1种新的天然α-葡萄糖苷酶抑制剂的分离纯化及其活性测定 被引量：17

1

作者 赵元 张莲英 +4 位作者 胡晓燕 崔福爱 吴伟芳 王晓蕾 孙道旭 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2007年第1期20-22,共3页

目的从中草药中分离并得到α-葡萄糖苷酶抑制剂。方法中草药地榆通过水提、脱色、离心、离子交换色谱得到地榆多糖。用4-硝基酚-2-D吡喃葡萄糖苷(PNPG)法测定其对不同来源的α-葡萄糖苷酶活性的抑制率。结果地榆多糖显著抑制α-葡萄糖... 目的从中草药中分离并得到α-葡萄糖苷酶抑制剂。方法中草药地榆通过水提、脱色、离心、离子交换色谱得到地榆多糖。用4-硝基酚-2-D吡喃葡萄糖苷(PNPG)法测定其对不同来源的α-葡萄糖苷酶活性的抑制率。结果地榆多糖显著抑制α-葡萄糖苷酶活性,并且可以降低大鼠餐后血糖浓度。结论地榆多糖是1种新的α-葡萄糖苷酶抑制剂。 展开更多

关键词 地榆 多糖 Α-葡萄糖苷酶 抑制剂

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姜黄素对前列腺癌细胞LNCaP增殖的影响 被引量：8

2

作者 杨磊 张莲英 +3 位作者 陈蔚文 胡晓燕 张建业 崔福爱 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期2194-2197,共4页

目的:姜黄素对前列腺癌细胞株LNCap增殖和凋亡的影响。方法:用不同剂量的姜黄素分别处理LNCap细胞,显微镜下观察细胞形态;MTT法检测细胞生长情况;流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率;然后检测姜黄素处理LNCap细胞后培养液中总前列腺特异抗... 目的:姜黄素对前列腺癌细胞株LNCap增殖和凋亡的影响。方法:用不同剂量的姜黄素分别处理LNCap细胞,显微镜下观察细胞形态;MTT法检测细胞生长情况;流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率;然后检测姜黄素处理LNCap细胞后培养液中总前列腺特异抗原(PSA)的变化,并用免疫印迹W estern b lotting技术检测雄激素受体(AR)的表达。结果:姜黄素能够抑制前列腺癌细胞LNCap的增殖和生长,40μmol/L作用24 h最强,细胞存活率为对照的40%;姜黄素诱导LNCap细胞凋亡,细胞形态呈凋亡特征,且40μmol/L作用最强,凋亡率为9.23%;姜黄素抑制LNCap细胞PSA表达,且40μmol/L姜黄素处理细胞24 h对PSA表达的抑制作用最强,PSA含量仅为对照的20%;W estern b lotting检测结果显示姜黄素抑制AR的表达,并且对AR表达的抑制程度依赖于姜黄素的浓度。结论:姜黄素抑制LNCap细胞增殖,诱导细胞凋亡,且表现出时间和剂量依赖性。姜黄素抑制LNCap细胞PSA与AR受体的表达。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 姜黄素 细胞凋亡 LNCAP细胞

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姜黄素对裸鼠乳腺移植瘤p21及CD44V_6表达的影响 被引量：8

3

作者 王晓蕾 张莲英 +3 位作者 孙道旭 王永胜 崔福爱 胡晓燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1524-1526,共3页

目的:研究姜黄素对裸鼠乳腺移植瘤p21及CD44V6表达的影响。方法:选用人乳腺癌细胞株MCF-7对裸鼠进行异种移植,成瘤后随机分为2组:(1)阴性对照组;(2)姜黄素组。观测移植瘤的出瘤时间、成瘤率,测量瘤体大小并计算瘤表面积。同时应用RT-PCR... 目的:研究姜黄素对裸鼠乳腺移植瘤p21及CD44V6表达的影响。方法:选用人乳腺癌细胞株MCF-7对裸鼠进行异种移植,成瘤后随机分为2组:(1)阴性对照组;(2)姜黄素组。观测移植瘤的出瘤时间、成瘤率,测量瘤体大小并计算瘤表面积。同时应用RT-PCR,检测2组肿瘤组织中cyclin D1、p21及CD44V6的表达。结果:姜黄素组瘤表面积明显低于阴性对照组;姜黄素组p21表达量高于阴性对照组,CD44V6表达量明显降低,2组的cyclin D1表达差异无显著。结论:姜黄素抑制裸鼠MCF-7乳腺移植瘤CD44V6的表达,增加p21的表达。 展开更多

关键词 姜黄素 乳腺肿瘤 细胞周期蛋白D1 小鼠 裸

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酸性神经肽1对VD小鼠脑内SOD、MDA和NO的影响 被引量：4

4

作者 崔福爱 安玉会 +3 位作者 王秀利 张建业 胡晓燕 胡一平 《山东大学学报（医学版）》 CAS 2003年第1期14-15,18,共3页

目的:探讨酸性神经肽1(BANP-1)对血管性痴呆(VD)小白鼠脑内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的影响。方法:将小白鼠随机分为5组,每组12只,除正常对照组外,其余4组分别在高脂血症的基础上,用颈总动脉缺血再灌注法建立VD模... 目的:探讨酸性神经肽1(BANP-1)对血管性痴呆(VD)小白鼠脑内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的影响。方法:将小白鼠随机分为5组,每组12只,除正常对照组外,其余4组分别在高脂血症的基础上,用颈总动脉缺血再灌注法建立VD模型,其中1组为VD模型组,其它3组在手术后分别给予BANP-11.5g/(kg·d)、0.75g/(kg·d)、0.3g/(kg·d),连续灌胃15d,每天1次,每次1ml。15d后将小白鼠断头处死并立即在冰盘中开颅取脑做组织匀浆,取上清液测MDA、NO含量和SOD活性。结果:VD模型组较正常对照组脑内SOD活性明显降低(P<0.01),MDA、NO含量明显升高(P<0.01)。BANP-1各治疗组较VD模型组脑内SOD活性明显升高(P<0.01),MDA、NO含量明显下降(P<0.01)。结论:BANP-1可明显升高VD小白鼠脑内SOD活性,降低MDA和NO含量。 展开更多

关键词 血管性痴呆 酸性神经肽1 超氧化物歧化酶 丙二醛 一氧化氮

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姜黄素对前列腺特异抗原基因表达的抑制 被引量：6

5

作者 杨磊 张莲英 +5 位作者 陈蔚文 孔峰 张鹏举 胡晓燕 张建业 崔福爱 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期800-803,共4页

目的研究姜黄素对前列腺特异抗原(PSA)表达的影响。方法化学发光法检测不同浓度的姜黄素处理前列腺癌细胞株LNCap后PSA含量,利用荧光素酶报告基因pGL3构建含PSA基因5′侧启动子区640bpDNA的荧光素酶表达载体pGL3PSA,并将其转染LNCap细胞... 目的研究姜黄素对前列腺特异抗原(PSA)表达的影响。方法化学发光法检测不同浓度的姜黄素处理前列腺癌细胞株LNCap后PSA含量,利用荧光素酶报告基因pGL3构建含PSA基因5′侧启动子区640bpDNA的荧光素酶表达载体pGL3PSA,并将其转染LNCap细胞,不同浓度姜黄素作用24h后应用荧光素酶测定系统检测荧光素酶表达活性。Westernblotting检测姜黄素处理过的LNCap细胞雄激素受体(AR)的表达。结果姜黄素抑制PSA、荧光素酶和AR受体的表达,并有浓度依赖性。结论姜黄素通过抑制雄激素受体的表达减弱对PSA基因启动子的作用,从而抑制PSA的表达。 展开更多

关键词 姜黄素 雄激素受体 前列腺特异抗原 前列腺癌

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酸性肽对血管性痴呆模型小鼠的治疗效应(英文) 被引量：7

6

作者 安玉会 蔡尚党 +1 位作者 崔福爱 赵荷键 《中国临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期196-197,共2页

背景:应用酸性肽对血管型痴呆vasculardementia,VD小鼠模型进行()治疗研究,是否可以发现酸性肽的治疗效果。目的:研究酸性肽对血管型模型痴呆小鼠学习记忆能力和它们脑中蛋白质和一氧化氮含量的变化并与正常小鼠相比较。设计:随机对照... 背景:应用酸性肽对血管型痴呆vasculardementia,VD小鼠模型进行()治疗研究,是否可以发现酸性肽的治疗效果。目的:研究酸性肽对血管型模型痴呆小鼠学习记忆能力和它们脑中蛋白质和一氧化氮含量的变化并与正常小鼠相比较。设计:随机对照的实验研究。单位:郑州大学医学院生物化学与分子生物学教研室。对象:实验于2002-10/2003-02在郑州大学医学院生物化学与分子生物学教研室的第一研究室和动物房进行。取昆明种小鼠84只,跳台实验低于正常小鼠平均反应时间的1只动物被排除。随机分为7组:正常组,模型组,盐水组,脑复康组,酸性肽高浓度组,酸性肽中浓度组,酸性肽低浓度组。方法:除12只正常组小鼠外,其余的动物一直用高脂乳剂05mL/d灌胃共10d,按照高维娟等的方法建立VD动物模型。模型组不作任何治疗,盐水组用生理盐,脑复康组应用脑复康,酸性肽高、中、低组应用不同浓度酸性肽治疗,口服给药治疗15d。之后用跳台试验进行学习记忆功能的变化测试,随后处死小鼠,测定脑中蛋白质和一氧化氮水平。主要观察指标:各组小鼠学习记忆功能和脑中蛋白质和一氧化氮水平。结果:①跳台试验的结果表明酸性肽能明显地减少痴呆小鼠跳台试验的错误次数,能显著地增加痴呆小鼠的学习记忆能力。②生化分析结果表明。 展开更多

关键词 痴呆 血管性 疾病模型 动物 一氧化氮

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脑肽精对痴呆小鼠的治疗作用研究 被引量：4

7

作者 安玉会 崔福爱 +1 位作者 章萍 吴立军 《河南医学研究》 CAS 2002年第4期289-290,共2页

目的 :为了研究脑肽精对痴呆小鼠的治疗作用。方法 :首先建立痴呆动物模型并用脑肽精治疗。通过跳台试验评价痴呆小鼠学习记忆能力的变化 ,并用生化分析方法测定小鼠脑中蛋白质和一氧化氮 (NO)水平的变化。结果 :实验表明脑肽精能提高... 目的 :为了研究脑肽精对痴呆小鼠的治疗作用。方法 :首先建立痴呆动物模型并用脑肽精治疗。通过跳台试验评价痴呆小鼠学习记忆能力的变化 ,并用生化分析方法测定小鼠脑中蛋白质和一氧化氮 (NO)水平的变化。结果 :实验表明脑肽精能提高痴呆小鼠的学习记忆能力 ,并且能增强脑内蛋白质的合成和降低NO的水平。结论 展开更多

关键词 脑肽精 小鼠 蛋白质 NO 老年痴呆 作用机理

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人同源盒基因NKX3·1对前列腺癌细胞的诱导凋亡作用 被引量：6

8

作者 刘闻闻 于春晓 +5 位作者 崔福爱 张鹏举 陈蔚文 胡晓燕 姜安丽 张建业 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期996-1002,共7页

构建人同源盒基因NKX3·1cDNA真核表达载体,研究其在前列腺癌细胞PC-3、LNCaP中的表达及对细胞的促凋亡作用.以人前列腺癌细胞LNCaP细胞中的总RNA为模板,RT-PCR扩增NKX3·1基因全长编码片段,将NKX3·1cDNA重组到真核表达载... 构建人同源盒基因NKX3·1cDNA真核表达载体,研究其在前列腺癌细胞PC-3、LNCaP中的表达及对细胞的促凋亡作用.以人前列腺癌细胞LNCaP细胞中的总RNA为模板,RT-PCR扩增NKX3·1基因全长编码片段,将NKX3·1cDNA重组到真核表达载体pcDNA3·1(+)中;将pcDNA3·1-NKX3·1表达载体瞬时转染前列腺癌细胞PC-3和LNCaP细胞,用RT-PCR和Western印迹检测NKX3·1cDNA在转录水平和蛋白水平的表达;绘制细胞生长曲线,观察NKX3·1对前列腺癌细胞增殖的抑制作用;用DNA/ladder和流式细胞术检测NKX3·1对前列腺癌细胞凋亡的影响,进一步用RT-PCR检测凋亡相关基因caspase3、caspase8、caspase9、Apaf1、survivin和Bcl2表达的变化.人同源盒基因NKX3·1cDNA真核表达载体pcDNA3·1-NKX3·1经酶切及测序鉴定正确.pcDNA3·1-NKX3·1转染PC-3和LNCaP细胞后,经RT-PCR和Western印迹证明能有效表达NKX3·1.生长曲线显示,前列腺癌细胞转染NKX3·1cDNA后细胞增殖受到抑制;前列腺癌细胞转染NKX3·1cDNA48h后,DNA电泳呈现具有凋亡特征的DNAladder;流式细胞术检测出现明显凋亡峰;RT-PCR检测凋亡相关基因.结果显示,caspase3、caspase8、caspase9基因表达明显增加,Bcl2基因表达明显减少.本研究成功构建了真核表达载体pcDNA3·1-NKX3·1,转染PC-3和LNCaP细胞后能有效表达,并对细胞具有诱导凋亡作用. 展开更多

关键词 同源盒基因NKX3.1 真核表达载体 前列腺癌细胞 细胞凋亡

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乳腺癌细胞株MCF-7中锌和锌转运体表达的关系 被引量：6

9

作者 孙道旭 王晓蕾 +4 位作者 徐同福 崔福爱 胡晓燕 康鲁东 张莲英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1138-1142,共5页

目的:通过ZnCl2和TPEN处理培养人乳腺癌细胞株MCF-7,观察高锌和低锌两种状态下锌转运体mRNA的表达情况。方法:0、50、100、150和200μmol/L的ZnCl2以及0、5、10和15μmol/L的TPEN分别处理培养MCF-7细胞12h,细胞存活率用噻唑蓝(MTT)方法... 目的:通过ZnCl2和TPEN处理培养人乳腺癌细胞株MCF-7,观察高锌和低锌两种状态下锌转运体mRNA的表达情况。方法:0、50、100、150和200μmol/L的ZnCl2以及0、5、10和15μmol/L的TPEN分别处理培养MCF-7细胞12h,细胞存活率用噻唑蓝(MTT)方法检测;荧光锌离子探针Zinquin检测细胞内锌离子含量;RT-PCR方法检测锌转运体(ZnT)mRNA的表达。结果:ZnCl2(浓度为150μmol/L和200μmol/L时)以及TPEN对MCF-7细胞均有生长抑制作用。ZnCl2处理后的MCF-7细胞内锌离子含量显著升高,TPEN处理后的MCF-7细胞内锌离子含量显著降低。与对照细胞相比,ZnCl2处理的细胞ZnT-1mRNA的表达水平随着ZnCl2浓度增加而依次升高;TPEN处理的细胞ZnT-1mRNA表达水平则普遍降低;ZIP2和ZIP10mRNA的表达水平随TPEN浓度的增加而依次升高。结论:高锌促进人乳腺癌MCF-7细胞ZnT-1mRNA的表达;低锌抑制人乳腺癌MCF-7细胞ZnT-1mRNA表达,促进ZIP2和ZIP10mRNA的表达。 展开更多

关键词 锌 乳腺肿瘤 锌转运体 基因表达

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脑肽精对痴呆小鼠学习记忆功能及SOD和MDA水平的影响 被引量：6

10

作者 安玉会 崔福爱 +3 位作者 叶华 郭茂峰 章萍 吴立军 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2002年第6期802-804,共3页

目的 :探讨脑肽精对痴呆小鼠学习记忆功能及超氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛 (MDA)水平的影响。方法 :建立痴呆动物模型 ,用脑肽精高 (1.5 0g/kg)、中 (0 .75 g/kg)、低 (0 .33g/kg)剂量治疗 ,通过避暗试验评价痴呆动物学习记忆功能的改... 目的 :探讨脑肽精对痴呆小鼠学习记忆功能及超氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛 (MDA)水平的影响。方法 :建立痴呆动物模型 ,用脑肽精高 (1.5 0g/kg)、中 (0 .75 g/kg)、低 (0 .33g/kg)剂量治疗 ,通过避暗试验评价痴呆动物学习记忆功能的改变 ,用生化分析方法测定小鼠脑中SOD和MDA的水平变化 ,并与正常组 ,模型组 ,生理盐水治疗组及脑复康阳性治疗组结果相比较。结果 :各剂量组脑肽精均能提高痴呆小鼠的学习记忆能力 ,并诱导SOD活性升高和抑制MDA的生成。结论 展开更多

关键词 脑肽精 痴呆 小鼠 学习记忆功能 SOD MDA

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人前列腺特异性膜抗原基因启动子/增强子表达载体的构建及组织特异性鉴定 被引量：4

11

作者 康鲁东 吴伟芳 +3 位作者 崔福爱 王秀利 胡晓燕 孔峰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期120-123,共4页

目的:构建前列腺特异性表达的人前列腺特异膜抗原(PSMA)基因启动子/增强子表达载体,并进行组织特异性鉴定。方法:从人外周血中提取基因组DNA,采用PCR技术分别扩增PSMA上游1175bp的启动子序列,及第三内含子中258bp的增强子序列,将两个序... 目的:构建前列腺特异性表达的人前列腺特异膜抗原(PSMA)基因启动子/增强子表达载体,并进行组织特异性鉴定。方法:从人外周血中提取基因组DNA,采用PCR技术分别扩增PSMA上游1175bp的启动子序列,及第三内含子中258bp的增强子序列,将两个序列定向克隆至荧光素酶报告基因表达质粒pGL3-Basic,构建前列腺特异性表达载体pGL3-PSMP-PSME。将构建载体用脂质体分别转染前列腺癌PC-3M细胞株及4种非前列腺癌细胞株,48h后通过检测荧光素酶表达活性,确定克隆的启动子及增强子的活性及其组织特异性表达活性。结果:构建的pGL3-PSMP-PSME质粒经酶切及DNA测序分析鉴定,证实克隆片段的大小、插入方向及其序列正确。细胞转染结果显示,pGL3-PSMP-PSME在PC-3M细胞株中表达活性明显高于其它4种非前列腺癌细胞株。结论:构建的前列腺表达载体具有较高的组织特异性,为进一步研究PSMA调控序列驱动治疗基因进行前列腺癌的靶向生物治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 前列腺特异抗原

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人PSMA基因启动子表达载体pGL3-PSMP的构建 被引量：3

12

作者 康鲁东 崔福爱 +4 位作者 吴伟芳 胡晓燕 姜安丽 孔峰 于清水 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第7期567-569,588,共4页

目的:构建含人前列腺特异性膜抗原(prostatespecificmembraneantigen,PSMA)基因启动子表达载体pGL3-PSMP。方法:PCR扩增人PSMA上游1175bp启动子序列,克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic,构建前列腺特异性表达载体pGL3-PSMP,重组子经双酶... 目的:构建含人前列腺特异性膜抗原(prostatespecificmembraneantigen,PSMA)基因启动子表达载体pGL3-PSMP。方法:PCR扩增人PSMA上游1175bp启动子序列,克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic,构建前列腺特异性表达载体pGL3-PSMP,重组子经双酶切、测序鉴定。将构建载体用脂质体转染体外培养的前列腺癌细胞株PC-3M,应用双荧光素酶测定系统检测荧光素酶的表达活性。结果:序列测定表明,克隆获得的1175bp的DNA序列与GenBank报道的一致,且插入方向正确。含人PSMA基因启动子的报告基因荧光素酶的表达活性显著提高,比pGL3-Basic高10倍多。结论:成功构建了含人PSMA基因启动子的荧光素酶表达载体。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 前列腺特异性膜抗原 启动子 荧光素酶

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NKX3.1下调前列腺癌PC-3细胞中抗凋亡基因bcl-2的表达 被引量：3

13

作者 陈兆波 刘春艳 +5 位作者 倪娜娜 于洋 张鹏举 陈蔚文 崔福爱 姜安丽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1902-1906,共5页

目的:研究前列腺特异转录因子NKX3.1对bcl-2基因表达以及前列腺癌细胞凋亡的影响。方法:转染pcDNA3.1-NKX3.1于前列腺癌PC-3细胞中,得到瞬时转染NKX3.1的PC-3细胞,通过RT-PCR和Western blotting方法研究NKX3.1对bcl-2基因的表达的影响,... 目的:研究前列腺特异转录因子NKX3.1对bcl-2基因表达以及前列腺癌细胞凋亡的影响。方法:转染pcDNA3.1-NKX3.1于前列腺癌PC-3细胞中,得到瞬时转染NKX3.1的PC-3细胞,通过RT-PCR和Western blotting方法研究NKX3.1对bcl-2基因的表达的影响,并通过EMSA技术,研究NKX3.1诱导bcl-2基因下调的分子机制;进一步通过流式细胞术、凋亡小体染色等方法研究NKX3.1对细胞凋亡的影响。结果:NKX3.1可明显下调PC-3细胞中bcl-2 mRNA及Bcl-2蛋白的表达;EMSA结果证明NKX3.1可与bcl-2基因上游调控区中的NKX3.1结合元件相互作用;流式细胞术结果显示,PC-3细胞转染NKX3.1后,细胞凋亡数增加了1.41倍;用Hoechst 33258细胞染色发现NKX3.1可使PC-3细胞凋亡小体数量明显增加。结论:NKX3.1可下调抗凋亡基因bcl-2的表达,促进前列腺癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 NKX3.1蛋白 PC-3细胞 基因 BCL-2 细胞凋亡

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人同源盒基因NKX3.1cDNA真核表达载体的构建及表达 被引量：1

14

作者 刘闻闻 于春晓 +5 位作者 崔福爱 张鹏举 胡晓燕 陈蔚文 张建业 姜安丽 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第10期973-977,共5页

目的:构建人同源盒基因NKX3.1 cDNA真核表达载体,研究其在前列腺癌细胞PC-3、LNCaP中的表达情况。方法:以人前列腺癌细胞LNCaP细胞中的总RNA为模板,RT-PCR扩增NKX3.1基因全长编码片段,T/A克隆至pCR2.1载体中。经酶切、测序鉴定后,将NKX3... 目的:构建人同源盒基因NKX3.1 cDNA真核表达载体,研究其在前列腺癌细胞PC-3、LNCaP中的表达情况。方法:以人前列腺癌细胞LNCaP细胞中的总RNA为模板,RT-PCR扩增NKX3.1基因全长编码片段,T/A克隆至pCR2.1载体中。经酶切、测序鉴定后,将NKX3.1cDNA重组到真核表达载体pcDNA3.1(+)中。将pcDNA3.1-NKX3.1表达载体瞬时转染前列腺癌细胞PC-3和LNCaP细胞,RT-PCR和Western blot法检测NKX3.1cDNA在转录水平和蛋白水平的表达。结果:人同源盒基因NKX3.1 cDNA真核表达载体pcD-NA3.1-NKX3.1经酶切及测序鉴定正确。pcDNA3.1-NKX3.1转染PC-3和LNCaP细胞后,经RT-PCR和West-ern blot证明在mRNA和蛋白水平均能有效表达NKX3.1。结论:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-NKX3.1,转染前列腺癌细胞PC-3和LNCaP后能有效表达。 展开更多

关键词 基因 同源盒 真核表达载体 基因表达 转染

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灵草液对痴呆小鼠学习记忆功能和脑蛋白合成及超氧化物歧化酶的影响 被引量：1

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作者 安玉会 崔福爱 +1 位作者 章萍 吴立军 《河南医学研究》 CAS 2002年第2期101-102,共2页

目的 :为了研究灵草液对痴呆小鼠学习记忆能力和脑蛋白合成及SOD的影响。方法 :建立痴呆动物模型并给痴呆小鼠服用灵草液。通过跳台实验评价痴呆小鼠学习记忆能力的变化。用生化方法分析痴呆小鼠脑中脑蛋白和SOD(superoxidedismutase)... 目的 :为了研究灵草液对痴呆小鼠学习记忆能力和脑蛋白合成及SOD的影响。方法 :建立痴呆动物模型并给痴呆小鼠服用灵草液。通过跳台实验评价痴呆小鼠学习记忆能力的变化。用生化方法分析痴呆小鼠脑中脑蛋白和SOD(superoxidedismutase)含量。结果 :灵草液能够提高痴呆小鼠的学习记忆能力 ,促进痴呆小鼠脑中蛋白质和SOD的合成。结论 :灵草液对痴呆病具有良好的治疗作用。 展开更多

关键词 小鼠 痴呆 灵草液 蛋白质 超氧化物歧化酶 治疗

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人低氧诱导因子-1α和LIM矿化蛋白-1联合表达重组腺病毒构建及其成骨作用

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作者 王秀利 崔福爱 +5 位作者 殷力 张翼 刘呜 王海涛 韩奇财 马源 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期821-824,共4页

目的利用内部核糖体进入位点（IRES）连接低氧诱导因子-1α（HIF-1α）与LIM矿化蛋白-1（LMP-1），构建同时表达LMP-1和HIF-1α的腺病毒载体，检测其在体外培养大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）的成骨作用。方法应用聚合酶链反应（PCR）法... 目的利用内部核糖体进入位点（IRES）连接低氧诱导因子-1α（HIF-1α）与LIM矿化蛋白-1（LMP-1），构建同时表达LMP-1和HIF-1α的腺病毒载体，检测其在体外培养大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）的成骨作用。方法应用聚合酶链反应（PCR）法扩增出人HIF-1α（2 481 bp）和LMP-1（1 374 bp）及IRES（564 bp）序列，依次插入pShuttle-IRES-hrGFP-1中构建腺病毒穿梭质粒pS-HIF-LMP-1-GFP；将其与质粒pAdEasy-1在BJ5183细胞中同源重组，得到重组腺病毒质粒（pAd-HIF-LMP-1-GFP）。经Pac I酶切转染AD293细胞进行包装得到重组腺病毒Ad-HIF-LMP-1-GFP。以腺病毒为载体，将人HIF-1α和LMP-1联合基因转染大鼠BMSCs细胞，分别观察转染后实验组与对照组碱性磷酸酶活性、钙形成以及骨钙素和核心结合蛋白因子2（Runx2）的表达变化，探讨HIF-1α与LMP-1联合表达的成骨作用。结果成功获取联合表达HIF-1α与LMP-1的重组腺病毒。HIF-1α和LMP-1基因能在BMSCs中高效表达，转染后BMSCs的碱性磷酸酶活性增强，与对照组比较，差异有统计学意义（P=0.000），活性分别为0.145、0.160、0.170、0.167（0.160±0.011） ng/μg蛋白和0.045、0.057、0.056、0.054（0.053±0.005） ng/μg蛋白；钙沉积明显增多，与对照组比较，差异有统计学意义（P=0.001），钙形成定量分别为0.636、0.544、0.591、0.515（0.570±0.050）和0.121、0.150、0.144、0.167（0.145±0.019）；骨钙素表达显著提高，与对照组比较，差异有统计学意义（P=0.017），分别为2.688、2.997、2.777（2.820±0.159）和2.009、1.916、1.944（1.956±0.047）；Runx2的表达明显增强，与对照组比较，差异有统计学意义（P=0.000），分别为0.440、0.465、0.456（0.454±0.010）和0.096、0.108、0.117（0.107±0.010）。结论成功利用IRES序列连接人HIF-1α和LMP-1基因构建重组腺病毒载体，Ad-HIF-LMP-1-GFP转染BMSCs后，能明显促进BMSCs向成骨细胞分化。 展开更多

关键词 低氧诱导因子-1Α LIM-1矿化蛋白 间充质干细胞 成骨活性 基因转染

原文传递

人LIM矿化蛋白-1重组腺病毒的成骨作用及其分子机制

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作者 王秀利 崔福爱 +3 位作者 殷力 王义生 蒋林栋 李邓 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期452-455,共4页

目的 利用pAdEasy腺病毒载体系统构建人LIM矿化蛋白-1（LMP-1）重组腺病毒,检测其在体外培养大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）的促成骨作用并分析其分子机制.方法 应用聚合酶链反应（PCR）法扩增出人LMP-1全长基因,插入pShuttle-IRES-hrGFP-... 目的 利用pAdEasy腺病毒载体系统构建人LIM矿化蛋白-1（LMP-1）重组腺病毒,检测其在体外培养大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）的促成骨作用并分析其分子机制.方法 应用聚合酶链反应（PCR）法扩增出人LMP-1全长基因,插入pShuttle-IRES-hrGFP-1中构建成腺病毒穿梭质粒pS-LMP-1-GFP,转化DH5a大肠杆菌,挑选细菌单克隆进行酶切鉴定和DNA测序;通过pS-LMP-1-GFP与质粒pAdEasy-1在BJ5183细胞中同源重组,得到携带人LMP-1基因的重组腺病毒载体（pAdLMP-1-GFP）.经PacⅠ酶切暴露两侧长末端重复序列,脂质体介导线性化质粒转染AD293细胞进行包装得到重组腺病毒Ad-LMP-1-GFP.以腺病毒为载体,将 人LMP-1 基因体外转染于第3代大鼠BMSCs内,检测LMP-1基因在BMSCs的表达,分别观察转染后实验组与对照组碱性磷酸酶活性变化,Western blot检测骨钙素（OCN）和β-连环蛋白（β-catenin）的表达,评价LMP-1 基因的成骨能力及其分子机制.结果 成功获取人LMP-1基因,并包装成重组腺病毒.LMP-1基因能在BMSCs 中高效表达,转染后BMSCs的碱性磷酸酶活性增强,与对照组比较P=0.000,分别为0.096、0.116、0.118、0.119（0.110±0.011）和 0.045、0.057、0.056、0.054（0.053±0.005）;骨钙素的表达显著升高,与对照组比较P=0.001,分别为0.661、0.767、0.651（0.693±0.064）和0.177、0.290、0.222（0.229±0.050）;β-catenin的表达明显增强,与对照组比较P=0.002,分别为0.841、0.806、0.867（0.838±0.030）和0.185、0.236、0.266（0.229±0.040）.结论 成功利用pAdEasy系统构建人LMP-1重组腺病毒载体,包装获得重组腺病毒.Ad-LMP-1-GFP转染BMSCs后,LMP-1基因能促进BMSCs向成骨细胞分化,并且可能通过β-catenin信号分子发挥作用. 展开更多

关键词 LIM-1矿化蛋白 间充质干细胞 成骨活性 基因转染

原文传递

LTC_4合酶基因敲除靶向载体的构建

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作者 姜安丽 张建业 +3 位作者 胡晓燕 崔福爱 王咏梅 孔峰 《山东大学学报（医学版）》 CAS 2003年第3期238-240,共3页

目的:构建鼠LTC4合酶基因靶向敲除载体,用于转染鼠胚胎干细胞,建立LTC4合酶基因敲除鼠。方法:分离、克隆LTC4合酶基因的1.85kb和1.35kb片段,作为靶向载体的5'同源臂和3'同源臂,重组到pJNS2载体中,筛选鉴定阳性重组子。结果:构... 目的:构建鼠LTC4合酶基因靶向敲除载体,用于转染鼠胚胎干细胞,建立LTC4合酶基因敲除鼠。方法:分离、克隆LTC4合酶基因的1.85kb和1.35kb片段,作为靶向载体的5'同源臂和3'同源臂,重组到pJNS2载体中,筛选鉴定阳性重组子。结果:构建的靶向载体由5'同源臂-Neo-3'同源臂-hTk-pJNS2构成。结论:经DNA测序及限制性酶切鉴定分析,该构建载体结构及序列正确,可用于转化鼠胚胎干细胞。 展开更多

关键词 LTC4 合酶 靶向载体 基因敲除

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