杜仲提取物对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢、骨密度及骨微结构的影响 被引量：42

1

作者 骆瑶 陈兰英 +4 位作者 官紫祎 李雪亮 周祎寒 周星 刘荣华 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2624-2628,共5页

目的:研究杜仲提取物对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢、骨密度以及骨微结构的影响。方法:通过双侧卵巢切除术建立大鼠绝经后骨质疏松症模型,术后4 w将精神状态良好的成模大鼠随机分为模型组、戊酸雌二醇片(0.8 mg/kg)阳性对照组及杜仲提取物... 目的:研究杜仲提取物对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢、骨密度以及骨微结构的影响。方法:通过双侧卵巢切除术建立大鼠绝经后骨质疏松症模型,术后4 w将精神状态良好的成模大鼠随机分为模型组、戊酸雌二醇片(0.8 mg/kg)阳性对照组及杜仲提取物高(6 g/kg)、中(3 g/kg)、低(1.5 g/kg)剂量组,并设假手术组。连续给药16w,每周记录各组大鼠体质量。16 w后ELISA法检测血清中雌二醇(E2)、骨钙素(OC)含量及尿中脱氧吡啶啉(DPD)含量;全自动生化仪检测血清中钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)含量及尿中钙(Ca)、磷(P)、肌酐(Cre)含量;骨密度仪检测左侧股骨骨密度(BMD);取第五节腰椎骨(L5)行u CT检测骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁分离度(Tb.Sp)、骨体积分数(BV/TV)、骨密度(BMD)、连接密度(Conn.D)。结果:给药16 w后,与模型组比较,杜仲提取物组大鼠体质量显著降低;血清E2显著升高,OC、ALP显著降低,尿中DPD/Cre、Ca/Cre、P/Cre显著降低;腰椎骨、股骨BMD均显著升高;大鼠第五节腰椎骨骨小梁Tb.N、BV/TV、Conn.D显著升高,Tb.Sp显著降低。结论:杜仲提取物对去卵巢大鼠骨质疏松症具有明显的防治作用,可升高血清雌二醇水平,降低雌二醇缺乏引起的体质量增加,调节骨代谢平衡,显著提高去卵巢骨质疏松大鼠股骨及腰椎骨骨密度,改善骨小梁微结构。 展开更多

关键词 杜仲 去卵巢骨质疏松 骨密度 骨小梁微结构 骨代谢

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金匮肾气丸对腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠的影响 被引量：18

2

作者 袁金凤 陈兰英 +8 位作者 王慧玲 张妮 李雪亮 官紫祎 方聪 周朦静 王玲玲 尹力 寿斌耀 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第21期149-156,共8页

目的：研究金匮肾气丸对腺嘌呤致大鼠肾间质纤维化的保护作用,并探讨其作用机制。方法：96只SD大鼠随机分成正常组、模型组、氯沙坦组（5 mg·kg-1）和金匮肾气丸高、中、低剂量组（2.4,1.2,0.6 g·kg-1）,采用腺嘌呤灌胃（200 ... 目的：研究金匮肾气丸对腺嘌呤致大鼠肾间质纤维化的保护作用,并探讨其作用机制。方法：96只SD大鼠随机分成正常组、模型组、氯沙坦组（5 mg·kg-1）和金匮肾气丸高、中、低剂量组（2.4,1.2,0.6 g·kg-1）,采用腺嘌呤灌胃（200 mg·kg^（-1）·d^（-1））诱导肾间质纤维化大鼠模型,2 h后灌胃给予相应药物,造模连续9周;给药连续16周。采用生化法测定血清肌酐（SCr）和尿素氮（BUN）水平;苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠肾脏组织病理改变情况;马松（Masson）染色观察大鼠肾脏胶原沉积情况;以实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）测定大鼠肾脏组组转化生长因子-β1（TGF-β1）,α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,钙黏蛋白（E-cadherin）,Ⅰ型胶原（Col-Ⅰ）,Ⅲ型胶原（Col-Ⅲ）,Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ）,基质金属蛋白酶-1（MMP-1）,基质金属蛋白酶-2（MMP-2）,基质金属蛋白酶-9（MMP-9）,基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）,基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）mRNA的表达;以免疫组化法测定大鼠肾脏TGF-β1,α-SMA和E-cadherin的表达。结果：与正常组比较,模型组中SCr和BUN显著升高（P〈0.01）,给予金匮肾气丸干预后SCr和BUN水平降低（P〈0.05）;HE染色和Masson染色结果显示,与正常组比较,模型组肾间质损伤严重且肾间质胶原物质大量沉积,给予金匮肾气丸干预后肾间质小管损伤减轻,肾间质胶原物质沉积减少;Real-time PCR结果显示,与正常组比较,模型组TGF-β1,α-SMA,Col-Ⅰ,Col-Ⅲ,Col-Ⅳ,TIMP-1,TIMP-2mRNA表达上调（P〈0.05）,模型组E-cadherin,MMP-1,MMP-2,MMP-9 mRNA表达下调（P〈0.05）,给予金匮肾气丸干预后E-cadherin,MMP-1,MMP-2,MMP-9 mRNA的表达上调（P〈0.05）,TGF-β1,α-SMA,Col-Ⅰ,Col-Ⅲ,Col-Ⅳ,TIMP-1,TIMP-2mRNA的表达明显下调（P〈0.05）;免疫组化结果显示,与正常组比较,模型组E-cadherin蛋白表达下调（P〈0.01）,TGF-β1和α-SMA蛋白� 展开更多

关键词 金匮肾气丸 肾间质纤维化 转化生长因子 Α-平滑肌肌动蛋白 钙黏蛋白 胶原 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶抑制剂

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二十五味儿茶丸对痛风性关节炎大鼠炎症反应的影响 被引量：9

3

作者 陈兰英 周星 +4 位作者 骆瑶 王木兰 崔亚茹 李雪亮 官紫祎 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期128-133,共6页

目的:探讨二十五味儿茶丸对尿酸钠诱导的大鼠急性痛风性关节炎的防治作用及炎症反应机制。方法:80只SD大鼠,随机分为正常组,模型组,秋水仙碱组(0.3 mg·kg^(-1)),氢化可的松组(4 mg·kg^(-1))及二十五味儿茶丸高、中、低剂量组(... 目的:探讨二十五味儿茶丸对尿酸钠诱导的大鼠急性痛风性关节炎的防治作用及炎症反应机制。方法:80只SD大鼠,随机分为正常组,模型组,秋水仙碱组(0.3 mg·kg^(-1)),氢化可的松组(4 mg·kg^(-1))及二十五味儿茶丸高、中、低剂量组(2.4,1.2,0.6 g·kg^(-1)),除正常组外,其余各组采用向大鼠踝关节内注入尿酸晶体建立急性痛风性关节炎模型,测定造模前及造模后3,6,9,12,15 h关节肿胀度,同时经眼眶静脉丛取血测定白细胞(WBC)和中性粒细胞(NEUT)数目,取滑膜组织测定炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),IL-8,环氧合酶-2(COX-2)含量,并采用蛋白质免疫印迹(Western bolt)检测滑膜组织中COX-2蛋白水平的表达。结果:与正常组比较,模型组各时间点大鼠关节肿胀度明显升高,WBC,NEUT数目明显升高,TNF-α,IL-1β,IL-8,COX-2含量明显升高(P<0.05,P<0.01),COX-2蛋白水平有所升高,但无统计学差异;与模型组比较,二十五味儿茶丸高、中、低剂量组肿胀度明显降低,抑制率明显升高,可明显减少WBC,NEUT数目,明显降低炎性因子TNF-α,IL-1β,IL-8,COX-2含量,并可明显降低COX-2蛋白水平表达(P<0.05,P<0.01)。结论:二十五味儿茶丸通过减少白细胞、中性粒细胞数目,抑制炎症因子的释放,从而达到抗急性痛风性关节炎炎症反应作用。 展开更多

关键词 二十五味儿茶丸 尿酸钠晶体 急性痛风性关节炎 炎症反应

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白头翁皂苷PSA对SW480人结直肠癌细胞糖酵解途径关键蛋白及调节因子HIF-1α的影响 被引量：9

4

作者 崔亚茹 王慧玲 +2 位作者 陈兰英 官紫祎 罗颖颖 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2887-2892,共6页

目的探讨白头翁皂苷PSA对人结直肠癌SW480细胞糖酵解的影响。方法MTT法检测细胞存活率;分光光度试剂盒检测葡萄糖消耗及糖酵解产物;荧光定量PCR法检测己糖激酶II(HKII)、丙酮酸激酶M2(PKM2)和乳酸脱氢酶A(LDHA)以及葡萄糖转运体1(GLUT1... 目的探讨白头翁皂苷PSA对人结直肠癌SW480细胞糖酵解的影响。方法MTT法检测细胞存活率;分光光度试剂盒检测葡萄糖消耗及糖酵解产物;荧光定量PCR法检测己糖激酶II(HKII)、丙酮酸激酶M2(PKM2)和乳酸脱氢酶A(LDHA)以及葡萄糖转运体1(GLUT1)、单羧酸转运体4(MCT4)mRNA表达;流式细胞术检测凋亡;Westernblot法检测低氧诱导因子(HIF 1α)蛋白表达。结果在无血清条件下,白头翁皂苷PSA(1~9μg/mL)能够显著抑制细胞的增殖(P<0.01),降低葡萄糖的消耗、乳酸和ATP的生成(P<0.05,P<0.01),下调HK II、PKM2以及GLUT1 mRNA的表达(P<0.05,P<0.01),诱导凋亡(P<0.01),降低HIF 1α蛋白表达水平(P<0.05)。结论白头翁皂苷PSA能够有效干扰SW480细胞糖酵解途径,其机制可能与抑制HIF 1α蛋白表达,下调HK II、PKM2及GLUT1 mRNA有关。 展开更多

关键词 白头翁皂苷PSA SW480细胞 糖酵解

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藏药二十五味儿茶丸降尿酸作用及对尿酸转运蛋白表达水平的影响 被引量：8

5

作者 方聪 陈兰英 +4 位作者 李雪亮 官紫祎 周朦静 张妮 谢永艳 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2374-2379,共6页

目的研究藏药二十五味儿茶丸对氧嗪酸钾联合次黄嘌呤诱导的大鼠高尿酸血症的防治作用。方法 60只大鼠随机分为空白组、模型组、别嘌醇组(10 mg/kg)和二十五味儿茶丸高、中、低剂量组(1、0. 5、0. 25 g/kg),除空白组外,其余各组皮下注射... 目的研究藏药二十五味儿茶丸对氧嗪酸钾联合次黄嘌呤诱导的大鼠高尿酸血症的防治作用。方法 60只大鼠随机分为空白组、模型组、别嘌醇组(10 mg/kg)和二十五味儿茶丸高、中、低剂量组(1、0. 5、0. 25 g/kg),除空白组外,其余各组皮下注射氧嗪酸钾(200 mg/kg)联合灌胃次黄嘌呤(300 mg/kg)建立高尿酸血症模型,1 h后灌胃给予相应药物,连续7 d。生化法测定血清尿酸(UA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,血清及肝组织中黄嘌呤氧化酶(XOD)活性; HE染色观察肾脏组织病理变化;免疫组化法测定肾脏有机阴离子转运蛋白1 (OAT1)、有机阴离子转运蛋白3 (OAT3)及尿酸盐阴离子转运体1 (URAT1)的表达。结果与空白组比较,模型组血尿酸水平、血清及肝脏组织XOD水平显著升高,肾脏组织出现病理损伤,肾脏组织OAT1及OAT3表达显著降低,URAT1表达显著升高。与模型组比较,二十五味儿茶丸高剂量组能明显降低血尿酸水平,抑制XOD活性,改善肾脏病理损伤,升高OAT1及OAT3的表达,抑制URAT1的表达。结论二十五味儿茶丸可以有效治疗高尿酸血症并对肾脏有一定的保护作用,其降尿酸机制可能与抑制XOD活性,提高OAT1、OAT3的表达,抑制URAT1的表达有关。 展开更多

关键词 二十五味儿茶丸 高尿酸血症 有机阴离子转运蛋白1(0AT1) 有机阴离子转运蛋白3(0AT3) 尿酸盐阴离子转运体1(URAT1)

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炎症诱导缺血缺氧环境下骨髓间充质干细胞的活性 被引量：6

6

作者 张妮 陈兰英 +5 位作者 李雪亮 官紫祎 方聪 周朦静 罗颖颖 刘荣华 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第33期5259-5267,共9页

背景:局部组织缺血缺氧和炎症微环境因素是造成骨髓间充质干细胞生存率低的主要原因。目的:探讨炎症环境下缺血缺氧对骨髓间充质干细胞活性的影响以及细胞活性与炎症因子之间的关系。方法:采用全骨髓培养法提取培养骨髓间充质干细胞,流... 背景:局部组织缺血缺氧和炎症微环境因素是造成骨髓间充质干细胞生存率低的主要原因。目的:探讨炎症环境下缺血缺氧对骨髓间充质干细胞活性的影响以及细胞活性与炎症因子之间的关系。方法:采用全骨髓培养法提取培养骨髓间充质干细胞,流式细胞仪对细胞进行鉴定,将第3代细胞进行不同时间氧糖剥夺(6,12,24 h)和炎症诱导(氧糖剥夺、氧糖剥夺+20μg/L肿瘤坏死因子α、氧糖剥夺+100μg/L脂多糖),倒置显微镜观察细胞生长状况,MTT法和流式细胞仪测定细胞活力,ELISA检测上清液中白细胞介素6、白细胞介素10、肿瘤坏死因子α水平,RT-PCR检测细胞中白细胞介素6、白细胞介素10、肿瘤坏死因子α、NF-κB基因表达水平。结果与结论:(1)成功分离培养大鼠骨髓间充质干细胞且纯度为95%以上;(2)氧糖剥夺6 h和12 h细胞活力明显增强,氧糖剥夺24 h细胞活力明显下降;在肿瘤坏死因子α和脂多糖诱导下氧糖剥夺6,12,24 h后细胞活力下降;(3)与正常条件比较,氧糖剥夺6,12 h后白细胞介素6、白细胞介素10水平和白细胞介素6、白细胞介素10、肿瘤坏死因子α、NF-κB基因表达下降;(4)与氧糖剥夺条件比较,在肿瘤坏死因子α和脂多糖诱导下氧糖剥夺6,12h后白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平和白细胞介素6、白细胞介素10、肿瘤坏死因子α、NF-κB基因表达显著升高;(5)由此可见,在肿瘤坏死因子α和脂多糖诱导下,骨髓间充质干细胞活力受炎症因子表达和分泌影响,随着炎症因子表达和分泌增加,骨髓间充质干细胞的活力降低。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 缺血缺氧 炎症环境 肿瘤坏死因子Α 脂多糖 细胞活性 干细胞 国家自然科学基金 骨髓 间质干细胞 缺血 缺氧 肿瘤坏死因子Α 脂多糖类 组织工程

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白头翁皂苷干预糖酵解途径抑制SW480人结直肠癌细胞增殖作用研究 被引量：5

7

作者 陈兰英 周朦静 +3 位作者 崔亚茹 王慧玲 官紫祎 罗颖颖 《中药材》 CAS 北大核心 2019年第3期652-656,共5页

目的:观察白头翁皂苷抑制人结直肠癌细胞的增殖作用及对肿瘤细胞糖酵解途径的影响。方法:采用人结直肠癌细胞株SW480,通过噻唑蓝(MTT)比色法研究白头翁皂苷(1.25、2.5、5、10、20、40μg/mL)对SW480细胞增殖的抑制作用,检测1、3、9μg/m... 目的:观察白头翁皂苷抑制人结直肠癌细胞的增殖作用及对肿瘤细胞糖酵解途径的影响。方法:采用人结直肠癌细胞株SW480,通过噻唑蓝(MTT)比色法研究白头翁皂苷(1.25、2.5、5、10、20、40μg/mL)对SW480细胞增殖的抑制作用,检测1、3、9μg/mL白头翁皂苷干预后SW480的葡萄糖消耗、乳酸生成和三磷酸腺苷含量变化,评价白头翁皂苷对SW480细胞糖酵解的干预作用;采用RT-PCR技术检测SW480细胞酵解途径中关键蛋白GLUT1、HK2、LDHA、MCT4、MCT1、c-Myc、HIF-1a mRNA表达水平;采用Western blot检测糖酵解调节因子HIF-1a、c-Myc蛋白及乳酸外排蛋白MCT4的表达。结果:白头翁皂苷对SW480细胞的增殖具有抑制作用,作用强度呈浓度依赖性,其对SW480的IC50为11.69μg/mL;9μg/mL白头翁皂苷能显著降低SW480细胞葡萄糖消耗、乳酸生成和三磷酸腺苷含量,能使糖酵解关键蛋白GLUT1、HK2、MCT4、MCT1、c-Myc、HIF-1a mRNA表达显著下调,并使调节因子c-Myc、HIF-1a蛋白和乳酸转运蛋白MCT4表达显著降低。结论:白头翁皂苷能显著抑制SW480细胞增殖,降低细胞糖酵解水平,其机制与调控c-Myc、HIF-1a而干预GLUT1、HK2、MCT4、MCT1的表达相关。白头翁皂苷可能是一种潜在的肿瘤能量代谢阻断剂。 展开更多

关键词 白头翁皂苷 SW480人结直肠癌细胞 糖酵解 关键蛋白

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全杜仲胶囊对肾阳虚小鼠抗应激能力的影响及机制研究 被引量：4

8

作者 王慧玲 陈兰英 +6 位作者 周祎寒 罗颖颖 崔亚茹 袁金凤 张妮 李雪亮 官紫祎 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1077-1081,共5页

目的:探讨全杜仲胶囊对肾阳虚小鼠抗应激能力的影响及机制。方法:采用氢化可的松注射液肌肉注射复制肾阳虚小鼠模型,检测小鼠的抗应激能力(耐寒死亡率、耐缺氧时间及耐疲劳时间),检测血清c GMP含量、c AMP/c GMP、肝脏Na^+-K^+-ATP酶活... 目的:探讨全杜仲胶囊对肾阳虚小鼠抗应激能力的影响及机制。方法:采用氢化可的松注射液肌肉注射复制肾阳虚小鼠模型,检测小鼠的抗应激能力(耐寒死亡率、耐缺氧时间及耐疲劳时间),检测血清c GMP含量、c AMP/c GMP、肝脏Na^+-K^+-ATP酶活性和脾脏T淋巴细胞CD4^+/CD8^+。结果:全杜仲胶囊可明显降低小鼠耐寒死亡率,延长小鼠耐缺氧时间和耐疲劳时间,且可降低血清c GMP含量,显著升高血清c AMP/c GMP、肝脏Na^+-K^+-ATP酶的活性和脾脏T淋巴细胞CD4^+/CD8^+。结论:全杜仲胶囊不仅可通过降低血清c GMP含量、升高血清c AMP/c GMP和肝脏Na^+-K^+-ATP酶的活性改善机体能量代谢,还可通过增强脾脏T淋巴细胞CD4^+/CD8^+免疫功能,进而提高肾阳虚小鼠的抗应激能力。 展开更多

关键词 全杜仲胶囊 抗应激能力 CAMP/CGMP NA+-K+-ATP酶 CD4+/CD8+

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降香新黄酮latifolin对大鼠急性心肌缺血影响及介导Nrf2信号通路机制研究 被引量：23

9

作者 李雪亮 陈兰英 +5 位作者 官紫祎 骆瑶 崔亚茹 刘荣华 邵峰 王定清 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第20期3974-3982,共9页

研究降香新黄酮latifolin对垂体后叶素(Pit)及异丙肾上腺素(ISO)致大鼠急性心肌缺血保护作用及作用机制。Pit及ISO分别诱导大鼠急性心肌缺血,观察大鼠心电图变化。ISO诱导大鼠急性心肌缺血,ELISA法或比色法检测血清中心肌损伤标志物含... 研究降香新黄酮latifolin对垂体后叶素(Pit)及异丙肾上腺素(ISO)致大鼠急性心肌缺血保护作用及作用机制。Pit及ISO分别诱导大鼠急性心肌缺血,观察大鼠心电图变化。ISO诱导大鼠急性心肌缺血,ELISA法或比色法检测血清中心肌损伤标志物含量或活力、比色法检测心肌中SOD活力及MDA含量;HE染色进行组织病理学检查;心肌组织冰冻切片进行DCFH-DA荧光染色,检测心肌中ROS含量水平;Western blot法检测心肌中Nrf2,Keap1,HO-1及NQO1的蛋白表达水平。心电图结果显示,latifolin抑制Pit及ISO引起的ST段变化,抑制Pit引起心率减慢。机制研究结果显示,latifolin降低血清中c Tn I含量和AST及LDH活力;升高心肌中SOD活力,降低心肌中MDA含量;降低心肌组织炎细胞浸润、肌纤维断裂及坏死的程度;减弱心肌DCFH-DA荧光染色的荧光强度;抑制Keap1的蛋白表达,促进Nrf2核转移,促进HO-1及NQO1的蛋白表达。结果表明降香新黄酮latifolin对大鼠急性心肌缺血具有保护作用,主要机制可能与激活Nrf2信号通路从而发挥抗氧化作用有关。 展开更多

关键词 latifolin 垂体后叶素 异丙肾上腺素 心肌缺血 Nrf2信号通路

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基于糖酵解机制的白头翁皂苷多成分协同抑制人肺癌NCI-H460细胞增殖作用研究 被引量：8

10

作者 官紫祎 陈兰英 +3 位作者 罗颖颖 崔亚茹 周祎寒 李雪亮 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期5289-5297,共9页

目的探讨白头翁皂苷中有效成分抑制人肺癌NCI-H460细胞增殖作用及其有效成分协同对肿瘤糖酵解机制的作用。方法体外培养NCI-H460细胞,以MTT法检测白头翁皂苷中白头翁皂苷A3(A3)、白头翁皂苷D(PSD)、白头翁皂苷B4(B4)、常春藤碱C(HC)、... 目的探讨白头翁皂苷中有效成分抑制人肺癌NCI-H460细胞增殖作用及其有效成分协同对肿瘤糖酵解机制的作用。方法体外培养NCI-H460细胞,以MTT法检测白头翁皂苷中白头翁皂苷A3(A3)、白头翁皂苷D(PSD)、白头翁皂苷B4(B4)、常春藤碱C(HC)、常春藤碱D(HD)、常春藤皂苷元(HY)、白头翁皂苷R13(R13)和白头翁皂苷PSA(PSA)的抗肿瘤活性;通过Calcusyn 3.0软件将筛选出的白头翁有效成分进行配伍及协同抗肿瘤作用研究;采用生物化学检测法和Elisa法检测糖酵解相关代谢产物(丙酮酸、乳酸、葡萄糖)和葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、乳酸脱氢酶(LDHA)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)和己糖激酶(HK)水平;运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术和Western blotting技术检测糖酵解相关41个成员基因和关键蛋白细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、Ras、GLUT1、单羧酸转运体4(MCT4)的表达。结果体外抗肿瘤结果显示,白头翁皂苷中以PSD、R13、PSA抑瘤活性最强,其对NCI-H460细胞IC50分别为5.2、4.6、7.9μg/m L;运用Calcusyn 3.0软件确定了白头翁皂苷中3个有效单体成分配伍比例及判定了配伍后具有协同抗肿瘤效应;生化和Elisa结果显示,与对照组比较,白头翁单体组及联合组的丙酮酸、乳酸、葡萄糖、HK、PKM2、LDHA含量均明显降低,且GLUT1含量明显升高(P<0.05),与各单体组相比,其联合组的丙酮酸、乳酸、葡萄糖、HK、PKM2、LDHA含量均明显的降低,GLUT1含量明显升高(P<0.05);q RT-PCR结果显示,单体联合组在网络图中节点最多,其作用靶点多于各个单体组;Western blotting结果显示,与对照组比较,白头翁单体联合组可显著性降低细胞ERK1/2、Ras、GLUT1、MCT4蛋白表达(P<0.05)。结论白头翁皂苷有效成分联用对NCI-H460细胞具有协同抗肿瘤作用,其可能通过调节肿瘤细胞糖酵解发挥抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 白头翁皂苷 协同抗肿瘤 糖酵解 NCI-H460细胞 葡萄糖转运蛋白1 乳酸脱氢酶 M2型丙酮酸激酶 己糖激酶 细胞外调节蛋白激酶1/2 Ras 单羧酸转运体4

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白头翁皂苷对NCI-H460细胞增殖、凋亡的影响及其差异表达蛋白筛选 被引量：8

11

作者 官紫祎 陈兰英 +3 位作者 罗颖颖 崔亚茹 寿斌耀 周立芬 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期49-56,共8页

目的:采用nano LC-LTQ-Orbitrap-MS/MS技术筛选白头翁皂苷抑制人大细胞肺癌细胞NCI-H460增殖及诱导凋亡作用的差异表达蛋白,初步推测其作用机制。方法:通过体外培养NCI-H460,人卵巢腺癌细胞SK-OV-3,人胃腺癌细胞SGC-7901,利用噻唑蓝(MTT... 目的:采用nano LC-LTQ-Orbitrap-MS/MS技术筛选白头翁皂苷抑制人大细胞肺癌细胞NCI-H460增殖及诱导凋亡作用的差异表达蛋白,初步推测其作用机制。方法:通过体外培养NCI-H460,人卵巢腺癌细胞SK-OV-3,人胃腺癌细胞SGC-7901,利用噻唑蓝(MTT)比色法检测白头翁皂苷的抗肿瘤活性;磷脂酰丝氨酸外翻分析-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)染色流式细胞术及4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色检测对细胞凋亡的影响;运用nano LC-LTQ-Orbitrap-MS/MS技术对白头翁皂苷干预后NCI-H460细胞全蛋白进行分析与鉴定;利用Thermo Proteome Discoverer 1. 4软件进行蛋白质鉴定,Sieve 2. 1软件对所有样本蛋白进行相对定量分析,筛选并鉴定差异表达蛋白后,通过DAVID Bioinformatics Resources 6. 8和京都基因及基因组百科全书(KEGG)数据库对差异表达蛋白进行生物信息学分析。结果:白头翁皂苷对NCI-H460,SK-OV-3及SGC-7901细胞的增殖均有一定的抑制作用,且能诱导NCI-H460细胞的凋亡。白头翁皂苷主要通过调节核糖体的生物功能、糖酵解/糖异生、碳代谢、蛋白质的生物合成及mRNA的代谢等生物进程来影响NCI-H460细胞的增殖及凋亡,可能通过干预丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路和调控Caspase途径来诱导NCI-H460细胞的凋亡。结论:白头翁皂苷具有抑制NCI-H460细胞增殖及诱导其凋亡的作用,其作用机制可能与干预MAPK信号通路和调控Caspase途径等有关,为研究白头翁皂苷抗肿瘤的分子机制提供了新思路。 展开更多

关键词 白头翁皂苷 抗肿瘤 凋亡 蛋白质组学 质谱检测 Caspase途径 丝裂原活化蛋白激酶

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