褐飞虱对噻虫嗪和烯啶虫胺的抗性风险评估 被引量：12

1

作者 李燕芳 张扬 +3 位作者 崔百元 张振飞 廖永林 肖汉祥 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期539-543,共5页

采用稻茎浸渍法,测定了广州市本地褐飞虱种群对噻虫嗪和烯啶虫胺的室内毒力,评估褐飞虱对其的抗性风险。结果表明:广州本地褐飞虱种群对噻虫嗪和烯啶虫胺的LC50分别为0.2857mg/L和0.5022mg/L,分别是敏感品系LC50的2.67倍和1.06倍,仍属... 采用稻茎浸渍法,测定了广州市本地褐飞虱种群对噻虫嗪和烯啶虫胺的室内毒力,评估褐飞虱对其的抗性风险。结果表明:广州本地褐飞虱种群对噻虫嗪和烯啶虫胺的LC50分别为0.2857mg/L和0.5022mg/L,分别是敏感品系LC50的2.67倍和1.06倍,仍属敏感水平。室内抗性筛选结果表明:经过30代的连续筛选后,噻虫嗪的抗性上升829.80倍,达到极高抗性水平,烯啶虫胺的抗性上升31.70倍,达到中等抗性水平,表明褐飞虱对噻虫嗪和烯啶虫胺存在抗性风险的可能。根据试验结果,对褐飞虱噻虫嗪和烯啶虫胺抗性的预防治理提出了应用策略。 展开更多

关键词 褐飞虱 噻虫嗪 烯啶虫胺 抗性风险

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天然生物可降解性材料在农业领域中的应用 被引量：9

2

作者 崔百元 张振飞 孔谦 《中国农学通报》 CSCD 2013年第24期5-10,共6页

为了研究天然生物可降解性材料在农业领域中的应用,综述了国内外近20年源于农业领域的几种天然生物可降解性材料,如淀粉、聚乳酸、纤维素、木质素、丝素、胶原、壳聚糖和甲壳素等的研究现状,发现天然可生物降解性材料在农业领域土壤改... 为了研究天然生物可降解性材料在农业领域中的应用,综述了国内外近20年源于农业领域的几种天然生物可降解性材料,如淀粉、聚乳酸、纤维素、木质素、丝素、胶原、壳聚糖和甲壳素等的研究现状,发现天然可生物降解性材料在农业领域土壤改良与水土保持、病虫害防治、保鲜与防腐、食品与饲料添加剂、生物肥料等方面应用广泛,但关于天然生物可降解性材料的特性、材料的优化设计与改良研究等方面还存在不足,今后还需研究如何改良天然生物可降解性材料特性以及拓宽其在农业领域的应用范围。 展开更多

关键词 天然生物可降解性材料 农业领域 应用

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根癌农杆菌介导的遗传转化及其在稻瘟病菌中的应用 被引量：7

3

作者 何丽云 张树林 +3 位作者 崔百元 朱庆锋 刘圣杰 刘文华 《广东农业科学》 CAS 2019年第3期93-100,共8页

根癌农杆菌介导的遗传转化(ATMT)技术是近20年发展起来的真菌研究中最具变革性的技术之一,它作为一种转化工具已被广泛应用于真菌基因功能研究中,使人们对真菌基因组学的理解有了很大的改变。利用ATMT获得随机的T-DNA插入突变体库,结合... 根癌农杆菌介导的遗传转化(ATMT)技术是近20年发展起来的真菌研究中最具变革性的技术之一,它作为一种转化工具已被广泛应用于真菌基因功能研究中,使人们对真菌基因组学的理解有了很大的改变。利用ATMT获得随机的T-DNA插入突变体库,结合突变体菌株表型筛选,使许多过程的遗传基础得到阐明。ATMT法具有操作简单,转化受体广泛,转化效率高以及转化子遗传稳定性高等优势。稻瘟病菌是植物十大重要真菌之一,是引发水稻稻瘟病的病原真菌。目前,培育水稻抗病品种是控制稻瘟病最经济和环保的方法。通过克隆稻瘟病菌相关致病基因并研究其功能,在解释致病机理和生理特性,以及培育抗病品种方面具有重要的理论和实践意义。以根癌农杆菌为介导的遗传转化为稻瘟病菌的插入突变、基因敲除和标记克隆等方面研究提供了一个重要工具。针对根癌农杆菌介导的遗传转化原理、特点、步骤、影响因素以及该技术在稻瘟病菌功能基因组学研究中的应用进行综述,以期能够为稻瘟病菌等真菌的遗传转化方面研究提供相关的参考。 展开更多

关键词 根癌农杆菌 遗传转化 稻瘟病菌 功能基因 突变体库

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薏苡苗期叶片全长转录组测序、注释及SSR预测 被引量：5

4

作者 李文燕 崔百元 刘勤坚 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第15期4855-4870,共16页

为了全面获得和发掘薏苡的基因数据、功能信息以及潜在的SSR标记,本研究采用PacBio SequelTM第三代测序平台对干旱胁迫下薏苡苗期叶片进行全长转录组测序与分析,获得总计98 858条非冗余的高质量Unigenes,其平均长度为2 318 bp,1 kb以上U... 为了全面获得和发掘薏苡的基因数据、功能信息以及潜在的SSR标记,本研究采用PacBio SequelTM第三代测序平台对干旱胁迫下薏苡苗期叶片进行全长转录组测序与分析,获得总计98 858条非冗余的高质量Unigenes,其平均长度为2 318 bp,1 kb以上Unigenes占91.74%。利用BLAST等软件在NR、Swiss Prot、eggNOG、GO和KEGG等公共数据中注释了90 339个Unigenes,占91.50%。NR注释表明,在90 093个被注释的Unigenes中,与之匹配数量最多是来源于高粱的序列,其次是玉米和谷子,这与它们之间在进化上的亲缘关系相一致。GO注释显示,34 765个Unigenes被注释到生物过程、细胞组分和分子功能等三大类别;eggNOG注释的89 158条Unigenes分属于25个功能聚类;KEGG代谢通路分析表明,30 579个Unigenes被注释到133条已知代谢通路,其中,1 884条Unigenes涉及信号转导和环境适应途径,包括植物激素信号转导途径、MAPK信号途径和植物-病原互作信号途径,上述代谢通路或途径均与植物响应干旱等逆境胁迫相关。此外,利用MISA程序在38 878个Unigenes中检测到56 540个SSR位点。研究结果将为薏苡耐旱等抗逆基因发掘与克隆、抗逆分子生理机制解析以及分子标记开发提供科学依据和理论参考。 展开更多

关键词 薏苡(Coix lacryma-jobi Linn.) 全长转录组 功能注释 SSR 干旱胁迫

原文传递

喷雾干燥法制备饲用植酸酶制剂 被引量：3

5

作者 张琪 朱庆锋 +3 位作者 崔百元 孔谦 王志林 晏石娟 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期750-753,共4页

以重组植酸酶(phyA-ABCD5F7)的毕赤酵母工程菌为植酸酶生产菌,经高密度发酵制备得到粗酶液。通过在粗酶液中添加Mg^(2+)和Zn^(2+)等金属离子以及海藻糖,可明显提高植酸酶的热耐受能力。以植酸酶的酶活回收率为评价指标,考察了进风温度... 以重组植酸酶(phyA-ABCD5F7)的毕赤酵母工程菌为植酸酶生产菌,经高密度发酵制备得到粗酶液。通过在粗酶液中添加Mg^(2+)和Zn^(2+)等金属离子以及海藻糖,可明显提高植酸酶的热耐受能力。以植酸酶的酶活回收率为评价指标,考察了进风温度、出风温度和保护剂对植酸酶酶活回收率的影响,确定最佳喷雾条件:保护剂5 g/L MgSO_4·7H_2O、2 g/L ZnSO_4·7H_2O和10 g/L海藻糖,进风温度为160℃,出风温度为70~75℃,在此条件下,植酸酶的酶活回收率达80%。 展开更多

关键词 植酸酶 喷雾干燥 保护剂 酶活 回收率

原文传递

蛋白质组学方法及其在农业生物科研领域的应用 被引量：4

6

作者 孔谦 陈中健 +4 位作者 贝锦龙 崔百元 张卫娜 贾谏 陈庄 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第15期164-167,共4页

随着分子生物学研究的逐步深入,蛋白质组学已经成为了一种新的重要技术手段和方法。首先,综述了蛋白质组学的主要研究内容和常用技术包括双向凝胶电泳、质谱技术、蛋白芯片技术、酵母双杂交系统、生物信息学,总结了蛋白质组学在农业生... 随着分子生物学研究的逐步深入,蛋白质组学已经成为了一种新的重要技术手段和方法。首先,综述了蛋白质组学的主要研究内容和常用技术包括双向凝胶电泳、质谱技术、蛋白芯片技术、酵母双杂交系统、生物信息学,总结了蛋白质组学在农业生物科研领域中的应用概况,介绍其在植物保护、农业制药,食品和畜牧兽医方面的应用。最后,对蛋白质组学在农业生物领域作了展望。 展开更多

关键词 蛋白质组学 农业生物科研 展望

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糖基化影响真菌植酸酶的胰蛋白酶耐受性 被引量：2

7

作者 朱庆锋 王志林 +4 位作者 崔百元 张琪 陈庄 晏石娟 贝锦龙 《华中师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2016年第5期746-751,共6页

通过重叠聚合酶链式反应,将黑曲霉植酸酶（Aspergillus niger NRRL 3135phytase）第238-337位与第382-444位多肽片段的基因编码序列替换为烟曲霉植酸酶（Aspergillus fumigatus ATCC 13073phytase）中的对应序列,构建片段置换植酸酶（Fr... 通过重叠聚合酶链式反应,将黑曲霉植酸酶（Aspergillus niger NRRL 3135phytase）第238-337位与第382-444位多肽片段的基因编码序列替换为烟曲霉植酸酶（Aspergillus fumigatus ATCC 13073phytase）中的对应序列,构建片段置换植酸酶（Fragments-replaced phytase）基因.将插入该基因的pGAPZαA重组质粒转化入毕赤酵母.通过离子交换与凝胶过滤纯化,获得重组酵母分泌的活性片段置换植酸酶.与黑曲霉植酸酶相比,片段置换显著提高了片段置换植酸酶的胰蛋白酶耐受性.而通过脱糖基化酶PNGase彻底去除N-糖基化,可恢复片段置换植酸酶对胰蛋白酶的敏感性.上述结果表明烟曲霉植酸酶对应片段上的N-糖基化修饰可显著提高毕赤酵母表达的黑曲霉植酸酶的胰蛋白酶耐受性. 展开更多

关键词 植酸酶 黑曲霉 烟曲霉 糖基化 蛋白酶水解

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应用改性聚乳酸构建复层组织工程皮肤的可行性研究 被引量：1

8

作者 王宗良 师铁英 +5 位作者 石毅 冯颖 崔百元 李俊锋 颜炜群 周余来 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期719-722,F0003,共5页

目的:以改性聚乳酸为细胞外基质网架,探索利用其构建复层组织工程皮肤的可行性。方法:取出生24h以内的Wistar大鼠背部皮肤,以Dispase-trypsin双酶消化分离培养表皮角质形成细胞;以Ⅰ型胶原酶消化分离培养真皮成纤维细胞。采用盐析法制... 目的:以改性聚乳酸为细胞外基质网架,探索利用其构建复层组织工程皮肤的可行性。方法:取出生24h以内的Wistar大鼠背部皮肤,以Dispase-trypsin双酶消化分离培养表皮角质形成细胞;以Ⅰ型胶原酶消化分离培养真皮成纤维细胞。采用盐析法制备机械性能得到部分改进的聚乳酸多孔泡沫支架,向支架接种真皮成纤维细胞(密度为3.0×105cell·mL-1)和表皮角质形成细胞(密度为5.0×105cell·mL-1),体外培养1周,构建复层组织工程皮肤,并取培养的皮肤进行切片检测。结果:复层组织工程皮肤在结构上与正常皮肤相似,具有真皮、表皮双层结构。改性聚乳酸网架上有双层细胞生长,生长的细胞与网架接触,并且在其表面形成较为明显而连续的细胞层。结论:双醛淀粉作为良好的增柔剂在改善聚乳酸网架机械性能的同时,也使其具有良好的细胞相容性,不影响细胞的生长增殖和代谢,可以进一步用作组织工程皮肤的支架材料。 展开更多

关键词 组织工程 皮肤 聚乳酸 双醛淀粉 大鼠 Wistar

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抗感褐飞虱水稻遗传群体差异蛋白质组分析 被引量：1

9

作者 崔百元 张扬 +3 位作者 朱庆锋 刘圣杰 何丽云 张振飞 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期417-425,共9页

为明确抗感褐飞虱Nilaparvata lugens水稻遗传群体在细胞水平的生理变化差异,通过蛋白质组学法对抗褐飞虱水稻遗传群体16W19-1-1和感稻飞虱水稻遗传群体16W45水稻叶片的差异蛋白质组进行研究,采用串联质谱标签标记和液相色谱-串联质谱... 为明确抗感褐飞虱Nilaparvata lugens水稻遗传群体在细胞水平的生理变化差异,通过蛋白质组学法对抗褐飞虱水稻遗传群体16W19-1-1和感稻飞虱水稻遗传群体16W45水稻叶片的差异蛋白质组进行研究,采用串联质谱标签标记和液相色谱-串联质谱联用仪进行差异蛋白质谱分析,利用Mascot search results软件进行搜库以确定差异表达蛋白,应用qPCR技术对差异蛋白关联基因在抗感褐飞虱遗传群体中的表达情况进行验证分析。结果表明,从抗感褐飞虱遗传群体中共鉴定出7625个蛋白,其中差异蛋白229个,涉及上调蛋白156个,下调蛋白73个,主要集中在代谢蛋白、氧化还原蛋白和应激蛋白,主要参与了氰胺基酸代谢、牛磺酸代谢、聚糖降解、脂肪酸链伸长等通路。最终找到9个关键蛋白,关联6种酶,分别为γ-谷氨酰基转移酶、β-葡糖苷酶、β-N-乙酰-D-氨基葡萄糖酶、谷氨酸脱羧酶、甚长链烯酰-CoA还原酶和甚长链3-氧酰辅酶,对应8个基因。表明以上6种酶与植物抗虫性关系密切,可能在上述水稻品系抗褐飞虱中起着重要作用。 展开更多

关键词 水稻 褐飞虱 抗虫性 蛋白质组学 抗虫基因

原文传递

重组毕赤酵母植酸酶N-糖基化位点质谱鉴定

10

作者 张琪 吴秀菊 +4 位作者 俞婷 王志林 崔百元 朱庆锋 贝锦龙 《华中师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2018年第5期678-685,共8页

为系统评估重组毕赤酵母植酸酶的N-糖基化充分性,建立了一种通过联用高效液相色谱-串级质谱来分析植酸酶氨基酸序列及N-糖基化位点的技术.分别发酵了3株基因组已整合不同植酸酶基因的毕赤酵母.发酵液上清经离子交换与凝胶过滤后获得纯... 为系统评估重组毕赤酵母植酸酶的N-糖基化充分性,建立了一种通过联用高效液相色谱-串级质谱来分析植酸酶氨基酸序列及N-糖基化位点的技术.分别发酵了3株基因组已整合不同植酸酶基因的毕赤酵母.发酵液上清经离子交换与凝胶过滤后获得纯化的植酸酶.使用PNGase F或Endo H脱糖基化酶处理植酸酶后,用胰蛋白酶消化脱糖基化产物.通过纳升级高效液相色谱分离胰蛋白酶切产生的肽段混合物.并在联用的串级质谱上进行肽段测序与N-糖基化位点鉴定.结果显示3种植酸酶蛋白的可检测序列覆盖率均在69%以上,且与文献报道不同,均存在糖基化位点修饰不充分的现象.本实验结果证明了高效液相色谱-串级质谱联用法检测植酸酶N-糖基化位点的有效性,并为植酸酶的糖基化研究提供了新的基础. 展开更多

关键词 植酸酶 N-糖基化 质谱 毕赤酵母

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褐飞虱应对水稻抗虫物质麦黄酮刺激的唾液蛋白组学响应

11

作者 巩固 崔百元 +5 位作者 戴彰言 贝锦龙 李怡峰 张扬 吴伟坚 张振飞 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期50-61,共12页

为研究褐飞虱响应麦黄酮刺激的分子机理,应用差异蛋白质组学方法分析褐飞虱唾液腺响应麦黄酮刺激处理的蛋白质组变化趋势。结果表明,麦黄酮处理褐飞虱6 h差异蛋白数量90个,其中上调蛋白62个,下调蛋白28个;处理褐飞虱24 h差异蛋白数量27... 为研究褐飞虱响应麦黄酮刺激的分子机理,应用差异蛋白质组学方法分析褐飞虱唾液腺响应麦黄酮刺激处理的蛋白质组变化趋势。结果表明,麦黄酮处理褐飞虱6 h差异蛋白数量90个,其中上调蛋白62个,下调蛋白28个;处理褐飞虱24 h差异蛋白数量27个,其中上调蛋白10个,下调蛋白17个,6 h的差异蛋白数量显著大于24 h。麦黄酮处理可以引起褐飞虱唾液腺丝氨酸蛋白酶及其同系物产生显著变化。通过对差异蛋白进行GO功能分析和KEGG通路分析,发现麦黄酮处理褐飞虱引起褐飞虱唾液腺蛋白变化主要集中在应激蛋白和代谢这两大类上,分别占了所有差异蛋白的50%以上,麦黄酮处理引起褐飞虱唾液响应蛋白主要参与了氨基酸代谢、唾液分泌系统、能量代谢、碳水化合物代谢等通路。 展开更多

关键词 褐飞虱 抗虫次生代谢物 麦黄酮 刺激反应 蛋白质组

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