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猪骨骼肌纤维类型和能量代谢相关基因的表达特性研究 被引量：4
1
作者 张燕伟 蔡春波 +8 位作者 孙迪 安家岐 黄晓宇 牛瑾 崔子旭 高鹏飞 郭晓红 李步高 曹果清 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第4期1223-1232,共10页
【目的】研究马身猪、晋汾白猪和杜长大猪骨骼肌肌纤维类型和能量代谢相关基因的表达特性。【方法】选取6月龄马身猪、晋汾白猪和杜长大猪,屠宰后采集背最长肌和趾长伸肌,采用HE染色检测肌纤维的直径、密度和横截面积,通过实时荧光定量... 【目的】研究马身猪、晋汾白猪和杜长大猪骨骼肌肌纤维类型和能量代谢相关基因的表达特性。【方法】选取6月龄马身猪、晋汾白猪和杜长大猪,屠宰后采集背最长肌和趾长伸肌,采用HE染色检测肌纤维的直径、密度和横截面积,通过实时荧光定量PCR分别检测Ⅰ型、Ⅱa型、Ⅱb型和Ⅱx型肌纤维的标记基因(MYH7、MYH2、MYH4和MYH1),线粒体活性相关基因(ATP5A1、PGC1-α和PPARβ),电子传递链活性相关基因(UQCRC2、SDHA、NDUFA9),以及糖酵解活性相关基因(LDHA、LDHB和GK)的表达量。【结果】马身猪背最长肌肌纤维直径和横截面积均显著低于晋汾白猪和杜长大猪,而密度显著高于晋汾白猪和杜长大猪(P<0.05);马身猪和晋汾白猪趾长伸肌肌纤维直径和横截面积均显著低于杜长大猪,而密度显著高于杜长大猪(P<0.05)。马身猪背最长肌MYH7基因的表达量最高,晋汾白猪最低;马身猪和晋汾白猪趾长伸肌MYH7基因的表达量显著高于杜长大猪(P<0.05)。马身猪背最长肌和趾长伸肌MYH2基因的表达量显著高于晋汾白猪和杜长大猪,晋汾白猪趾长伸肌MYH2基因的表达量显著高于杜长大猪(P<0.05)。马身猪背最长肌MYH4基因的表达量显著低于晋汾白猪和杜长大猪,马身猪和晋汾白猪趾长伸肌MYH4基因的表达量显著低于杜长大猪(P<0.05)。马身猪背最长肌中ATP5A1和PGC1-α基因的表达量均显著低于晋汾白猪和杜长大猪,晋汾白猪PGC1-α和PPARβ基因的表达量均显著低于杜长大猪(P<0.05);马身猪和晋汾白猪趾长伸肌中ATP5A1、PGC1-α和PPARβ基因的表达量均显著低于杜长大猪(P<0.05)。晋汾白猪背最长肌中UQCRC2、SDHA和NDUFA9基因的表达量均显著低于杜长大猪和马身猪(P<0.05);晋汾白猪和马身猪趾长伸肌中UQCRC2、SDHA和NDUFA9基因的表达量均显著低于杜长大猪,马身猪UQCRC2和SDHA基因的表达量均显著低于晋汾白猪(P<0.05)。晋汾白猪和马身猪 展开更多
关键词 猪 肌纤维类型 氧化磷酸化 糖酵解
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CircECH1通过充当miR-365-5p海绵抑制猪前体脂肪细胞增殖
2
作者 李娇 赵天枝 +7 位作者 王婕妤 李萌 安家岐 杨阳 高鹏飞 曹果清 郭晓红 李步高 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期672-682,共11页
环状RNA(circRNA)是一种共价封闭RNA,在脂肪发育过程中具有重要作用。本研究旨在探讨猪环状RNA ECH1(circECH1)对前体脂肪细胞增殖的调控机制。本研究通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析、Sanger测序和RNase R酶消化法成功鉴定circECH1... 环状RNA(circRNA)是一种共价封闭RNA,在脂肪发育过程中具有重要作用。本研究旨在探讨猪环状RNA ECH1(circECH1)对前体脂肪细胞增殖的调控机制。本研究通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析、Sanger测序和RNase R酶消化法成功鉴定circECH1的稳定环状结构,其在马身猪各个组织中均有表达,并且其在脂肪组织中的表达量随日龄增加呈上升趋势。功能研究证明,干扰circECH1后,增殖相关基因PCNA、CDK1和MKi67极显著升高(P<0.01),增殖细胞数量极显著增加(P<0.01)。为进一步探究其分子机制,使用miRDB、miRWalk和RNAhybrid预测circECH1的下游靶基因。通过双荧光素酶报告基因分析和RNA结合蛋白免疫沉淀技术,验证circECH1能靶向结合miR-365-5p。在猪前体脂肪细胞中过表达miR-365-5p会增殖相关基因PCNA和CDK1的表达量极显著升高(P<0.01),增殖细胞数量极显著增加(P<0.01);干扰miR-365-5p后增殖相关基因PCNA、CDK1和MKi67的表达量极显著降低(P<0.01),增殖细胞数量极显著增加(P<0.01)。挽救实验结果显示,共转染si-circECH1和miR-365-5p inhibitor与单独转染miR-365-5p inhibitor相比,增殖相关基因PCNA、CDK1和MKi67的表达量显著升高(P<0.01),增殖细胞数量显著升高。本研究结果证明,circECH1存在于马身猪的脂肪组织中,并且通过海绵吸附miR-365-5p调控猪前体脂肪细胞增殖,为进一步了解调控猪前体脂肪细胞的分子机制提供理论依据。 展开更多
关键词 猪 猪环状RNA ECH1(circECH1) miR-365-5p 前体脂肪细胞 细胞增殖
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晋汾白猪背最长肌肌纤维类型和能量代谢特性分析
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作者 安家岐 何志强 +7 位作者 孙迪 李娇 赵天枝 高鹏飞 曹果清 郭晓红 蔡春波 李步高 《山西农业科学》 2023年第4期434-442,共9页
为了探究晋汾白猪背最长肌肌纤维类型和能量代谢的特点,试验采集6月龄晋汾白猪和大白猪背最长肌,采用HE染色检测肌纤维的直径和密度;通过qRT-PCR分别检测生肌调节因子、肌纤维类型标记基因、氧化磷酸化、糖酵解活性以及线粒体活性相关... 为了探究晋汾白猪背最长肌肌纤维类型和能量代谢的特点,试验采集6月龄晋汾白猪和大白猪背最长肌,采用HE染色检测肌纤维的直径和密度;通过qRT-PCR分别检测生肌调节因子、肌纤维类型标记基因、氧化磷酸化、糖酵解活性以及线粒体活性相关基因的表达模式;PCR扩增晋汾白猪UCP3基因的CDS序列,并进行信号肽预测分析,采用qRT-PCR和Western blot检测晋汾白猪和大白猪中UCP3基因的表达特性。结果表明,相较于大白猪,晋汾白猪背最长肌肌纤维直径较小,密度较大;晋汾白猪背最长肌中生肌调节因子MyoD和MyoG的表达量较低;Ⅰ型肌纤维标记基因Myh7的表达量较高,Ⅱ型肌纤维标记基因Myh2、Myh4和Myh1的表达量均较低;糖酵解活性相关基因LDHA和LDHB、氧化磷酸化相关基因UQCRC2和NDUFA9以及线粒体活性相关基因ATP5A1和PGC1α的表达量均较低;晋汾白猪UCP3基因的CDS序列共有927个碱基,且不存在信号肽;晋汾白猪背最长肌中UCP3基因表达量和蛋白含量均显著低于大白猪;UCP3在晋汾白猪背最长肌和皮下脂肪组织中的表达量较高,且90 d晋汾白猪背最长肌中的表达量明显高于0、180 d。综上,晋汾白猪背最长肌肌纤维直径较小,I型肌纤维含量较高,Ⅱa型和Ⅱb型肌纤维含量较低,糖酵解和氧化磷酸化的活性较低,且UCP3的表达量低于大白猪。 展开更多
关键词 猪 背最长肌 肌纤维类型 能量代谢 UCP3基因
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