光合细菌固氮分子生物学研究进展 被引量：23

1

作者 吴永强 宋鸿遇 《植物生理学通讯》 CSCD 1991年第3期161-166,共6页

本文着重介绍光合细菌固氮基因的遗传图谱和物理图谱,多拷贝nif基因,固氮酶合成的调节以及固氮酶在蛋白质水平上的调节。

关键词 光合细菌 生物固氮 分子生物学

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含吸氢酶基因（hup）嵌合质粒的构建和吸氢酶活性在阴沟肠杆菌中的表达 被引量：6

2

作者 吴永强 朱美珍 +2 位作者 梁建光 华征 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1996年第3期209-217,共9页

以质粒ｐＲＫ４０４为载体亚克隆含大豆根瘤菌吸氢酶结构基因（ｈｕｐ）的片段，构建成嵌合质粒ｐＨＲ１１、ｐＨＲ４和ｐＨＲ１０。通过三亲本杂交将这些嵌合质粒导入无吸氢活性的Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ２４１... 以质粒ｐＲＫ４０４为载体亚克隆含大豆根瘤菌吸氢酶结构基因（ｈｕｐ）的片段，构建成嵌合质粒ｐＨＲ１１、ｐＨＲ４和ｐＨＲ１０。通过三亲本杂交将这些嵌合质粒导入无吸氢活性的Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ２４１菌株（Ｈｕｐ－），均获得Ｈｕｐ＋的接合子。利用启动子检测质粒ｐＭＰ２２０证明，在ｈｕｐ对结构基因上游１．２ｋｂ内存在ｈｕｐ启动基因片段。以ｐＲＫ２０１３为助质粒可将ｐＨＲ１１导入Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏａｃａｅ和Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｏｘｙｔｏｃａ等土壤固氮菌株。本文以接合子Ｅ．ｃｌｏａｃａｅＥＨ１１１３为例，通过对基因组ＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析证明，嵌合质粒ｐＨＲ１１在ＥＨ１１１３中稳定贮存和复制。Ｈ２诱导接合子ＥＨ１１１３吸氢酶活性高表达，吸氢活性与放氢活性比值约为对照的两倍。当以延胡索酸为电子受体时，吸氢酶的吸氢作用支持菌株固氮酶活性的提高。 展开更多

关键词 固氮细菌 吸氢酶基因 南粒 吸氢酶 阴沟肠杆菌

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紫云英根瘤菌107菌株酸性胞外多糖的分离纯化及结构分析 被引量：2

3

作者 吴 周蓓芸 +2 位作者 宋鸿遇 郭忠武 王来曦 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1997年第3期227-232,共6页

用化学沉淀法和柱层析法，分高纯化了紫云英根瘤菌野生型107菌株、胞外多糖合成缺陷型变种NA02及其回复子NA02（R'－11）产生的酸性胞外多糖（EPS）。结构组成分析表明：菌株107与NA02（R＇－11）产生的EPS糖组分均由葡萄糖、半乳... 用化学沉淀法和柱层析法，分高纯化了紫云英根瘤菌野生型107菌株、胞外多糖合成缺陷型变种NA02及其回复子NA02（R'－11）产生的酸性胞外多糖（EPS）。结构组成分析表明：菌株107与NA02（R＇－11）产生的EPS糖组分均由葡萄糖、半乳糖、核糖和葡萄糖醛酸构成；而变种NA02产生的EPS只含葡萄糖、半乳糖和葡萄糖醛酸，与野生型显著不同。3个菌株的EPS均有乙酰基取代，而无其它形式的取代基。EPS的酸性来自葡萄糖醛酸。1H－NMR分析表明，野生型菌株107和回复子NA02（R＇－11）的EPS糖残基通过α和β糖苷键方式连接，而变种NA02EPS的糖链中均为α连接方式。 展开更多

关键词 紫云英根瘤菌 分离 纯化 酸性胞外多糖 多糖

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丙酮酸对浑球红假单胞菌突变株(GOGAT^-Nif^-)固氮酶活性的调节 被引量：4

4

作者 吴永强 陈秉俭 +1 位作者 朱美珍 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1992年第3期285-292,共8页

固氮无效的浑球红假单胞菌GOGAT突变株经丙酮酸诱导产生固氮酶活性。固氮酶比活随丙酮酸浓度增加而提高,同时依赖于蛋白质合成的菌体生长。丙酮酸产生固氮酶时氮源Glu的浓度高达60 mmol/L。液相色谱分析表明,丙酮酸诱导固氮酶活性的形... 固氮无效的浑球红假单胞菌GOGAT突变株经丙酮酸诱导产生固氮酶活性。固氮酶比活随丙酮酸浓度增加而提高,同时依赖于蛋白质合成的菌体生长。丙酮酸产生固氮酶时氮源Glu的浓度高达60 mmol/L。液相色谱分析表明,丙酮酸诱导固氮酶活性的形成与胞内Gln耗竭有关而与Asn无关。用丙酮酸代替苹果酸诱导,突变株向胞外分泌的游离氨大大减少。丙酮酸诱导时变种谷氨酰胺酶比活较高,它可能参与胞内Gln的分解。 展开更多

关键词 光合细菌 固氮酶 假单胞菌 丙酮酸

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浑球红细菌谷氨酸合酶基因(glt)的克隆和图谱分析 被引量：3

5

作者 鲁涛 吴永强 宋鸿遇 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期1-11,共11页

利用转座子Tn5随机插入诱变筛选得到12株浑球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)氨同化缺陷突变株(Asm^-)。这些突变株胞内均无GOGAT活性,同时它们均无固氮酶活性(Nif^-),并且具有氮代谢多效性缺失表型(Ntr^-)。将含有Azorhizobium sesban... 利用转座子Tn5随机插入诱变筛选得到12株浑球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)氨同化缺陷突变株(Asm^-)。这些突变株胞内均无GOGAT活性,同时它们均无固氮酶活性(Nif^-),并且具有氮代谢多效性缺失表型(Ntr^-)。将含有Azorhizobium sesbaniae ORS571的完整glt基因的质粒pHB10转入突变株中能互补上述表型。通过筛选携带Tn5的R-prime质粒克隆了glt::Tn5片段。Southern杂交证明所克隆glt::Tn5片段与E. coli的gltBD基因有同源性。用此片段与以pLAFR3为载体所构建的R. sphaeroides 601基因文库进行菌落原位杂交筛选到了携带glt基因的cosmid pLT27。pLT27能互补所有12株R.sphaeroides氨同化缺陷突变株。酶切分析表明在该cosmid中插人的染色体DNA片段大小约为26.5kb。以pRK415为载体亚克隆了4.0kb与10.5kh的pLT27的Hindlll酶切片段,分别命名为pLTRK271与pLTRK272。pLTRK272能互补变种GT6、GT10、GT11,pLTRK271能互补其余的变种。通过单、双酶切作出了pLTRK271与pLTRK272的物理图谱。上述10.5kb的pLT27Hindlll酶切片段与E. coil gltBD基因具有同源性。Southern杂交分析表明Tn5均插在变种染色体的同一区域并得出了其插入位点。由此可确定glt基因大致位于一段11kb的EcoRl-Hindlll克隆片段内。 展开更多

关键词 浑球红细菌 谷氨酸合酶基因 基因克隆 图谱分析

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浑球红假单胞菌GOGAT缺失株中依赖2-酮戊二酸的固氮酶诱导 被引量：3

6

作者 王星 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1989年第3期269-274,共6页

2—酮戊二酸加于限量氮培养基中后,引起泽球红假单胞菌谷氨酸合成酶(GOGAT)缺失菌株(asm^-,Nif^-)固氮酶的诱导表达,诱导生成的固氮酶的活性随着培养时间的延长而下降。此时如果加入谷氨酸,固氮酶活性又重新出现,而谷氨酸通常是阻遏GOGA... 2—酮戊二酸加于限量氮培养基中后,引起泽球红假单胞菌谷氨酸合成酶(GOGAT)缺失菌株(asm^-,Nif^-)固氮酶的诱导表达,诱导生成的固氮酶的活性随着培养时间的延长而下降。此时如果加入谷氨酸,固氮酶活性又重新出现,而谷氨酸通常是阻遏GOGAT缺失菌株固氮酶表达的。诱导出的固氮酶与野生菌株固氮酶有相同的调节方式,但前后两次出现的固氮酶活性在氨的敏感性上有差异。此外,在GOGAT缺失菌株内含有较高的谷氨酰胺库,同时谷氨酸胺合成酶(GS)的腺苷酸化状态也较野生型菌株高。 展开更多

关键词 假单胞菌 固氮酶 酮戊二酸 GOGAT

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浑球红细菌谷氨酰胺合成酶基因(glnA)及PⅡ蛋白基因(glnB)的序列分析 被引量：2

7

作者 韩涛 吴永强 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1997年第2期130-138,共9页

测定了浑球红细菌的glnA和／glnB基因DNA序列，共2707nt。其中glnA基因编码区为1401nt，编码467个氨基酸；glnB基因编码区为336nt，编码112个氨基醚。DNA序列的G＋C百分含量为65％，它们的密码子第三位GC利用率高达89．1％。在氨基酸序... 测定了浑球红细菌的glnA和／glnB基因DNA序列，共2707nt。其中glnA基因编码区为1401nt，编码467个氨基酸；glnB基因编码区为336nt，编码112个氨基醚。DNA序列的G＋C百分含量为65％，它们的密码子第三位GC利用率高达89．1％。在氨基酸序列上，GS酶和PⅡ蛋白与其它不同属的细菌间有较好的同源性，尤其是固氮类细菌间同源性较高。 展开更多

关键词 浑球红细菌 谷氨酰氨合成酶 基因 glnB基因 固氮

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浑球红假单胞菌及其谷氨酸合成酶突变株氢酶活性和合成 被引量：2

8

作者 杨大庆 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1990年第3期220-226,共7页

浑球红假单胞菌野生型菌株的氢酶表达被有机碳、氮底物所抑制。在光照和黑暗时,氧浓度变化对氢酶的作用不同,但高氧浓度都阻遏氢酶的表达。微量Ni^(2+)能专一性地促进氢酶活性,固氮酶的产氢也可以调节氢酶的表达水平。该野生菌株的GOGA... 浑球红假单胞菌野生型菌株的氢酶表达被有机碳、氮底物所抑制。在光照和黑暗时,氧浓度变化对氢酶的作用不同,但高氧浓度都阻遏氢酶的表达。微量Ni^(2+)能专一性地促进氢酶活性,固氮酶的产氢也可以调节氢酶的表达水平。该野生菌株的GOGAT突变株缺乏固氮酶和氢酶活性,在加入谷氨酰胺合成酶抑制剂MSX后,固氮酶和氢酶以相关联的方式合成出来,固氮酶产生的氢看来诱导了氢酶的合成。然而在固氮酶不表达的情况下,外源氢也可诱导氢酶的合成。 展开更多

关键词 红假单胞菌 GOGAT突变株 氢酶

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紫云英根瘤菌107菌株exo基因簇非连锁突变位点的克隆 被引量：1

9

作者 曾维清 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1997年第4期331-336,共6页

用鸟枪法从3株紫云英根瘤菌107菌株的胞外多糖合成缺陷变种（Exo-）NA－05、NA－07和NA－08中克隆获得含有107菌株exo基因及Tn5的exo::Tn5片段。以pRK415为载体构建107菌株EcoRI酶切后DNA片段的部分基因库，用exo::Tn5做探针原位杂交得... 用鸟枪法从3株紫云英根瘤菌107菌株的胞外多糖合成缺陷变种（Exo-）NA－05、NA－07和NA－08中克隆获得含有107菌株exo基因及Tn5的exo::Tn5片段。以pRK415为载体构建107菌株EcoRI酶切后DNA片段的部分基因库，用exo::Tn5做探针原位杂交得到一个阳性克隆。该克隆的外源片段4．2kb能恢复3个变种的多糖表型及结瘤固氮能力。酶切分析和Southern杂交表明，3株变种中Tn5插入位点相近。 展开更多

关键词 紫云英 鸟枪法 紫云英根瘤菌 exo基因 基因克隆

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利用Tn5定位诱变筛选紫云英根瘤菌Exo^-变种 被引量：1

10

作者 周蓓芸 黄建斌 +1 位作者 粟文英 宋鸿遇 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期51-57,共7页

利用Ｔｎ５定位诱变方法，对质粒ｐＪＢＢ５进行Ｔｎ５插入诱变，得到１０个Ｔｎ５在５９ｋｂＢ５外源片段上有不同插入位点的质粒ＴＮ１１，ＴＮ１１２，ＴＮ２２，ＴＮ２３，ＴＮ３１，ＴＮ４１，ＴＮ９１，ＴＮ１... 利用Ｔｎ５定位诱变方法，对质粒ｐＪＢＢ５进行Ｔｎ５插入诱变，得到１０个Ｔｎ５在５９ｋｂＢ５外源片段上有不同插入位点的质粒ＴＮ１１，ＴＮ１１２，ＴＮ２２，ＴＮ２３，ＴＮ３１，ＴＮ４１，ＴＮ９１，ＴＮ１０１，ＴＮ１３１，ＴＮ１４１。将Ｔｎ１１等分别转移到已经含有不相容质粒ｐＰＨ１ＪＩ的紫云英根瘤菌１０７菌株中，使之发生同源变换。通过抗性选择及表型鉴别，筛选到３株菌落表型干燥（Ｍｕｃ－）的酸性胞外多糖（ＥＰＳ）合成缺陷菌株（Ｅｘｏ－）１０７（ＴＮ２２），１０７（ＴＮ１０１），１０７（ＴＮ１３１）。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析证明这３株变种的Ｔｎ５插入确实是同源交换而不是转座产生，表明经过适当改良的Ｔｎ５定位诱变法可以应用于紫云英根瘤菌Ｅｘｏ－变种的筛选。 展开更多

关键词 定位诱变 变种筛选 紫云英 根瘤菌

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紫云英根瘤菌109菌株的氢氧化电子传递链 被引量：1

11

作者 孙金华 陈秉俭 +1 位作者 杨玉锁 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1990年第2期158-166,共9页

H_2还原减去O_2氧化的差示光谱显示424,522,552,560,603nm峰,鱼腾酮(反竞争性抑制),DBMIB,HQNO,抗霉素A,氰化钠和叠氮化钠(非竞争性抑制)明显抑制吸氢活性,表明细胞色素c,b和a分别参与氢氧化的电子传递。以Dixon作图来确定抑制剂在电子... H_2还原减去O_2氧化的差示光谱显示424,522,552,560,603nm峰,鱼腾酮(反竞争性抑制),DBMIB,HQNO,抗霉素A,氰化钠和叠氮化钠(非竞争性抑制)明显抑制吸氢活性,表明细胞色素c,b和a分别参与氢氧化的电子传递。以Dixon作图来确定抑制剂在电子传递链中结合位点数目,鱼腾酮和DBMIB为单位点结合,HQNO和氰化物为双位点结合,HQNO所引起的部份抑制,可使对氰化钠敏感的结合位点消逝。鱼腾酮与HQNO同时存在时,其叠加或累积抑制效果表明,两种类型的细胞色素b参与氢氧化的电子传递,由H_2到O_2的电子传递于细胞色素b处分叉,对氰化物抑制敏感性也有所不同。 展开更多

关键词 紫云英根瘤菌 氢氧化 电子传递链

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质粒exoR′恢复紫云英根瘤菌胞外多糖缺陷型变种有效结瘤能力 被引量：1

12

作者 龙北国 华征 +1 位作者 郭一松 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1995年第2期183-188,共6页

以ＰＭＮ２作为载体质粒，应用体内克隆技术，从紫云英根瘤菌胞外多糖缺陷型变种ＮＡ－１１中，分离到ｅｘｏＲ′质粒，该杂合质粒带有Ｔｎ５及其插入位点两侧的根瘤菌ＤＮＡ片段。ｅｘｏＲ′质粒能稳定地存在于紫云英根瘤菌中，不仅可... 以ＰＭＮ２作为载体质粒，应用体内克隆技术，从紫云英根瘤菌胞外多糖缺陷型变种ＮＡ－１１中，分离到ｅｘｏＲ′质粒，该杂合质粒带有Ｔｎ５及其插入位点两侧的根瘤菌ＤＮＡ片段。ｅｘｏＲ′质粒能稳定地存在于紫云英根瘤菌中，不仅可纠正紫云英根瘤菌Ｅｘｏ－变种（Ｎｄｖ－）的胞外多糖合成缺陷，也能恢复该变种使宿生植物根部结瘤的能力。 展开更多

关键词 紫云英根瘤菌 结瘤 胞外多糖 缺陷型变种 紫云英

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浑球红细菌谷氨酸合酶大亚单位基因(gltB)的序列分析 被引量：1

13

作者 鲁涛 吴永强 宋鸿遇 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期87-94,共8页

测定了浑球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)谷氨酸合酶大亚单位基因(gltB)及其5'端和3'端的序列,全长为5510bp。序列分析表明,R. sphaeroides gltB基因全长为4636bp。从核苷酸序列推测其蛋白质分子量约为164kD。R. sphaeroides... 测定了浑球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)谷氨酸合酶大亚单位基因(gltB)及其5'端和3'端的序列,全长为5510bp。序列分析表明,R. sphaeroides gltB基因全长为4636bp。从核苷酸序列推测其蛋白质分子量约为164kD。R. sphaeroides gltB基因与Azospirillum brasilense和Escherichia coli的gltB基因DNA序列有很高的同源性。其蛋白质氨基酸序列与A. brasilense gltB基因产物GltB也具有很高的同源性。此外,还对R. sphaeroides GltB的各可能功能区进行了分析,发现它们具有很高的保守性。 展开更多

关键词 浑球红细菌 谷氨酸合酶基因 DNA序列

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浑球红细菌（R．srhaeroides）glnBA基因克隆及其物理图谱 被引量：1

14

作者 韩涛 吴永强 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1996年第2期177-183,共7页

从浑球红细菌的基因文库中筛选到ｐＨＴ３、ｐＨＴ１０及ｐＨＴ３５三个阳性克隆，其中质粒ｐＨＴ１０与ｐＨＴ３５能遗传互补英膜红细菌的谷氨酰胺缺陷型Ｇ２９，使其ＧＳ酶及固氮酶活性得到恢复。对质粒ｐＨＴ１０上的ｇｌｎＡ同源片... 从浑球红细菌的基因文库中筛选到ｐＨＴ３、ｐＨＴ１０及ｐＨＴ３５三个阳性克隆，其中质粒ｐＨＴ１０与ｐＨＴ３５能遗传互补英膜红细菌的谷氨酰胺缺陷型Ｇ２９，使其ＧＳ酶及固氮酶活性得到恢复。对质粒ｐＨＴ１０上的ｇｌｎＡ同源片段进行了亚克隆和限制性内切酶图谱分析，确定了浑球红细菌ｇｌｎＢ与ｇｌｎＡ之间存在连锁关系。 展开更多

关键词 浑球红细菌 光合细菌 基因克隆 物理图谱

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紫云英根瘤菌菌株107exo基因簇的遗传互补分析 被引量：1

15

作者 黄建斌 王江海 +2 位作者 华征 粟文英 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1996年第2期184-190,共7页

紫云英根瘤菌菌株１０７经Ｔｎ５插入诱变，得到１２株胞外多糖缺陷型变种，以质粒ｐＭＮ２为载体，从其中７株ＥＰＳ－变种内分别构建了７个Ｒ－Ｐｒｉｍｅ质粒（ｅｘｏＲ＇），大部分变种的ＥＰＳ－表型可被ｅｘｏＲ＇互补，恢复野生... 紫云英根瘤菌菌株１０７经Ｔｎ５插入诱变，得到１２株胞外多糖缺陷型变种，以质粒ｐＭＮ２为载体，从其中７株ＥＰＳ－变种内分别构建了７个Ｒ－Ｐｒｉｍｅ质粒（ｅｘｏＲ＇），大部分变种的ＥＰＳ－表型可被ｅｘｏＲ＇互补，恢复野生型表型（ＥＰＳ＋）。互补表明，１２株ＥＰＳ－变种可分为６个不同的互补群，其中５个在遗传上连锁。ｅｘｏＲ＇酶切分析，除ｅｘｏＲ＇－０２，ｅｘｏＲ＇－０４外，其余５只的外源片段均整合于ＰＭＮ２的两同向重复序列ＩＳ２１之间。 展开更多

关键词 紫云英 遗传分析 紫云英根瘤菌 exo基因簇

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紫云英根瘤菌胞外多糖缺失变种及其结瘤性状的变化

16

作者 龙北国 王江海 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1992年第3期239-245,共7页

根据紫云英根瘤菌在寄主豆科植物紫云英上的结瘤能力,经转座子Tn5诱变获得的18株Exo^-变种可分为4种结瘤类群(A-D):A类变种诱导植物产生小的瘤状突起,不具固氮能力;B类变种形成无效根瘤;C类变种产生固氮效率降低的根瘤;D类变种丧失了结... 根据紫云英根瘤菌在寄主豆科植物紫云英上的结瘤能力,经转座子Tn5诱变获得的18株Exo^-变种可分为4种结瘤类群(A-D):A类变种诱导植物产生小的瘤状突起,不具固氮能力;B类变种形成无效根瘤;C类变种产生固氮效率降低的根瘤;D类变种丧失了结瘤能力。电镜分析显示:无效瘤和瘤状突起中不存在类菌体区,根瘤细胞均为不含细菌的空细胞,侵染线不能穿透到根瘤细胞中。说明紫云英根瘤菌胞外多糖很可能参与有效根瘤的形成。 展开更多

关键词 结瘤 根瘤菌 紫云英 胞外多糖

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紫云英根瘤菌109菌株吸氢特性及碳底物的调节 被引量：1

17

作者 孙金华 陈秉俭 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1989年第4期382-387,共6页

紫云英根瘤菌109菌株完整细胞的吸氧活性,在空气气相中衰减快,加氢或降低温度,衰减延缓。完整细胞的吸氢反应受体,包括甲基蓝、氧、铁氰化钾、TTC、甲基紫精、Cyt C_3、硝酸钾、DCPIP和反丁烯二酸盐的表现不相同。当氧为受体时,气相氧... 紫云英根瘤菌109菌株完整细胞的吸氧活性,在空气气相中衰减快,加氢或降低温度,衰减延缓。完整细胞的吸氢反应受体,包括甲基蓝、氧、铁氰化钾、TTC、甲基紫精、Cyt C_3、硝酸钾、DCPIP和反丁烯二酸盐的表现不相同。当氧为受体时,气相氧浓度为5％,吸氢值最大,甲基蓝为受体时,吸氢活性高。另外,氧为受体的吸氢受到碳水化合物抑制,并与基础吸氧速率相关。紫云英根瘤菌的氢氧化与碳水化合物氧化竞争电子传递途径。 展开更多

关键词 紫云英 根瘤菌 吸氢活性 调节 氢酶

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影响紫云英根瘤菌入侵和根瘤发育的exo基因的克隆及分析 被引量：1

18

作者 黄建斌 周蓓芸 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1997年第3期267-273,共7页

紫云英根瘤菌菌株107的3个胞外多糖缺陷突变株NA－01、02、04不具备诱导宿主植物紫云英结瘤的能力。以NA-01突变位点的DNA片段为探针，从可互补这3个变种的exoR′－11质粒上亚克隆到2．6kb的DNA片段。互补试验表明，2．6kb的片段不仅可... 紫云英根瘤菌菌株107的3个胞外多糖缺陷突变株NA－01、02、04不具备诱导宿主植物紫云英结瘤的能力。以NA-01突变位点的DNA片段为探针，从可互补这3个变种的exoR′－11质粒上亚克隆到2．6kb的DNA片段。互补试验表明，2．6kb的片段不仅可纠正突变株的胞外多糖缺陷表型，而且使变种恢复诱导宿主植物形成有效根瘤的能力。2．6kb片段经Tn5定位突变后丧失这种恢复能力，表明该片段带有对应于3个变种的野生型基因。 展开更多

关键词 紫云英 根瘤菌 exo基因 克隆 胞外多糖 生物固氮

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紫云英根瘤菌糖基转移酶基因exoL的定位突变及序列分析 被引量：1

19

作者 宫锋 李强 +1 位作者 周蓓芸 宋鸿遇 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1998年第4期373-379,共7页

利用转座子Tn5对质粒pJB-B6既定位诱变，经同源交换，筛选获得一株Rhizobiumhuakuii107胞外糖合成缺陷（Exo－）变种RH983。三亲本杂交实验显示，pJB-B6及其亚克隆pJB-B601均可纠正变种RH983的胞外多糖合成缺陷。pJB-B601的2．3kbDNA片... 利用转座子Tn5对质粒pJB-B6既定位诱变，经同源交换，筛选获得一株Rhizobiumhuakuii107胞外糖合成缺陷（Exo－）变种RH983。三亲本杂交实验显示，pJB-B6及其亚克隆pJB-B601均可纠正变种RH983的胞外多糖合成缺陷。pJB-B601的2．3kbDNA片段的核苷酸顺序表明，该片段内存在一个完整的开放阅读框架（ORF）。ORF全长1170bp，编码390个氨基酸的蛋白，该蛋白与Rhi－zobiummeliloti的糖基转移酶ExoL有56．7％．的同源性，称为RhexoL。利用启动子探测质粒，构建了RhexoL-lacZ转录融合子，发现RhexoL基因5’上游有较强的启动子活性。 展开更多

关键词 紫云英 根瘤菌 糖基转移酶基因 DNA序列

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豇豆根瘤菌NGR234和紫云英根瘤菌109感染紫云英的比较研究

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作者 陈汉才 郁宝麟 +1 位作者 郭一松 宋鸿遇 《实验生物学报》 CSCD 1990年第4期381-389,共9页

利用光学和电子显微镜对紫云英根瘤菌菌株109和广宿主的快生型根瘤菌菌株NGR234感染温带型豆科植物紫云英进行了研究,结果表明根瘤菌感染紫云英是通过在根毛中形成侵染线的途径。电子显微镜研究揭示了固氮根瘤中细胞内侵染线的存在。接... 利用光学和电子显微镜对紫云英根瘤菌菌株109和广宿主的快生型根瘤菌菌株NGR234感染温带型豆科植物紫云英进行了研究,结果表明根瘤菌感染紫云英是通过在根毛中形成侵染线的途径。电子显微镜研究揭示了固氮根瘤中细胞内侵染线的存在。接种二天后,首先可观察到根毛的卷曲或分枝。接种四至五天后,在每株植物卷曲的根毛中可看到侵染线。接种八至十天后的植株出现肉眼可见的根瘤。菌株NGR234能够在紫云英上诱导根毛的卷曲,侵染线和根瘤的形成,但所形成的根瘤却未能固氮,根瘤中无明显的类菌体区,但有少数包有细菌的侵染线。NGR234抗抗菌素的衍生菌均未能使紫云英结瘤。将NGR234的共生质粒转移至三叶草、苜蓿、豌豆、快生型大豆根瘤菌和农杆菌,亦未能使这些细菌获得紫云英上结瘤的能力。 展开更多

关键词 紫云英 根瘤菌感染 侵染线

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