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3种致猪腹泻病毒的多重RT-PCR检测 被引量：34
1
作者 田小艳 孙华 +3 位作者 邓雨修 苏润环 王东东 宋延华 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第9期54-57,共4页
试验建立了用于检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)与猪轮状病毒(PRV)的三重RT-PCR方法,以调查猪群中腹泻病毒感染情况。通过该方法对采自广东省规模化猪场的95份临床疑似病毒性腹泻病料进行了检测,结果表明,猪流行... 试验建立了用于检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)与猪轮状病毒(PRV)的三重RT-PCR方法,以调查猪群中腹泻病毒感染情况。通过该方法对采自广东省规模化猪场的95份临床疑似病毒性腹泻病料进行了检测,结果表明,猪流行性性腹泻病毒阳性率为33.7%,猪传染性胃肠炎病毒阳性率为4.2%,猪轮状病毒阳性率为20%;猪流行性性腹泻病毒和猪轮状病毒混合感染率为8.4%,猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒混合感染率为2.1%。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 猪轮状病毒 猪传染性胃肠炎病毒 多重RT-PCR
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猪圆环病毒2型疫苗研究进展 被引量：27
2
作者 欧阳海平 潘永飞 宋延华 《动物医学进展》 北大核心 2020年第1期98-103,共6页
猪圆环病毒2型(PCV2)感染后会导致断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)等"猪圆环病毒相关疾病"(PCVADs),给全球养猪业造成了巨大的经济损失。疫苗免疫是防控该病的有效手段,近年来市场上推出了PCV2灭活疫苗、嵌合疫苗和亚单位疫苗... 猪圆环病毒2型(PCV2)感染后会导致断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)等"猪圆环病毒相关疾病"(PCVADs),给全球养猪业造成了巨大的经济损失。疫苗免疫是防控该病的有效手段,近年来市场上推出了PCV2灭活疫苗、嵌合疫苗和亚单位疫苗。PCV2变异较快,主要临床流行毒株从PCV2b逐渐演变为PCV2d,现有商业化疫苗免疫效果需进一步研究证实。论文就近年来国内外PCV2传统疫苗、新型基因工程疫苗、PCV2疫苗与其他疫苗联合免疫的研究进展进行综述,旨在为猪圆环病毒相关疾病的防控及疫苗的开发与利用提供参考。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 疫苗 研究
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广东省新兴县鸭圆环病毒感染的PCR诊断及序列分析 被引量：15
3
作者 黎敏 宋延华 +3 位作者 温纳相 周全 周丽 宋永峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期164-167,共4页
根据已发表的鸭圆环病毒(duck circovirus,DuCV)序列,合成了1对检测引物。利用此对引物对广东省新兴县发生的疑似圆环病毒感染的患病番鸭的肝、胰腺、心、肾、脾、肺、血液、腔上囊、胸腺、哈氏腺、粪便和羽毛进行了PCR扩增。结果显示,... 根据已发表的鸭圆环病毒(duck circovirus,DuCV)序列,合成了1对检测引物。利用此对引物对广东省新兴县发生的疑似圆环病毒感染的患病番鸭的肝、胰腺、心、肾、脾、肺、血液、腔上囊、胸腺、哈氏腺、粪便和羽毛进行了PCR扩增。结果显示,获得了与预期619 bp大小相符的DNA片段,经测序确认其为DuCV特异序列,证实鸭群感染了鸭圆环病毒。然后,再设计了2对引物从鸭组织提取的DNA中扩增出2条片段,拼接校对后获得了全基因组序列,并对其进行了分析。结果表明,在感染鸭体内各组织器官中都有DuCV存在,该株病毒基因组序列全长为1 988 bp,与部分已登录GenBank的DuCV同源性高达97.0%以上。 展开更多
关键词 鸭 圆环病毒 聚合酶链式反应 序列分析
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应用PCR快速诊断番鸭细小病毒病和小鹅瘟 被引量：13
4
作者 宋永峰 温纳相 +5 位作者 宋延华 周丽 黎敏 周全 管凤霞 高恒 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第5期49-52,共4页
根据GenBank中已发表的番鸭细小病毒(MDPV)和鹅细小病毒(GPV)全序列,分别设计并合成特异性引物MDPVF/R和GPVF/R,对细小病毒属成员GPV、MDPV、犬细小病毒(CPV)及鸭常见病毒病病原如鸭瘟病毒(DPV)、鸭病毒性肝炎病毒(DHV)、鸭呼肠病毒(DRV... 根据GenBank中已发表的番鸭细小病毒(MDPV)和鹅细小病毒(GPV)全序列,分别设计并合成特异性引物MDPVF/R和GPVF/R,对细小病毒属成员GPV、MDPV、犬细小病毒(CPV)及鸭常见病毒病病原如鸭瘟病毒(DPV)、鸭病毒性肝炎病毒(DHV)、鸭呼肠病毒(DRV)、流感病毒(AIV)的核酸进行PCR扩增。结果表明,引物特异性良好,引物MDPVF/R只能特异性扩增出MDPV的714 bp基因片段,引物GPVF/R只能特异性扩增出GPV的570 bp基因片段;敏感性试验结果表明,MDPV DNA最低检出量为17.5 pg,GPV DNA最低检出量为13.7 pg。该方法的建立对这两种疾病的鉴别诊断具有重要意义。 展开更多
关键词 PCR 鉴别诊断 番鸭细小病毒 鹅细小病毒
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犬场蚊子与犬细小病毒 被引量：11
5
作者 杨德威 宋延华 刘福安 《广东畜牧兽医科技》 2000年第4期16-18,共3页
2 0 0 0年 4月 ,应用套式PCR技术从犬场蚊子的血液样品中检测出犬细小病毒。将分离到的犬细小病毒VP2 Y34基因片段克隆到PMD1 8 T载体 ,其病毒基因组CPV VP2 Y34序列测定结果显示与作者在GENEBANK发表的肺病变犬细小病毒CPV HN 1株有
关键词 犬细小病毒 蚊子 套式PCR 检测
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鸡传染性支气管炎病毒S1基因在昆虫细胞中的高效表达 被引量：8
6
作者 宋延华 刘福安 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期421-424,共4页
将鸡传染性支气管炎病毒（ Ｉ Ｂ Ｖ） Ｓ１ 基因 ｃ Ｄ Ｎ Ａ 克隆至含有起始密码 Ａ Ｔ Ｇ 的转移载体 ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３／４，构建成重组转移质粒 ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３／４ Ｓ１． Ｈｏｌｔｅ，再与粉纹夜... 将鸡传染性支气管炎病毒（ Ｉ Ｂ Ｖ） Ｓ１ 基因 ｃ Ｄ Ｎ Ａ 克隆至含有起始密码 Ａ Ｔ Ｇ 的转移载体 ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３／４，构建成重组转移质粒 ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３／４ Ｓ１． Ｈｏｌｔｅ，再与粉纹夜蛾核型多角体病毒 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ Ｓ Ｖ Ｉ－ Ｇ Ｄ Ｎ Ａ（ Ｏ Ｃ Ｃ－ ， ｇａｌ＋ ）共转染 草地夜蛾（ Ｓｆ９） 细胞， 经空斑纯化得 到已插入 Ｓ１ 基 因并能形成多角体 的重组病毒 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３／４） Ｓ１． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 。以重组毒株感染 Ｔｎ５ Ｂ１ 细胞，在不同时间收取感染了病毒的细胞进行 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 与 Ｗ ｅｓｔｅｒｎ 印迹检测。 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３／４） Ｓ１． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 在感染的细胞中高效表达了 Ｓ１ 基因，表达产物为约 １００ ０００ 的融合蛋白，与预计的表达修饰后的产物大小相符，推测此蛋白已糖基化。 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ凝胶薄层色谱分析结果显示，感染病毒后 ４８、７２、９６ ｈ， Ｓ１ 蛋白分别占细胞内总蛋白量的 ２８７％ 、３５８％ 、３７１％ 。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 IBV 昆虫细胞 传染性支气管炎病毒 S1基因 杆状病毒 表达
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应用套式PCR在MDCK细胞系中发现犬细小病毒 被引量：10
7
作者 杨德威 宋延华 刘福安 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期81-83,共3页
本研究自 1 997年至 1 999年从国内部分大学实验室、卫生防疫站和动检局陆续收集 1 1个犬肾 (MDCK)细胞系样品 ,选取犬细小病毒基因组的VP2 基因上 4段核苷酸序列作引物 ,对样品DNA进行套式PCR(NestedPCR)检测 ;PCR扩增产物经 0 0 1g... 本研究自 1 997年至 1 999年从国内部分大学实验室、卫生防疫站和动检局陆续收集 1 1个犬肾 (MDCK)细胞系样品 ,选取犬细小病毒基因组的VP2 基因上 4段核苷酸序列作引物 ,对样品DNA进行套式PCR(NestedPCR)检测 ;PCR扩增产物经 0 0 1g/mL琼脂糖凝胶电泳和克隆到pGEM-T载体并进行核苷酸序列测序鉴定后 ,发现我国MDCK细胞系中存在犬细小病毒的传代病毒株 该病毒基因组部分序列测定结果显示与犬细小病毒CPV N株有 91 %同源性 . 展开更多
关键词 犬细小病毒 MDCK细胞 套式PCR 传氏病毒污染
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含有IBVS1基因的昆虫杆状病毒表达载体的构建 被引量：4
8
作者 宋延华 刘福安 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期1-4,共4页
以含有鸡传染性支气管炎病毒Ｈｏｌｔｅ株Ｓ１基因的重组质粒ｐＵＣ１８Ｓ１．Ｈｏｌｔｅ和ｐＵＣ１８Ｓ′１．Ｈｏｌｔｅ为材料，分别构建了可表达ＩＢＶＳ１基因的昆虫杆状病毒转移载体质粒ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３Ｓ１．Ｈｏｌｔ... 以含有鸡传染性支气管炎病毒Ｈｏｌｔｅ株Ｓ１基因的重组质粒ｐＵＣ１８Ｓ１．Ｈｏｌｔｅ和ｐＵＣ１８Ｓ′１．Ｈｏｌｔｅ为材料，分别构建了可表达ＩＢＶＳ１基因的昆虫杆状病毒转移载体质粒ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３Ｓ１．Ｈｏｌｔｅ（含ＩＢＶ先导序列）、ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３／４Ｓ１．Ｈｏｌｔｅ（ＩＢＶ先导序列作为融合短肽）、ｐＡｃＧＨＬＣＳ１． 展开更多
关键词 S1基因 杆状病毒 表达载体 构建 IBV 鸡
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鸡传染性支气管炎病毒S1基因在昆虫细胞中表达水平初探 被引量：5
9
作者 宋延华 刘福安 《中国病毒学》 CAS CSCD 1999年第3期255-258,共4页
将含有鸡传染性支气管炎病毒 Ｓ１ 基因ｃ Ｄ Ｎ Ａ 的重组转移质粒ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３ Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ 和ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３／４ Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ 分别与粉纹夜蛾核型多角体病毒 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ Ｓ ... 将含有鸡传染性支气管炎病毒 Ｓ１ 基因ｃ Ｄ Ｎ Ａ 的重组转移质粒ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３ Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ 和ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３／４ Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ 分别与粉纹夜蛾核型多角体病毒 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ Ｓ Ｖ Ｉ－ Ｇ Ｄ Ｎ Ａ（ Ｏ Ｃ Ｃ－ ，ｇａｌ＋ ） 共转染草地夜蛾（ Ｓｆ９） 细胞，经空斑纯化得到重组病毒 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３） Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 和 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３／４） Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 。将重组毒株分别感染 Ｔｎ５ Ｂ１ 细胞，并进行 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 与 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ 检测。结果表明， Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３／４） Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 在感染的细胞中高效表达了 Ｓ１ 蛋白， Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 凝胶薄层色谱分析结果显示，感染病毒后７２ ｈ Ｓ１ 蛋白的表达量占细胞内总蛋白量的３５ ．８ ％ ，而 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３） Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 感染的细胞内检测不出 Ｓ１ 蛋白。经分析认为这一差异主要来自 Ｓ１ 基因翻译起始位点及其附近的周围环境。 展开更多
关键词 传染性支气管炎 病毒 S1基因 杆状病毒 表达 鸡
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我国猪繁殖与呼吸综合征流行概况 被引量：10
10
作者 王东东 邓雨修 +5 位作者 招丽婵 李春梅 苏润环 徐贵娟 杨明柳 宋延华 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第5期101-104,共4页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是目前危害世界养猪业最严重的传染病之一,并在我国广泛流行。2006年我国出现的美洲型高致病性PRRS病毒(PRRSV)变异株,更是对我国养猪业影响极大。论文概述了近年来我国PRRS的流行特点,对血清学及病原学方面的... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是目前危害世界养猪业最严重的传染病之一,并在我国广泛流行。2006年我国出现的美洲型高致病性PRRS病毒(PRRSV)变异株,更是对我国养猪业影响极大。论文概述了近年来我国PRRS的流行特点,对血清学及病原学方面的调查数据进行了统计分析,并对PRRSV分子流行病学进行了探讨。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 血清学 病原学 流行病学
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超级电容器用竹炭的制备及其电容性能 被引量：9
11
作者 张勇 王力臻 +2 位作者 张爱勤 冯辉 宋延华 《电子元件与材料》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期35-38,共4页
以竹材为原料,在高温Ar保护下制备了高比表面积超级电容器用竹炭材料。用XRD和SEM对所制竹炭进行了物相分析和形貌观察;用循环伏安、恒电流充放电和交流阻抗谱研究了炭化温度对所制超级电容器性能的影响。结果表明:所得竹炭为无定形结构... 以竹材为原料,在高温Ar保护下制备了高比表面积超级电容器用竹炭材料。用XRD和SEM对所制竹炭进行了物相分析和形貌观察;用循环伏安、恒电流充放电和交流阻抗谱研究了炭化温度对所制超级电容器性能的影响。结果表明:所得竹炭为无定形结构,随着炭化温度的升高,竹炭中石墨微晶向有序态结构发展。炭化温度为500℃时,制备的竹炭电性能最佳。在125mA/g电流密度下的首次放电比电容为226F/g;即使在500mA/g的大电流密度下,其放电比电容仍高达184F/g,第1000次循环时其放电比电容为138F/g,每次循环电容衰减仅为0.046F/g。 展开更多
关键词 超级电容器 竹炭 循环伏安 交流阻抗谱
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猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定 被引量：10
12
作者 宋延华 邓雨修 +2 位作者 李春梅 苏润环 周全 《畜牧与兽医》 北大核心 2008年第3期27-30,共4页
从广东地区发病猪场的病料中,分离到1株致Marc-145细胞病变的病毒ShB6。扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)主要结构蛋白基因ORF2-ORF7并进行序列分析,结果表明,该分离株与国内PRRSV分离株HB-1(sh)/2002的同源性为96.9%;与ATCC VR-2332... 从广东地区发病猪场的病料中,分离到1株致Marc-145细胞病变的病毒ShB6。扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)主要结构蛋白基因ORF2-ORF7并进行序列分析,结果表明,该分离株与国内PRRSV分离株HB-1(sh)/2002的同源性为96.9%;与ATCC VR-2332株的同源性为91%;而与Lelystad株的同源性仅为59.8%;用美洲型PRRSV单抗进行免疫组化染色,结果显示在细胞病变处呈现明显的阳性着色(为棕黄色)。综合可见,所分离的病毒为美洲型PRRSV。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离 鉴定
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2008年-2009年广东番鸭细小病毒分子流行病学研究 被引量：9
13
作者 宋永峰 吴发兴 +4 位作者 宋延华 黎敏 周全 周丽 温纳相 《中国动物检疫》 CAS 2010年第1期39-40,46,共3页
VP2基因是番鸭细小病毒(MDPV)的主要免疫原性基因,其编码的VP2蛋白能够诱导机体产生中和抗体。本文对2008年～2009年从广东各县市分离、鉴定的11个MDPV野毒株VP2基因进行克隆测序,并对获得的VP2基因序列进行比较和分析。结果表明:11个... VP2基因是番鸭细小病毒(MDPV)的主要免疫原性基因,其编码的VP2蛋白能够诱导机体产生中和抗体。本文对2008年～2009年从广东各县市分离、鉴定的11个MDPV野毒株VP2基因进行克隆测序,并对获得的VP2基因序列进行比较和分析。结果表明:11个不同分离株之间核苷酸序列同源性为98.7%-100%;与6个国内外参考毒株同源性为97.7%-99.6%;所有毒株都含有4个完全相同的潜在糖基化位点;说明该病毒保守度高,仅有个别的点突变。将分离株SL2连续传70代获得致弱毒株SL-70,动物实验结果表明SL70株对雏鸭无致病力;经测序发现SL-70与其祖代分离株SL2的VP2基因序列同源性高达99.9%,仅发生了18个碱基的点突变。 展开更多
关键词 番鸭细小病毒 VP2基因 分子流行病学
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PAM在锂离子电池正极材料LiFePO_4中的应用 被引量：8
14
作者 宋延华 张胜利 +1 位作者 李维 李娟 《电池》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期8-10,共3页
利用金相显微镜、SEM、XRD、恒流充放电、电化学阻抗及循环伏安法,研究了分散剂聚丙烯酰胺（PAM）对正极材料LiFePO4性能的影响。往LiFePO4中加入0.1%PAM时,分散性能最好,能抑制活性物质团聚;以0.1C在2.7~4.2 V循环,正极的首次放电比容... 利用金相显微镜、SEM、XRD、恒流充放电、电化学阻抗及循环伏安法,研究了分散剂聚丙烯酰胺（PAM）对正极材料LiFePO4性能的影响。往LiFePO4中加入0.1%PAM时,分散性能最好,能抑制活性物质团聚;以0.1C在2.7~4.2 V循环,正极的首次放电比容量从未添加分散剂时的132.6 mAh/g提高到了166.9 mAh/g,循环稳定性增强。 展开更多
关键词 聚丙烯酰胺(PAM) 分散剂 磷酸铁锂(LiFePO4) 团聚
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增强实践教学手段细化教学过程管理 被引量：8
15
作者 李继光 冯辉 +2 位作者 张勇 张林森 宋延华 《实验室科学》 2010年第6期172-174,共3页
实践教学手段与实践教学过程管理是提高实践效果的关键因素,为了提高实践教学效果,该文探索了综合应用实践教学手段与细化实践教学过程管理的实践教学体系,并针对工科院校生产实习环节采用了录像资料播放与讲解、开展实习讨论会等手段,... 实践教学手段与实践教学过程管理是提高实践效果的关键因素,为了提高实践教学效果,该文探索了综合应用实践教学手段与细化实践教学过程管理的实践教学体系,并针对工科院校生产实习环节采用了录像资料播放与讲解、开展实习讨论会等手段,合理安排实习过程、充分利用学生干部辅助管理等细化实践教学管理过程。经过3年的实践研究证明可有效提高实践教学效果。 展开更多
关键词 实践教学手段 过程管理 实践教学效果
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浅谈新能源材料与器件专业思政进课堂的改革 被引量：8
16
作者 王利霞 张林森 +3 位作者 方华 宋延华 李晓峰 贾晓东 《河南化工》 CAS 2020年第10期65-66,共2页
课堂是进行知识传授、思想传递和价值引导的重要场所。新能源相关技术的发展与人才的培养不仅在国民经济、科技发展中具有重要战略地位,而且对国家安全具有重要影响力。在新能源材料与器件专业的专业课堂中引入思想政治教育,对培养德才... 课堂是进行知识传授、思想传递和价值引导的重要场所。新能源相关技术的发展与人才的培养不仅在国民经济、科技发展中具有重要战略地位,而且对国家安全具有重要影响力。在新能源材料与器件专业的专业课堂中引入思想政治教育,对培养德才兼备的新能源技术人才具有重要意义。 展开更多
关键词 新能源材料与器件专业 课程思政 专业课教学
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猪流行性腹泻病毒RT-LAMP方法的建立及应用 被引量：7
17
作者 田野 张祥斌 +4 位作者 宋延华 张常明 潘永飞 刘佳佳 贺东生 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第8期38-40,共3页
猪流行性腹泻病毒（PEDV）属于冠状病毒成员,为有囊膜的单股正链RNA病毒,以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征的一种高度接触性肠道传染病。我国从1976年开始陆续有PED的报道,20世纪80年代后该病在中国流行面逐渐扩大,并... 猪流行性腹泻病毒（PEDV）属于冠状病毒成员,为有囊膜的单股正链RNA病毒,以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征的一种高度接触性肠道传染病。我国从1976年开始陆续有PED的报道,20世纪80年代后该病在中国流行面逐渐扩大,并多与猪传染性胃肠炎、轮状病毒等其他肠道病原混合感染,给养猪业造成严重经济损失。 展开更多
关键词 RT-LAMP方法 猪传染性胃肠炎 肠道病原 PEDV 轮状病毒 核酸扩增 乳仔猪 冠状病毒 混合感染 正链
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锂离子电池用黏结剂的研究进展 被引量：7
18
作者 马利华 傅鹏立 +2 位作者 陈小娜 张胜利 宋延华 《电池工业》 CAS 2008年第3期203-206,共4页
黏结剂是锂离子电池的重要组成部分,其性能的优劣直接影响电池的性能。介绍了黏结剂在锂离子电池中的作用及对其要求。重点综述了最新专利中聚偏氟乙烯(PVDF)粘结剂、水溶性粘结剂及其它黏结剂在锂离子电池中的应用。指出从黏结剂分子... 黏结剂是锂离子电池的重要组成部分,其性能的优劣直接影响电池的性能。介绍了黏结剂在锂离子电池中的作用及对其要求。重点综述了最新专利中聚偏氟乙烯(PVDF)粘结剂、水溶性粘结剂及其它黏结剂在锂离子电池中的应用。指出从黏结剂分子结构出发,探讨结构与性能的关系,对于选择和改善黏结剂,提高电池的综合性能,具有现实的意义。 展开更多
关键词 锂离子电池 聚偏氟乙烯 黏结剂
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新型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立 被引量：7
19
作者 宋永峰 温纳相 +3 位作者 宋延华 周全 周丽 高恒 《中国家禽》 北大核心 2009年第18期19-21,共3页
根据GenBank中已发表的1型鸭病毒性肝炎(duck hepatitis virus type1,DHV-1)和新型鸭病毒性肝炎(new type duck hepatitis virus,N-DHV)全基因序列,在非同源区域设计一对新型鸭病毒性肝炎特异性引物P1/P2,对鸭病毒性肝炎病毒、鸭瘟病毒... 根据GenBank中已发表的1型鸭病毒性肝炎(duck hepatitis virus type1,DHV-1)和新型鸭病毒性肝炎(new type duck hepatitis virus,N-DHV)全基因序列,在非同源区域设计一对新型鸭病毒性肝炎特异性引物P1/P2,对鸭病毒性肝炎病毒、鸭瘟病毒、鹅细小病毒细胞毒、流感病毒等鸭常见病病原进行RT-PCR扩增。结果表明引物特异性良好,引物P1/P2仅能特异性扩增出N-DHV的638bp基因片段;敏感性试验结果表明:N-DHV RNA最低检出量为21pg。同时对临床样品的检测中发现DHV-1和N-DHV存在混合感染的情况。该方法的建立为鸭病毒性肝炎病毒尤其是新型鸭病毒性肝炎病毒的鉴定及快速诊断提供了可靠的依据。 展开更多
关键词 新型鸭肝炎病毒 RT—PCR 检测方法
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牛分支杆菌MPT83基因的表达及重组蛋白的纯化 被引量：6
20
作者 鲁俊鹏 罗满林 +1 位作者 宋延华 邹潍力 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期366-370,共5页
从牛分支杆菌培养物中抽提总DNA,扩增了MPT83基因,并克隆入pMD 18-T Simple Vector,将测序正确的目的基因插入表达载体pET-32a(+)中,转化BL21(DE3)宿主菌,IPTG诱导表达,用亲和层析方法对表达蛋白进行了纯化。经测序,构建的克隆质粒pMD-M... 从牛分支杆菌培养物中抽提总DNA,扩增了MPT83基因,并克隆入pMD 18-T Simple Vector,将测序正确的目的基因插入表达载体pET-32a(+)中,转化BL21(DE3)宿主菌,IPTG诱导表达,用亲和层析方法对表达蛋白进行了纯化。经测序,构建的克隆质粒pMD-MPT83与Gen- Bank中的序列一致;构建的表达质粒pET-MPT83经PCR和BamHⅠ+HindⅢ双酶切鉴定构建正确;经SDS-PAGE分析,在约42 ku处出现新的蛋白条带,4 h后表达量即达到高峰;Western- blotting分析表明,融合蛋白能够被牛分支杆菌阳性血清所识别;纯化的表达蛋白经SDS-PAGE电泳,出现清晰的单一条带。表明MPT83基因原核表达载体构建成功。 展开更多
关键词 牛分支杆菌 MPT83基因 克隆 原核表达 蛋白纯化
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