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基于Nrf2/ARE信号通路探讨当归-川芎含药血清对H_(2)O_(2)致PC12细胞氧化损伤的保护作用 被引量：9
1
作者 尹曼雪 林玉婕 +3 位作者 黄文治 刘四军 周晓兰 吴庆光 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第16期67-74,共8页
目的:研究当归-川芎含药血清(Angelicae Sinensis Radix-Chuanxiong Rhizoma medicated serum,ASRCRS)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)氧化损伤的保护作用及其分子机制。方法:采用H_(2)O_(2)体外诱导P... 目的:研究当归-川芎含药血清(Angelicae Sinensis Radix-Chuanxiong Rhizoma medicated serum,ASRCRS)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)氧化损伤的保护作用及其分子机制。方法:采用H_(2)O_(2)体外诱导PC12细胞氧化损伤,并以终体积分数为15%的ASRCRS低、中、高剂量组进行干预。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率;荧光倒置显微镜观察细胞形态;试剂盒检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH),丙二醛(MDA)含量和细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力及活性氧(ROS)分布水平;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核转录因子E2相关因子2(Nrf2),Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1),血红素加氧酶-1(HO-1),SOD1蛋白的表达水平。结果:选择300μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)刺激24 h作为氧化损伤造模的条件。与正常组比较,H_(2)O_(2)模型组细胞形态异常,细胞存活率显著降低(P<0.01);LDH,MDA含量升高(P<0.01),SOD活力降低,ROS在细胞内分布增加;Nrf2,HO-1,SOD1蛋白表达水平均明显下调(P<0.05,P<0.01),Keap1蛋白表达水平明显上调(P<0.01)。与模型组比较,ASRCRS不同剂量组均能改善细胞形态,提高细胞存活率,抑制细胞凋亡;显著提高SOD酶活力(P<0.01),抑制LDH的释放(P<0.01)和ROS的生成,降低MDA含量(P<0.01);明显上调Nrf2,HO-1,SOD1蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),显著下调Keap1蛋白表达水平(P<0.01)。结论:当归-川芎含药血清可能是通过上调Nrf2的蛋白表达,激活Nrf2/抗氧化反应元件(ARE)信号通路,增强细胞抗氧化损伤能力,抑制细胞凋亡,从而发挥保护H_(2)O_(2)损伤的PC12细胞的作用。 展开更多
关键词 当归 川芎 含药血清 氧化损伤 核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路
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当归-川芎药对治疗阿尔茨海默病的生物信息学、网络药理学分析 被引量：7
2
作者 尹曼雪 吴庆光 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期72-77,共6页
目的通过生物信息学、网络药理学探讨当归-川芎药对治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法检索GEO数据库,获得GSE5281基因表达谱,对AD进行差异表达基因筛选分析。应用中药系统药理学技术平台(TCMSP)数据库,筛选出药对中的潜在化学活性... 目的通过生物信息学、网络药理学探讨当归-川芎药对治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法检索GEO数据库,获得GSE5281基因表达谱,对AD进行差异表达基因筛选分析。应用中药系统药理学技术平台(TCMSP)数据库,筛选出药对中的潜在化学活性物质及相关靶点蛋白。借助Cytoscape(3.7.2)软件构建"药物-疾病-靶点"的调控网络,Bisogenet和CytoNCA构建蛋白互作网络(PPI),Bioconductor平台和R软件进行GO和KEGG富集分析,MOE软件对潜在化学活性物质和关键靶点进行分子对接。结果共筛选出9个化合物,涉及9个靶点,PPI核心基因为JUN、NR3C1、PPARG、RXRA、BCL2、BAX;GO生物功能分析包含661条富集,主要涉及蛋白结合、信号转导、突触后膜等;KEGG富集得到23条相关信号通路,主要涉及神经活性配体-受体相互作用通路、糖尿病并发症AGE-RAGE信号通路、细胞凋亡通路、非酒精性脂肪肝通路、PI3K-Akt信号通路等。Perlolirine可能对PPARG存在较好的结合能力,并且Perlolirine、Myricanone与RXRA也能形成较好结合。结论当归-川芎药对治疗AD体现了中药多成分、多靶点的特点,可实现对本病发生发展过程的调控。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 当归-川芎药对 辛润药性理论 生物信息学 网络药理学
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阿魏酸对H_2O_2致PC12细胞氧化损伤的保护作用 被引量：6
3
作者 林秋珊 杨佩芬 +3 位作者 尹曼雪 张时兵 刘四军 吴庆光 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第13期66-72,共7页
目的:探讨阿魏酸(ferulic acid,FA)对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法:H_2O_2诱导PC12细胞构建氧化应激损伤模型,不同剂量阿魏酸(终浓度为1,10,100μmol·L^(-1))进行干预;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞... 目的:探讨阿魏酸(ferulic acid,FA)对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法:H_2O_2诱导PC12细胞构建氧化应激损伤模型,不同剂量阿魏酸(终浓度为1,10,100μmol·L^(-1))进行干预;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,生化法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)的含量以及细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞中胰岛素样生长因子-1(IGF-1) mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测IGF-1蛋白的表达。结果:不同剂量的阿魏酸(终浓度为1,10,100μmol·L^(-1))干预24 h后能明显改善H_2O_2诱导的PC12细胞的氧化损伤,与模型组比较,给药组细胞存活率明显升高,细胞上清液中LDH的漏出率明显减少(P <0. 01); MDA的含量明显降低(P <0. 05),同时细胞中SOD的含量显著升高(P <0. 01); Real-time PCR结果显示,与空白组比较,模型组IGF-1 mRNA显著降低(P <0. 01),与模型组比较,药物干预24 h后IGF-1 mRNA表达显著升高(P <0. 01); Western blot结果显示,与空白组比较,模型组IGF-1蛋白的表达显著降低(P <0. 01),与模型组比较,药物作用24 h后,能上调IGF-1蛋白的表达(P <0. 01)。结论:FA能够抑制H_2O_2诱导的PC12细胞的氧化损伤,其保护作用机制可能与胰岛信号通路相关。 展开更多
关键词 阿魏酸 PC12细胞 氧化应激 保护作用
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