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VASH1在口腔鳞状细胞癌、口腔白斑及口腔扁平苔藓中的表达及意义 被引量：4
1
作者 孙鑫 魏秀峰 +4 位作者 吕珊珊 刘桐 安欢欢 李娜 谷楠 《海南医学》 CAS 2015年第23期3560-3562,共3页
目的探讨血管生成抑制蛋白1(VASH1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)、口腔白斑(OLK)和口腔扁平苔藓(OLP)中的表达及意义。方法免疫组织化学染色SP法检测60例OSCC、20例OLK、20例OLP及20例正常口腔黏膜(NOM)中VASH1的表达情况,采用SPSS19.0软件... 目的探讨血管生成抑制蛋白1(VASH1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)、口腔白斑(OLK)和口腔扁平苔藓(OLP)中的表达及意义。方法免疫组织化学染色SP法检测60例OSCC、20例OLK、20例OLP及20例正常口腔黏膜(NOM)中VASH1的表达情况,采用SPSS19.0软件对结果进行统计学分析。结果 (1)VASH1蛋白在OSCC组织中的阳性表达率和染色强度随组织分化程度的降低而呈增高趋势(P<0.05),并且在中、低分化的鳞状细胞癌中的表达明显高于白斑,差异有统计学意义(P<0.05);(2)VASH1在白斑中的表达明显高于正常组织和扁平苔藓,且差异有统计学意义(P<0.05);(3)VASH1在扁平苔藓与正常组织的表达情况差异无统计学意义(P>0.05);(4)口腔鳞癌组中VASH1在有淋巴转移组的表达明显高于无淋巴转移组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 VASH1蛋白可能与口腔鳞状细胞癌的发生、发展及转移有关。 展开更多
关键词 血管生成抑制蛋白1 口腔鳞状细胞癌 口腔白斑
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麻疹病毒N蛋白的原核表达、纯化及其兔抗血清的制备
2
作者 杨志辉 安欢欢 +3 位作者 吴杰 孟胜利 郭靖 申硕 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第9期1025-1029,1036,共6页
目的原核表达并纯化麻疹病毒(measles virus,MV)核蛋白(N),免疫家兔后制备兔抗MV N抗血清,并鉴定其特异性。方法以MV-S191疫苗株基因组为模板,PCR扩增N基因3个片段,构建重组表达质粒pGEX-MV-N1、pGEXMV-N2和pGEX-MV-N3,分别转化至E.coli... 目的原核表达并纯化麻疹病毒(measles virus,MV)核蛋白(N),免疫家兔后制备兔抗MV N抗血清,并鉴定其特异性。方法以MV-S191疫苗株基因组为模板,PCR扩增N基因3个片段,构建重组表达质粒pGEX-MV-N1、pGEXMV-N2和pGEX-MV-N3,分别转化至E.coli BL21(DE3)中诱导表达N-末端带有GST标签的融合蛋白GST-MV-N1、GST-MV-N2和GST-MV-N3,纯化后,分别与等体积弗氏完全佐剂(初次免疫)、弗氏不完全佐剂(加强免疫)混合,乳化均匀后各免疫1只雌性家兔,共免疫6次,采集全血,分离血清获得兔抗MV N抗血清,Western blot法及间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)鉴定其特异性。结果重组表达质粒pGEX-MV-N1、pGEX-MV-N2和pGEX-MV-N3经双酶切、PCR及测序鉴定证明构建正确;表达的GST-MV-N1和GST-MV-N3融合蛋白相对分子质量分别约42000和39000,主要以包涵体形式存在,纯度分别为96%和85%,而上清和沉淀中均未见GST-MV-N2融合蛋白的表达;兔抗MV N3抗血清能特异性识别MV-S191感染细胞后表达的N蛋白,且特异性高于兔抗MV-N1抗血清。结论成功制备了兔抗MV N抗血清,为重组MV疫苗的研发以及MV结构蛋白抗体的制备提供了技术支持。 展开更多
关键词 麻疹病毒 核蛋白 兔抗血清 原核表达 纯化
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市政道路改造施工的质量控制措施研究 被引量：1
3
作者 安欢欢 《新材料·新装饰》 2023年第6期195-198,共4页
城市发展水平的提升,使得目前市政道路的建设规模逐渐扩大。在市政道路规模扩大的过程中,不仅需要建设新型的道路,而且还需要对以往旧市政道路进行改造施工,以使得其能够继续投入使用。通过对市政道路的改造施工,能极大地节约建设新道... 城市发展水平的提升,使得目前市政道路的建设规模逐渐扩大。在市政道路规模扩大的过程中,不仅需要建设新型的道路,而且还需要对以往旧市政道路进行改造施工,以使得其能够继续投入使用。通过对市政道路的改造施工,能极大地节约建设新道路的资金。在施工过程中,应有效面对一系列的质量问题,并全面考虑所用的施工技术,这样才能科学合理地开展市政道路改造施工,并延长其使用寿命。通过对现有的施工案例进行分析,提前做好相应的应对策略,规划好施工预案。文章通过对市政道路改造施工的价值以及质量问题进行相应的分析,提出了相应的质量控制措施。 展开更多
关键词 市政道路 改造施工 施工规划
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冲击式内燃螺栓扳手电源电路研究与设计
4
作者 唐定华 秦刚 +2 位作者 陈忠孝 安欢欢 路荣坤 《电子测量技术》 2017年第11期34-39,共6页
为实现冲击式内燃螺栓扳手控制器的稳定工作,通过测试发现在汽油发电机和控制器之间会有浪涌出现。并且在实际应用中,电路浪涌干扰会导致控制装置频繁进入保护状态,这严重影响了内燃螺栓扳手的使用。针对以上问题,利用二极管、功率电阻... 为实现冲击式内燃螺栓扳手控制器的稳定工作,通过测试发现在汽油发电机和控制器之间会有浪涌出现。并且在实际应用中,电路浪涌干扰会导致控制装置频繁进入保护状态,这严重影响了内燃螺栓扳手的使用。针对以上问题,利用二极管、功率电阻和TVS管等非线性元器件设计了两种电源浪涌软启动抑制电路。通过电路仿真和结合冲击式内燃螺栓扳手做松紧螺栓实验,结果表明,该电路能有效抑制浪涌,而且能够为内燃螺栓扳手提供稳定工作电源。 展开更多
关键词 内燃机 电源电路 电源保护 浪涌抑制
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柯萨奇病毒A组4型生物化学特性及免疫原性分析
5
作者 田宇璇 魏真妮 +2 位作者 安欢欢 吴杰 申硕 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期581-590,共10页
对引起手足口病的肠道病毒A组4型进行生物化学特性及免疫原性的研究。利用大肠杆菌表达结构蛋白全长或部分片段的GST融合蛋白,纯化CV-A4病毒颗粒,制备兔抗CV-A4 VP1~VP4蛋白及抗CV-A4病毒颗粒抗血清。以免疫印迹法(Western blotting,WB)... 对引起手足口病的肠道病毒A组4型进行生物化学特性及免疫原性的研究。利用大肠杆菌表达结构蛋白全长或部分片段的GST融合蛋白,纯化CV-A4病毒颗粒,制备兔抗CV-A4 VP1~VP4蛋白及抗CV-A4病毒颗粒抗血清。以免疫印迹法(Western blotting,WB),结合SDS-PAGE电泳法,对CsCl密度梯度纯化的CV-A4的空心颗粒(EP)与实心颗粒(FP)的蛋白组分、纯度、多聚蛋白酶剪切进行分析。以微量中和法测定以上6种抗原免疫的兔或小鼠血清中和抗体效价,评估免疫原性。WB和间接免疫荧光法证明了抗体特异性。EP由VP0、VP1和VP3构成,而FP的VP0被剪切,故由VP1-VP4构成。EP和FP比例分别为41%和59%。CsCl密度分别为1.26 g/cm^(3)和1.34 g/cm^(3),纯度分别为70.5%和96.3%。中和试验显示,兔抗全病毒抗体具有中和作用,而兔抗CV-A4VP1~VP4结构蛋白抗体不具有中和作用。免疫原性强弱为:FP>EP>VP1-VP4。本研究建立了CV-A4纯化病毒结构蛋白的分析方法,研究了重组病毒蛋白及2种病毒颗粒的免疫原性及免疫持久性。对包括CV-A4的手足口病多价疫苗的研发策略以及质量控制具重要意义。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组4型(CV-A4) 结构蛋白VP1-VP4 空心颗粒与实心颗粒 免疫原性
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SARS-CoV-2非结构蛋白兔抗血清的制备及其在灭活疫苗质量监控中的应用
6
作者 汪梦俊 安欢欢 +5 位作者 田宇璇 刘睿伦 张小宇 吴杰 郭靖 申硕 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1034-1039,1044,共7页
目的制备SARS-CoV-2非结构蛋白1(non-structure protein 1,NSP1)兔抗血清,并用其检测SARS-CoV-2NSP1在灭活疫苗生产过程中的含量变化,为建立灭活疫苗纯度、工艺质量监控方法奠定基础。方法选择带DE3的E.coli原核表达系统表达SARS-CoV-2 ... 目的制备SARS-CoV-2非结构蛋白1(non-structure protein 1,NSP1)兔抗血清,并用其检测SARS-CoV-2NSP1在灭活疫苗生产过程中的含量变化,为建立灭活疫苗纯度、工艺质量监控方法奠定基础。方法选择带DE3的E.coli原核表达系统表达SARS-CoV-2 NSP1全长蛋白,纯化后免疫日本大耳白兔,共免疫6次,每次间隔14 d,采集全血,获得NSP1兔抗血清;以纯化的NSP1蛋白为抗原,Western blot法鉴定兔抗血清纯度,同时利用RD细胞表达NSP1-eGFP融合蛋白,裂解后作为抗原对NSP1兔抗血清进行特异性鉴定;以SARS-CoV-2灭活疫苗生产过程中1~4 d细胞裂解液及纯化后病毒颗粒为抗原,NSP1兔抗血清及M、S、E、N兔抗血清为一抗,Western blot法鉴定样品中抗原蛋白的含量变化。结果成功表达带有GST标签的NSP1蛋白,并获得相应的兔抗血清,且抗原纯度较高;制备的兔抗血清能正确识别真核表达的NSP1-eGFP融合蛋白,并能鉴定灭活疫苗生产过程中蛋白含量的变化;灭活疫苗成品中不含NSP,疫苗纯度高;E蛋白与其他3种主要结构蛋白M、S、N的表达时相不同,早期表达晚期下降。结论制备的NSP1兔抗血清可用于NSP1和E蛋白功能的研究,以及灭活疫苗生产过程中纯度和质量的监控。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 非结构蛋白1 兔抗血清 灭活疫苗 质量控制
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盖挖逆作地铁车站冬季施工关键技术 被引量：1
7
作者 王宁波 安欢欢 +2 位作者 胡鹏举 张旭 许有俊 《工程技术研究》 2021年第3期73-74,共2页
冬季低温会对盖挖逆作地铁车站施工的材料和结构造成损坏,从而直接影响地铁车站的施工质量和进度。文章结合呼市地铁新华广场车站的工程案例,详细研究了盖挖逆作车站冬季施工中材料、结构和设备的保温问题,并提出了相应可行的保温措施,... 冬季低温会对盖挖逆作地铁车站施工的材料和结构造成损坏,从而直接影响地铁车站的施工质量和进度。文章结合呼市地铁新华广场车站的工程案例,详细研究了盖挖逆作车站冬季施工中材料、结构和设备的保温问题,并提出了相应可行的保温措施,为今后类似的工程提供参考。 展开更多
关键词 地铁车站 盖挖逆作 冬季保温 施工技术
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严重急性呼吸道综合征冠状病毒2全长cDNA的构建新途径
8
作者 安欢欢 钱莎莎 +1 位作者 于代冠 申硕 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1418-1426,共9页
目的构建严重急性呼吸道综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus-2,SARS-CoV-2)全长cDNA,为SARS-CoV-2基因功能、药物筛选和安全减毒灭活疫苗株的研究提供重要工具,也为大基因组RNA病毒cDNA的构建提供新的方法... 目的构建严重急性呼吸道综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus-2,SARS-CoV-2)全长cDNA,为SARS-CoV-2基因功能、药物筛选和安全减毒灭活疫苗株的研究提供重要工具,也为大基因组RNA病毒cDNA的构建提供新的方法。方法结合In-Fusion、Gibson Assembly以及Recombineering技术对SARS-CoV-2基因组进行全长cDNA克隆的从头合成。首先将SARS-CoV-2全长基因组分17个片段进行扩增,利用In-Fusion试剂盒将这些小片段连接、克隆,以获得插入序列约5000 bp的6个pUC19重组质粒;然后利用Gibson Assembly试剂盒将30000 bp SARS-CoV-2全长基因组分3次逐步连接至pBR322载体,每次连接10000 bp,得到含30000 bp SARSCoV-2全长cDNA的重组质粒;最后利用Recombineering技术修复逐步连接过程中通过NotⅠ位点引入的两处多余GC碱基。结果构建了SARS-CoV-2 WIV04株的全长cDNA,插入基因组的重组质粒经酶切和测序鉴定正确。为区别于野生型毒株SARS-CoV-2 WIV04,分别在全长cDNA的8791 nt和12655 nt进行了同义突变,引入了两处BglⅠ酶切位点,以此作为遗传标记。结论成功构建了SARS-CoV-2全长cDNA,为SARS-CoV-2基础研究和应用研究提供了技术平台。 展开更多
关键词 严重急性呼吸道综合征冠状病毒2 全长CDNA In-Fusion克隆 Gibson拼接 重组技术
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小学英语复习课的有效教学策略探究
9
作者 安欢欢 《最漫画·学校体音美》 2018年第8期00158-00158,共1页
复习课是小学英语教学中不可或缺的一个课型,它不仅帮助学生对已习得的知识进行整理,而且使之获得升华和提高。本文就小学英语复习课的有效性策略进行探讨。
关键词 复习课 合理时机 突出重难点
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