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绵羊肺炎支原体Y98 P30基因的克隆、表达及免疫试验 被引量:8
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作者 赵红艳 刘文青 +3 位作者 车腾飞 卢金华 赵宝华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期397-400,405,共5页
根据猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)跨膜蛋白P30基因序列设计引物,通过PCR克隆出绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)膜蛋白P30基因片段。通过对该序列的同源性分析表明MOP30基因与Mhp P30基因核苷酸序列同源性为... 根据猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)跨膜蛋白P30基因序列设计引物,通过PCR克隆出绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)膜蛋白P30基因片段。通过对该序列的同源性分析表明MOP30基因与Mhp P30基因核苷酸序列同源性为79%。抗原表位及跨膜结构预测的结果表明,MO P30基因与Mhp P30基因的抗原表位及跨膜结构均具有高度的一致性。该片段中含1个TGA编码Trp,而不是终止密码子。将P30基因与原核表达载体pET-28a连接构建pET-28a-P30表达质粒,转化受体菌Rossta得到重组菌株Rossta(pET-28a-P30)。经诱导后SDS-PAGE表明有30 000左右的目的条带出现;Western blot表明Rossta(pET-28a-P30)表达的30 000蛋白主要以包涵体的形式存在;小鼠免疫试验表明Rossta(pET-28a-P30)原核表达的蛋白对小鼠具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体Y98 P30基因 基因表达 免疫动物
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保定地区1617例遗传咨询者外周血染色体核型分析 被引量:1
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作者 殷晨星 +3 位作者 姚克文 李伟 阎丹丹 卢莹 《河北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第2期187-193,共7页
为探讨保定地区遗传咨询者染色体异常核型类型及检出率,并分析染色体异常与临床表型之间的相关性,选取2018年1月至2021年10月在保定市妇幼保健院就诊的1 617例遗传咨询者作为研究对象,采集外周血进行淋巴细胞培养,常规方法制备染色体,G... 为探讨保定地区遗传咨询者染色体异常核型类型及检出率,并分析染色体异常与临床表型之间的相关性,选取2018年1月至2021年10月在保定市妇幼保健院就诊的1 617例遗传咨询者作为研究对象,采集外周血进行淋巴细胞培养,常规方法制备染色体,G显带后进行染色体核型分析.共检出异常核型54例,异常检出率为3.34%,包括数目异常14例(25.93%)和结构异常40例(74.07%).异常检出率最高为智力低下组(28.21%),主要见于21-三体;其次是发育异常组(26.31%),主要见于特纳综合征;不良孕产史组是构成遗传咨询的主要原因,异常检出率为2.40%,主要见于平衡易位和罗氏易位;不孕不育组异常检出率为2.64%.保定地区遗传咨询者染色体异常是导致不良孕产史、不孕不育、发育异常、智力低下等疾病的重要原因之一,应着重对此类患者进行外周血染色体检测,以寻找病因、指导优生优育、提高保定地区人口素质. 展开更多
关键词 遗传咨询者 临床表型 外周血 核型分析 染色体异常
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人类精原细胞分化过程的生物信息学分析
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作者 殷晨星 李澎涛 +6 位作者 师楠 陈英 邢鹏 孟娜娜 张康 王玉真 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1237-1243,共7页
目的为了明确精子发生过程中的关键基因和生物学过程, 挖掘人类精原细胞(spermatogonia, SPG)分化过程中的差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)及其信号通路, 探索精子发生早期的分子机制, 增加对SPG分化过程的分子生... 目的为了明确精子发生过程中的关键基因和生物学过程, 挖掘人类精原细胞(spermatogonia, SPG)分化过程中的差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)及其信号通路, 探索精子发生早期的分子机制, 增加对SPG分化过程的分子生物学认识。方法从公共数据库下载人类未分化精原细胞(undifferentiated spermatogonia, uSPG)和分化精原细胞(differentiating spermatogonia, dSPG)的转录组数据, 利用Hisat2和StingTie筛选DEGs, 并对差异表达基因进行GO和KEGG功能富集分析。利用MACS2软件对ATAC-seq数据中开放染色质区域进行富集分析。结果共筛选出8 532个DEGs, 包括4 127个上调基因和4 405个下调基因, 它们通过一些重要的生物学过程, 如细胞周期、细胞因子介导的信号通路、有机物代谢过程、细胞运动、甲基化等来调控SPG的分化过程。KEGG富集分析结果表明一些重要信号通路包括FoxO信号通路、JAK-STAT信号通路等在SPG分化过程中具有重要作用。GO富集分析结果显示甲基化在SPG分化过程中发挥重要作用, 甲基化相关基因表达差异显著。组蛋白甲基化词条相关基因TDRDs家族显著富集, 9个TDRDs基因在dSPG中表达更加活跃。结论本研究通过生物信息学分析鉴定了SPG分化过程中的差异表达基因, 明确了关键基因在转录和染色质水平的差异, 为SPG分化机制研究奠定了重要的理论基础。 展开更多
关键词 精子发生 精原细胞 生物信息学 不育 男性 分化
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羊水染色体核型分析降低出生缺陷的研究 被引量:2
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作者 于俊娜 +3 位作者 田敬茹 李伟 阳剑 李强 《河北医科大学学报》 CAS 2022年第2期173-176,217,共5页
目的探讨羊水染色体异常核型类型、分布及不同产前诊断指征的异常核型检出情况。方法选取在保定市妇保健院具有产前诊断指征的孕妇1305例,进行羊膜腔穿刺术及羊水染色体核型分析。结果1305例羊水标本共检出异常核型92例,检出率为7.05%,... 目的探讨羊水染色体异常核型类型、分布及不同产前诊断指征的异常核型检出情况。方法选取在保定市妇保健院具有产前诊断指征的孕妇1305例,进行羊膜腔穿刺术及羊水染色体核型分析。结果1305例羊水标本共检出异常核型92例,检出率为7.05%,包括数目异常68例(73.91%)和结构异常24例(26.09%);异常核型以21-三体最常见(48.91%),其次是性染色体数目异常(23.91%)。在单项指征中,检出率最高为无创产前筛查(non-invasive prenatal testing,NIPT)高风险(50.00%),其次是夫妇一方染色体异常(38.46%);高龄合并NIPT高风险组异常检出率显著高于单纯高龄(P<0.001)。结论孕中期对有产前诊断指征的孕妇进行羊水染色体核型分析,有助于发现胎儿染色体异常核型,降低出生缺陷发生率。NIPT对筛查胎儿染色体异常准确率较高,临床上可以考虑高龄孕妇首选NIPT筛查策略。 展开更多
关键词 羊水 染色体 核型分析 出生缺陷
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染料木黄酮的抗巨噬细胞泡沫化效应及其分子机制研究 被引量:1
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作者 刘晨 +5 位作者 赵颖 孟雅娟 路新华 赵宝华 郑智慧 段宝玲 《中国医药生物技术》 2013年第1期13-18,共6页
目的研究染料木黄酮对动脉粥样硬化过程中巨噬细胞泡沫化的抑制作用,并探讨其抗泡沫化的分子作用机制。方法采用体外OX.LDL诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7产生泡沫化,通过油红0染色观察细胞内脂质聚集程度判定细胞的泡沫化程度以及... 目的研究染料木黄酮对动脉粥样硬化过程中巨噬细胞泡沫化的抑制作用,并探讨其抗泡沫化的分子作用机制。方法采用体外OX.LDL诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7产生泡沫化,通过油红0染色观察细胞内脂质聚集程度判定细胞的泡沫化程度以及药物效应;利用报告基因细胞检测方法评价染料木黄酮对代谢性核受体过氧化物酶体增殖物激活受体PPAR和肝x受体LXR的转录调控功能的激动作用;利用实时定量PCR检测染料木黄酮对巨噬细胞中OX.LDL摄取以及胆固醇逆转运相关基因的mRNA水平。结果OX—LDL处理的空白组小鼠RAW264.7单核巨噬细胞内聚积大量的脂质,而经过10gg/ml染料木黄酮处理后的RAW264.7细胞内脂滴量明显减少,细胞泡沫化程度被大幅度降低。瞬时转染的细胞报告基因的转录激活效应研究结果说明,染料木黄酮对核受体PPAR和LXR均有较高的转录激活效应,其EC50值分别为3.5~9.2gg/ml和1.6~3_3gg/ml。定量PCR研究结果显示,染料木黄酮可以有效地使巨噬细胞中的胆固醇逆转运基因LXRa、LXRl3、ABCAl、ABCGl、和SR-B1的表达上调,而作为主要摄取OX—LDL受体的CD36基因的表达无明显变化。结论染料木黄酮可以有效抑制动脉粥样硬化过程中巨噬细胞的泡沫化,而该作用机制可能是通过激活PPAR和LXR通路,上调胆固醇逆转运蛋白的ABCAl、ABCGl、LXRGt、LXR13、SR.131基因的表达,增强了巨噬细胞的胆固醇外排,从而防止动脉粥样硬化的发生和发展。 展开更多
关键词 染料木黄酮 动脉粥样硬化 泡沫细胞 胆固醇逆转运
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