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题名蒙成药安神补心六味丸多维鉴定研究
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作者
边澈
宋跃岳
杨燕云
包桂花
许亮
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机构
辽宁中医药大学药学院
内蒙古民族大学
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出处
《辽宁中医药大学学报》
CAS
2024年第3期22-27,共6页
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基金
国家科技部“十三五”项目(2018YFC1708200)
中央本级重大增减支项目(2060302)
+2 种基金
内蒙古自治区重大项目(2019ZD004)
辽宁省“百千万人才工程”资助项目(2021921039)
辽宁省教育厅面上项目(JYTMS20231834)。
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文摘
目的 建立蒙成药安神补心六味丸组成药材基原系统化的鉴定方法。方法 通过高通量测序技术对蒙成药安神补心六味丸进行总DNA的提取,并对其COI及ITS2序列进行PCR扩增,双端测序后进行序列的整理和聚类分析,并与组成安神补心六味丸中牛心的COI序列,木香、丁香、广枣、肉豆蔻药材的ITS2序列进行测序的结果利用邻接法构建系统树。利用薄层色谱方法以正己烷-石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯-冰醋酸(6∶2∶3∶0.2)为展开剂。展开后烘箱烘干,置紫外光灯(254 nm)下检视。最后对蒙成药安神补心六味丸进行光学显微鉴定观察,确定其显微特征,并将显微特征与组成中药显微特征进行对应。结果 基于对蒙成药安神补心六味丸的ITS2序列进行高通量测序后得到高质量序列共138 633条,经过比对与安神补心六味丸组成药味相关的序列共584条,分别为木香(Aucklandia lappa)、南酸枣(Choerospondias axillaris)、丁香(Eugenia caryophyllata),均为木香、广枣、丁香药材的正品植物来源。在新鲜牛心中成功提取到COI序列,但未提取到安神补心六味丸成药及干燥牛心的COI序列,木香、丁香、广枣、肉豆蔻的ITS2序列成功扩增,扩增的ITS2序列与高通量测序比对后获得的OTU代表序列在系统树与木香、丁香、广枣分别聚为一支。安神补心六味丸与枫香脂及对照药材在相同条件下,薄层色谱同一处出现斑点。在对成药进行显微鉴定后发现与组成药味一致的显微特征。结论 结果表明以ITS2序列作为条形码,利用高通量测序的ITS2序列技术为主要鉴别手段,结合薄层色谱及对蒙成药显微特征观察,可以对安神补心六味丸中6种中药的基原进行准确的鉴别。
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关键词
高通量测序技术
安神补心六味丸
蒙成药
中药鉴定
薄层色谱法
显微特征
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Keywords
high-throughput sequencing
Anshen Buxin Liuwei Pills(安神补心六味丸)
Inner Mongolian medicine
identification of Chinese medicine
thin layer chromatography
microscopic character
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分类号
R289.5
[医药卫生—方剂学]
R291.2
[医药卫生—中药学]
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