项目问题,促进研究生在掌握分子生物学基础技术技能的同时,培养独立设计、执行实验操作和分析结果的能力,为今后的科研工作提供科学方法的培训。 展开更多

关键词 基于项目的学习教学法 分子生物学技术 教学改革 研究生课程

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二甲双胍通过AMPK/STAT3信号通路抑制星形胶质细胞的反应性

3

作者 林海旭 管徒晨 巫荣华 《西部医学》 2023年第6期805-811,共7页

目的探讨二甲双胍对体外培养的大鼠脊髓星形胶质细胞反应性的作用及机制。方法使用三因子(TNF-α、IL-1α、C1q)诱导产生反应性星形胶质细胞,RT-qPCR及Westernblot检测补体3(C3)的表达;使用5、10、20 mM浓度的二甲双胍处理,Westernblot... 目的探讨二甲双胍对体外培养的大鼠脊髓星形胶质细胞反应性的作用及机制。方法使用三因子(TNF-α、IL-1α、C1q)诱导产生反应性星形胶质细胞,RT-qPCR及Westernblot检测补体3(C3)的表达;使用5、10、20 mM浓度的二甲双胍处理,Westernblot检测星形胶质细胞中腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)与信号转导和转录激活因子3(STAT3)磷酸化水平;采用AMPK抑制剂Compound C处理,检测AMPK和STAT3磷酸化水平。结果形态学及RT-qPCR结果显示:与对照组相比,三因子处理改变了星形胶质细胞形态并显著提高了C3的表达(P<0.05),表明成功建立反应性星形胶质细胞模型。RT-qPCR结果及Westernblot结果显示:与对照组相比,二甲双胍对C3表达有明显的抑制作用,呈现浓度依赖性(P<0.05)。在诱导星形胶质细胞反应性过程中,与对照组相比,AMPK的磷酸化水平显著降低(P<0.05),使用不同浓度二甲双胍处理后,AMPK的磷酸化水平显著增加且呈浓度依赖性(P<0.05),同时信号传导及STAT3的磷酸化水平显著降低且呈浓度依赖性(P<0.05)。AMPK抑制剂Compound C处理后显著抑制了二甲双胍导致的AMPK活性升高及STAT3活性降低,同时抑制了C3表达下调(P<0.05)。结论二甲双胍通过AMPK/STAT3信号通路抑制星形胶质细胞的反应性。 展开更多

关键词 二甲双胍 星形胶质细胞反应性 腺苷酸激活蛋白激酶 信号转导和转录激活因子3 补体3

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沙利度胺联合三氧化二砷抑制SMMC7721裸鼠移植瘤生长及毒副反应观察 被引量：1

4

作者 鲁光平 常仁安 +4 位作者 刘春 潘骥群 巫荣华 于志坚 周雪峰 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第7期1540-1544,共5页

目的:研究高低剂量沙利度胺(Tha)联合三氧化二砷(AsT)干预SMMC7721裸鼠移植瘤生长,检测移植瘤微血管密度(MVD)和核转录因子(NF-κB)表达,观察毒副反应。方法:取人肝癌细胞株SMMC7721接种于BALB/c裸鼠颈部皮下,随机分为7组。一周后按实... 目的:研究高低剂量沙利度胺(Tha)联合三氧化二砷(AsT)干预SMMC7721裸鼠移植瘤生长,检测移植瘤微血管密度(MVD)和核转录因子(NF-κB)表达,观察毒副反应。方法:取人肝癌细胞株SMMC7721接种于BALB/c裸鼠颈部皮下,随机分为7组。一周后按实验设计开始给药,每周称裸鼠体重,测移植瘤体积,连续给药4周。实验结束处死裸鼠,检测移植瘤MVD及NF-κB表达,鼠肺、肝、肾行HE染色,鼠血行血常规、ALT、Cr分析。结果:各组间裸鼠体重差异无统计学意义(P>0.05)。裸鼠接种成瘤率100%,各组瘤体积:组4<组5<组1<组2<组3<PG<NG,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组移植瘤MVD:组4<组5<组1<组2<组3<PG<NG,差异有统计学意义(P<0.05)。各组移植瘤NF-κB表达:组4<组5<组3<PG<组1<组2<NG,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组肺、肝、肾组织细胞结构及裸鼠血常规、ALT、Cr检测结果与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Tha联合AsT能够降低移植瘤MVD,下调NF-κB表达,具有协同抑瘤作用,毒副反应轻微,值得进一步研究。 展开更多

关键词 沙利度胺 三氧化二砷 移植瘤 MVD NF—κB 毒副反应

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大鼠坐骨神经夹伤过程中腓肠肌组织Kif11和Kif15基因的表达变化 被引量：1

5

作者 巫荣华 陆伟 +1 位作者 陈海姣 刘梅 《南通大学学报（医学版）》 2010年第4期235-238,241,共5页

目的:研究驱动蛋白家族成员11(kinesin family member 11,Kif11)和驱动蛋白家族成员15(kinesin familymember 15,Kif15)在大鼠失神经肌萎缩及再支配过程中的表达变化。方法:建立大鼠坐骨神经夹伤模型,测定腓肠肌湿重比了解肌萎缩程度,... 目的:研究驱动蛋白家族成员11(kinesin family member 11,Kif11)和驱动蛋白家族成员15(kinesin familymember 15,Kif15)在大鼠失神经肌萎缩及再支配过程中的表达变化。方法:建立大鼠坐骨神经夹伤模型,测定腓肠肌湿重比了解肌萎缩程度,采用足迹实验测定坐骨神经功能指数了解神经损伤再支配恢复情况,采用Real-time PCR方法检测坐骨神经夹伤后不同时间腓肠肌组织中Kif11和Kif15 mRNA水平的表达变化。结果:在神经夹伤早期(1～7 d),腓肠肌组织中的Kif11和Kif15 mRNA迅速上升,7～14 d达到高峰,随后mRNA水平逐渐下降,至28 d时基本接近正常表达水平;同时可观察到腓肠肌湿重比及坐骨神经功能指数的恢复。结论:Kif11和Kif15 mRNA的变化与坐骨神经损伤(夹伤)引起的肌萎缩程度呈正相关。 展开更多

关键词 坐骨神经夹伤 驱动蛋白家族成员11 驱动蛋白家族成员15 肌萎缩

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坐骨神经夹伤与心脏毒素注射导致腓肠肌功能损伤中Calpains和FoxOs的差异表达及相关性分析 被引量：1

6

作者 巫荣华 徐曼 +1 位作者 赵攀峰 刘梅 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第7期1173-1179,共7页

背景:钙蛋白酶家族和FoxO转录因子在肌萎缩过程中发挥着重要的作用。目的:观察钙蛋白酶家族成员及FoxO转录因子(FoxO1和FoxO3a)在心脏毒素注射与坐骨神经夹伤致腓肠肌失功能损伤中表达的变化。方法:分别采用坐骨神经夹伤和心脏毒素注射... 背景:钙蛋白酶家族和FoxO转录因子在肌萎缩过程中发挥着重要的作用。目的:观察钙蛋白酶家族成员及FoxO转录因子(FoxO1和FoxO3a)在心脏毒素注射与坐骨神经夹伤致腓肠肌失功能损伤中表达的变化。方法:分别采用坐骨神经夹伤和心脏毒素注射建立大鼠腓肠肌功能损伤模型,于造模后的第3,7,14,21天取大鼠腓肠肌进行实时荧光定量PCR检测,并采用线性回归法进行相关性分析。结果与结论:结果显示,腓肠肌组织中的钙蛋白酶Ⅰ、钙蛋白酶Ⅱ和FoxO3amRNA在坐骨神经夹伤7d达到高峰,随后下降;钙蛋白酶Ⅲ和FoxO1mRNA在坐骨神经夹伤后14d达到高峰,随后下降。钙蛋白酶Ⅰ、钙蛋白酶Ⅱ、FoxO3amRNA在心脏毒素注射后第3天达高峰,随后逐渐下降;FoxO1mRNA在心脏毒素注射后7d时达最高;而钙蛋白酶ⅢmRNA在心脏毒素注射后3d时表达显著下降,随后逐渐恢复至正常水平。线性回归分析结果显示,在失神经肌损伤过程中钙蛋白酶Ⅲ的表达与FoxO1呈正相关(r=0.9015);在心脏毒素注射肌损伤过程中钙蛋白酶Ⅰ(r=0.8987)和钙蛋白酶Ⅱ(r=0.9374)表达趋势与FoxO3a呈正相关。可见,在不同的肌损伤模型中,钙蛋白酶Ⅰ和钙蛋白酶Ⅱ的表达趋势相似,而钙蛋白酶Ⅲ的表达不同。 展开更多

关键词 坐骨神经夹伤 心脏毒素 肌萎缩 钙蛋白酶家族 FOXO1 FOXO3A

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沙利度胺对SMMC7721裸鼠移植瘤生长及瘤组织Ki67和PCNA表达的影响 被引量：1

7

作者 鲁光平 潘骥群 +4 位作者 常仁安 刘春 巫荣华 于志坚 黄华 《江苏医药》 CAS 北大核心 2013年第21期2523-2525,F0002,共4页

目的研究沙利度胺(Tha)对SMMC7721移植瘤生长以及瘤组织Ki67和增殖性细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法 40只BALB/c裸鼠接种SMMC7721细胞,随机均分为分别在早期干预和正常干预条件下的Tha 25mg/kg处理组(A1和A2组)、Tha 2.5mg/kg处理组... 目的研究沙利度胺(Tha)对SMMC7721移植瘤生长以及瘤组织Ki67和增殖性细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法 40只BALB/c裸鼠接种SMMC7721细胞,随机均分为分别在早期干预和正常干预条件下的Tha 25mg/kg处理组(A1和A2组)、Tha 2.5mg/kg处理组(B1和B2组)、环磷酰胺20mg/kg阳性对照组(C1和C2组)、生理盐水20ml/kg阴性对照组(D1和D2组)。观察移植瘤体积变化,免疫组化法检测瘤组织Ki67和PCNA的表达。结果与阴性对照组比较,Tha干预组、阳性对照组瘤体积以及瘤组织中Ki67和PCNA表达均明显减少(P<0.05)。此外,A1组瘤体积和Ki67、PCNA表达少于A2、B1组,A2、B1组少于B2组(P<0.05)。结论 Tha能抑制SMMC7721移植瘤生长,且早期、高剂量给药抑瘤效果更显著;其抑瘤机制与下调Ki67、PCNA蛋白表达进而抑制瘤细胞增殖相关。 展开更多

关键词 沙利度胺 SMMC7721移植瘤 KI67 增殖细胞核抗原

原文传递

干扰Kinesin-12表达对星形胶质细胞周期和凋亡的影响 被引量：1

8

作者 冯杰 花娟 +3 位作者 胡遵鲁 严莹莹 巫荣华 刘梅 《南通大学学报（医学版）》 2015年第3期173-177,F0002,共6页

目的 :比较驱动蛋白家族成员Kinesin-12和Kinesin-5对星形胶质细胞周期和凋亡的影响差异,探讨Kinesin-12在细胞增殖中的作用机制。方法 :采用si RNA方法干扰Kinesin-12、Kinesin-5基因表达,通过实时定量PCR、Western Blot检测干扰表达效... 目的 :比较驱动蛋白家族成员Kinesin-12和Kinesin-5对星形胶质细胞周期和凋亡的影响差异,探讨Kinesin-12在细胞增殖中的作用机制。方法 :采用si RNA方法干扰Kinesin-12、Kinesin-5基因表达,通过实时定量PCR、Western Blot检测干扰表达效率;Hoechst33342染色观察细胞凋亡;经AnnexinⅤ/PI双染色检测细胞凋亡率;流式细胞术检测细胞周期变化;细胞免疫化学染色观察Kinesin-12失功能后MyosinⅡB的分布改变。结果:Kinesin-12和Kinesin-5蛋白表达下调达65%以上;Hoechst33342染色和AnnexinⅤ/PI双染色法发现干扰Kinesin-12和Kinesin-5表达后细胞凋亡率显著增加(P<0.05);流式细胞术检测发现Kinesin-12 si RNA处理后细胞周期被阻滞在G1期,而Kinesin-5si RNA处理后,细胞周期被阻滞在G2/M期。细胞免疫化学染色发现,抑制Kinesin-12表达后MyosinⅡB(即Myh 10)的分布发生改变。结论:抑制Kinesin-12或Kinesin-5表达,均可明显阻滞细胞分裂并诱导细胞凋亡,但作用机制与Kinesin-5不同,推测Kinesin-12可能与MyosinⅡB相互作用形成异源聚合体作用于微管微丝骨架重构。 展开更多

关键词 Kinesin-12 Kinesin-5 星形胶质细胞 凋亡 细胞周期 大鼠

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活体成像技术观察胶质瘤荷瘤鼠中过表达SASH1基因的作用 被引量：2

9

作者 张思铭 马超 +5 位作者 胡樱子 尤正晨 陈汉 巫荣华 杨柳 刘梅 《交通医学》 2018年第1期1-5,共5页

目的 :采用小动物活体成像技术,观察过表达SASH1对荷胶质瘤裸鼠的抗肿瘤生长作用。方法 :将稳定表达GFP绿色荧光蛋白及荧光素酶报告基因(luciferase)的胶质瘤SHG-44细胞接种于裸鼠皮下,待成瘤后,将ADV4-SASH1慢病毒注射入裸鼠肿瘤组织中... 目的 :采用小动物活体成像技术,观察过表达SASH1对荷胶质瘤裸鼠的抗肿瘤生长作用。方法 :将稳定表达GFP绿色荧光蛋白及荧光素酶报告基因(luciferase)的胶质瘤SHG-44细胞接种于裸鼠皮下,待成瘤后,将ADV4-SASH1慢病毒注射入裸鼠肿瘤组织中,对照组注射相同剂量的ADV4-NC空载体对照病毒;1周后,腹腔注射底物荧光素(luciferin),用小动物活体成像仪采集荧光值,分析肿瘤生长情况。结果:过表达SASH1的裸鼠中有70%(7/10)肿瘤减小;对照组中有71.4%(5/7)裸鼠肿瘤增加,且有30%(3/10)裸鼠死亡。过表达SASH1 1周后肿瘤大小减小至90%,对照组肿瘤增大至166%。结论:本实验表明活体成像技术可以实时观察荷瘤鼠异位接种的胶质瘤体的生长情况,初步结果表明在胶质瘤体中过表达SASH1基因可以抑制肿瘤的生长。 展开更多

关键词 SASH1 病毒载体 胶质瘤荷瘤鼠 小动物活体成像

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干扰Kinesin-12表达对大鼠脊髓损伤后形态和功能的影响

10

作者 赵攀峰 巫荣华 +2 位作者 花娟 王萍 刘梅 《南通大学学报（医学版）》 2017年第1期1-5,F0002,共6页

目的:探讨干扰Kinesin-12表达对大鼠脊髓损伤后形态和功能的影响。方法:建立大鼠脊髓挫伤模型,通过实时定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测脊髓损伤后不同时间Kinesin-12基因表达,及... 目的:探讨干扰Kinesin-12表达对大鼠脊髓损伤后形态和功能的影响。方法:建立大鼠脊髓挫伤模型,通过实时定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测脊髓损伤后不同时间Kinesin-12基因表达,及胶质瘢痕相关基因硫酸软骨素蛋白聚醣(chondroitin sulfate proteoglycans,CSPGs)mRNA水平表达变化;脊髓损伤术后1周,在损伤处注射siRNA干扰Kinesin-12基因表达,并于干扰表达后不同时间进行运动功能(Basso Beattie Bresnahan,BBB)评分评估损伤后神经功能,磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)观察脊髓损伤修复程度,免疫组织化学法观察胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和CSPGs表达。结果:脊髓损伤后Kinesin-12基因表达显著升高,与胶质瘢痕CSPGs相关的基因表达也逐渐升高。在大鼠脊髓损伤模型中,与对照组相比,干扰Kinesin-12表达使大鼠脊髓损伤运动功能BBB评分增加,CSPGs表达下降,脊髓组织保存较多,空洞区减小。结论:在大鼠脊髓损伤后采用siRNA干扰Kinesin-12表达,可以减少空洞和胶质瘢痕的形成,利于脊髓形态和功能恢复。 展开更多

关键词 脊髓损伤 Kinesin-12 胶质纤维酸性蛋白 硫酸软骨素蛋白聚醣 实时定量聚合酶链式反应 大鼠

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中枢神经系统与周围神经系统发育和损伤过程中微管动态性的差异比较

11

作者 柏为娟 马超 +2 位作者 巫荣华 刘炎 刘梅 《南通大学学报（医学版）》 2022年第6期497-501,共5页

目的:通过比较微管蛋白的酪氨酸化、去酪氨酸化水平,分析中枢神经和周围神经系统神经元发育和损伤后微管动态变化。方法:分离培养Sprague-Dawley(SD)大鼠孕18 d(E18)胎鼠的背根神经节神经元和海马神经元,采用免疫细胞荧光化学方法检测... 目的:通过比较微管蛋白的酪氨酸化、去酪氨酸化水平,分析中枢神经和周围神经系统神经元发育和损伤后微管动态变化。方法:分离培养Sprague-Dawley(SD)大鼠孕18 d(E18)胎鼠的背根神经节神经元和海马神经元,采用免疫细胞荧光化学方法检测不同修饰微管蛋白的表达和定位,对培养的神经元进行划伤,采用活细胞拍摄对神经元胞体及轴突生长进行分析比较。提取SD大鼠生后发育不同时间点的坐骨神经和脊髓组织,同时建立SD大鼠的脊髓挫伤和坐骨神经夹伤模型,于术后不同时间提取蛋白,通过Western Blot方法检测不同修饰(酪氨酸化、去酪氨酸化)的微管蛋白表达情况。结果:免疫细胞化学结果显示,与神经元种植1 d相比,在3 d时,背根神经节神经元,酪氨酸化、去酪氨酸化微管蛋白均维持较高水平,而海马神经元中酪氨酸化微管蛋白表达较低;活细胞摄像观察显示,背根神经节神经元和海马神经元在体外发育和损伤再生过程中轴突的平均生长速率差异无统计学意义,但背根神经节神经元胞体运动速率显著高于海马神经元胞体。中枢神经和周围神经发育过程中,坐骨神经组织维持较高的酪氨酸化微管蛋白水平,而在脊髓组织中酪氨酸化微管蛋白的表达逐步下降;在神经损伤后,酪氨酸化微管蛋白在坐骨神经组织中表达显著高于脊髓酪氨酸化微管蛋白。结论:与中枢神经相比,周围神经在发育和损伤后酪氨酸化修饰微管蛋白水平均高于中枢神经,提示周围神经具有更强的微管动态性。 展开更多

关键词 酪氨酸化微管蛋白 去酪氨酸化微管蛋白 海马神经元 背根神经节神经元 脊髓 坐骨神经 神经损伤 大鼠

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Spastin基因突变对斑马鱼脊髓运动神经元的作用研究

12

作者 赖晓娜 李媛媛 +3 位作者 陈旭 巫荣华 董张及 刘梅 《南通大学学报（医学版）》 2021年第1期1-5,共5页

目的:微管切割蛋白Spastin是遗传性痉挛性截瘫(hereditary spastic paraplegia,HSP)的主要致病基因,本文旨在探讨Spastin基因突变对运动神经系统的形态和功能的影响。方法:鉴定斑马鱼spost敲除突变体的纯合子和杂合子,检测包括野生型的... 目的:微管切割蛋白Spastin是遗传性痉挛性截瘫(hereditary spastic paraplegia,HSP)的主要致病基因,本文旨在探讨Spastin基因突变对运动神经系统的形态和功能的影响。方法:鉴定斑马鱼spost敲除突变体的纯合子和杂合子,检测包括野生型的3种基因型spest^(+/+)、spest^(+/ZKO988a)、spest^(ZKO988a/ZKO988a)斑马鱼在无刺激下、光刺激下及声音刺激下自由游泳的运动速率;激光共聚焦显微镜成像转基因spast敲除突变体斑马鱼3种基因型Tg(hb9:eCFP);spost、Tg(hb9:eCFP);spost^(+/ZKO988a)、Tg(hb9:eGFP);spast^(ZKO988a/ZKO988a)的脊髓运动神经元(Cap)形态差异。结果:突变体spest^(+/ZKO988a)和spest^(ZKO988a/ZKO988a)斑马鱼的运动速率与野生型无差异;突变体Tg(hb9:eGFP);spast^(+/ZKO988a)和Tg(hb9:eGFP);spast^(ZKO988a/ZKO988a)斑马鱼朝向腹侧的CaP脊髓运动神经元的轴突长度显著短于野生型的轴突长度。结论:Spastin M1蛋白缺失对斑马鱼的运动速率无显著改变,但导致CaP神经元轴突长度缩短。 展开更多

关键词 spast 遗传性痉挛性截瘫 脊髓运动神经 斑马鱼

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