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CEMIP调控Src/AKT/STAT3信号通路对非小细胞肺癌上皮间质转化及细胞侵袭、迁移的影响 被引量：7
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作者 莫小香 黎骊 +4 位作者 黄国林 宋锦静 于菲 韦彤彤 阳洁 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第1期16-22,共7页
目的:探讨细胞迁移诱导透明质酸结合蛋白(CEMIP)对非小细胞肺癌(NSCLC)上皮间质转化(EMT)及细胞迁移、侵袭的影响及其可能的分子机制。方法:采用免疫荧光染色法检测NSCLC患者病理标本中CEMIP的表达。以高表达CEMIP的NSCLC细胞A549、H129... 目的:探讨细胞迁移诱导透明质酸结合蛋白(CEMIP)对非小细胞肺癌(NSCLC)上皮间质转化(EMT)及细胞迁移、侵袭的影响及其可能的分子机制。方法:采用免疫荧光染色法检测NSCLC患者病理标本中CEMIP的表达。以高表达CEMIP的NSCLC细胞A549、H1299为研究对象,采用慢病毒转染细胞,干扰CEMIP的表达,建立干扰CEMIP表达的NSCLC细胞模型,构建成功后,将细胞分为干扰CEMIP组(shCEMIP组)和阴性对照组(shNC组);采用实时荧光定量PCR(qPCR)、Western blotting检测各组细胞中CEMIP及EMT标志物、信号通路蛋白的表达水平变化;划痕实验、Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力。结果:6对肺腺癌组织中CEMIP表达量均高于其配对癌旁正常肺泡组织,约为1.56倍(P<0.05)。同样地,肺癌细胞A549和H1299的CEMIP mRNA及蛋白表达水平均显著高于肺正常细胞BEAS-2B(均P<0.05)。慢病毒干扰A549和H1299细胞的CEMIP后,shCEMIP组CEMIP mRNA及蛋白水平较shNC组均降低(均P<0.05);Transwell和划痕结果显示,与shNC组比较,shCEMIP组细胞的迁移、侵袭细胞数均明显减少(均P<0.05);细胞愈合率明显降低(P<0.05)。Western blotting结果显示,干扰CEMIP后可上调细胞的上皮标志物E-cadherin蛋白的表达(P<0.05),同时下调间质标记物N-cadherin、Vimentin、Twist1、Snail1蛋白的表达(P<0.05);转移相关信号通路蛋白Src、p-AKT、STAT3表达水平在干扰CEMIP后均出现明显下降(均P<0.05)。结论:CEMIP在NSCLC细胞中高表达,下调CEMIP的表达或可通过抑制Src/AKT/STAT3通路逆转EMT过程,从而降低细胞的迁移、侵袭能力。 展开更多
关键词 CEMIP 非小细胞肺癌 侵袭转移 EMT Src/AKT/STAT3
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缝隙连接蛋白26在肺腺癌相关成纤维细胞中的表达及临床意义
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作者 宋锦静 韦彤彤 +4 位作者 梁凯 黄志广 陈罡 茅乃权 阳洁 《中国癌症防治杂志》 CAS 2021年第2期201-206,共6页
目的探讨缝隙连接蛋白26(connexin 26,Cx26)在肺腺癌相关成纤维细胞中的表达及其临床意义。方法收集2018年11月至2019年5月于广西医科大学附属肿瘤医院6例手术切除肺腺癌癌组织及相应癌旁组织,分离原代肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associ... 目的探讨缝隙连接蛋白26(connexin 26,Cx26)在肺腺癌相关成纤维细胞中的表达及其临床意义。方法收集2018年11月至2019年5月于广西医科大学附属肿瘤医院6例手术切除肺腺癌癌组织及相应癌旁组织,分离原代肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)和正常肺成纤维细胞(normal lung fibroblasts,NLFs);采用光学显微镜观察细胞形态,并结合Western blot和细胞免疫荧光染色检测CAFs标志物α-SMA、E-cadherin和Vimentin的表达,鉴定原代成纤维细胞;qRT-PCR检测Cx26 mRNA表达水平。组织免疫荧光染色法检测Cx26在2013年1月至2018年12月收集的22例肺腺癌癌及癌旁组织中的分布及表达情况。结果成功分离原代CAFs和NLFs,镜下可见细胞呈纺锤形,两者均表达α-SMA、Vimentin,但仅微量表达E-cadherin,且CAFs较NLFs高表达α-SMA(P<0.001)。qRT-PCR检测结果显示,Cx26表达水平在CAFs中随肿瘤分期增加呈持续下调趋势(t=5.684,P=0.011);组织免疫荧光染色检测结果显示,Cx26在肺腺癌组织中的表达低于癌旁组织(t=2.609,P=0.016)。结论肿瘤微环境中CAFs的Cx26表达下调可能与肺腺癌更高分期及恶性进展有关。 展开更多
关键词 肺腺癌 成纤维细胞 缝隙连接蛋白 肿瘤相关成纤维细胞 正常肺成纤维细胞
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