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对乙酰氨基酚耐受肝细胞株的建立及其作用机制研究 被引量：1
1
作者 曹欢欢 茅育蕾 +5 位作者 陈娟慧 陈佳媛 郑锐攀 岑梦娇 倪坚 金立方 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第5期717-724,共8页
对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)是引起急性肝衰竭最主要的原因,但其确切的作用机制仍不明了。该研究建立了不同浓度的APAP耐药肝细胞,并对其耐药机制进行初步研究。克隆状密度培养的AML-12小鼠肝细胞浓度递增诱导建立APAP耐药细胞系... 对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)是引起急性肝衰竭最主要的原因,但其确切的作用机制仍不明了。该研究建立了不同浓度的APAP耐药肝细胞,并对其耐药机制进行初步研究。克隆状密度培养的AML-12小鼠肝细胞浓度递增诱导建立APAP耐药细胞系;细胞计数检测细胞增殖能力;Mito Tracker和H_2DCF-DA分别检测线粒体膜电位和氧自由基水平;GSH/GSSH检测细胞抗氧化能力;q PCR检测细胞基因表达水平;Western blot检测蛋白质水平。成功建立了增殖和耐药稳定的1.25和2.50 mmol/L APAP耐药AML-12肝细胞。在相应浓度APAP处理后,与对照组相比,耐药组细胞增殖能力强,氧自由基水平低,线粒体膜电位水平高,GSH/GSSH值高。进一步研究结果显示,耐受组细胞抗氧化通路Nrf2及其靶基因表达活性提高,而凋亡相关信号通路JNK及其相关基因活性下降。肝细胞表型特征分析显示,耐药组细胞肝功能相关基因表达水平并未发生显著变化,但与染色体重塑相关的转录因子Foxa1和Foxa2 m RNA和蛋白质水平显著升高。该研究建立了增殖和耐药性状稳定的APAP耐药肝细胞,耐药性状的获得与抗氧化能力和抗凋亡能力的提高相关,并提示染色体重塑相关转录因子也可能参与这一过程,为深入研究耐药机制奠定了基础。 展开更多
关键词 肝细胞 对乙酰氨基酚 耐药 氧化应激
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