细胞紧密连接的结构组成及其调控的研究进展 被引量：9

1

作者 马怡然 尚德淑 +1 位作者 方文刚 陈誉华 《解剖科学进展》 CAS 2010年第1期71-74,共4页

紧密连接(tight junction)位于相邻细胞间隙的顶端侧面,对于维持表皮和内皮细胞的选择渗透性屏障功能是非常关键的。紧密连接有两个主要功能:渗透性调节功能、维持细胞极性。本文综述了最新研究的紧密连接的蛋白质组成、紧密连接组装的... 紧密连接(tight junction)位于相邻细胞间隙的顶端侧面,对于维持表皮和内皮细胞的选择渗透性屏障功能是非常关键的。紧密连接有两个主要功能:渗透性调节功能、维持细胞极性。本文综述了最新研究的紧密连接的蛋白质组成、紧密连接组装的信号调节、组成蛋白间的相互作用调控机制以及在生命活动中意义,为寻找某些疾病的治疗方案提供一定的理论基础。 展开更多

关键词 细胞紧密连接 结构组成 调控 蛋白质组成 信号调节 细胞间隙 屏障功能 内皮细胞

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Aβ1-42通过TLR4影响小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症因子IL-1β和IL-6释放 被引量：6

2

作者 张玉琪 方文刚 +1 位作者 陈誉华 尚德淑 《解剖科学进展》 2019年第3期320-324,共5页

目的探讨Aβ1-42对小鼠巨噬细胞RAW264.7向炎症性细胞转变的影响及机制。方法 RAW264.7细胞分别经过LPS与Aβ1-42刺激,RT-PCR和Western blot检测GM-CSF受体CSF2RA和CSF2RB的表达水平,ELISA检测在Aβ1-42刺激下的炎症因子IL-1β、IL-6和T... 目的探讨Aβ1-42对小鼠巨噬细胞RAW264.7向炎症性细胞转变的影响及机制。方法 RAW264.7细胞分别经过LPS与Aβ1-42刺激,RT-PCR和Western blot检测GM-CSF受体CSF2RA和CSF2RB的表达水平,ELISA检测在Aβ1-42刺激下的炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平;采用TLR4抑制剂分别干预LPS和Aβ1-42处理后的RAW264.7,检测CSF2RA与CSF2RB受体的表达变化,炎症因子IL-1β、IL-6的释放。结果 RAW264.7细胞表面GM-CSF受体CSF2RB在LPS与Aβ1-42处理后表达水平均比对照组升高(P<0.05),而CSF2RA表达没有显著性改变;炎症因子IL-6与IL-1β在Aβ1-42刺激后分泌增加,同时TLR4抑制剂抑制LPS和Aβ1-42对细胞的刺激。结论 Aβ1-42通过TLR4促进小鼠RAW264.7细胞炎症因子IL-6、IL-1β的分泌。 展开更多

关键词 AΒ1-42 GM-CSF受体 IL-1Β IL-6 TLR4

原文传递

基于网络药理学与分子对接的丹皮酚治疗结直肠癌的分子机制研究

3

作者 高吴陆怡 王静艳 +3 位作者 舒岑皓 尚德淑 韩锁 商宇 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第11期992-998,共7页

目的基于网络药理学与分子对接探讨丹皮酚治疗结直肠癌的靶点与作用机制。方法通过PubChem、SwissTargetPrediction和TargetNet数据库检索丹皮酚的药物靶点,使用Genecards、OMIM和TTD数据库检索结直肠癌的疾病靶点,通过Venny在线工具获... 目的基于网络药理学与分子对接探讨丹皮酚治疗结直肠癌的靶点与作用机制。方法通过PubChem、SwissTargetPrediction和TargetNet数据库检索丹皮酚的药物靶点,使用Genecards、OMIM和TTD数据库检索结直肠癌的疾病靶点,通过Venny在线工具获得交集靶点。利用Metascape数据库完成交集靶点的基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组数据库(KEGG)信号通路富集分析。交集靶点经STRING数据库与Cytoscape软件分析其相互作用关系并筛选枢纽节点。采用LeDock与CB-Dock2软件完成丹皮酚与枢纽节点的分子对接,以筛选丹皮酚的核心药物靶点。结果经筛选得到21个药物靶点。富集分析结果显示,丹皮酚发挥作用的分子机制涉及癌症通路、Ras信号和Rap1信号等通路,而其涉及的生物过程包括细胞对缺氧的反应以及调控激酶活性等。蛋白质-蛋白质相互作用分析发现9个靶点为蛋白质相互作用的枢纽。分子对接结果显示,丹皮酚和枢纽节点中的SRC、EP300、MMP9具有最高亲和力,提示SRC、EP300以及MMP9可能是丹皮酚治疗结直肠癌的核心靶点。结论丹皮酚可能通过靶向SRC、EP300与MMP9,调控Ras、Rap1等信号通路与激酶活性等生物过程,进而发挥治疗结直肠癌的作用。 展开更多

关键词 结直肠癌 丹皮酚 网络药理学 分子对接

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巨噬细胞炎症因子1α对人脑微血管内皮细胞通透性的影响 被引量：3

4

作者 尚德淑 马怡然 +3 位作者 赵伟东 方文刚 朱莉 陈誉华 《解剖科学进展》 CAS 2007年第4期330-333,337,共5页

目的研究巨噬细胞炎症因子1α(MIP-1α)是否具有开通血脑屏障的作用。方法以重组人MIP-1α直接作用于人脑微血管内皮细胞(HBMEC),免疫荧光方法检测紧密连接蛋白ZO-1的分布变化、跨内皮细胞电阻、HRP穿过HBMEC单层的改变、HBMEC细胞CC趋... 目的研究巨噬细胞炎症因子1α(MIP-1α)是否具有开通血脑屏障的作用。方法以重组人MIP-1α直接作用于人脑微血管内皮细胞(HBMEC),免疫荧光方法检测紧密连接蛋白ZO-1的分布变化、跨内皮细胞电阻、HRP穿过HBMEC单层的改变、HBMEC细胞CC趋化因子受体5(CCR5)的表达,以及MIP-1α中和抗体和分泌MIP-1α的模式细胞(6T-CEM)与HBMEC单层共同温育时ZO-1的分布变化。结果MIP-1α作用下,HBMEC单层紧密连接结构被破坏,通透性增加,引起HBMEC细胞CCR5受体的表达,MIP-1α中和抗体阻断6T-CEM细胞对HBMEC单层ZO-1分布的改变。结论MIP-1α可能通过CCR5改变HBMEC单层通透性促进T淋巴细胞穿过血脑屏障。 展开更多

关键词 巨噬细胞炎症因子1α 人脑微血管内皮细胞 血脑屏障

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水和土壤中LAS的提取及HPLC测定 被引量：3

5

作者 区自清 贾良清 +2 位作者 何耀武 孙铁珩 尚德淑 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期67-71,共5页

1 引言合成洗涤剂中直链烷基苯磺酸盐(LAS)是目前生产和使用量最大的表面活性剂[1],同时也是环境中最常见、分布最广的有机污染物[2,3]。它可通过生活污水、垃圾及工业废水废渣等多种途径进入水体和土壤,造成了不同程度的环境污染[4,5]... 1 引言合成洗涤剂中直链烷基苯磺酸盐(LAS)是目前生产和使用量最大的表面活性剂[1],同时也是环境中最常见、分布最广的有机污染物[2,3]。它可通过生活污水、垃圾及工业废水废渣等多种途径进入水体和土壤,造成了不同程度的环境污染[4,5]。准确、快速、经济地提取和测定环境样品中的LAS含量,是防治其污染的必要手段。目前水样中LAS的提取方法多为液-液提取法,土壤样品中LAS的提取多用索氏提取法。但这些方法步骤繁琐、费时,试剂消耗量大,且重现性不好[1]。本研究旨在建立一个快捷、准确、经济的水和土壤中LAS的提取和测定方法。 2 展开更多

关键词 直链烷基 苯磺酸盐 LAS 环境污染 高效液相色谱

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未折叠蛋白反应对维甲酸诱导鼠胚胎干细胞分化的作用 被引量：2

6

作者 尚德淑 陈誉华 宋今丹 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期162-167,共6页

目的　研究未折叠蛋白反应 (UPR)在神经分化过程中的作用。　方法　应用全反式维甲酸 (RA)诱导鼠胚胎干细胞 (ES) ,通过免疫细胞化学和RT PCR方法检测神经组织特异性标志物的表达 ,建立以RA诱导ES细胞得到的神经分化的初步模型 ,再分别... 目的　研究未折叠蛋白反应 (UPR)在神经分化过程中的作用。　方法　应用全反式维甲酸 (RA)诱导鼠胚胎干细胞 (ES) ,通过免疫细胞化学和RT PCR方法检测神经组织特异性标志物的表达 ,建立以RA诱导ES细胞得到的神经分化的初步模型 ,再分别用RT PCR和Westernblot方法检测模型中UPR分子的表达。　结果　RA诱导后得到大量表达神经特异性标志物的细胞。UPR关键分子Irelα的表达在RA处理组和未经RA处理组中均下降 ,但未经RA处理组中Irelα的表达始终低于同一时间RA处理组细胞 ;Grp78的表达在RA处理组随诱导时间延长逐渐上升 ,但在未经RA处理组Grp 78的表达未见上升。Irelα和Grp78的这种表达变化与RA诱导细胞中神经特异性标志物的表达情况相关。　结论　以RA诱导ES细胞得到表达神经特异性标志物的细胞分化系统 ,可作为研究神经发育的初步模型 ,其模型中UPR分子的表达变化提示 。 展开更多

关键词 未折叠蛋白反应 维甲酸 诱导 胚胎干细胞 细胞分化

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不同人大肠癌细胞内质网合成的二硫键异构酶研究

7

作者 尚德淑 王芸庆 宋今丹 《解剖科学进展》 CAS 2000年第4期366-368,共3页

目的 :探索 PDI与癌细胞生物学特性之间的关系。方法 :应用不同侵袭力的大肠癌细胞系 CCL -2 2 9(高侵袭 )和 CX- 1(低侵袭 ) ,通过流式细胞术分析两者 PDI含量的差别 ,以及经全反式维甲酸 (RA)诱导后PDI的变化 ;间接免疫荧光法观察细胞... 目的 :探索 PDI与癌细胞生物学特性之间的关系。方法 :应用不同侵袭力的大肠癌细胞系 CCL -2 2 9(高侵袭 )和 CX- 1(低侵袭 ) ,通过流式细胞术分析两者 PDI含量的差别 ,以及经全反式维甲酸 (RA)诱导后PDI的变化 ;间接免疫荧光法观察细胞中 PDI的表达情况。结果 :CX- 1中 PDI的含量高于 CCL - 2 2 9;随诱导天数的增加 ,同一细胞系中 PDI含量增加。结论 :PDI与癌细胞的侵袭力呈负相关关系 ;PDI与分化呈正相关关系。 展开更多

关键词 二硫键异构酶 内质网膜系统 大肠癌

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巨噬细胞炎症蛋白1α促进6T-CEM细胞穿过人脑微血管内皮细胞单层 被引量：1

8

作者 尚德淑 马怡然 +4 位作者 赵伟东 方文刚 朱莉 陈誉华 宋今丹 《细胞生物学杂志》 CSCD 2006年第6期883-887,共5页

有研究表明,T细胞可能参与阿尔茨海默氏病(AD)免疫过程,但T细胞如何穿过血脑屏障内皮细胞紧密连接,到达脑内还不清楚。我们研究曾发现,AD病人外周血T淋巴细胞穿过人脑微血管内皮细胞(HBMEC)单层能力高于同龄正常人,其T淋巴细胞巨噬细胞... 有研究表明,T细胞可能参与阿尔茨海默氏病(AD)免疫过程,但T细胞如何穿过血脑屏障内皮细胞紧密连接,到达脑内还不清楚。我们研究曾发现,AD病人外周血T淋巴细胞穿过人脑微血管内皮细胞(HBMEC)单层能力高于同龄正常人,其T淋巴细胞巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)表达明显增高。为进一步在体外研究促使T淋巴细胞穿过HBMEC单层的机制,选取重组人MIP-1α(rhMIP-1α)作用于HBMEC,同时选用高表达MIP-1α的人急性白血病T淋巴细胞(6T-CEM)作为模式细胞,与HBMEC共同温育。发现rhMIP-1α可促进6T-CEM细胞穿过HBMEC单层,并使HBMEC单层紧密连接结构发生改变。在6T-CEM细胞或rhMIP-1α与HBMEC单层单独温育过程中,均引起HBMEC单层CCR5表达变化。提示MIP-1α可能通过与HBMEC单层上CCR5相互作用介导T淋巴细胞穿过HBMEC单层。 展开更多

关键词 巨噬细胞炎症蛋白1Α 人脑微血管内皮细胞 紧密连接蛋白ZO-1 CC趋化因子受体5

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诱导干细胞分化为神经细胞的研究进展

9

作者 尚德淑 陈誉华 宋今丹 《生命科学》 CSCD 2002年第2期81-84,76,共5页

干细胞是在机体分化过程中存在的具有自我增殖、更新能力，且能形成各种类型分化细胞的一类细胞的总称。它不但为细胞发育分化和细胞诱导研究提供了很好的模型，而且对于临床细胞替代疗法与细胞移植具有重要意义。作者综合干细胞研究的... 干细胞是在机体分化过程中存在的具有自我增殖、更新能力，且能形成各种类型分化细胞的一类细胞的总称。它不但为细胞发育分化和细胞诱导研究提供了很好的模型，而且对于临床细胞替代疗法与细胞移植具有重要意义。作者综合干细胞研究的成果，从方法、机理及诱导得到的神经细胞的检查等几个方面对诱导干细胞向神经细胞分化的进展加以综述。 展开更多

关键词 诱导分化 干细胞 神经细胞 研究进展

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小鼠resistin基因表达载体的构建及在RAW264.7细胞的表达 被引量：1

10

作者 赵鑫月 陈添娇 +2 位作者 于皓 李孝琢 尚德淑 《解剖科学进展》 2020年第5期500-503,共4页

目的构建小鼠resistin基因表达载体,并将其导入小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞中,从而建立能够高表达resistin的单核巨噬细胞系。方法从小鼠脂肪组织提取mRNA,PCR后连接到真核表达载体进行测序验证,同时构建慢病毒载体,感染至RAW264.7细胞... 目的构建小鼠resistin基因表达载体,并将其导入小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞中,从而建立能够高表达resistin的单核巨噬细胞系。方法从小鼠脂肪组织提取mRNA,PCR后连接到真核表达载体进行测序验证,同时构建慢病毒载体,感染至RAW264.7细胞中,通过荧光显微镜观察是否转染成功,ELISA方法检测蛋白分泌水平。结果双酶切结果显示构建的质粒中有大小为345bp的resistin插入条带;经过测序及BLAST比对,插入序列与Genebank中resistin的小鼠CDS序列相同,没有移码突变;荧光显微镜观察病毒感染后的RAW264.7细胞,红色荧光比率达到70%;ELISA检测培养的感染细胞上清中resistin分泌显著增加。结论成功获得了能够分泌resistin蛋白的单核/巨噬细胞。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 resistin基因 RAW264.7细胞 病毒感染

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CCR5介导6T-CEM细胞穿过人脑微血管内皮细胞单层能力分析 被引量：1

11

作者 马怡然 尚德淑 +2 位作者 赵伟东 方文刚 陈誉华 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2008年第7期702-706,共5页

目的为进一步研究T细胞在阿尔茨海默病(AD)患者脑内发挥的作用,探讨CCR5在6T-CEM穿过人脑微血管内皮细胞(HBMECs)过程中所发挥的生物学功能。方法应用免疫荧光和Western blot等技术,集中探讨了HBMECs膜受体CCR5在6T-CEM细胞穿过HBMECs... 目的为进一步研究T细胞在阿尔茨海默病(AD)患者脑内发挥的作用,探讨CCR5在6T-CEM穿过人脑微血管内皮细胞(HBMECs)过程中所发挥的生物学功能。方法应用免疫荧光和Western blot等技术,集中探讨了HBMECs膜受体CCR5在6T-CEM细胞穿过HBMECs过程中作用。结果在6T-CEM细胞与HBMECs单层单独孵育过程中,引起HBMECs膜受体CCR5表达变化;HBMECs膜受体CCR5的高表达使6T-CEM细胞穿过HBMECs单层能力增强。结论HBMECs膜受体CCR5参与了6T-CEM细胞穿过HBMECs单层过程。 展开更多

关键词 趋化因子受体5 人T淋巴细胞白血病细胞系 人脑微血管内皮细胞

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经ibeB基因转染的鼠胚胎干细胞分化的研究

12

作者 尚德淑 方文刚 陈誉华 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期340-343,共4页

ibeB 是一个致脑膜炎大肠杆菌 K1 株中参与大肠杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞的基因. 以 ibeB基因转染鼠胚胎干细胞, 结果表明, 大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭蛋白IbeB不但具有“侵袭”功能, 而且可诱导真核细胞向神经样细胞分化, 经 ibeB... ibeB 是一个致脑膜炎大肠杆菌 K1 株中参与大肠杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞的基因. 以 ibeB基因转染鼠胚胎干细胞, 结果表明, 大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭蛋白IbeB不但具有“侵袭”功能, 而且可诱导真核细胞向神经样细胞分化, 经 ibeB 基因稳定转染的鼠胚胎干细胞能特异性表达神经前体细胞标志分子——nestin. GFP 标记的活细胞观察显示外源性 IbeB 蛋白定位于细胞核. 上述结果提示 ibeB基因可能在调控 nestin 表达过程中发挥功能, 这为研究 nestin 基因的表达调控提供了资料. 展开更多

关键词 B基因 鼠胚 转染 胚胎干细胞 脑微血管内皮细胞 侵袭 分化 表达调控 活细胞 蛋白定位

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