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夏枯草苯丙氨酸解氨酶基因的克隆与表达分析 被引量：15
1
作者 许锋 曹腾 +3 位作者 宁迎晶 蒋丽阳 张威威 程水源 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期39-44,共6页
苯丙氨酸解氨酶(PAL)是迷迭香酸合成途径中的关键酶之一,根据其他植物PAL基因的保守区域设计特异引物,利用3'-RACE-PCR技术,本研究首次从夏枯草中克隆得到了PAL基因的cDNA片段序列,命名为PvPAL,Gen-Bank登录号为JN65446。PvPAL基因c... 苯丙氨酸解氨酶(PAL)是迷迭香酸合成途径中的关键酶之一,根据其他植物PAL基因的保守区域设计特异引物,利用3'-RACE-PCR技术,本研究首次从夏枯草中克隆得到了PAL基因的cDNA片段序列,命名为PvPAL,Gen-Bank登录号为JN65446。PvPAL基因cDNA片段长1 306 bp,其中编码区域为1 047 bp,编码349个氨基酸。蛋白质序列多重比较结果显示,PvPAL蛋白质序列与丹参、地黄、黄芩、藿香等植物的PAL蛋白质高度同源。PAL系统进化树分析结果表明,PvPAL与唇形科植物的PAL基因亲缘关系最近。组织表达分析结果显示,PvPAL基因在根、茎、叶中均表达,其中根中表达量最高。PvPAL基因的克隆为进一步研究夏枯草迷迭香酸合成的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 苯丙氨酸解氨酶 表达分析 夏枯草 克隆 酶基因 蛋白质序列 唇形科植物 系统进化树分析
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银杏CONSTANS基因的克隆与序列分析 被引量：3
2
作者 龚付全 熊超 +4 位作者 陈柳吉 宁迎晶 张威威 许锋 程水源 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第12期2945-2948,共4页
利用1对简并引物,从银杏中克隆得到CONSTANS基因的cDNA片段,命名为GbCO。GbCO长855bp,编码285个氨基酸。核苷酸和蛋白质序列多重比较结果显示,GbCO与其他植物的CO基因的核苷酸与蛋白质序列均高度同源。GbCO编码的蛋白质与挪威云杉、海... 利用1对简并引物,从银杏中克隆得到CONSTANS基因的cDNA片段,命名为GbCO。GbCO长855bp,编码285个氨基酸。核苷酸和蛋白质序列多重比较结果显示,GbCO与其他植物的CO基因的核苷酸与蛋白质序列均高度同源。GbCO编码的蛋白质与挪威云杉、海岸松和长白松的CO氨基酸相似性分别为60%、53%和52%。CO系统进化树显示,GbCO与其他裸子植物亲缘关系较近。该研究通过克隆GbCO基因,可为利用转基因技术缩短银杏童期提供基因资源,也为进一步了解银杏开花的分子调控机理奠定基础。 展开更多
关键词 银杏 CONSTANS 基因克隆 序列分析
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银杏CONSTANS基因植物表达载体构建 被引量：2
3
作者 张威威 宁迎晶 +3 位作者 陈柳吉 龚付全 许锋 程水源 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期8-10,共3页
目的:构建银杏CONSTANS基因的表达载体。方法:PCR扩增CO基因得到1.2kb左右的片段,用BamHⅠ+HindⅢ酶切纯化,通过T4DNA连接酶连接到植物表达载体pCAMBIA1304上,并转化到农杆菌LBA4404,然后进行菌落PCR及酶切鉴定。结果:载体构建成功。结... 目的:构建银杏CONSTANS基因的表达载体。方法:PCR扩增CO基因得到1.2kb左右的片段,用BamHⅠ+HindⅢ酶切纯化,通过T4DNA连接酶连接到植物表达载体pCAMBIA1304上,并转化到农杆菌LBA4404,然后进行菌落PCR及酶切鉴定。结果:载体构建成功。结论:构建了GbCO正义链和反义链的植物表达载体pCAMBIA 1304-GbCOs和pCAMBIA 1304-GbCOa,可用于GbCO基因的转基因功能研究。 展开更多
关键词 银杏 CONSTANS基因 表达载体构建 转化
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夏枯草RuBPCase大亚基基因的克隆与表达
4
作者 许锋 蒋丽阳 +2 位作者 曹腾 宁迎晶 程水源 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2012年第4期6-9,共4页
为从夏枯草中克隆参与光合作用和光呼吸代谢的关键酶RuBPcase大亚基基因rbcL,为今后研究夏枯草RuBPcase的结构和功能以及从分子水平探讨夏枯草的光合作用机理提供必要的基础数据,以夏枯草基因组DNA为模板,采用PCR法对夏枯草RuBPCase大... 为从夏枯草中克隆参与光合作用和光呼吸代谢的关键酶RuBPcase大亚基基因rbcL,为今后研究夏枯草RuBPcase的结构和功能以及从分子水平探讨夏枯草的光合作用机理提供必要的基础数据,以夏枯草基因组DNA为模板,采用PCR法对夏枯草RuBPCase大亚基基因(PvrbcL)的克隆与表达进行研究。结果表明:PCR法扩增出夏枯草RuBPcase大亚基基因片段PvrbcL,基因长837bp,编码278个氨基酸,GenBank登录号为JN 692563;经BLAST序列比较,夏枯草PvrbcL基因核苷酸序列与大花夏枯草、鼠尾草、烟草、大豆、水稻、菜豆、葡萄、油菜的相似性为86%～100%,氨基酸同源性为92%～100%;Northern杂交分析表明,PvrbcL基因在夏枯草叶和茎中表达,且在叶中的表达量最大;发育表达模式结果显示,Pvr-bcL基因的表达量随着叶片的生长而增加。PvrbcL基因的克隆和表达模式分析为进一步研究夏枯草RuB-Pcase的结构和功能奠定了基础。 展开更多
关键词 夏枯草 RuBPcase的大亚基基因(rbcL) 克隆 表达
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核桃分子生物学研究进展
5
作者 钟亚男 许锋 +1 位作者 宁迎晶 程水源 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2013年第1期34-37,共4页
核桃是一种有较强适应性、分布广泛、多用途的优良经济树种,由于核桃生物学特性的限制,核桃的常规品种选育、苗木繁殖等难度大、效率低。为了加速核桃品种改良以及优良品种的繁殖,用现代生物技术的方法培育核桃新品种、繁殖核桃苗木势... 核桃是一种有较强适应性、分布广泛、多用途的优良经济树种,由于核桃生物学特性的限制,核桃的常规品种选育、苗木繁殖等难度大、效率低。为了加速核桃品种改良以及优良品种的繁殖,用现代生物技术的方法培育核桃新品种、繁殖核桃苗木势在必行,也是当今核桃生产和科研发展的客观要求和必然结果。该文从分子水平上对近年来核桃在种质资源研究中的应用、离体再生系统的建立及其在基因育种方面的应用现状等的研究进行了简述,旨在为在分子方面改良核桃品种、核桃优良基因的克隆及种质资源的保存提供一定的参考。 展开更多
关键词 核桃 分子生物学 分子标记 基因
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