草鱼肾组织细胞系CIK的建立及其生物学特性 被引量：45

1

作者 左文功 钱华鑫 +2 位作者 许映芳 杜森英 杨先乐 《水产学报》 CAS 1986年第1期11-17,共7页

作者于1982年1月开始进行草鱼肾组织单层细胞培养,至今已连续培养32个月,传至l20多代,建立了细胞系,定名为草鱼肾组织细胞系(CIK)。本文介绍了原代和传代培养、细胞形态、细胞生长速度和分裂指数、细胞的保存和对温度的适应性、细胞染... 作者于1982年1月开始进行草鱼肾组织单层细胞培养,至今已连续培养32个月,传至l20多代,建立了细胞系,定名为草鱼肾组织细胞系(CIK)。本文介绍了原代和传代培养、细胞形态、细胞生长速度和分裂指数、细胞的保存和对温度的适应性、细胞染色体分析以及细胞系对病毒敏感性的试验和研究结果。CIK生长迅速、适应性强、以20°—38℃生长较好,28℃左右生长稳定,pH为6.5时仍能保持致密单层,染色体数为非整倍体,众数为55。对草鱼出血病左右病毒FRV具敏感性。 展开更多

关键词 草鱼 肾组织细胞系 CIK 生物学特性 细胞培养 出血病

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水温与草鱼免疫应答关系的研究 被引量：29

2

作者 杨先乐 左文功 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1997年第1期42-48,共7页

通过在不同水温条件下,用CFRV疫苗免疫后的草鱼血清中和抗体效价和免疫保护力的变化探讨水温与草鱼免疫应答的关系。结果表明:(1)水温在10℃以下,草鱼的免疫应答受到抑制,它以CFRV疫苗的免疫临界温度是10℃;(2)在免疫临界温度之上,草鱼... 通过在不同水温条件下,用CFRV疫苗免疫后的草鱼血清中和抗体效价和免疫保护力的变化探讨水温与草鱼免疫应答的关系。结果表明:(1)水温在10℃以下,草鱼的免疫应答受到抑制,它以CFRV疫苗的免疫临界温度是10℃;(2)在免疫临界温度之上,草鱼的免疫应答随温度的升高而增强,超过草鱼的适宜生长温度(32℃以上),其应答反应反而有下降的趋势;(3)免疫诱导期的水温是决定草鱼免疫应答发生与否和免疫应答强弱的重要因素之一。 展开更多

关键词 草鱼 免疫应答 水温 鱼病 人工免疫 人工养殖

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草鱼出血病细胞培养灭活疫苗的研究——疫苗株的免疫原性及其有效免疫剂量的比较 被引量：31

3

作者 杨先乐 夏春 左文功 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期138-144,共7页

本文比较了疫苗株FR—854和FR—836—w的免疫原性,及其对三寸左右草鱼种的有效免疫剂量。疫苗株FR—854和FR—836—w均有较强的免疫原性,其保护力可达70％以上。但试验结果初步证明,FR—854疫苗比FR—836—w疫苗免疫原性更强。经统计分... 本文比较了疫苗株FR—854和FR—836—w的免疫原性,及其对三寸左右草鱼种的有效免疫剂量。疫苗株FR—854和FR—836—w均有较强的免疫原性,其保护力可达70％以上。但试验结果初步证明,FR—854疫苗比FR—836—w疫苗免疫原性更强。经统计分析,FR—854疫苗的免疫保护力可达88.9±12.0(6)％,血清中和抗体效价为160.5±58.9(6);而FR-838-W疫苗分别只有71.3±14.2(6)％、88.3±26.2(6);二者有显著的差异(0.05>P>0.01)。注射免疫三寸左右的草鱼种,FR—854的免疫剂量在3—5×10^(4.5)TCID_(50)/尾左右,FR—836—w在3—5×10^(7.5)TCID_(50)/尾左右,其免疫保护力可达80％左右,同时我们测得ER—854的半数免疫量为10^(5.1)TCID_(50)/ml。 展开更多

关键词 草鱼 出血病 疫苗株 免疫剂量

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牛蛙腹水病病原研究 被引量：28

4

作者 贺路 艾晓辉 左文功 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 1995年第3期16-18,共3页

从患腹水病的牛蛙腹水中分离到二株细菌，人工感染可使牛蛙、青蛙、银鲫和ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠致死，生理生化及Ｇ＋Ｃ含量测定属于气单胞菌属的嗜水气单胞菌。该菌与本地分离的出血性败血症菌株间的交叉凝集反应小于１：４０。

关键词 牛蛙 嗜水气单胞菌 水肿病 病原

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草鱼肾脏组织细胞系CIK的建立(简报) 被引量：24

5

作者 左文功 钱华鑫 +2 位作者 许映芳 杜森英 杨先乐 《淡水渔业》 1984年第2期38-39,共2页

鱼类细胞系是研究鱼类病毒和细胞生物学的重要基础。自Wolf和Quimby(1962)报告建立RTG-2细胞系以后，国外相继报告来自冷水性和温水性鱼类组织的细胞系已有数十年。我国台湾省陈秀男和郭光雄（1931）曾报告建立了鱼卵巢组织细胞系。

关键词 细胞系 CIK 肾脏组织 卵巢组织 简报 细胞生物学 类病毒 草鱼 鱼类 温水

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草鱼出血病细胞培养灭活疫苗的研究:疫苗的稳定性及佐剂和加强免疫对草鱼免疫应答的影响 被引量：19

6

作者 杨先乐 左文功 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期46-52,共7页

CFRV 疫苗具有较好的稳定性。4℃保存8个月,其免疫保护力仍为83.6%,草鱼免疫后的血清中和抗体效价为119.2±8.8(2),与保存开始时相比,没有显著的差别。28℃保存8d,其免疫原性也基本上保持在原来的水平。CFRV 疫苗在此两温度下的免... CFRV 疫苗具有较好的稳定性。4℃保存8个月,其免疫保护力仍为83.6%,草鱼免疫后的血清中和抗体效价为119.2±8.8(2),与保存开始时相比,没有显著的差别。28℃保存8d,其免疫原性也基本上保持在原来的水平。CFRV 疫苗在此两温度下的免疫有效期分别为8个月和8d。不完全弗氏佐剂对 CFRV 疫苗有明显的增效作用;用 CFRV 疫苗对草鱼进行加强免疫,可明显地增强草鱼对该疫苗的免疫应答,由此证明草鱼具有免疫回忆反应。 展开更多

关键词 草鱼 出血病 细胞培养 灭活疫苗

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淡水养殖鱼类细菌出血性败血病药物防治研究 被引量：16

7

作者 艾晓辉 左文功 贺路 《中国水产科学》 CAS CSCD 1997年第3期54-61,共8页

通过对防治淡水养殖鱼类细菌出血性败血病的口服药物败血宁的系列实验研究表明：败血宁主药（ＢＬ）对嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）的ＭＩＣ为４μｇ／ｍｌ，在剂量１０～３０ｍｇ／ｋｇ范围内进行鱼体内抗... 通过对防治淡水养殖鱼类细菌出血性败血病的口服药物败血宁的系列实验研究表明：败血宁主药（ＢＬ）对嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）的ＭＩＣ为４μｇ／ｍｌ，在剂量１０～３０ｍｇ／ｋｇ范围内进行鱼体内抗菌试验，对鲢、银鲫的预防和治疗性给药有效率皆在８０％以上，其ＬＤ５０为６１５．２ｍｇ／ｋｇ，属低毒，对鱼类较为安全；以３０、６０ｍｇ／ｋｇ的剂量口灌银鲫进行微核试验证实ＢＬ诱发红细胞微核率不明显，无潜在致突变作用。用ＨＰＬＣ法测定ＢＬ在鱼体内治疗浓度维持时间为８～９ｈ，消除半衰期ｔ（１／２β）为２．５ｈ，连续灌药３ｄ后停药５ｄ在银鲫血浆中未检测到ＢＬ的含量。以３０ｍｇ／ｋｇ的剂量进行了四年的池塘应用试验，统计有效率为９２．９％，疗效肯定。 展开更多

关键词 败血宁 细菌出血性 败血病 淡水鱼类 防治

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沙市地区暴发性传染病病原研究 被引量：20

8

作者 贺路 左文功 +2 位作者 蔡传奇 艾晓辉 何介华 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 1992年第3期13-16,共4页

1991年6—9月,从湖北省沙市市及江陵县患暴发性传染病的鲢鱼、鳙鱼、团头鲂、白鲫和鲤鱼体内分离到10多株病原菌;这类细菌能够使多种淡水鱼致病,20℃—28℃时,LD_(50)为10^(4.2)—10^(5.0),能够产生溶血毒素和细胞毒素。经鉴定嗜水气单... 1991年6—9月,从湖北省沙市市及江陵县患暴发性传染病的鲢鱼、鳙鱼、团头鲂、白鲫和鲤鱼体内分离到10多株病原菌;这类细菌能够使多种淡水鱼致病,20℃—28℃时,LD_(50)为10^(4.2)—10^(5.0),能够产生溶血毒素和细胞毒素。经鉴定嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)亦是沙市地区暴发性传染病病原之一。 展开更多

关键词 鱼 传染病 暴发性 病原

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草鱼出血病细胞培养灭活疫苗的研究——生产性免疫试验 被引量：15

9

作者 杨先乐 夏春 +2 位作者 左文功 吴泉明 郭永金 《水产科技情报》 1992年第1期10-14,共5页

用草鱼出血病细胞培养灭活疫苗(CFRV疫苗)在较大的范围内对草鱼进行免疫试验,通过五种不同的草鱼放养方式以及二种疫苗给予途径的比较观察,证实CFRV疫苗在生产上有广泛的应用性。试验结果表明,一龄草鱼种使用CFRV疫苗后成活率比对照纽提... 用草鱼出血病细胞培养灭活疫苗(CFRV疫苗)在较大的范围内对草鱼进行免疫试验,通过五种不同的草鱼放养方式以及二种疫苗给予途径的比较观察,证实CFRV疫苗在生产上有广泛的应用性。试验结果表明,一龄草鱼种使用CFRV疫苗后成活率比对照纽提高25.5±15.8(10)%,二龄草鱼种的成活率提高31.2±8.1(7)%,草鱼成鱼的成活率提高26.7±5.4(3)%。本文还对目前CFRV疫苗制作的成本和使用疫苗后带来成活率提高的经济效益作了分析,指出在生产上推广应用是可行的。 展开更多

关键词 草鱼 出血病 疫苗 免疫 培养

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用电融合结合继代移核方法构建草鱼抗病体细胞工程鱼 被引量：16

10

作者 余来宁 左文功 +1 位作者 方耀林 郑卫东 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期314-318,共5页

选择对草鱼出血病病毒（ＦＲＶ）不敏感的草鱼肝组织进行细胞培养，建立了草鱼肝细胞株，命名为ＧＬＡ．对ＧＬＡ进行攻毒，发现其对ＦＲＶ有抗性。采用电融合结合继代移核的方法，将ＧＬＡ细胞（核），移植于草鱼未受精卵内，获得开口... 选择对草鱼出血病病毒（ＦＲＶ）不敏感的草鱼肝组织进行细胞培养，建立了草鱼肝细胞株，命名为ＧＬＡ．对ＧＬＡ进行攻毒，发现其对ＦＲＶ有抗性。采用电融合结合继代移核的方法，将ＧＬＡ细胞（核），移植于草鱼未受精卵内，获得开口前的幼鱼８尾和存活仔鱼１尾，说明此方法能提高细胞的发育能力。通过比较体细胞工程鱼与供体、受体亲本草鱼的形态特征，发现体细胞工程鱼可数性状与供体草鱼的基本一致，初步推断体细胞工程鱼的遗传信息，是由供体细胞核提供的。 展开更多

关键词 草鱼 抗病性 电融合 继代移核 细胞工程鱼

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草鱼出血病病毒854株的理化、生物学特性及基因组结构 被引量：10

11

作者 曾令兵 贺路 左文功 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期279-282,共4页

草鱼出血病是我国一种十分严重的病毒性鱼病。１９７８年，中国科学院水生生物研究所第三研究室的科研人员首先报道了草鱼出血病是一种病毒性鱼病，并初步认为其病原是一种疱疹病毒（Ｈｅｒｐｓｖｉｒｕｓ）。１９８３年，陈燕新等报道... 草鱼出血病是我国一种十分严重的病毒性鱼病。１９７８年，中国科学院水生生物研究所第三研究室的科研人员首先报道了草鱼出血病是一种病毒性鱼病，并初步认为其病原是一种疱疹病毒（Ｈｅｒｐｓｖｉｒｕｓ）。１９８３年，陈燕新等报道了自己分离的草鱼出血病病毒形态结构... 展开更多

关键词 草鱼 出血病 854株病毒 理化特性 基因组结构

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草鱼出血病细胞培养灭活疫苗研究初步报告 被引量：10

12

作者 杨先乐 杜森英 +2 位作者 曾令兵 钱华鑫 左文功 《淡水渔业》 1986年第3期1-5,共5页

草鱼出血病是一种危害草鱼的严重疾病．长期以来，因对该病缺乏有效的防治方法，而使草鱼的成活受到很大的威胁。草鱼出血病组织浆灭活疫苗，虽然在预防该病上有些成效，但其预防效果不稳定，广泛地推广和应用亦有一定的困难。

关键词 草鱼出血病 灭活疫苗 害草 预防效果 成活 推广 防治方法 细胞培养 严重疾病 成效

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草鱼出血病病毒854株基因组SDS—PAGE分析及其核酸类型鉴定 被引量：12

13

作者 曾令兵 左文功 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 1991年第5期17-19,共3页

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明:草鱼出血病病毒854株基因组由11个分段的核酸片段组成,总分子量约为14.46×10~6道尔顿。其中最大片段的分子量约为2.45×10~6道尔顿;最小片段的分子量约为0.38×10~6... 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明:草鱼出血病病毒854株基因组由11个分段的核酸片段组成,总分子量约为14.46×10~6道尔顿。其中最大片段的分子量约为2.45×10~6道尔顿;最小片段的分子量约为0.38×10~6道尔顿。其基因组核酸片段电泳图谱具有病毒株的特异性.核酸酶敏感性试验表明该病毒的核酸为RNA。 展开更多

关键词 草鱼 出血病 病毒 基因组 核酸

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淡水鱼类细胞培养方法 被引量：4

14

作者 左文功 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 1991年第2期38-40,37,共4页

鱼类细胞培养研究大约已有三十年历史。自Clem等(1961)建立的GF-1细胞株问世以来的有关统计,到1979年为止国外相继报告来自冷水性和温水性真骨鱼类组织的细胞系已有61种,现在业已大大地超过了该数字。我国鱼类细胞培养研究开始于70年代,... 鱼类细胞培养研究大约已有三十年历史。自Clem等(1961)建立的GF-1细胞株问世以来的有关统计,到1979年为止国外相继报告来自冷水性和温水性真骨鱼类组织的细胞系已有61种,现在业已大大地超过了该数字。我国鱼类细胞培养研究开始于70年代,1981年张念慈和杨广智报告了草鱼吻端组织二倍体细胞株ZC-7901及其亚株ZC-7901S_1的建立,同年台湾省陈秀男和郭光雄亦报告建立了鳗鱼卵巢组织细胞系,陈秀男等(1982、1983)还先后报告建立了鳗鱼肾脏组织和罗非鱼卵巢组织的细胞系,左文功等(1986) 展开更多

关键词 鱼类 淡水鱼类 细胞培养法

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鱼呼肠孤病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定 被引量：9

15

作者 贺路 杜先林 +2 位作者 左文功 董继华 田慕贞 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 1990年第5期3-5,共3页

采用杂交瘤技术,用浓缩的鱼呼肠孤病毒(Fish Reovirus FRV)免疫BALB/C小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/O细胞融合,经筛选克隆,共获得B_7、C_6.D_9.G_7、E_4、F_5,F_7七株分泌抗鱼呼肠孤病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。这七株细胞经液氮反... 采用杂交瘤技术,用浓缩的鱼呼肠孤病毒(Fish Reovirus FRV)免疫BALB/C小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/O细胞融合,经筛选克隆,共获得B_7、C_6.D_9.G_7、E_4、F_5,F_7七株分泌抗鱼呼肠孤病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。这七株细胞经液氮反复冻存、复苏及连续培养,可稳定分泌抗FRV的单克隆抗体.这七株杂交瘤细胞的染色体数为90～98条,明显高于SP2/O细胞(71条).分泌的单克隆抗体经琼脂双扩散法证实分别属于小鼠r球蛋白中的IgG_1、IgG_(2a)和IgG_(26)亚类.ELISA测得腹水抗体滴度1:2万～1:40万,病毒中和试验显示C_6、G_7有中和作用,滴度达1:64. 展开更多

关键词 鲁呼肠孤病毒 抗体 杂交瘤细胞株

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草鱼出血病细胞培养灭活疫苗旋转瓶法大规模生产工艺 被引量：7

16

作者 曾令兵 杨先乐 +3 位作者 贺路 艾晓辉 何介华 左文功 《中国水产科学》 CAS CSCD 1998年第2期62-67,共6页

Ｃａｒｅｌ氏瓶静置培养草鱼ＣＩＫ细胞，细胞２～３ｄ内长成单层，细胞单层均匀而稳定；旋转瓶培养，细胞７ｄ左右长成单层，细胞单层面积大，病毒培养产量高。２种方式所培养病毒的ＴＣＩＤ５０／ｍｌ值稳定在６．０左右。０．１％福... Ｃａｒｅｌ氏瓶静置培养草鱼ＣＩＫ细胞，细胞２～３ｄ内长成单层，细胞单层均匀而稳定；旋转瓶培养，细胞７ｄ左右长成单层，细胞单层面积大，病毒培养产量高。２种方式所培养病毒的ＴＣＩＤ５０／ｍｌ值稳定在６．０左右。０．１％福尔马林４℃条件下灭活病毒材料１７ｄ制备疫苗，疫苗性能稳定，安全性好。疫苗效力检验结果表明，注射免疫１０ｄ和浸泡免疫１０ｄ后，免疫鱼体内血清中和抗体效价分别为１０７．９±１１．０（３）和６８．５±９．９（３），免疫保护力分别为（７７．１±８．９）％（３）和（７３．９±８．３）％（３），与对照组相比差异显著。本研究建立了草鱼细胞培养灭活疫苗大规模生产工艺流程，进行了较大规模的疫苗生产和生产性免疫试验，免疫草鱼成活率平均达到８５％以上。 展开更多

关键词 草鱼 出血病 细胞疫苗 工艺流程 生产性应用

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草鱼出血病细胞培养灭活疫苗的研究——疫苗侏FR—854的保藏 被引量：5

17

作者 杨先乐 左文功 陈远新 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 1990年第4期3-5,共3页

通过在不同温度下保藏的疫苗株FR—854滴度的变化和逐次冻融后滴度的损失,提出疫苗株FR—854的保藏方法,为草鱼出血病细胞培养灭活疫苗工厂化生产提供理论依据。

关键词 草鱼 出血病 细胞培养 灭活疫苗

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草鱼出血病发病与水温的关系 被引量：6

18

作者 左文功 《淡水渔业》 1980年第1期21-23,共3页

草鱼出血病是危害当年草鱼最严重的疾病之一，近几年研究认为病原是病毒(水生生物研究所第三室病毒组，1978)。有的提出25—30℃是通常发病的水温(水生所第三室病毒组，1978)，有的提出30℃以上呈暴发性流行(江西景德镇水产养殖场，1976)。

关键词 草鱼出血病 水温 常发病 暴发性 病毒 病原 水生 疾病 流行 关系

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草鱼出血病细胞培养灭活疫苗的研究——细胞和病毒的扩大培养 被引量：5

19

作者 杨先乐 夏春 左文功 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 1992年第1期3-7,共5页

旋转培养优于静置培养,它不仅表现在可形成细胞单层的面积大,单层细胞的产量高,单位面积所需的培养液(维持液)少,而且细胞生长的速度较快,细胞形成单层的时间较短,接种病毒后收获的病毒滴度也相应较高,它适宜于疫苗工厂化生产。

关键词 草鱼 出血病 疫苗 培养

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沙市地区鲢鱼等鱼暴发性传染病流行病学初步调查 被引量：2

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作者 左文功 贺路 向东 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 1991年第4期10-12,共3页

本文报道了沙市地区鲢鱼等鱼暴发性传染病流行病学初步调查情况,分析了病因,提出了应急预防措施.

关键词 鲢鱼 暴发性 传染病 流行病学

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