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原发性膜性肾病标志物抗PLA2R抗体检测方法比较 被引量：1
1
作者 游延军 张欢 +9 位作者 向乾银 曹长春 王健 曾红 魏元敏 吴斌 黄敬双 季纯宇 代苗 秦枫 《检验医学》 CAS 2023年第12期1153-1156,共4页
目的探讨磁微粒化学发光法(CLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测血清抗M型磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体的差异。方法选取2020年1月—2021年5月雅安市名山区人民医院、四川省地矿局四〇五医院、成都市郫都区人民医院接受肾脏活检的患者21... 目的探讨磁微粒化学发光法(CLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测血清抗M型磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体的差异。方法选取2020年1月—2021年5月雅安市名山区人民医院、四川省地矿局四〇五医院、成都市郫都区人民医院接受肾脏活检的患者215例,根据病理检查结果确诊PMN 135例(PMN组),其他肾病80例。另选取健康体检者72名。将其他肾病和健康体检者归入非PMN组。比较CLIA和ELISA检测抗PLA2R1抗体的效能(精密度、准确度、相关性、一致性)。分别采用2种方法检测PMN组和非PMN组抗PLA2R1抗体水平,比较2种方法检测抗PLA2R抗体诊断PMN的敏感性和特异性差异。结果CLIA的批内精密度(低值1.23%、高值1.45%)、批间精密度(低值2.59%、高值2.12%)均优于ELISA(批内精密度:低值8.18%、高值8.51%;批间精密度:低值8.67%、高值8.91%)。CLIA平均回收率为98.7%,ELISA平均回收率为96.0%,均符合要求。CLIA与ELISA的相关性较好(r=0.846,P<0.01),一致性较高(kappa值=0.928)。CLIA检测抗PLA2R抗体诊断PMN的敏感性(88.9%)优于ELISA(79.3%)(χ^(2)=4.675,P=0.031);2种方法的特异性分别为99.4%、96.1%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CLIA检测抗PLA2R抗体的效能优于ELISA,适用于临床大批量检测。 展开更多
关键词 抗M型磷脂酶A2受体抗体 磁微粒化学发光法 酶联免疫吸附试验 原发性膜性肾病
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POCT定量检测急性心力衰竭患者全血样本中NT-proBNP的临床应用 被引量：1
2
作者 王洁 王健 +5 位作者 向乾银 陈蕊 游延军 代苗 季纯宇 秦枫 《检验医学与临床》 CAS 2022年第S02期80-84,共5页
目的探讨即时检测(POCT)化学发光法定量检测N-末端脑钠肽前体(NT-proBNP)在诊断急性心力衰竭的临床应用价值。方法收集100例临床诊断为心力衰竭全血样本,根据CLSI系列文件,采用POCT化学发光定量检测NT-proBNP试剂盒,配制两组HCT系列梯... 目的探讨即时检测(POCT)化学发光法定量检测N-末端脑钠肽前体(NT-proBNP)在诊断急性心力衰竭的临床应用价值。方法收集100例临床诊断为心力衰竭全血样本,根据CLSI系列文件,采用POCT化学发光定量检测NT-proBNP试剂盒,配制两组HCT系列梯度的标本,探究HCT对全血NT-proBNP检测的影响;通过与罗氏NT-proBNP试剂盒做方法学比对,评价POCT化学发光定量检测NT-proBNP试剂盒的临床应用价值。结果实验所用POTC化学发光定量检测NT-proBNP试剂的空白限、检测限及功能灵敏度分别为15.66、20.01、21.55 pg/mL,线性范围为25~32000 pg/mL,精密度、准确度符合要求。血红蛋白≤200 mg/dL、三酰甘油≤1000 mg/dL、胆红素≤40 mg/dL时,干扰率低于15%,对检测检测结果无显著影响;不同HCT对NT-proBNP检测结果无显著影响;经方法学比对,本实验所用试剂盒与罗氏试剂盒检测结果的相关性(r)达0.9997;二者的受试者工作特征曲线下面积、灵敏度、特异度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验所用POCT化学发光定量检测NT-proBNP试剂的性能优异,具有较高的临床推广价值。 展开更多
关键词 即时检测 化学发光 N-末端脑钠肽前体 心力衰竭
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磁微粒化学发光法检测KL-6的性能评价及其临床应用价值
3
作者 白皓 向乾银 +4 位作者 杨伟 杨莎莎 代苗 季纯宇 秦枫 《国际检验医学杂志》 CAS 2023年第S01期95-100,共6页
目的评估化学发光定量检测KL-6试剂盒性能并评价临床应用价值。方法收集180例间质性肺疾病(ILDs)患者及135例健康者血清。参考CLSI EP相关文件,评估试剂盒的灵敏度、精密度、准确度、线性范围、干扰分析、方法学比对及临床灵敏度、特异... 目的评估化学发光定量检测KL-6试剂盒性能并评价临床应用价值。方法收集180例间质性肺疾病(ILDs)患者及135例健康者血清。参考CLSI EP相关文件,评估试剂盒的灵敏度、精密度、准确度、线性范围、干扰分析、方法学比对及临床灵敏度、特异度。采用该试剂盒监测15例治疗前、后患者血清中涎液化糖链抗原-6(KL-6)浓度,分析其临床应用价值。结果该试剂盒的空白限、检测限及分析灵敏度,分别为:8.5、21.35、24.5 U/mL;批内和批间精密度符合要求;线性范围为50.00~5000.00 U/mL;回收率在94.6%~104.0%之间,符合要求;血红蛋白、三酰甘油、胆红素浓度分别低于400、2000、45 mg/dL时,不影响检测;与富士瑞必欧化学发光试剂盒检测结果的相关系数r=0.993;试剂盒灵敏度为90.5%,特异度为94.1%;并且,患者治疗前后KL-6检测结果与患者病程进展一致。结论所验证KL-6化学发光定量检测试剂盒具有良好分析性能,且能评估ILD患者的治疗效果,适用于临床应用及推广。 展开更多
关键词 间质性肺病 涎液化糖链抗原-6 化学发光免疫分析
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化学发光法定量检测食物过敏原特异性IgE抗体性能研究
4
作者 代苗 吴荣桂 +5 位作者 朱玉青 李娜 吴斌 季纯宇 王健 秦枫 《食品与发酵科技》 CAS 2021年第6期120-123,共4页
随着全球食物过敏发生率的逐年升高,食物过敏性疾病已成为人们日益关注的食品安全和公共卫生问题。本实验依据中华人民共和国医药行业标准YY/T 1581-2018,分析了磁微粒化学发光法定量检测过敏原特异性IgE抗体试剂盒产品性能及特点;并就... 随着全球食物过敏发生率的逐年升高,食物过敏性疾病已成为人们日益关注的食品安全和公共卫生问题。本实验依据中华人民共和国医药行业标准YY/T 1581-2018,分析了磁微粒化学发光法定量检测过敏原特异性IgE抗体试剂盒产品性能及特点;并就主要食物类过敏原牛奶、鸡蛋、蟹、虾和小麦等5个重点项目与ImmunoCAP过敏原检测系统的检测结果进行了一致性评价。结果显示,该试剂盒检测方法的分析内精密度(CV)<4%,分析间精密度<7%;检出限≤0.10 IU/mL,在0.10~100.00 IU/mL的检测范围内,检测方法的相关系数≥0.9900;其准确度、特异性等各项指标均满足行业标准的要求。所选5个食物过敏原重点项目与ImmunoCAP检测系统比对,阴阳性符合率>90%,Kappa值>0.75。实验所用的过敏原特异性IgE抗体定量检测试剂盒分析性能优良,符合过敏原抗体检测的需求,与ImmunoCAP过敏原检测系统检测结果一致性良好,具有很高的推广价值。 展开更多
关键词 纳米磁微粒 化学发光 食物过敏原 过敏原特异性IgE抗体 定量检测
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新型冠状病毒RBD结构和N蛋白的融合表达
5
作者 秦枫 黄帅 +6 位作者 唐艳 季纯宇 黄敬双 张小飞 张敬文 张伟 潘敬梅 《国际检验医学杂志》 CAS 2020年第S02期48-51,共4页
目的目前市场上的病毒重组蛋白均为单一的N蛋白或S蛋白,为了提高重组抗原对新型冠状病毒(COVID-19)特异度抗体的识别率,研究将S蛋白的RBD结构域和N蛋白融合后进行表达。方法研究中人工构建含有S蛋白的RBD结构域基因、Linker和N蛋白基因... 目的目前市场上的病毒重组蛋白均为单一的N蛋白或S蛋白,为了提高重组抗原对新型冠状病毒(COVID-19)特异度抗体的识别率,研究将S蛋白的RBD结构域和N蛋白融合后进行表达。方法研究中人工构建含有S蛋白的RBD结构域基因、Linker和N蛋白基因的序列;然后将序列全基因克隆进pFastBacTMHTA载体,转化进DH10 Bac菌株,然后提取COVID-19 S蛋白RBD结构域和N蛋白融合蛋白表达质粒;将该重组质粒转染昆虫细胞sf9,获取细胞培养物,然后通过Ni-NTA亲和纯化获取COVID-19-RBD&N融合蛋白。其次,通过双抗体夹心磁微粒化学发光法确认获得的融合蛋白与N抗体和S抗体相结合的能力。结果通过表达条件的优化,从昆虫细胞sf9培养物中获取约70×103可溶性蛋白,与预测蛋白大小相一致,说明成功表达COVID-19-RBD&N融合蛋白;磁微粒化学发光法确认了该融合蛋白的抗原表位活性,即具有和N抗体和S抗体相结合的能力,且特异度高于单独的N或者S蛋白。结论通过柔性连接子成功将COVID-19 S蛋白RBD结构域和N蛋白在昆虫细胞中进行融合蛋白,获得有生物活性的可溶蛋白,推断该融合病毒蛋白用于新冠状病毒抗体检测具有潜在的应用前景。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 N蛋白 S蛋白 融合蛋白 化学发光
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