目的:探讨芍药苷调控MLH1和MSH2蛋白增强黑色素瘤细胞放疗敏感性的机制。方法:体外培养构建放疗抵抗性的黑色素瘤M14细胞株(M14-RR); Western blot实验检测M14和M148-RR细胞中MLH1和MSH2的表达水平,MTT细胞实验检测不同浓度的芍药苷对...目的:探讨芍药苷调控MLH1和MSH2蛋白增强黑色素瘤细胞放疗敏感性的机制。方法:体外培养构建放疗抵抗性的黑色素瘤M14细胞株(M14-RR); Western blot实验检测M14和M148-RR细胞中MLH1和MSH2的表达水平,MTT细胞实验检测不同浓度的芍药苷对黑色素瘤细胞活性的影响; Western blot检测芍药苷对黑色素瘤细胞中MLH1和MSH2蛋白水平的影响;免疫荧光检测黑色素瘤细胞γ-H2AX聚集点的情况及对放疗的敏感性; CCK-8实验检测M14-RR细胞株接受放疗后凋亡率和细胞周期的变化。结果:成功构建M14-RR放疗抵抗细胞株后,Western blot检测M14-RR细胞中MLH1和MSH1的表达水平高于M14细胞,MTT细胞实验检测250μg/ml浓度的芍药苷药物对M14细胞最佳抑制率为(63. 61±3. 65)%; Western blot检测250μg/ml浓度的芍药苷组黑色素瘤细胞中MLH1和MSH2的表达水平比对照组细胞的增高[(85. 31±5. 16) vs (38. 26±3. 16),P<0. 05;(74. 15±6. 08) vs (29. 62±3. 57),P<0. 05];免疫荧光检测芍药苷作用黑色素瘤细胞后γ-H2AX聚集点的表达明显增多,DNA损伤增多;芍药苷作用黑色素瘤细胞接受放疗后细胞凋亡率增加,提高黑色素瘤细胞在G1期和S期的分布率,干扰细胞增殖的进程。结论:芍药苷通过调控MLH1和MSH1蛋白增强黑色素瘤细胞的DNA损伤及修复能力,增强其对放疗的敏感性。展开更多
文摘目的:探讨芍药苷调控MLH1和MSH2蛋白增强黑色素瘤细胞放疗敏感性的机制。方法:体外培养构建放疗抵抗性的黑色素瘤M14细胞株(M14-RR); Western blot实验检测M14和M148-RR细胞中MLH1和MSH2的表达水平,MTT细胞实验检测不同浓度的芍药苷对黑色素瘤细胞活性的影响; Western blot检测芍药苷对黑色素瘤细胞中MLH1和MSH2蛋白水平的影响;免疫荧光检测黑色素瘤细胞γ-H2AX聚集点的情况及对放疗的敏感性; CCK-8实验检测M14-RR细胞株接受放疗后凋亡率和细胞周期的变化。结果:成功构建M14-RR放疗抵抗细胞株后,Western blot检测M14-RR细胞中MLH1和MSH1的表达水平高于M14细胞,MTT细胞实验检测250μg/ml浓度的芍药苷药物对M14细胞最佳抑制率为(63. 61±3. 65)%; Western blot检测250μg/ml浓度的芍药苷组黑色素瘤细胞中MLH1和MSH2的表达水平比对照组细胞的增高[(85. 31±5. 16) vs (38. 26±3. 16),P<0. 05;(74. 15±6. 08) vs (29. 62±3. 57),P<0. 05];免疫荧光检测芍药苷作用黑色素瘤细胞后γ-H2AX聚集点的表达明显增多,DNA损伤增多;芍药苷作用黑色素瘤细胞接受放疗后细胞凋亡率增加,提高黑色素瘤细胞在G1期和S期的分布率,干扰细胞增殖的进程。结论:芍药苷通过调控MLH1和MSH1蛋白增强黑色素瘤细胞的DNA损伤及修复能力,增强其对放疗的敏感性。
